摘要
目的基于网络药理学和细胞实验探讨菟丝子总黄酮配伍雷公藤多苷对雷公藤多苷所致生殖毒性的减毒作用。方法通过TCMSP、UniProt、GeneCards、OMIM数据库建立药物和疾病的关键靶点,借助Cytoscape 3.9.1软件构建靶点互作网络(PPI)和药物-活性成分-靶点网络,利用Metascape数据库对靶点进行GO和KEGG通路富集分析。基于网络药理学结果,进一步开展体外细胞实验验证,以卵巢生殖干细胞(OGSCs)为研究对象,分别给予25μg/mL菟丝子总黄酮、3.75μg/mL雷公藤多苷、25μg/mL菟丝子总黄酮+3.75μg/mL雷公藤多苷处理,CCK8法检测细胞活性;RT-qPCR法检测OGSCs细胞标志物MVH、Oct4和Notch信号通路分子Hes1、Notch1、Jagged1 mRNA表达;免疫荧光双标法检测MVH与Notch1、Hes1、Jagged1蛋白共表达。结果网络药理学结果显示,共筛选出28种雷公藤活性成分,10种菟丝子活性成分,93个药物与疾病关联靶标,富集到卵巢类固醇生成、孕激素介导的卵母细胞成熟、催乳素、Notch、癌症等与生殖毒相关的通路,推测可能是通过参与OGSCs细胞增殖分化的Notch信号通路发挥作用。细胞实验结果显示,与对照组比较,雷公藤多苷组OGSCs细胞活性降低(P<0.01);MVH、Oct4和Hes1、Notch1、Jagged1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01);MVH-Notch1、MVH-Jagged1蛋白共表达程度降低(P<0.01)。相较于雷公藤多苷单独给药,菟丝子总黄酮与雷公藤多苷联合配伍可提高OGSCs细胞活性(P<0.01),升高MVH、Oct4和Hes1、Notch1、Jagged1 mRNA表达(P<0.01),升高MVH-Hes1、MVH-Notch1、MVH-Jagged1蛋白共表达程度(P<0.01)。结论菟丝子总黄酮对雷公藤多苷诱发的OGSCs细胞生殖毒有改善作用,可能是通过上调特有标志物MVH、Oct4和关键因子Notch1、Hes1、Jagged1表达实现的。
出处
《中成药》
北大核心
2025年第3期958-963,共6页
Chinese Traditional Patent Medicine
基金
国家自然科学基金项目(81974537)
北京市自然科学基金项目(7242250)
中国中医科学院科技创新工程项目(CI2021A03802,CI2023E001TS)。
