新城疫病毒La Sota株热损伤靶点的初步分析

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作者 曾敏倩 焦嘉杰 +7 位作者 左晓昕 王军宁 赵艳红 冯磊 卢宇 吕芳 周斌 侯继波 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期59-67,共9页

为探索新城疫病毒不耐热毒株La Sota热损伤靶点,以期为新型耐热疫苗研发提供理论依据,试验通过检测加热前后La Sota株的吸附及内化功能,考察纤突蛋白HN和F活性变化情况,以及核衣壳完整性,综合分析新城疫病毒热损伤靶点。结果显示:37℃加... 为探索新城疫病毒不耐热毒株La Sota热损伤靶点,以期为新型耐热疫苗研发提供理论依据,试验通过检测加热前后La Sota株的吸附及内化功能,考察纤突蛋白HN和F活性变化情况,以及核衣壳完整性,综合分析新城疫病毒热损伤靶点。结果显示:37℃加热24 h后F蛋白活性首先受损,表现为内化功能显著下降(0.01<P<0.05),56℃加热15 min后HN和F蛋白活性几乎丧失,表现为吸附及内化功能均极显著下降(P<0.01);高温加热后,病毒核衣壳完整性显著降低,病毒粒子破损且失去纤突结构,表现为吸附及内化功能极显著下降(P<0.01)。研究表明,La Sota株热损伤靶点与加热温度和时间密切相关:中温下(≤56℃)病毒热损伤靶点主要在HN和F蛋白,高温下(≥80℃)病毒热损伤靶点为纤突蛋白和核衣壳;纤突蛋白的热敏感性高于核衣壳,且F蛋白受损早于HN蛋白。 展开更多

关键词 新城疫病毒 La Sota株 热损伤靶点 吸附 内化 纤突蛋白 核衣壳

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氧化石墨烯量子点对鸡卵清蛋白递送-免疫增强佐剂效力评估

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作者 许泽玉 党安雷 +4 位作者 邓碧华 左晓昕 卢宇 杨平 尹文竹 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1065-1078,共14页

利用改进的Hummers法氧化鳞片石墨,获得富含羟基和羧基的氧化石墨烯量子点(GOQDs)。通过透射电子显微镜、X射线衍射、红外光谱及拉曼光谱测试表征其理化性质。此外,利用鸡卵清蛋白(OVA)作为模式抗原,构筑GOQDs/OVA纳米疫苗并评估其载量... 利用改进的Hummers法氧化鳞片石墨,获得富含羟基和羧基的氧化石墨烯量子点(GOQDs)。通过透射电子显微镜、X射线衍射、红外光谱及拉曼光谱测试表征其理化性质。此外,利用鸡卵清蛋白(OVA)作为模式抗原,构筑GOQDs/OVA纳米疫苗并评估其载量、安全性、免疫效力等。结果显示,GOQDs/OVA纳米疫苗直径在5 nm左右,具有高度的水分散性和稳定性。其对OVA的最大负载量约为500 mg·g^(-1),在pH=5.5和7.4环境下24 h的释放率分别为74.65%和56.93%,表现出pH刺激响应释放性能。当GOQDs浓度在500μg·mL^(-1)以下时,不会引起溶血、细胞损伤、重要组织发生病变等现象。免疫后,与OVA单独免疫对照组相比,GOQDs/OVA纳米疫苗可以诱导产生高水平的免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白G1(IgG1)及免疫球蛋白G2a(IgG2a)抗体,提高白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4和IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌,同时促进脾中辅助性(CD4+)和细胞毒性(CD8+)T淋巴细胞百分比的增加。 展开更多

关键词 氧化石墨烯 量子点 佐剂 吸附 抗体

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猪小肠上皮细胞分离培养与鉴定 被引量：12

3

作者 詹康 左晓昕 +3 位作者 陈银银 贡笑笑 占今舜 赵国琦 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1477-1484,共8页

为建立功能性永生化的猪小肠上皮细胞系,并为猪肠道营养吸收与免疫调控以及仔猪肠道疾病发病机制的研究提供细胞模型,本试验采用组织块培养法来分离纯化猪小肠上皮细胞,并通过细胞角蛋白18、细胞增殖曲线、核型分析来鉴定猪小肠上皮细... 为建立功能性永生化的猪小肠上皮细胞系,并为猪肠道营养吸收与免疫调控以及仔猪肠道疾病发病机制的研究提供细胞模型,本试验采用组织块培养法来分离纯化猪小肠上皮细胞,并通过细胞角蛋白18、细胞增殖曲线、核型分析来鉴定猪小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块培养法能够成功培养猪小肠上皮细胞并稳定传11代。2)本试验获得的猪小肠上皮细胞角蛋白18抗原鉴定为阳性,染色体核型为二倍体。3)倒置显微镜下观察培养至第11代的猪小肠上皮细胞仍然保持着上皮细胞的特征,呈现"铺路石"和上皮样形态。培养11代后的猪小肠上皮细胞间隙开始变大,规则不明显,细胞开始凋亡。第15代的猪小肠上皮细胞则出现大量凋亡并从瓶底脱落,仅有很少细胞贴壁生长。综上所述,采用组织块培养法能够获得生物学功能稳定的猪小肠上皮细胞系并能正常传11代,可为细胞的永生化提供试验素材。 展开更多

关键词 猪小肠上皮细胞 功能性 肠道营养与免疫 永生化

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奶牛乳腺上皮细胞系的培养与鉴定 被引量：10

4

作者 詹康 贡笑笑 +3 位作者 左晓昕 陈银银 占今舜 赵国琦 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期2544-2550,共7页

本试验旨在培养功能性奶牛乳腺上皮细胞系,为奶牛泌乳调控和奶牛乳房炎发病机制研究提供功能性的细胞模型。采用组织块细胞培养法来分离纯化并鉴定奶牛乳腺上皮细胞;采用有限稀释法单克隆奶牛乳腺上皮细胞;采用噻唑蓝（MTT）法来分析奶... 本试验旨在培养功能性奶牛乳腺上皮细胞系,为奶牛泌乳调控和奶牛乳房炎发病机制研究提供功能性的细胞模型。采用组织块细胞培养法来分离纯化并鉴定奶牛乳腺上皮细胞;采用有限稀释法单克隆奶牛乳腺上皮细胞;采用噻唑蓝（MTT）法来分析奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线是否为正常的＂S＂形;观察细胞角蛋白18免疫荧光来证明所培养的细胞为上皮型;选择培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞进行染色体核型分析。结果表明：1）利用组织块细胞分离法能够成功获得奶牛乳腺上皮细胞并传至20代。2）培养5~6 d成纤维细胞迅速增殖且周围分裂出少量的上皮细胞。培养8 d奶牛乳腺上皮细胞迅速增殖,形成岛屿状集落,呈单层＂鹅卵石＂和＂铺路石＂形态生长。3）奶牛乳腺上皮细胞角蛋白18鉴定为阳性。4）培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞染色体数为60条,具有正常的细胞二倍体核型。综上所述,采用组织块培养细胞能够获得具有稳定性、功能性的奶牛乳腺上皮细胞,但不是永生化细胞。 展开更多

关键词 奶牛乳腺上皮细胞 乳房炎 功能性 核型分析

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鸡胚小肠上皮细胞的体外分离培养和鉴定 被引量：7

5

作者 詹康 左晓昕 +3 位作者 贡笑笑 陈银银 占今舜 赵国琦 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期2150-2156,共7页

本试验旨在提供鸡小肠上皮细胞的体外分离方法,为进一步研究鸡肠道疾病的致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收与免疫机理提供模型。本试验采用组织块培养法来分离培养鸡小肠上皮细胞。运用刮除法、酶消化法、有限稀释法纯化鸡小肠上皮细... 本试验旨在提供鸡小肠上皮细胞的体外分离方法,为进一步研究鸡肠道疾病的致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收与免疫机理提供模型。本试验采用组织块培养法来分离培养鸡小肠上皮细胞。运用刮除法、酶消化法、有限稀释法纯化鸡小肠上皮细胞。利用噻唑蓝(MTT)法来鉴定鸡小肠上皮细胞生长情况。通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测鸡小肠上皮细胞特异性基因的表达来鉴定鸡小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块细胞培养法能够成功获得鸡小肠上皮细胞系。2)接种组织块8h内鸡小肠上皮细胞开始大量增殖。3)鸡小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律。4)传至第5代的鸡小肠上皮细胞体积开始变大,细胞形态模糊并开始衰老凋亡;细胞传代时进行接种,大量的细胞未贴壁。综上所述,采用在6孔板内接种鸡小肠组织快,能够获得具有稳定性的鸡小肠上皮细胞,为鸡肠道疾病致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收和永生化鸡小肠上皮细胞提供细胞素材。 展开更多

关键词 鸡小肠上皮细胞 营养免疫 稳定性 永生化

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日粮硝酸盐水平对湖羊瘤胃硝态氮动态消失率、发酵参数及血液高铁血红蛋白含量的影响 被引量：5

6

作者 陈志远 马婷婷 +3 位作者 方伟 左晓昕 林淼 赵国琦 《草业学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期95-104,共10页

本试验研究日粮硝酸盐的添加量对湖羊瘤胃还原硝态氮程度和对发酵参数及血液高铁血红蛋白的影响.试验选取6头湖羊,采用随机区组试验设计,每期分别饲喂含0%,1%,2%,3%,4%,5%硝酸钾的日粮.测定喂后0,0.5,1.0,1.5,2.0,4.0,6.0,8.0h瘤胃液硝... 本试验研究日粮硝酸盐的添加量对湖羊瘤胃还原硝态氮程度和对发酵参数及血液高铁血红蛋白的影响.试验选取6头湖羊,采用随机区组试验设计,每期分别饲喂含0%,1%,2%,3%,4%,5%硝酸钾的日粮.测定喂后0,0.5,1.0,1.5,2.0,4.0,6.0,8.0h瘤胃液硝酸盐和亚硝酸盐含量及瘤胃发酵参数.晨饲后2.0h通过颈静脉采血,测定高铁血红蛋白含量.结果表明,湖羊在采食1.0h后硝酸盐含量达到最高（0.95～2.14g/L）,之后快速消失,亚硝酸盐含量在喂后1.5h达到最高（0.93～6.22μmol/L）,之后降低.高铁血红蛋白的含量随硝酸盐添加量的增加而显著升高（P〈0.01）,最高达0.32%.添加硝酸盐显著提高瘤胃液pH 值（P〈0.01）和2.0h的氨态氮含量（犘〈0.01）以及乙酸/丙酸,添加量高于3%会降低微生物蛋白和总挥发性脂肪酸的浓度,2%的硝酸盐添加量微生物蛋白和总挥发性脂肪酸的合成量最高,最有利于微生物发酵. 展开更多

关键词 微生物蛋白 硝酸盐还原 瘤胃发酵 添加量

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苜蓿生物活性物质在动物上的应用 被引量：16

7

作者 左晓昕 姚丹丹 +1 位作者 占今舜 赵国琦 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1185-1191,共7页

苜蓿中含有许多生物活性物质,能够显著影响动物的生长性能、繁殖机能和免疫功能,有些活性物质还可以作为人的保健品使用。本文主要介绍苜蓿皂苷、苜蓿多糖、苜蓿黄酮的生物学功能以及国内外学者对苜蓿中活性成分研究的最新成果。苜蓿中... 苜蓿中含有许多生物活性物质,能够显著影响动物的生长性能、繁殖机能和免疫功能,有些活性物质还可以作为人的保健品使用。本文主要介绍苜蓿皂苷、苜蓿多糖、苜蓿黄酮的生物学功能以及国内外学者对苜蓿中活性成分研究的最新成果。苜蓿中活性物质可以作为动物的饲料添加剂使用,一定剂量的苜蓿活性物质可以提高动物体内的淋巴细胞水平,增加免疫力;提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制丙二醛的水平,具有抗氧化功能;增加动物的生产性能和繁殖性能。 展开更多

关键词 苜蓿皂苷 苜蓿多糖 苜蓿黄酮

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初生罗曼鹅与马岗鹅毛囊发育和黑色素分布的比较研究 被引量：3

8

作者 王惠影 吴宁昭 +3 位作者 左晓昕 徐琪 何大乾 陈国宏 《中国家禽》 北大核心 2016年第3期10-13,共4页

羽绒性状作为鹅的一种重要经济性状,其产量和价值主要取决于毛囊发育和黑色素分布情况。针对罗曼鹅的皮肤组织,利用石蜡切片和HE染色、甲苯胺蓝染色及多巴染色,观察比较其毛囊大小及黑色素分布状况,并与马岗鹅进行比较。研究结果表明,... 羽绒性状作为鹅的一种重要经济性状,其产量和价值主要取决于毛囊发育和黑色素分布情况。针对罗曼鹅的皮肤组织,利用石蜡切片和HE染色、甲苯胺蓝染色及多巴染色,观察比较其毛囊大小及黑色素分布状况,并与马岗鹅进行比较。研究结果表明,初生时两种鹅的皮肤均有初级毛囊和次级毛囊分布,且初级毛囊周围竖毛肌及腺体组织丰富。毛囊大小测量结果显示,初生罗曼公鹅的毛囊宽显著大于罗曼母鹅(P<0.05),罗曼鹅的毛囊宽显著高于马岗鹅(P<0.05)。黑色素分布观察结果显示,马岗鹅皮肤黑色素数量明显多于罗曼鹅,这可能是导致两种鹅羽色差异的原因。研究结果为揭示不同鹅品种毛囊发育和黑色素分布的组织学特性差异奠定了基础。 展开更多

关键词 罗曼鹅 马岗鹅 毛囊发育 黑色素沉积

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乌鬃鹅RIG-Ⅰ基因的克隆及初步分析 被引量：3

9

作者 吴宁昭 王彬 +5 位作者 左晓昕 陈卓 张阿秀 陈阳 徐琪 陈国宏 《中国家禽》 北大核心 2014年第19期9-13,共5页

维甲酸诱导基因蛋白Ⅰ(RIG-Ⅰ)是一类胞质内模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。本研究通过poly(I∶C)和5′ppp-dsRNA刺激原代鹅胚成纤维细胞,采用RT-PCR扩增获得了乌鬃鹅RIG-ⅠCDS,其全长2805bp,编码934个氨基酸。... 维甲酸诱导基因蛋白Ⅰ(RIG-Ⅰ)是一类胞质内模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。本研究通过poly(I∶C)和5′ppp-dsRNA刺激原代鹅胚成纤维细胞,采用RT-PCR扩增获得了乌鬃鹅RIG-ⅠCDS,其全长2805bp,编码934个氨基酸。氨基酸序列分析表明,该蛋白无跨膜区,无信号肽,位于细胞质和细胞核,故推测gRIG-Ⅰ蛋白为胞质内可溶性蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,poly(I∶C)和5′ppp-dsRNA能显著上调gRIG-ⅠmRNA水平。研究结果为RIG-Ⅰ在鹅抗病毒天然免疫研究奠定了一定的理论基础。 展开更多

关键词 鹅 维甲酸诱导基因蛋白Ⅰ 基因克隆 反转录聚合酶链反应

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猪瘟耐热活疫苗节能冻干曲线的优化研究 被引量：3

10

作者 左晓昕 赵艳红 +6 位作者 邓碧华 牟和平 胡来根 宋伟 吕芳 卢宇 侯继波 《江苏农业科学》 2020年第5期156-161,共6页

猪瘟疫苗真空冷冻干燥工艺,可减少冻干对制品活性的影响,降低制品冻干过程的耗能,缩短冻干周期,故研制安全、耐热、节能的猪瘟减毒冻干疫苗极为重要。选用甘露醇、甘氨酸等成分设计猪瘟耐热保护剂配方,通过间接免疫荧光法比较制品在37℃... 猪瘟疫苗真空冷冻干燥工艺,可减少冻干对制品活性的影响,降低制品冻干过程的耗能,缩短冻干周期,故研制安全、耐热、节能的猪瘟减毒冻干疫苗极为重要。选用甘露醇、甘氨酸等成分设计猪瘟耐热保护剂配方,通过间接免疫荧光法比较制品在37℃、10 d的冻干和耐热损失,并用兔体热反应法复核。检测优化配方的共晶点和塌陷温度设计冻干程序,比较不同预冻方式对猪瘟耐热疫苗冻干的影响,调整冻干周期。猪瘟耐热保护剂配方A-4的冻干和耐热损失最小,分别为0.30 lg和0.45 lg。根据制品的共晶点-27.51℃,对预冻方式筛选,发现快冻冻干和耐热损失最小,分别为0.17 lg和0.38 lg,根据塌陷温度-24.3℃,成功将冻干曲线缩短至24 h。调整后的配方可使猪瘟活苗在37℃保存15 d、45℃保存7 d;内毒素和动物试验表明该疫苗安全、无副反应。上述结果表明,试验成功筛选出猪瘟耐热保护剂配方A-4,在保证疫苗质量的前提下优化冻干曲线,调整后的保护剂配方保证疫苗耐热性能,安全无副反应。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 耐热保护剂配方 冻干工艺 耐热性能 安全性

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紫花苜蓿黄酮对人胃癌MGC-803细胞周期和凋亡的影响 被引量：4

11

作者 左晓昕 赵倩明 +3 位作者 隋雁南 詹康 占今舜 赵国琦 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2104-2106,共3页

目的探究紫花苜蓿黄酮在体外抑制肿瘤细胞活性的研究。方法采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定紫花苜蓿黄酮在体外的抗肿瘤活性;流式细胞术检测紫花苜蓿黄酮对人胃癌细胞MGC-803周期和凋亡的影响;Western blotting方法检测相关细胞蛋白的表达... 目的探究紫花苜蓿黄酮在体外抑制肿瘤细胞活性的研究。方法采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定紫花苜蓿黄酮在体外的抗肿瘤活性;流式细胞术检测紫花苜蓿黄酮对人胃癌细胞MGC-803周期和凋亡的影响;Western blotting方法检测相关细胞蛋白的表达情况。结果 MGC-803细胞经紫花苜蓿黄酮预处理后,细胞存活率显著降低(P<0.05)。流式细胞术检测发现紫花苜蓿黄酮能够诱导细胞凋亡;引起细胞周期紊乱,使细胞阻滞在G0/G1期。Western blotting实验结果表明它能够活化促凋蛋白Caspase-9,Caspase-3,RARP,抑制抑凋蛋白Bcl-2的表达;引起相关细胞周期蛋白Cyclin D1,CDK4,CDK6的表达量下调。结论紫花苜蓿黄酮能够通过诱导MGC-803细胞凋亡途径和调节正常周期活动来抑制MGC-803细胞增殖,并且这种抑制作用还存在着时间和剂量依赖效应。 展开更多

关键词 清肠化湿方 抗炎 镇痛

原文传递

豁眼鹅、皖西白鹅和浙东白鹅肌纤维特性的比较 被引量：2

12

作者 左晓昕 吴宁昭 +2 位作者 朱振 徐琪 陈国宏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第1期86-90,共5页

研究旨在通过测定豁眼鹅、皖西白鹅、浙东白鹅肌肉纤维直径、横切面积和肌纤维的密度,探讨不同鹅品种的肌纤维特性差异。结果表明,豁眼鹅胸肌肌纤维直径、横切面积显著大于浙东白鹅、皖西白鹅(P<0.05),而肌纤维密度表现为相反的趋势... 研究旨在通过测定豁眼鹅、皖西白鹅、浙东白鹅肌肉纤维直径、横切面积和肌纤维的密度,探讨不同鹅品种的肌纤维特性差异。结果表明,豁眼鹅胸肌肌纤维直径、横切面积显著大于浙东白鹅、皖西白鹅(P<0.05),而肌纤维密度表现为相反的趋势。豁眼鹅的腿肌肌纤维直径和横切面积显著大于皖西白鹅(P<0.05),而豁眼鹅的腿肌肌纤维密度显著小于皖西白鹅(P<0.05)。品种内不同性别之间部分指标也存在显著差异,主要表现在皖西白鹅和浙东白鹅的肌纤维横切面积和直径上。相关性分析表明,肌纤维的直径与肌纤维横切面积呈极显著正相关(P<0.01),肌纤维直径和横切面积与肌纤维密度呈极显著负相关(P<0.01)。由此可知,不同品种间肌纤维特性存在差异,同品种间不同性别间的肌纤维特性也存在差异。 展开更多

关键词 鹅 肌肉 肌纤维

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不同培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异 被引量：1

13

作者 詹康 左晓昕 +3 位作者 贡笑笑 陈银银 占今舜 赵国琦 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期2241-2247,共7页

本试验旨在研究二维和三维培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异。利用组织块培养细胞来分离奶牛乳腺上皮细胞,利用有限稀释法克隆奶牛乳腺上皮细胞。通过显微镜观察细胞在基质胶中的形态,并用Western blot法检测酪蛋白的... 本试验旨在研究二维和三维培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异。利用组织块培养细胞来分离奶牛乳腺上皮细胞,利用有限稀释法克隆奶牛乳腺上皮细胞。通过显微镜观察细胞在基质胶中的形态,并用Western blot法检测酪蛋白的诱导表达。结果表明:1)采用组织块培养细胞能够成功分离奶牛乳腺上皮细胞,克隆得到的细胞能稳定传至20代。2)细胞接种12h之后,二维培养的奶牛乳腺上皮细胞并没有形成明显的细胞簇,细胞间也没有相互连接;三维培养的奶牛乳腺上皮细胞形成明显的细胞簇,在基质胶内的层黏连蛋白作用下形成交织网状结构。培养2d细胞间交织网状结构逐渐消失,细胞开始形成单个的成细胞簇,使细胞间更加紧密的相连。3)二维培养奶牛乳腺上皮细胞不能诱导表达酪蛋白,但三维培养细胞可诱导表达κ-酪蛋白。综上所述,三维培养奶牛乳腺上皮细胞能够改变细胞的形态和功能,诱导κ-酪蛋白的表达,三维培养的奶牛乳腺上皮细胞可作为奶牛的泌乳机制研究的体外模型。 展开更多

关键词 奶牛乳腺上皮细胞 三维培养 酪蛋白 体外模型

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江苏某牛场奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定、耐药性及保守抗原分析 被引量：18

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作者 周明旭 左晓昕 +5 位作者 徐悦 鲍熹 张金秋 杨章平 朱国强 卢宇 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期54-60,共7页

2018年6月对江苏某奶牛场30头隐性乳房炎奶牛的50个发病乳区采集生牛乳进行检测,分离鉴定主要病原菌,其中大肠埃希菌19株(38%)、肺炎克雷伯菌13株(26%)、金黄色葡萄球菌5株(10%)、凝固酶阴性葡萄球菌11株(22%)、无乳链球菌4株(8%)、停... 2018年6月对江苏某奶牛场30头隐性乳房炎奶牛的50个发病乳区采集生牛乳进行检测,分离鉴定主要病原菌,其中大肠埃希菌19株(38%)、肺炎克雷伯菌13株(26%)、金黄色葡萄球菌5株(10%)、凝固酶阴性葡萄球菌11株(22%)、无乳链球菌4株(8%)、停乳链球菌1株(2%)。采用PCR和血清学方法对金黄色葡萄球菌分离株进行分型,结果显示5株金黄色葡萄球菌中4株为CP8型(80%),1株为非CP5、CP8或336PS型。耐药性分析结果显示该牛场松鼠葡萄球菌菌株对磺胺类药物复方新诺明和广谱抗菌药甲氧胺嘧啶表现双重耐药,耐药率达100%;肺炎克雷伯菌对利福平和万古霉素表现双重耐药,耐药率达100%。此外,部分葡萄球菌、链球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对四环素、红霉素、克林霉素和克拉霉素表现出中度敏感。但所有菌株对头孢哌酮、链霉素、庆大霉素、妥布霉素、氯霉素和呋喃妥因表现高度敏感,敏感率100%。通过PCR方法检测发现,在分离菌株中金黄色葡萄球菌TraP和FnbpA,无乳链球菌GapC和Sip,大肠埃希菌Lpf1A等保守抗原检出率高达89%~100%,证明其作为亚单位疫苗候选抗原的普适性。这一研究为该牛场乳房炎的临床用药和综合防控提供了参考依据。 展开更多

关键词 奶牛乳房炎 16S rDNA 耐药性 保守抗原 亚单位疫苗

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维生素A在养猪生产上的应用 被引量：1

15

作者 左晓昕 占今舜 《猪业科学》 2015年第1期82-83,共2页

维生素A是一个具有脂环的不饱和一元醇,不仅在仔猪的生长发育阶段发挥重要的生理作用,还能够给妊娠母猪提供所必须的营养成分。有研究发现维生素A具有改善动物视觉,增强免疫功能,提高抗氧化功能和繁殖性能等作用。对维生素A在养猪生产... 维生素A是一个具有脂环的不饱和一元醇,不仅在仔猪的生长发育阶段发挥重要的生理作用,还能够给妊娠母猪提供所必须的营养成分。有研究发现维生素A具有改善动物视觉,增强免疫功能,提高抗氧化功能和繁殖性能等作用。对维生素A在养猪生产上的应用作一综述。 展开更多

关键词 维生素A 猪 生理功能

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冰晶调控剂对活疫苗半成品中伪狂犬病病毒效价的影响

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作者 赵艳红 孟繁荣 +5 位作者 吕芳 王军宁 左晓昕 揭鸿英 卢宇 鲍恩东 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期757-765,共9页

为了解决病毒活疫苗半成品经-20℃保存后猪伪狂犬病病毒效价降低显著的问题,在伪狂犬病病毒悬液中分别添加4类不同浓度的冰晶调控剂后,经5次冻融循环后检测冻融前后病毒效价损失。结果显示,0.25 mol/L AMG、0.14 mol/L Suc、0.45 mmol/L... 为了解决病毒活疫苗半成品经-20℃保存后猪伪狂犬病病毒效价降低显著的问题,在伪狂犬病病毒悬液中分别添加4类不同浓度的冰晶调控剂后,经5次冻融循环后检测冻融前后病毒效价损失。结果显示,0.25 mol/L AMG、0.14 mol/L Suc、0.45 mmol/L PVP、0.40 mol/L Lac组的病毒效价损失分别为0.20、0.26、0.25、0.31 lg TCID_(50)/m L;将保护效果最好的0.25 mol/L AMG与伪狂犬病病毒悬液混合,制备成活疫苗半成品在-20℃条件下保存60 d后,其病毒效价损失小于0.6 lg TCID_(50)/m L;安全性评价结果显示,0.25 mol/L AMG对小鼠、细胞无明显毒性。结果表明:病毒悬液中添加0.25 mol/L AMG经冻融循环后制备的活疫苗半成品猪伪狂犬病病毒效价损失小,且对小鼠和细胞均具有安全性,这为病毒活疫苗生产的冻干工艺优化提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 活疫苗 冰晶调控剂 冻干工艺优化

原文传递

Protamex复合蛋白酶水解鸡蛋蛋清蛋白工艺优化 被引量：3

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作者 左晓昕 朱隆基 +3 位作者 金晓君 占今舜 霍永久 赵国琦 《食品科技》 CAS 北大核心 2016年第8期64-69,共6页

探讨Protamex复合蛋白酶水解鸡蛋蛋清蛋白时的最佳工艺条件。试验以水解度和蛋白质残留量为指标,研究水解温度、酶用量、pH及蛋清浓度对水解条件的影响,并通过正交试验来确定最佳工艺参数。结果发现,在温度55℃、pH7.0、酶量为7%、蛋清... 探讨Protamex复合蛋白酶水解鸡蛋蛋清蛋白时的最佳工艺条件。试验以水解度和蛋白质残留量为指标,研究水解温度、酶用量、pH及蛋清浓度对水解条件的影响,并通过正交试验来确定最佳工艺参数。结果发现,在温度55℃、pH7.0、酶量为7%、蛋清浓度为1:5条件下,蛋白质残留量为6.88%,水解度达7.40%,水解物的相对分子质量集中在500以下,这部分小肽极易被人体吸收且不会引起过敏反应。 展开更多

关键词 鸡蛋 PROTAMEX复合蛋白酶 水解

原文传递

新型猪瘟耐热活疫苗冻干工艺设计及放大研究 被引量：1

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作者 左晓昕 赵艳红 +5 位作者 邓碧华 胡来根 宋伟 吕芳 卢宇 侯继波 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期110-118,共9页

为了筛选耐热、安全的猪瘟活疫苗冻干工艺,探索工艺放大规律,为耐热冻干工艺从实验室到生产提供理论依据和技术支撑。根据新型猪瘟耐热配方的热参数科学设计冻干程序,通过冻形、加速耐老化实验、残余水分等指标筛选冻干程序并进行工艺... 为了筛选耐热、安全的猪瘟活疫苗冻干工艺,探索工艺放大规律,为耐热冻干工艺从实验室到生产提供理论依据和技术支撑。根据新型猪瘟耐热配方的热参数科学设计冻干程序,通过冻形、加速耐老化实验、残余水分等指标筛选冻干程序并进行工艺放大。结果表明,新型猪瘟耐热活疫苗溶液的共晶点为-26.4七、塌陷温度-22.4--20.4 X.,筛选得到冻干程序3,当预冻温度为-42 t,主干燥温度为-10 t时为最优曲线。将程序3在0.15 m2-0.5 m2-2 m?进行逐级工艺放大摸索,规模放大3倍(0.5 n/)时程序可不变,放大到13倍(2 m2)时需在主干燥阶段下调隔板温度、延长干燥时间。采用新型猪瘟耐热配方及程序3制备的冻干活疫苗产品可在37 t保存20 d、45 t保存14 d;动物实验安全。上述结果表明成功筛选出新型猪瘟耐热配方的配套冻干工艺,并实现了工艺的逐级放大。 展开更多

关键词 猪瘟 冷冻干燥 工艺放大 耐热性能 安全性

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奶牛小肠上皮细胞的原代培养和鉴定 被引量：4

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作者 赵倩明 左晓昕 +3 位作者 詹康 隋雁南 封飞飞 赵国琦 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期84-90,共7页

为研究小肽转运蛋白对小肽转运和吸收机制提供细胞模型,在体外建立原代奶牛小肠上皮细胞分离的方法,采用Ⅰ型胶原酶和中性蛋白酶混合消化液对奶牛小肠组织进行消化,通过2%山梨醇进行密度梯度离心以去除单核细胞、淋巴细胞和肌细胞;用刮... 为研究小肽转运蛋白对小肽转运和吸收机制提供细胞模型,在体外建立原代奶牛小肠上皮细胞分离的方法,采用Ⅰ型胶原酶和中性蛋白酶混合消化液对奶牛小肠组织进行消化,通过2%山梨醇进行密度梯度离心以去除单核细胞、淋巴细胞和肌细胞;用刮除法、相差消化法和96孔板单克隆方法来纯化奶牛小肠上皮细胞,从细胞形态学、细胞角蛋白18免疫荧光染色和小肠上皮细胞特异性标志蛋白来鉴定奶牛肠上皮细胞。结果表明:1)采用Ⅰ型胶原酶和中性蛋白酶联合消化奶牛小肠组织,通过2%山梨醇密度梯度离心可以获得大量的细胞团且48h发生贴壁,但是细胞贴壁不牢。2)48h之后细胞团进一步向外辐射生长出细胞,细胞形态呈现典型的上皮细胞和铺路石形态。5~7d细胞处于对数生长期,细胞大量增值,一部分成纤维细胞与小肠上皮细胞夹杂生长。3)通过96孔板能够单克隆奶牛小肠上皮细胞,细胞呈现均一的铺路石形态。4)奶牛小肠上皮细胞角蛋白18鉴定为阳性,荧光显微镜下能够发出绿色荧光。5)通过RT-PCR能够检测到奶牛小肠上皮细胞特异性标志蛋白E-钙黏蛋白、碱性磷酸酶和肠肽酶的表达,成功建立了奶牛小肠上皮细胞的分离和培养方法。 展开更多

关键词 奶牛 小肠上皮细胞 细胞角蛋白18 肠肽酶 E-钙黏蛋白

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