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大田软海绵酸人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备
被引量：
2
1
作者
王丽
桑亚新
+1 位作者
周群标
王向红
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期1001-1007,共7页
采用活化酯法将大田软海绵酸(OA)与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备免疫抗原(OA-KLH),用还原聚丙烯酰胺凝胶电泳法和红外光谱法对人工抗原的偶联效果进行分析,通过免疫兔子制备抗体,所得抗血清经Protein A凝胶层析柱纯化处理后,用紫外全波长...
采用活化酯法将大田软海绵酸(OA)与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备免疫抗原(OA-KLH),用还原聚丙烯酰胺凝胶电泳法和红外光谱法对人工抗原的偶联效果进行分析,通过免疫兔子制备抗体,所得抗血清经Protein A凝胶层析柱纯化处理后,用紫外全波长扫描和间接竞争ELISA法验证纯化效果。结果表明,免疫抗原偶联成功并获得了高亲和力的多克隆抗血清,抗血清纯化后浓度为2.16 mg/mL,间接竞争ELISA测定其滴度为12 800、IC15为3.41 ng/mL,为建立快速、经济的检测方法打下了基础。
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关键词
大田软海绵酸
人工抗原
红外表征
抗体纯化
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职称材料
动物性食品中盐酸克伦特罗ELISA检测方法的建立及应用
被引量：
14
2
作者
周群标
桑亚新
+2 位作者
王丽
李星
王向红
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期158-162,共5页
目的:建立动物性食品中盐酸克伦特罗残留快速检测技术,确保食品安全。方法:以盐酸克伦特罗重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫得到多抗血清,经硫酸铵沉淀,Sephrose 4B-prot...
目的:建立动物性食品中盐酸克伦特罗残留快速检测技术,确保食品安全。方法:以盐酸克伦特罗重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫得到多抗血清,经硫酸铵沉淀,Sephrose 4B-proteinA对抗体进行纯化,在此基础上建立间接竞争ELISA方法。结果表明:包被抗原的最适质量浓度为10μg/mL,抗体的最佳稀释度为1:1000;该方法的IC50为2.18ng/mL,最低检测限达0.05ng/mL,与沙丁胺醇和妥洛特罗的交叉反应率分别为8.28%和7.75%,平均加标回收率为90.78%。结论:该法灵敏度高,样品前处理简便、快速,适用于动物源性食品中盐酸克伦特罗残留的大批量现场检测。
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关键词
盐酸克伦特罗
ELISA
检测方法
原文传递
题名
大田软海绵酸人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备
被引量：
2
1
作者
王丽
桑亚新
周群标
王向红
机构
河北农业大学食品科技学院
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期1001-1007,共7页
基金
国家海洋局公益性行业科研专项(200805046)
文摘
采用活化酯法将大田软海绵酸(OA)与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备免疫抗原(OA-KLH),用还原聚丙烯酰胺凝胶电泳法和红外光谱法对人工抗原的偶联效果进行分析,通过免疫兔子制备抗体,所得抗血清经Protein A凝胶层析柱纯化处理后,用紫外全波长扫描和间接竞争ELISA法验证纯化效果。结果表明,免疫抗原偶联成功并获得了高亲和力的多克隆抗血清,抗血清纯化后浓度为2.16 mg/mL,间接竞争ELISA测定其滴度为12 800、IC15为3.41 ng/mL,为建立快速、经济的检测方法打下了基础。
关键词
大田软海绵酸
人工抗原
红外表征
抗体纯化
Keywords
okadaic acid（OA）
antigen synthesis
IR characterization
antibody purification
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
S917 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
动物性食品中盐酸克伦特罗ELISA检测方法的建立及应用
被引量：
14
2
作者
周群标
桑亚新
王丽
李星
王向红
机构
河北农业大学食品科技学院河北省农产品加工工程技术研究中心
出处
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期158-162,共5页
基金
国家海洋局公益性行业科研专项(No.200805046)
文摘
目的:建立动物性食品中盐酸克伦特罗残留快速检测技术,确保食品安全。方法:以盐酸克伦特罗重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫得到多抗血清,经硫酸铵沉淀,Sephrose 4B-proteinA对抗体进行纯化,在此基础上建立间接竞争ELISA方法。结果表明:包被抗原的最适质量浓度为10μg/mL,抗体的最佳稀释度为1:1000;该方法的IC50为2.18ng/mL,最低检测限达0.05ng/mL,与沙丁胺醇和妥洛特罗的交叉反应率分别为8.28%和7.75%,平均加标回收率为90.78%。结论:该法灵敏度高,样品前处理简便、快速,适用于动物源性食品中盐酸克伦特罗残留的大批量现场检测。
关键词
盐酸克伦特罗
ELISA
检测方法
Keywords
clenbuterol hydrochloride
enzyme-linked immunosorbent assay
method validation
分类号
S859.84 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大田软海绵酸人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备
王丽
桑亚新
周群标
王向红
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
动物性食品中盐酸克伦特罗ELISA检测方法的建立及应用
周群标
桑亚新
王丽
李星
王向红
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
14
原文传递
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