摘要
目的探究环状RNA线粒体融合蛋白(circ-MFN)2通过miR-489-3p调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对结直肠癌(CRC)细胞增殖的影响。方法收集90例CRC患者的CRC及癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测circ-MFN2、miR-489-3p水平,并分析circ-MFN2水平与患者临床病理参数的关系。将pHRi-si-circ-NC、pHRi-si-circ-MFN2、pHRi-si-circ-MFN2+anti-miR-NC和pHRi-si-circ-MFN2+anti-miR-489-3p分别转染至SW480、SW620细胞,记作si-circ-NC组、si-circ-MFN2组、si-circ-MFN2+anti-miR-NC组和si-circ-MFN2+anti-miR-489-3p组。双荧光素酶实验验证circ-MFN2对miR-489-3p的调控关系;单克隆形成实验和5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色检测细胞增殖能力;实时荧光定量PCR检测细胞circ-MFN2、miR-489-3p水平;Western印迹检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67、细胞依赖性激酶(CDK)4、CDK6、细胞周期蛋白(Cyclin)D、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平。将20只裸鼠皮下注射已转染慢病毒的SW480细胞悬液,30 d后测定移植瘤体积和重量;Western印迹检测瘤组织PCNA、Ki67表达。结果与癌旁组织相比,CRC组织circ-MFN2水平升高,miR-489-3p水平降低,且circ-MFN2水平越高,患者TNM分期越高、分化程度越低、淋巴结越容易转移,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-circ-NC组比较,si-circ-MFN2组细胞单克隆形成数及EdU阳性率明显减少,miR-489-3p水平明显升高,circ-MFN2、Ki67、PCNA、CDK4、CDK6、CyclinD、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平明显降低(P<0.05);与si-circ-MFN2+anti-miR-NC组比较,si-circ-MFN2+anti-miR-489-3p组细胞单克隆形成数及EdU阳性率明显增加,miR-489-3p水平明显降低,circ-MFN2、Ki67、PCNA、CDK4、CDK6、CyclinD、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平明显升高(P<0.05)。低表达circ-MFN2能明显抑制小鼠移植瘤生长和瘤组织PCNA、Ki67水平(P<0.05)。结论circ-MFN2靶向调控miR-489-3p表达促进CRC细胞增殖,其可能通过激活PI3K/AKT信号通路发挥作用。
出处
《中国老年学杂志》
2025年第7期1717-1724,共8页
Chinese Journal of Gerontology
