摘要
目的:分析白芥子提取物对HeLa细胞增殖、迁移与侵袭的作用及可能机制。方法:用终浓度分别为20、40、80μg/mL的白芥子提取物培养HeLa细胞,作为白芥子各浓度组,以未经任何处理的HeLa细胞作对照组。将pcDNA3.1、pcDNA3.1⁃CASC2、si⁃NC、si⁃CASC2分别转染至正常培养的HeLa细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1⁃CASC2组、si⁃NC组、si⁃CASC2组;再将转染si⁃NC、si⁃CASC2的细胞用终浓度为80μg/mL的白芥子提取物培养,记为白芥子+si⁃NC组、白芥子+si⁃CASC2组。蛋白质印迹(Westernblot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、上皮钙黏蛋白(E⁃cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP⁃2)表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)试剂盒检测细胞活力;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR(qRT⁃PCR)检测癌症易感候选基因2(CASC2)和miR⁃18b⁃5p表达;荧光素酶报告实验检测CASC2和miR⁃18b⁃5p的靶向关系。结果:与对照组比较,不同浓度白芥子组HeLa细胞CyclinD1、MMP⁃2蛋白表达显著降低,P21、E⁃cadherin蛋白表达显著升高,细胞活力及迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05),且白芥子提取物的作用呈浓度依赖性。白芥子处理的HeLa细胞中CASC2高表达,miR⁃18b⁃5p低表达。与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1⁃CASC2组HeLa细胞CyclinD1、MMP⁃2蛋白表达显著降低,P21、E⁃cadherin蛋白表达显著升高,细胞活力及迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。抑制CASC2表达可逆转白芥子对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。CASC2靶向调控miR⁃18b⁃5p。结论:白芥子提取物可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭;其机制可能与调节CASC2、miR⁃18b⁃5p表达有关。
出处
《中药材》
CAS
北大核心
2020年第12期3029-3034,共6页
Journal of Chinese Medicinal Materials
基金
贵州省科技计划项目(黔科合基础[2019]1331)。
