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姜黄素对体外培养软骨细胞氧化应激反应的影响 被引量:14
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作者 宋永周 关健 +4 位作者 李明 马维 袁鹤 王斌 童九辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期188-191,共4页
目的:研究姜黄素对骨关节炎软骨细胞氧化应激的影响。方法:体外培养骨关节炎患者膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞,并以姜黄素干预,检测培养液一氧化氮(NO)、丙二醛产生量(MDA),检测一氧化氮合成酶(NOS)、超氧化物歧化酶活性(SOD);Real... 目的:研究姜黄素对骨关节炎软骨细胞氧化应激的影响。方法:体外培养骨关节炎患者膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞,并以姜黄素干预,检测培养液一氧化氮(NO)、丙二醛产生量(MDA),检测一氧化氮合成酶(NOS)、超氧化物歧化酶活性(SOD);Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 m RNA及其蛋白表达水平。采用荧光共聚焦显微镜观察Nrf2的核转位情况,分析姜黄素对炎症损伤细胞的干预作用。结果:对关节炎软骨细胞,经姜黄素干预后,SOD、MDA、NOS、NO均有显著性变化。与正常软骨细胞组比较,关节炎软骨细胞组Nrf2 m RNA及其蛋白表达水平下调,细胞核内Nrf2活性增强;经姜黄素干预组变化更明显。结论:关节炎软骨细胞存在氧化应激反应,姜黄素能部分纠正氧化应激,对软骨细胞具有保护作用,机制可能与诱导Nrf2核转位从而激活Nrf2-ARE信号通路有关。 展开更多
关键词 姜黄素 软骨细胞 氧化应激 NO NRF2
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含抗骨增生胶囊血清预处理骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化 被引量:9
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作者 宋永周 童九辉 +2 位作者 刘会玲 马维 李明 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1439-1443,共5页
背景:课题组前期研究发现抗骨增生胶囊可促进骨折愈合。目的:观察含抗骨增生胶囊血清对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。方法:将40只SD大鼠随机分4组,低、中、高剂量组分别灌胃给予抗骨增生胶囊药粉11.6,34.8,104.4 g/kg,空白组... 背景:课题组前期研究发现抗骨增生胶囊可促进骨折愈合。目的:观察含抗骨增生胶囊血清对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。方法:将40只SD大鼠随机分4组,低、中、高剂量组分别灌胃给予抗骨增生胶囊药粉11.6,34.8,104.4 g/kg,空白组灌胃给予等量生理盐水,1次/d,连续灌胃12 d后,腹主动脉采血,分离血清备用。应用全骨髓贴壁培养法分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,分4组培养,分别加入含上述4种血清的成骨培养基中诱导培养,培养24,48,72 h,检测细胞增殖;培养7,14 d,检测细胞碱性磷酸酶活性;培养7 d,进行碱性磷酸酶染色;培养14 d,进行茜素红染色。结果与结论:(1)与空白组比较,低剂量组细胞增殖无明显变化,中、高剂量组培养48,72 h的细胞增殖显著升高(P<0.05);(2)与空白组比较,低剂量组细胞碱性磷酸酶活性无明显变化,中、高剂量组培养7,14 d的细胞碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.05);(3)低、中、高剂量组均可见碱性磷酸酶及茜素红染色阳性,以高剂量组效果最明显;(4)结果表明,含抗骨增生胶囊血清可促进骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化。 展开更多
关键词 干细胞 间质干细胞 细胞增殖 组织工程 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 增殖 碱性磷酸酶 含药血清 骨向分化
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膝骨关节炎严重程度与抵抗素水平的相关性 被引量:7
3
作者 宋永周 关健 +3 位作者 李明 马维 童九辉 苏瑞红 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第16期2461-2466,共6页
背景:研究显示抵抗素表达水平与骨关节炎的发病机制密切相关。目的:旨在探讨膝骨关节炎患者的血清和关节液中抵抗素水平与膝关节病变程度的相关性。方法:选取74例膝骨关节炎患者和79例健康对照者,通过关节镜进行软骨损伤程度评分;WOMAC... 背景:研究显示抵抗素表达水平与骨关节炎的发病机制密切相关。目的:旨在探讨膝骨关节炎患者的血清和关节液中抵抗素水平与膝关节病变程度的相关性。方法:选取74例膝骨关节炎患者和79例健康对照者,通过关节镜进行软骨损伤程度评分;WOMAC评分来评估患者的症状严重程度;X射线K-L分级系统评估膝关节影像学分级;ELISA检测血清和关节液中抵抗素及Ⅱ型胶原基端端肽水平。结果与结论:(1)关节液中抵抗素水平与膝放射学病变程度X射线K-L分级呈正相关,与WOMAC评分中疼痛、肢体功能及总评分成正相关,与WOMAC僵硬评分无显著的相关性;(2)骨关节炎组血清抵抗素水平与WOMAC总分、各分项评分及X射线K-L分级评分差异均无显著的相关性;(3)多元回归分析在去除混合因素后,显示关节液中抵抗素水平与WOMAC评分差异有显著性意义,关节液中抵抗素水平与Noyes评分及CTX-II水平成正相关;(4)结果说明,关节液中抵抗素水平在反映膝骨关节炎患者的病变严重程度及关节软骨退变程度上可能作为一个潜在的生物标志物。 展开更多
关键词 骨关节炎 抵抗素 滑液 生物学标记 组织工程 组织构建 骨组织工程 关节滑液 生物标记物
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羊膜脱细胞基质的制备及其生物相容性 被引量:14
4
作者 宋永周 崔慧先 +3 位作者 王振显 吕哲 史正亮 郭威 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期51-55,共5页
目的:羊膜是一种天然的细胞外基质,具有抗原性低、排异反应小特点。实验拟进行羊膜脱细胞基质的制备,观察其作为组织工程支架材料的生物相容性。方法:实验于2007-03/08在河北医科大学解剖教研室实验中心完成。实验材料:4~6周龄健康清洁... 目的:羊膜是一种天然的细胞外基质,具有抗原性低、排异反应小特点。实验拟进行羊膜脱细胞基质的制备,观察其作为组织工程支架材料的生物相容性。方法:实验于2007-03/08在河北医科大学解剖教研室实验中心完成。实验材料:4~6周龄健康清洁级SD大鼠,体质量100~150g,由河北医科大学实验动物中心提供。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。新鲜人羊膜取自石家庄市第四医院,采取前征得产妇知情同意,实验经医院伦理委员会批准。实验方法:①取新鲜人羊膜冲洗后以1%tritonX-100溶液振荡24h,0.25%胰蛋白酶37℃振荡4h,充分漂洗,冷冻干燥,环氧乙烷消毒,并进行苏木精-伊红染色和扫描电镜检测。②体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,并复合培养于羊膜脱细胞基质上,以不含细胞的培养基作为空白对照,以普通培养基培养作为阴性对照,倒置显微镜下观察生长情况,并进行苏木精-伊红检测。四甲基偶氮唑盐法测定羊膜脱细胞基质浸提掖对骨髓间充质干细胞毒性;将羊膜脱细胞基质植入SD大鼠背部皮下,检测其组织相容性。结果:①制备的羊膜脱细胞基质为白色菲薄、半透明的膜状物,柔韧性好,经苏木精-伊红和扫描电镜检测无细胞残留。苏木精-伊红染色可见羊膜表面细胞黏附生长良好,细胞伸展,形态与正常培养细胞无差异。②实验组第2、4、6、8天的吸光度值低于对照组,相对增殖率随培养时间延长而增加,平均相对增殖率为89.5%,细胞毒性评分均为1级。③皮下埋置术后动物全部成活,伤口无红肿、渗液等炎症反应,移植物均未见坏死、纤维化等。光镜下,术后1周移植物周围可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,羊膜卷尚完整;术后2周,淋巴细胞减少,偶见新生毛细血管;术后4周,部分移植物已经降解,基本未见淋巴细胞。结论:经去污剂和酶消化法制备的羊膜脱细胞基质生物相容性良好,是一种理想的组织工程支架材料。 展开更多
关键词 羊膜脱细胞基质 组织工程 组织相容性
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抗骨增生胶囊含药血清对软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响 被引量:13
5
作者 宋永周 刘会玲 +2 位作者 崔慧先 郭威 李莎 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期4642-4646,共5页
背景:抗骨增生胶囊在治疗骨关节疾病方面有很好的疗效,基础研究多集中于颈椎病等骨关节疾病上。目的:拟观察抗骨增生胶囊含药血清对白细胞介素1β引起的软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响。设计、时间及地点:分组对照体外细... 背景:抗骨增生胶囊在治疗骨关节疾病方面有很好的疗效,基础研究多集中于颈椎病等骨关节疾病上。目的:拟观察抗骨增生胶囊含药血清对白细胞介素1β引起的软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响。设计、时间及地点:分组对照体外细胞学实验,于2007-03/09在河北医科大学解剖教研室细胞培养中心完成。材料:新生1周SD大鼠,用于培养软骨细胞;体质量200g左右SD大鼠10只,以中药水溶液灌胃后定时取血制备含药血清。方法:采用胶原酶NB4消化法从大鼠关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,实验分为3组:空白血清组:90%L-DMEM+10%空白血清,每日给予同等量的生理盐水;白细胞介素1β组(90%DMEM+10%空白血清+白细胞介素1β);中药血清+白细胞介素1β组(90%DMEM+10%中药血清+白细胞介素1β)。白细胞介素1β加入量为5μg/L,培养72h。将实验用细胞消化传代后制成单细胞悬液,以1×108L-1的密度接种于96孔培养板,100μL/孔,每组6孔。主要观察指标:倒置显微镜下观察中药含药血清对软骨细胞增殖的影响;四甲基偶氮唑盐比色法检测其各孔吸光度变化;流式细胞仪分析凋亡细胞百分率;基质金属蛋白酶13Elisa试剂盒检测不同组基质金属蛋白酶13分泌情况。结果:在正常培养基条件下,细胞形态均匀,死亡脱落细胞较少。空白血清组软骨细胞的增殖速度缓慢,细胞较稀疏。白细胞介素1β组细胞明显稀疏,部分细胞胞浆中空泡增多,细胞核形态不规则。在中药血清培养基作用下,软骨细胞增殖的速度较白细胞介素1β组快,胞体显著增大,细胞核形态规则。白细胞介素1β组细胞增殖数量减少,凋亡细胞百分率增加,其培养的细胞上清液中基质金属蛋白酶13含量升高,抗骨增生胶囊含药血清可对抗白细胞介素1β对软骨细胞的影响。结论:体外条件下,抗骨增生胶囊含药血清能够抑制白细胞介素1β诱导的软骨细胞凋亡;降低基质金属蛋白酶13水平。 展开更多
关键词 软骨细胞 凋亡 金属蛋白酶
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Nrf2介导姜黄素对软骨细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:5
6
作者 宋永周 关健 +4 位作者 李明 马维 袁鹤 王斌 童九辉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第51期8218-8222,共5页
背景:研究表明氧化应激在骨关节炎的发生发展中起重要作用,姜黄素具有抗氧化、清除自由基作用。目的:通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用。方法:体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为正常组、模型组(H2O2... 背景:研究表明氧化应激在骨关节炎的发生发展中起重要作用,姜黄素具有抗氧化、清除自由基作用。目的:通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用。方法:体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为正常组、模型组(H2O2)、姜黄素低、中、高剂量剂量组(20,40,80μmol/L)。姜黄素与软骨细胞培养48 h后,加入H2O2,24 h后收集细胞,MTT法测定细胞存活率,测定细胞超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶含量,Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 mR NA及其蛋白表达水平,荧光显微镜观察细胞核形态变化。结果与结论:与正常组比较,模型组软骨细胞存活率降低,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量降低,丙二醛含量增加,Nrf2 mR NA及其蛋白表达水平下调,呈现出凋亡细胞的特征。经姜黄素预先处理,软骨细胞存活率升高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量升高,丙二醛含量降低,Nrf2 mR NA及其蛋白表达水平升高,细胞核形态改善,随姜黄素浓度升高变化更明显。结果说明,姜黄素对H2O2所致软骨细胞氧化应激损伤保护作用可能是通过增强Nrf2表达来实现的。 展开更多
关键词 姜黄素 软骨细胞 氧化性应激 组织工程 组织构建 氧化应激 NRF2
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创伤性脑组织匀浆对大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的影响 被引量:8
7
作者 宋永周 崔慧先 +3 位作者 吕哲 王新生 王振显 史正亮 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期461-464,共4页
目的:骨髓间充质干细胞在脑组织匀浆诱导环境下可以转化为神经元样细胞,损伤脑组织匀浆的骨髓间充质干细胞培养液中,不仅有脑组织中提取的生长因子,而且有骨髓间充质干细胞分泌的多种生长因子,共同刺激骨髓间充质干细胞向神经元样细胞... 目的:骨髓间充质干细胞在脑组织匀浆诱导环境下可以转化为神经元样细胞,损伤脑组织匀浆的骨髓间充质干细胞培养液中,不仅有脑组织中提取的生长因子,而且有骨髓间充质干细胞分泌的多种生长因子,共同刺激骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化。实验观察了创伤后24h和正常脑组织匀浆诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的差别。方法:实验于2007-03/08在河北医科大学解剖教研室细胞培养中心完成。①实验材料:体质量100~150g的健康SD大鼠由河北医科大学实验动物中心提供,4~6周龄,清洁级。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:取1只SD大鼠,麻醉后分离股骨和胫骨,用培养基冲洗骨髓腔,离心弃上清液,加入含体积分数为0.10胎牛血清的L-DMEM培养基重悬,接种于培养瓶培养并传代,于倒置显微镜下观察细胞形态。采用Gruncr改良法制作中度脑损伤大鼠模型,取伤后24h和正常大鼠脑组织匀浆,对体外培养的第3代骨髓间充质干细胞进行诱导。③实验评估:在倒置显微镜下观察细胞形态学变化,并应用免疫细胞化学技术检测细胞内神经元特异性烯醇化酶的表达,比较创伤后和正常脑组织匀浆两组诱导率差别。结果:骨髓间充质干细胞经创伤性脑组织匀浆培养基诱导24h后,细胞的胞体变大,36h后部分细胞分化,回缩成圆形或梭形,48h后部分细胞可见两个或多个突起伸出,类似神经元。免疫细胞化学技术检测显示,创伤性脑组织匀浆培养基诱导组神经元特异性烯醇化酶阳性表达为(54.28±6.03)%,正常脑组织匀浆诱导分化率较前者低,神经元特异性烯醇化酶阳性表达为(32.76±3.25)%,细胞生长状态略差。结论:脑组织匀浆可诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化,创伤性脑组织匀浆可明显促进其分化。 展开更多
关键词 脑组织匀浆 骨髓间充质干细胞 神经元样细胞
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姜黄素对软骨细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:5
8
作者 宋永周 童九辉 +5 位作者 马维 关健 苏瑞红 李飞 孙淑芹 王华军 《河北医药》 CAS 2016年第23期3525-3528,共4页
目的通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用。方法体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为对照组、模型组(H2O2)、姜黄素低中高剂量剂量组(20、40、80μmol/L)。姜黄素与软骨细胞培养48 h后,加入H2O2,24 h后... 目的通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用。方法体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为对照组、模型组(H2O2)、姜黄素低中高剂量剂量组(20、40、80μmol/L)。姜黄素与软骨细胞培养48 h后,加入H2O2,24 h后收集细胞,MTT和流式细胞仪测定细胞增殖能力,测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量,Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组软骨细胞存活率降低,具有分裂象的S期和G2/M期细胞明显减少;SOD、CAT含量降低,MDA含量增加,Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平下调。经姜黄素预先处理,软骨细胞存活率升高,细胞增殖能力恢复,SOD、CAT含量升高,MDA含量降低,Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平升高。随浓度升高变化更明显。结论姜黄素对软骨细胞氧化应激损伤有保护作用,可通过增强Nrf2表达实现。 展开更多
关键词 姜黄素 软骨细胞 氧化应激 NRF2
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姜黄素对骨关节炎软骨细胞氧化应激和基质金属蛋白酶13、白细胞介素-6分泌的影响 被引量:7
9
作者 宋永周 童九辉 +3 位作者 李明 马维 关健 苏瑞红 《河北中医》 2016年第9期1344-1347,1352,共5页
目的观察姜黄素对骨关节炎(OA)患者软骨细胞氧化应激和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响。方法无菌分离并体外培养OA患者的膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞;采用姜黄素干预培养细胞24 h,检测各组细胞培养液... 目的观察姜黄素对骨关节炎(OA)患者软骨细胞氧化应激和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响。方法无菌分离并体外培养OA患者的膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞;采用姜黄素干预培养细胞24 h,检测各组细胞培养液上清中的MMP-13、IL-6水平,检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用Real-Time PCR和Western blot法检测细胞核因子E_2相关因子(2Nrf 2)mRNA及其蛋白表达水平。采用荧光共聚焦显微镜观察Nrf 2的核转位情况,分析姜黄素对炎症损伤细胞的干预作用。结果对关节炎软骨细胞,经姜黄素干预后,SOD、MDA、MMP-13、IL-6均有显著性变化。与正常软骨细胞组比较,关节炎软骨细胞组Nrf 2 mRNA及其蛋白表达水平下调,细胞核内Nrf 2活性增强。经姜黄素干预后关节炎软骨细胞Nrf 2 mRNA及其蛋白表达水平上调,细胞核内Nrf 2活性明显增强。结论姜黄素能部分纠正关节炎软骨细胞的氧化应激,减轻炎症反应,对软骨细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 中药疗法 姜黄素 基质金属蛋白酶-13 白细胞介素6
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大鼠关节软骨细胞的培养 被引量:5
10
作者 宋永周 崔慧先 +2 位作者 吕哲 李莎 郭威 《河北医科大学学报》 CAS 2008年第4期534-536,I0010,共4页
目的探讨大鼠关节软骨细胞培养方法。方法采用胶原酶NB4消化法从1周龄SD大鼠的关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,每日在倒置显微镜下观察细胞形态及其生长情况,并用HE、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色进行鉴定。... 目的探讨大鼠关节软骨细胞培养方法。方法采用胶原酶NB4消化法从1周龄SD大鼠的关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,每日在倒置显微镜下观察细胞形态及其生长情况,并用HE、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色进行鉴定。结果软骨细胞形成单层的时间在原代培养1周左右,5d左右即可传代。第5代后部分变为梭形,第7代后绝大部分变为长梭形,增殖能力减弱。结论采用此法可在短时间内获得大量纯化的大鼠软骨细胞。 展开更多
关键词 软骨细胞 细胞培养技术 大鼠
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关节液抵抗素水平与膝骨关节炎严重程度的相关性 被引量:3
11
作者 宋永周 关健 +3 位作者 童九辉 马维 李锋 苏瑞红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第23期3944-3947,共4页
目的:探讨膝骨关节炎患者血清和关节液中抵抗素水平与病变程度的相关性。方法:选取74例膝骨关节炎患者和79例健康对照组进行研究,通过关节镜来进行软骨损伤程度评分,WOMAC评分来评估患者的症状严重程度,X线K-L分级系统评估膝关节影像学... 目的:探讨膝骨关节炎患者血清和关节液中抵抗素水平与病变程度的相关性。方法:选取74例膝骨关节炎患者和79例健康对照组进行研究,通过关节镜来进行软骨损伤程度评分,WOMAC评分来评估患者的症状严重程度,X线K-L分级系统评估膝关节影像学分级。通过ELISA检测血清和关节液中抵抗素及Ⅱ型胶原基端端肽水平。结果:关节液中抵抗素水平与X线K-L分级呈正相关,与WOMAC评分中疼痛、肢体功能及总评分呈正相关,与WOMAC僵硬评分差异无统计学意义。骨关节炎组血清抵抗素水平与WOMAC总分、各分项评分及X线K-L分级评分差异均无统计学意义。关节液中抵抗素水平与Noyes评分呈正相关。结论:关节液中抵抗素水平在反映膝骨关节炎患者的病变严重程度及关节软骨退变程度上可能作为一个潜在的生物标志物。 展开更多
关键词 骨关节炎 抵抗素 关节滑液 生物标记物
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抗骨增生胶囊含药血清对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响 被引量:8
12
作者 宋永周 刘会玲 +3 位作者 马维 童九辉 李飞 孙淑芹 《河北中医》 2016年第8期1187-1190,1194,共5页
目的探讨抗骨增生胶囊含药血清对大鼠成骨细胞增殖、分化及骨保护蛋白(OPG)和核因子-кB受体活化子配体(RANKL)蛋白表达的影响。方法采用中药血清药理学方法制备含抗骨增生胶囊大鼠血清。取乳鼠颅骨,利用复合胶原蛋白酶反复消化,离心,... 目的探讨抗骨增生胶囊含药血清对大鼠成骨细胞增殖、分化及骨保护蛋白(OPG)和核因子-кB受体活化子配体(RANKL)蛋白表达的影响。方法采用中药血清药理学方法制备含抗骨增生胶囊大鼠血清。取乳鼠颅骨,利用复合胶原蛋白酶反复消化,离心,体外培养成骨细胞。加入不同浓度的抗骨增生胶囊含药血清进行干预,噻唑蓝(MTT)法检测中药血清对成骨细胞增殖的影响,测定碱性磷酸酶(ALP)活性,Western Blot检测OPG和RANKL蛋白表达。结果成骨细胞经抗骨增生胶囊含药血清作用后,细胞的生长呈现不同程度的增殖,中、高剂量中药组在24、48、72 h均有明显的促进作用(P<0.01),且呈剂量依赖性。低剂量中药组在24、48 h时与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),72 h时作用较强(P<0.05)。除低剂量组培养24 h外,低、中、高剂量中药组培养24、48、72 h后,ALP分泌均呈不同程度增加,均有明显的促进作用(P<0.01)。成骨细胞经过抗骨增生胶囊含药血清低、中、高剂量作用72 h后,对比值进行统计分析,与空白对照组比较,OPG表达明显升高(P<0.01),RANKL表达明显降低(P<0.01)。结论抗骨增生胶囊含药血清可以促进成骨细胞的增值、分化,从而促进骨形成。 展开更多
关键词 成骨细胞 碱性磷酸酶 细胞增殖 药物作用 中药疗法
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老年股骨粗隆间骨折内固定治疗方法分析 被引量:1
13
作者 宋永周 马维 +1 位作者 史正亮 关键 《河北医科大学学报》 CAS 2008年第3期361-363,共3页
目的探讨不同内固定方法治疗老年股骨粗隆间骨折的疗效。方法对63例老年股骨粗隆间骨折患者分别进行动力髋螺钉、Gamma钉固定。结果随访63例,随访时间6~18个月,骨折愈合62例,总优良率为85.7%。其中动力髋加压螺钉固定39例,发生... 目的探讨不同内固定方法治疗老年股骨粗隆间骨折的疗效。方法对63例老年股骨粗隆间骨折患者分别进行动力髋螺钉、Gamma钉固定。结果随访63例,随访时间6~18个月,骨折愈合62例,总优良率为85.7%。其中动力髋加压螺钉固定39例,发生髋内翻2例,钉尖穿破股骨头并不愈合1例;Gamma钉固定24例,髋内翻1例。结论应用动力髋螺钉和Gamma钉治疗老年股骨粗隆间骨折,可取得较好疗效。 展开更多
关键词 老年人 骨折 内固定器
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人羊膜在神经组织工程中的应用进展 被引量:4
14
作者 宋永周 郭威 崔慧先 《生物医学工程研究》 2007年第4期375-378,共4页
人羊膜具有很多神经生物学特性,对人体抗原性极低,其在神经系统疾病异体移植方面的研究越来越广泛,具有很大的临床应用潜能。我们参阅了国内外相关文献,就人羊膜在神经系统组织工程方面的应用进展作一综述。
关键词 人羊膜 移植 神经营养因子
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交锁髓内钉固定术治疗下肢骨折致迟发感染6例治疗体会
15
作者 宋永周 马维 +1 位作者 史正亮 关键 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第29期99-100,共2页
关键词 固定术治疗 交锁髓内钉 迟发感染 下肢骨折 感染患者
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人脱细胞羊膜与体外培养大鼠血管平滑肌细胞的生物相容性 被引量:4
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作者 王振显 蔡文清 +2 位作者 瞿长宝 宋永周 郭威 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期598-601,共4页
目的了解人脱细胞羊膜(HAM)的细胞相容性;观察以HAM为生长载体,复合大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)构筑组织工程膀胱的可能性。方法用物理和酶消化方法处理人羊膜,将大鼠VSMCs与HAM进行体外复合培养,分别进行组织学、相差显微镜和扫描电镜... 目的了解人脱细胞羊膜(HAM)的细胞相容性;观察以HAM为生长载体,复合大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)构筑组织工程膀胱的可能性。方法用物理和酶消化方法处理人羊膜,将大鼠VSMCs与HAM进行体外复合培养,分别进行组织学、相差显微镜和扫描电镜观察。将20只大鼠随机分为两组后行半膀胱切除术,实验组10只行半膀胱切除后用复合大鼠VSMCs的HAM进行修补,另外10只以单纯的HAM修补。分别于术后2、4、8周测定膀胱容量并取膀胱进行组织学观察。结果经物理和酶处理的HAM纯度高,孔隙多,胶原纤维未受损;VSMCs在HAM上可黏附生长,并能长入材料的孔隙内。应用HAM行大鼠膀胱重建术后,实验组与对照组膀胱最大容量(Volmax)比较无显著性差异。组织学观察显示,2周时HAM即已吸收降解,膀胱移行细胞和平滑肌细胞开始形成,炎性反应明显;实验组膀胱平滑肌比对照组厚且规则。4周和8周时实验组和对照组膀胱均与正常膀胱组织无明显区别。结论HAM的细胞相容性良好,不影响VSMCs的形态,作为膀胱移植物进行膀胱修补吸收降解迅速,可用做组织工程膀胱的支架材料进一步研究。 展开更多
关键词 平滑肌细胞 脱细胞羊膜 生物相容性 组织工程 体外培养 大鼠
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膀胱匀浆上清液在大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为平滑肌样细胞中的作用 被引量:7
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作者 王振显 蔡文清 +3 位作者 宋永周 瞿长宝 史正亮 郭威 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1422-1425,共4页
目的:环境因素对干细胞的分化起到重要的作用。实验拟观察经低浓度二甲亚枫进行预诱导后,大鼠骨髓间充质干细胞在体外经膀胱组织匀浆上清液诱导定向分化为平滑肌样细胞的可行性。方法:实验于2007-04/2007-09在河北医科大学解剖教研... 目的:环境因素对干细胞的分化起到重要的作用。实验拟观察经低浓度二甲亚枫进行预诱导后,大鼠骨髓间充质干细胞在体外经膀胱组织匀浆上清液诱导定向分化为平滑肌样细胞的可行性。方法:实验于2007-04/2007-09在河北医科大学解剖教研室下属细胞培养室完成。①实验材料:4~6周龄100~150g健康清洁级SD大鼠1只,雌雄不限,8周龄220~250gSD大鼠4只,由河北医科大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:采用骨髓干细胞培养基和贴壁法从SD大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞,并在体外扩增、传代。选择8周龄SD大鼠进行膀胱组织上清液的制备。取第4代骨髓间充质干细胞用1%二甲亚砜预诱导8h后,应用膀胱匀浆上清液诱导7d。以未进行诱导的骨髓间充质干细胞为阴性对照组。③实验评估:观察细胞形态学的变化,并运用免疫细胞化学检测特异性。一平滑肌肌动蛋白(α—SMA)的表达。结果:骨髓间充质干细胞经诱导分化后,细胞呈梭形平滑肌样,融合后形成峰谷状排列,并表达平滑肌特异性蛋白标志物。一平滑肌肌动蛋白,诱导分化率为(45.6±3.5)%,与阴性对照组相比差异具有显著性意义(P〈0.05)。结论:采用此方法成功诱导骨髓间充质干细胞分化为平滑肌样细胞。 展开更多
关键词 干细胞 平滑肌 细胞培养 分化
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人脱细胞羊膜移植物用于兔膀胱切除修复的研究 被引量:5
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作者 王振显 庞国勋 +2 位作者 宋永周 陈康宁 蔡文清 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第12期1913-1915,共3页
目的:探讨人脱细胞羊膜(HAM)移植物用于兔膀胱重建的效果。方法:用物理和酶消化方法制备人脱细胞羊膜,将12只兔行半个膀胱切除后用人脱细胞羊膜移植物进行修补,另外6只兔行半个膀胱切除后单纯缝合作为对照。分别于术后2、4、8周测定膀... 目的:探讨人脱细胞羊膜(HAM)移植物用于兔膀胱重建的效果。方法:用物理和酶消化方法制备人脱细胞羊膜,将12只兔行半个膀胱切除后用人脱细胞羊膜移植物进行修补,另外6只兔行半个膀胱切除后单纯缝合作为对照。分别于术后2、4、8周测定膀胱容量并取膀胱进行组织学观察。结果:应用人脱细胞羊膜行兔膀胱重建术后,实验组与对照组2、4、8周膀胱最大容量(Volmax)比较差异有显著性(P<0.05)。与术前相比,实验组和对照组膀胱容量均缩小,差异有显著性(P<0.05和P<0.01)。组织学观察,2周时人脱细胞羊膜即已吸收降解,膀胱移行细胞和平滑肌细胞开始形成,炎性反应明显;4、8周后膀胱的三层结构明显,炎性反应轻微,接近正常兔膀胱。而对照组仅2周时有轻微炎性反应,4、8周炎性反应消失。膀胱三层结构均正常。实验组大多数重建膀胱均有结石形成(8/11),对照组仅1例结石形成(1/6)。结论:人脱细胞羊膜作为膀胱移植物进行膀胱修补吸收降解迅速,移行细胞和膀胱平滑肌细胞可在移植物支架上再生,可以用做组织工程膀胱的支架材料进一步研究。 展开更多
关键词 膀胱 移植 脱细胞羊膜 生物医学工程
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lncRNA ANCR调节骨质疏松大鼠脂肪源性干细胞分化成骨细胞及对Wnt信号通路的作用机制 被引量:4
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作者 史正亮 张华 +4 位作者 范志勇 宋永周 李身泰 李秋童 马维 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1249-1253,1268,共6页
目的探讨lncRNA ANCR调节骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠脂肪源性干细胞分化成骨细胞及对Wnt信号通路的作用机制。方法将lncRNA ANCR siRNA慢病毒载体及慢病毒空载体分别转染至脂肪源性干细胞,分为siRNA组、空载体组、干细胞组。分别通... 目的探讨lncRNA ANCR调节骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠脂肪源性干细胞分化成骨细胞及对Wnt信号通路的作用机制。方法将lncRNA ANCR siRNA慢病毒载体及慢病毒空载体分别转染至脂肪源性干细胞,分为siRNA组、空载体组、干细胞组。分别通过碱性磷酸酶染色观察ALP染色效果、Western blot法检测Wnt/β-catenin蛋白水平、茜素红染色实验检测成骨染色效果、免疫组化法检测Wnt/β-catenin信号阳性表达的差异性。结果与空载体组、干细胞组相比较,siRNA组细胞中ALP染色显著加深(P均<0.05),成骨染色更为显著(P均<0.05);与空载体组,干细胞组相比较,siRNA组细胞Wnt/β-catenin蛋白表达显著上升(P均<0.05),Wnt/β-catenin阳性数显著升高(P均<0.05);空载体组与干细胞组比较,细胞中Wnt/β-catenin蛋白、ALP表达水平、Wnt/β-catenin阳性数相近,无显著差异(P>0.05)。结论lncRNA ANCR的表达水平与骨质疏松大鼠体内脂肪源性干细胞的分化存在显著相关性,下调lncRNA ANCR能够促进脂肪源性干细胞向成骨细胞分化,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin的表达有关。 展开更多
关键词 骨质疏松症 抗分化非编码长链RNA Wnt/β-连环蛋白 骨细胞
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血小板浓缩液的制备及促进兔尺骨骨折愈合方面的实验研究 被引量:3
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作者 张爱民 张英泽 +5 位作者 马维 范志勇 史正亮 宋永周 张华 郑广德 《中国骨伤》 CAS 2005年第6期346-348,共3页
目的:探索动脉血小板浓缩液,在无菌情况下的制备方法。通过免疫组化及物理测量,证实血小板浓缩液中含有多种生长因子,并对比分析其对骨折愈合不同时期的促进作用,为临床应用提供基础资料。方法:选用20只新西兰兔,随机分成2组,分别为空... 目的:探索动脉血小板浓缩液,在无菌情况下的制备方法。通过免疫组化及物理测量,证实血小板浓缩液中含有多种生长因子,并对比分析其对骨折愈合不同时期的促进作用,为临床应用提供基础资料。方法:选用20只新西兰兔,随机分成2组,分别为空白组及血小板组。制作尺骨中段骨折动物模型,采用指钢板行内固定。在手术之前,先抽取兔股动脉血6ml左右,经枸橼酸钠抗凝后,加低速高速离心,提纯出白色的血小板浓缩液,将其注射回骨折断端。所有操作均为无菌操作。分别在1、2、4及6周处死兔,在骨折处取5mm骨组织标本。切片作PDGF免疫组化染色定性分析及测量骨痂直径定量分析。结果:①6ml的兔动脉血在低速及高速离心后,可分离出0.5ml的血小板浓缩液,浓度在正常兔血小板浓度的3倍以上。②免疫组化染色阳性产物呈棕黄色颗粒状。在空白组术后第1周及第2周PDGF因子为阴性表达,第4周、第6周为弱阳性表达;在血小板浓缩液组,随着处死时间延长,阳性表达率逐渐增高。在相同的处死时间,血小板浓缩液组阳性表达率明显高于空白组。空白组、血小板组兔尺骨骨折标本在1、2、4、6周,均有不同程度骨痂形成,其中以第6周兔骨痂最多,第1周兔以纤维连接为主,仅有少许骨痂形成。空白组与血小板组同期骨痂直径差异有显著性意义。结论:①少量的兔血在严格的实验条件下,能够制备出血小板浓缩液。②兔血小板浓缩液中确含有较高浓度的PDGF生长因子。③血小板浓缩液加速了骨折断端的愈合。 展开更多
关键词 血小板浓缩液 制备方法 动物模型 尺骨骨折 骨折愈合
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