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水稻矮缩病毒昆明分离物抗血清制备及免疫捕捉PCR检测 被引量:6
1
作者 彭潞波 李婷婷 +7 位作者 魏春红 方琦 董家红 张丽珍 苏晓霞 丁铭 张仲凯 李毅 《中国病毒学》 CSCD 2006年第4期408-410,共3页
By Using the modified method to extract Rice dwarf virus virions from infected rice leaves,a concentration 3.854mg/mL of purified virus virions reached,and the Rabbits was immunized with purified virions,yielding high... By Using the modified method to extract Rice dwarf virus virions from infected rice leaves,a concentration 3.854mg/mL of purified virus virions reached,and the Rabbits was immunized with purified virions,yielding high titer antiserum;1:20480 by the indirect enzyme-linked immunosorbent assay(I-ELISA)test.The antiserum successfully detected three rice samples from Kunming,Yuxi and Luliang by I-ELISA.Immunocapture polymerase chain reaction(IC-PCR),respectively was the utilized to show that serologic and molecular methods were successfully used for detection of Rice dwarf virus. 展开更多
关键词 水稻矮缩病毒 抗血清 间接ELIZA 免疫捕捉PCR
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番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒在云南的发生分布研究初报 被引量:36
2
作者 张仲凯 丁铭 +5 位作者 方琦 张丽珍 李婷婷 彭潞波 苏晓霞 李展 《西南农业学报》 CSCD 2004年第B05期163-168,共6页
应用电子显微镜观察形态学及细胞病理特征,间接酶联免疫吸附测定(I-ELISA)和双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA),部分样品经番茄斑萎病毒(TSWV)核壳体蛋白基因(N-gene)的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,以及部分样品的生物学回接测定的方法... 应用电子显微镜观察形态学及细胞病理特征,间接酶联免疫吸附测定(I-ELISA)和双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA),部分样品经番茄斑萎病毒(TSWV)核壳体蛋白基因(N-gene)的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,以及部分样品的生物学回接测定的方法,对采自云南不同地区20种寄主植物上204份疑似Tospovirus侵染的病株样品进行了检测。结果表明,共有20种寄主作物139份样品中含有Tospovirus分离物,从检出样品的分布看,云南全省均有分布,但在海拔2400m以上的地区其症状表现不明显。Tospovirus云南分离物在血清型、细胞病理特征以及寄主范围方面与国内外报道的同属病毒有共同的特征,同时也有较明显的差异,即云南存在有Tospovirus新的株系或种类。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒属 病毒 云南 细胞病理 血清型
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不同基因型粳稻籽粒产量与功能成分的生态变异 被引量:11
3
作者 杨树明 夏小环 +6 位作者 赵旭 方晓东 杜娟 曾亚文 普晓英 杨涛 彭潞波 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期464-469,共6页
以云南省育成的14个功能型水稻品种(系)为材料,在新平、玉溪和寻甸3个生态点种植,研究不同基因型粳稻的产量和功能成分含量及其生态变异。结果表明:寻甸的水稻平均产量、有效穗数和结实率均显著高于新平和玉溪,以新平最低,玉溪每穗穗粒... 以云南省育成的14个功能型水稻品种(系)为材料,在新平、玉溪和寻甸3个生态点种植,研究不同基因型粳稻的产量和功能成分含量及其生态变异。结果表明:寻甸的水稻平均产量、有效穗数和结实率均显著高于新平和玉溪,以新平最低,玉溪每穗穗粒数显著高于新平和寻甸,不同地区粳稻千粒重差异不显著;通径分析表明,限制新平、玉溪、寻甸水稻产量的主要因素分别为每穗粒数、有效穗数、结实率;基因型、环境及其互作均对产量及其构成因素和稻米功能成分有显著或极显著的影响,稻谷产量、有效穗数、每穗总粒数和结实率主要受生态环境的影响,而千粒重受基因型控制,γ–氨基丁酸受生态环境的影响,总黄酮、生物碱受基因型及基因型与环境互作的共同调节,抗性淀粉含量主要受基因型控制;新平水稻糙米γ–氨基丁酸和生物碱含量较高,玉溪和寻甸2种成分含量相接近;总黄酮以玉溪点最高,寻甸较低;不同地区抗性淀粉含量差异较小。 展开更多
关键词 水稻 基因型 生态环境 总黄酮 γ–氨基丁酸 生物碱 抗性淀粉
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导致云南马铃薯品种中甸红退化的PVX分离物提纯及鉴定 被引量:15
4
作者 张仲凯 魏春红 +3 位作者 丁铭 方琦 彭潞波 李毅 《西南农业学报》 CSCD 2003年第1期78-81,共4页
对引起云南马铃薯品种中甸红退化的病毒分离物进行了纯化 ,应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)和免疫电镜技术 (ISEM )检测鉴定了分离纯化的病毒样品 ,鉴定为马铃薯X病毒 (PotatovirusX ,PVX)的分离株。经ELISA和ISEM复合检测筛选 ,用组织培... 对引起云南马铃薯品种中甸红退化的病毒分离物进行了纯化 ,应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)和免疫电镜技术 (ISEM )检测鉴定了分离纯化的病毒样品 ,鉴定为马铃薯X病毒 (PotatovirusX ,PVX)的分离株。经ELISA和ISEM复合检测筛选 ,用组织培养法得到了侵染中甸红的PVX分离物标准毒株。应用电镜技术检测了PVX在寄主植株中的分布 ,结果呈系统侵染。 展开更多
关键词 马铃薯品种 中甸红 PVX 分离纯化 鉴定
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粉虱传双生病毒在云南的发生分布 被引量:14
5
作者 张仲凯 丁铭 +3 位作者 方琦 彭潞波 张丽珍 赵永昌 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第4期450-451,共2页
关键词 粉虱传双生病毒 云南 发生分布 PCR检测
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侵染烟草的番茄斑萎病毒(TSWV)电镜诊断鉴定 被引量:25
6
作者 张仲凯 方琦 +2 位作者 丁铭 彭潞波 张丽珍 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第3期339-340,共2页
关键词 烟草 番茄斑萎病毒 电镜 TSWV
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抗水稻矮缩病毒转基因水稻的农艺性状分析 被引量:6
7
作者 张仲凯 董家红 +4 位作者 李展 李婷婷 苏晓霞 彭潞波 李毅 《西南农业学报》 CSCD 2006年第1期159-161,共3页
关键词 水稻矮缩病毒 转基因水稻 农艺性状 20世纪90年代 发生危害 北京大学 VIRUS 水稻品种 暴发流行 南方稻区
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TSWV与TMV复合侵染大花蕙兰的细胞病理 被引量:7
8
作者 张仲凯 方琦 +5 位作者 丁铭 李婷婷 彭潞波 张丽珍 李展 苏晓霞 《西南农业学报》 CSCD 2004年第B05期155-159,共5页
应用超薄切片法制样电子显微镜观察,对番茄斑萎病毒(TSWV)和烟草花叶病毒(17MV)复合侵染的大花蕙兰同一病叶的细胞病理进行了研究。结果表明:无症的叶部其亚细胞结构较完整,在叶绿体旁及细胞质中有少量的TWV聚集块;在表现为花叶的部位... 应用超薄切片法制样电子显微镜观察,对番茄斑萎病毒(TSWV)和烟草花叶病毒(17MV)复合侵染的大花蕙兰同一病叶的细胞病理进行了研究。结果表明:无症的叶部其亚细胞结构较完整,在叶绿体旁及细胞质中有少量的TWV聚集块;在表现为花叶的部位亚细胞器不同程度病变,TMV粒体聚集或散布于细胞质中;在表现为黄化的叶部亚细胞大部分崩解,有的细胞中大量聚集或散布TMV粒体,有的细胞中则散布或聚集TSWV粒体,且在细胞质中出现病毒基质或空泡囊状结构,TSWV被膜粒体散布或聚集于细胞壁中,有的韧皮部细胞中充满纤维状内含体。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒 烟草花叶病毒 大花蕙兰 细胞病理 细胞壁
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烟草曲叶病病原的鉴定及其细胞病理 被引量:8
9
作者 张仲凯 方琦 +3 位作者 周雪平 丁铭 彭潞波 张丽珍 《西南农业学报》 CSCD 2003年第1期62-67,共6页
应用电镜技术 ,结合粉虱传双生病毒的多抗血清和单克隆抗体采用免疫电镜 (ISEM )和三抗体夹心酶联免疫吸附测定(TAS -ELISA) ,对云南烤烟、香料烟和白肋烟 3种类型烟草上的曲叶病病原进行了检测鉴定 ,其病原为粉虱传双生病毒 (WTG) ;根... 应用电镜技术 ,结合粉虱传双生病毒的多抗血清和单克隆抗体采用免疫电镜 (ISEM )和三抗体夹心酶联免疫吸附测定(TAS -ELISA) ,对云南烤烟、香料烟和白肋烟 3种类型烟草上的曲叶病病原进行了检测鉴定 ,其病原为粉虱传双生病毒 (WTG) ;根据单克隆抗体分析表位抗原 ,可分为 3组 ,其中香料烟曲叶病分离物中三者皆有 ,烤烟和白肋烟曲叶病分离物与香料烟曲叶病的一个分离物同属一组表位抗原类型 ;对 3种烟草曲叶病的病原细胞进行了观察 ,在核内观察到典型的纤维环 ,细胞核和细胞质内都含大量的双生病毒颗粒 ,在细胞质中有病毒颗粒的聚集块 ,在胞间连丝中观察到病毒颗粒。 展开更多
关键词 烟草曲叶病 病原鉴定 双生病毒 细胞病理
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番茄斑萎病毒侵染烟草的细胞病理 被引量:9
10
作者 张仲凯 杨录明 +3 位作者 方琦 彭潞波 汪继玲 普耀芳 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期349-349,共1页
关键词 番茄斑萎病毒 烟草 细胞病理学 透射电子显微镜 病毒分析
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南瓜主要病毒病的细胞病理观察 被引量:1
11
作者 方琦 杨国慧 +5 位作者 丁铭 李婷婷 张丽珍 彭潞波 苏晓霞 张仲凯 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期348-348,共1页
关键词 南瓜 黄瓜花叶病毒 番茄斑萎病毒属病毒 细胞病理学 电子显微镜
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云南马铃薯病毒种类及脱病毒种苗筛选技术体系 被引量:20
12
作者 张仲凯 丁铭 +4 位作者 方琦 张丽珍 彭潞波 李展 李婷婷 《云南农业科技》 2003年第B12期121-131,共11页
应用电子显微镜(负染色观察、免疫电镜、细胞病理)、血清学(DAS-ELISA、TAS—ELISA)的方法,对采自云南省马铃薯产区的2 000多份马铃薯病毒病样品及试管苗、微型薯样品进行了检测鉴定。检出的病毒种类有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(P... 应用电子显微镜(负染色观察、免疫电镜、细胞病理)、血清学(DAS-ELISA、TAS—ELISA)的方法,对采自云南省马铃薯产区的2 000多份马铃薯病毒病样品及试管苗、微型薯样品进行了检测鉴定。检出的病毒种类有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)、番茄斑萎病毒(TSWV)、类烟草脆裂病毒(TRV like)、类马铃薯帚顶病毒(PMTV like)7种,其中PVX、PVY、PLRV是主要毒源。研究了PVY对合作88、PVX对中甸红产量的影响,随着种薯带毒率增加,产量显著下降。应用电子显微镜、TAS—ELISA技术建立了脱病毒核心种苗的检测筛选技术体系。制备了PVY的TAS—ELISA快速检测试剂盒,应用于生产用种苗、种薯的检测。 展开更多
关键词 云南 马铃薯 病毒种类 脱病毒种苗筛选技术 产量
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应用电镜技术研究云南家蚕病毒 被引量:1
13
作者 方琦 丁铭 +3 位作者 董占鹏 张仲凯 彭潞波 张丽珍 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第3期337-338,共2页
关键词 电镜 家蚕 病毒
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电镜技术结合分子筛法分离纯化黄瓜花叶病毒(CMV)
14
作者 丁铭 彭潞波 +2 位作者 方琦 张丽珍 张仲凯 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第3期341-342,共2页
关键词 电镜 分子筛法 黄瓜花叶病毒 分离 纯化 烟草
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云南3个不同地区水稻矮缩病毒S8片段的序列分析 被引量:5
15
作者 彭潞波 魏春红 +6 位作者 方琦 李婷婷 董家红 苏晓霞 丁铭 张仲凯 李毅 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期21-24,共4页
用RT-PCR方法从云南昆明、玉溪和陆良3个地区的水稻样品中扩增到水稻矮缩病毒S8全长片段,核苷酸测定及序列分析表明,水稻矮缩病毒云南昆明、玉溪及陆良分离物S8片段全长均为1356 bp,含一个1266 bp的ORF,编码421个氨基酸.核苷酸和氨基酸... 用RT-PCR方法从云南昆明、玉溪和陆良3个地区的水稻样品中扩增到水稻矮缩病毒S8全长片段,核苷酸测定及序列分析表明,水稻矮缩病毒云南昆明、玉溪及陆良分离物S8片段全长均为1356 bp,含一个1266 bp的ORF,编码421个氨基酸.核苷酸和氨基酸同源性分析表明,4个中国分离物S8片段之间的核苷酸同源性为97.9%,其编码的氨基酸同源性为98.6%;4个中国分离物与日本分离物的S8片段核苷酸同源性和氨基酸相似性分别为94.7%和98.1%.昆明、陆良、玉溪和福建分离物应属同一株系,而日本分离物应属另一株系. 展开更多
关键词 水稻矮缩病毒 S8片段 同源性分析
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云南澳洲坚果苗木感染番茄斑萎病毒属病毒初报 被引量:13
16
作者 方琦 丁铭 +7 位作者 董家红 尹跃艳 张磊 苏晓霞 李婷婷 张丽珍 彭潞波 张仲凯 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期350-354,共5页
在云南省临沧市永德县海拔约800m的澳洲坚果(Macadamia sp.)种苗繁育基地发现叶片褪绿、黄化、叶脉间呈现近似圆形或不规则褐色枯斑的植株。为了确认植株病因,采集典型病株,应用电子显微镜负染色法、超薄切片和DAS-ELISA进行检测,在澳... 在云南省临沧市永德县海拔约800m的澳洲坚果(Macadamia sp.)种苗繁育基地发现叶片褪绿、黄化、叶脉间呈现近似圆形或不规则褐色枯斑的植株。为了确认植株病因,采集典型病株,应用电子显微镜负染色法、超薄切片和DAS-ELISA进行检测,在澳洲坚果苗木病叶分离物Maca-LC的粗汁液和病叶超薄切片中均观察到有类似番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒粒体。该病毒粒子为球形,直径80~85nm。进一步应用DAS-ELISA方法鉴定,病叶与Tospovirus的西瓜银色斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)/花生芽坏死病毒(Groundnut bud necrosisvirus,GBNV)复合抗血清呈阳性反应。通过病症典型症状、病毒形态学观察及血清学方法检测表明,侵染云南澳洲坚果种苗的病毒分离物Maca-LC为番茄斑萎病毒属Tospovirus病毒。 展开更多
关键词 澳洲坚果 番茄斑萎病毒属 超薄切片 DAS—ELISA
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生物电镜技术的应用实践 被引量:7
17
作者 张仲凯 方琦 +2 位作者 丁铭 吴秋豫 彭潞波 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S1期9-11,共3页
应用生物电子显微技术,开展了云南主要作物病毒学的研究,探明烟草病毒病原9种,马铃薯病毒病原5种,番茄、辣椒、香石竹、水稻、玉米病毒病原各2种,玫瑰、香焦病毒各1种,魔芋病毒4种;同时对主要茄科作物病毒病的生态流行、交... 应用生物电子显微技术,开展了云南主要作物病毒学的研究,探明烟草病毒病原9种,马铃薯病毒病原5种,番茄、辣椒、香石竹、水稻、玉米病毒病原各2种,玫瑰、香焦病毒各1种,魔芋病毒4种;同时对主要茄科作物病毒病的生态流行、交互保护、细胞病理以及抗病毒基因工程植株的抗性鉴定开展了研究;还对植物病原细菌形态学,真菌超微结构及其侵染植物的细胞病理进行了初步研究,结合电感藕合氩等离子体发射光谱法(ICPAES)分析开展了植物疑难病害的综合诊断.在研究过程中,也对生物电镜制样技术进行了改进. 展开更多
关键词 生物电镜 应用 植物病毒学
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烟草主要病毒病的细胞病理研究 被引量:6
18
作者 张仲凯 方琦 +2 位作者 丁铭 吴秋豫 彭潞波 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S1期12-15,18,共5页
应用超薄切片技术,对云南烟草主要病毒病的细胞病理进行了较为系统的研究,比较了不同病毒侵染,不同症状和病程引起的的细胞病理和特征性内含体及病毒病原在细胞内特征性的聚集块.发现烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV... 应用超薄切片技术,对云南烟草主要病毒病的细胞病理进行了较为系统的研究,比较了不同病毒侵染,不同症状和病程引起的的细胞病理和特征性内含体及病毒病原在细胞内特征性的聚集块.发现烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、番茄斑萎病毒(TSWV)和马铃薯Y病毒组(Potyvirus)具有特征性内含体或聚集块;复合侵染的病叶其症状与内含体无必然对应关系;在病程观察中。 展开更多
关键词 烟草 病毒病 细胞病理
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