摘要
目的 探讨微小RNA(miR)-27a靶向胰岛素受体底物(IRS)1对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症损伤的影响。方法 利用100μg/ml ox-LDL处理细胞24 h,分为对照组和ox-LDL组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6含量,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-27a和IRS1 mRNA表达,Western印迹检测IRS1、蛋白激酶B(AKT)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达量。利用双荧光素酶报告基因实验检测miR-27a和IRS1靶向结合关系。再转染miR-27a inhibitor,分为对照组、oxLDL组、ox-LDL+miR-27a inhibitor组和ox-LDL-miR-27a inhibitor NC组,观察抑制miR-27a对ox-LDL暴露造成炎症损伤的影响。结果 随ox-LDL浓度升高,HUVEC细胞活力降低。100μg/ml ox-LDL暴露时,与对照组相比,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量均明显增加,miR-27a表达量明显升高,IRS1、AKT和VEGF蛋白相对表达量明显降低(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,miR-27a可以与IRS1靶向结合。抑制miR-27a后,与ox-LDL暴露组相比,ox-LDL+miR-27a inhibitor组中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量均明显降低,miR-27a表达量明显降低,IRS1、AKT和VEGF蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05)。结论 miR-27a在体外ox-LDL诱导的HUVEC中表达上调,抑制miR-27a可增加靶基因IRS1表达,从而激活IRS1/AKT/VEGF通路,减轻ox-LDL暴露导致的炎症损伤作用。
出处
《中国老年学杂志》
北大核心
2025年第1期187-191,共5页
Chinese Journal of Gerontology
基金
山西省心血管病医院科研激励计划项目(XYS20170308)。
