摘要
目的以miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径为切入点,探讨肾衰饮改善肾间质纤维化大鼠的作用及机制。方法将60只雄性SD大鼠适应性喂养3 d后,按体重随机分为两组,即假手术组10只,模型组50只,采用左侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型。造模成功后,将大鼠再随机分为组:模型组,肾衰饮低剂量组,肾衰饮中剂量组,肾衰饮高剂量组及尿毒清组。分别按人与大鼠1∶1/2,1∶1,1∶2和1∶1灌胃各给药组大鼠,假手术组与模型组给予生理盐水0.15ml/10g灌胃,M组:9.56 g/kg/d。实验期间进行一般情况观察,灌胃治疗14d后结束实验,各组大鼠禁食、不禁水12h,第二日早8:00称重,进行取材。收集24小时尿,全自动生化分析仪一次性检测尿肌酐(UCr)、微球蛋白(β2-MG)及尿微量白蛋白(mAlb)含量,髂总动脉分支处穿刺采血测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学改变及胶原沉积情况;免疫组织化学法检测肾脏组织相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肾脏组织miRNA21及相关mRNA的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测肾脏组织相关蛋白表达水平。结果与假手术组大鼠比较,模型组大鼠精神倦怠,明显消瘦,排便、排尿异常。Scr、BUN、Ucr、β2-MG、mAlb显著升高(P<0.01)。模型组HE染色肾组织结构紊乱,肾小管官腔明显扩张,排列稀疏,肾小管间质明显增宽,间质内有炎性细胞浸润;Masson模型组肾间质区及系膜区增宽伴大量胶原纤维沉积;肾脏组织miR-21、p62、FN、CollagenⅢmRNA的表达显著增高(P<0.01或P<0.05),PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1mRNA的表达显著降低(P<0.01或P<0.05);肾脏组织FN、CollagenⅢ、p62、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR蛋白水平显著增高(P<0.01);PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。经给药治疗后,各给药组大鼠上述指标均明显好转(P<0.01或P<0.05),其中以肾衰饮高剂量组最为显著,明显优于尿毒清组(P<0.01或P<0.05)。结论肾衰饮可能通过下调miR-21及其介导的PTEN/AKT/m TOR通路,从而促进自噬的发生而有效延缓肾间质纤维化的发生发展。
出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期330-335,共6页
Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金
国家自然科学基金(81673956)
辽宁省民生科技计划项目(2021JH2/10300034)
辽宁省教育厅科学技术研究项目-青年科技人才“育苗”项目(L202030)
辽宁中医药大学博士后支持项目辽宁省兴辽英才计划项目(XLYC2005006)。
