摘要
目的 :构建包含人野生型nm2 3 H1cDNA和绿色荧光蛋白 (GFP)基因的真核表达载体pLXSN nm2 3 H1 EGFP ,用以研究nm2 3 H1逆转肺癌转移表型的分子机制。 方法 :应用基因工程和分子克隆技术 ,将nm2 3 H1 EGFP基因克隆到真核表达载体pLXSN中 ,得到真核重组载体pLXSN nm2 3 H1 EGFP ;脂质体法转染包装细胞系PA317,得到包含nm2 3 H1 EGFP的逆转录病毒 ,并感染人肺癌细胞株L9981。 结果 :构建了pLXSN nm2 3 H1 EGFP逆转录病毒真核表达载体 ,L9981细胞能够表达nm2 3 H1 EGFP融合蛋白。 结论 :成功构建真核表达载体pLXSN nm2 3 H1 EGFP ,并能在L9981细胞中持续、稳定和高效表达nm2 3 H1 EGFP融合蛋白。
Objective:To construct and express a recombinant eukaryotic vector bearing fusion gene of human nm23-H_1gene and EGFP gene, and to explore tne mechanism of nm23-H_1 reversing the metastasis phenotype in lung cancer. Methods:pLXSN-nm23-H_ 1-EGFP is constructed by gene engineering and molecular clone technique .then the recombinant eukaryotic vector was transferred into PA317 cells by using Lipofectamine, and the virus of nm23-H_ 1-EGFP infected L9981 cells. Results:A retrovirus eukaryotic expression vector pLXSN-nm23-H_1-EGFP was successfully cells. Conclusion:The fusion protein of nm23-H_1-EGFP is stablely,continuously and high efficiently expressed in transfected L9981 cells.
出处
《医学研究生学报》
CAS
2005年第1期1-3,7,F002,共5页
Journal of Medical Postgraduates
基金
国家自然科学基金资助项目 (批准号 :3 0 43 0 3 0 0 )
中国博士后科学基金资助项目 (批准号 :2 0 0 40 3 5 697)
