目的制备一套A群轮状病毒(group A rotavirus,RVA)抗原检测试剂盒(胶体金法)质量控制参考品,并对其稳定性进行考察。方法用细胞培养法制备的1组肠道病毒液、轮状病毒(rotavirus,RV)液及致腹泻的主要细菌培养物,建立RVA抗原检测试剂企业...目的制备一套A群轮状病毒(group A rotavirus,RVA)抗原检测试剂盒(胶体金法)质量控制参考品,并对其稳定性进行考察。方法用细胞培养法制备的1组肠道病毒液、轮状病毒(rotavirus,RV)液及致腹泻的主要细菌培养物,建立RVA抗原检测试剂企业用参考品。阳性参考品(P1~P8)、阴性参考品(N1~N8)、检测限参考品S0、精密性参考品R0。随机抽取3套参考品(P1~P8、R0、S0),使用BioRad ChemiDoc MP系统将试剂盒条带亮度信号转化为灰度值,结果结合检测线(T线)灰度值的变异系数(coefficient of variation,CV)以及肉眼观察条带是否阳性且显色均一,考察分装均匀性;将参考品分别放置于4℃、25℃、37℃保存3、7 d及反复冻融2~6次,测定灰度值,利用Mann-Whitney U检验考察参考品的稳定性。结果阳性参考品、检测限参考品、精密性参考品显色条带均一,无肉眼可见的差异,灰度值CV在4%以内,参考品分装均匀性良好;冻融2~6次检测显色条带均一、无肉眼可见的差异,经灰度值检测及统计分析,差异无统计学意义(P>0.05);参考品在4℃、25℃及37℃放置7 d内,均具有较好的稳定性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立了RVA抗原检测试剂盒(胶体金法)企业用参考品,均一性、稳定性好,可用于RVA抗原检测试剂盒的质量控制。展开更多
文摘目的制备一套A群轮状病毒(group A rotavirus,RVA)抗原检测试剂盒(胶体金法)质量控制参考品,并对其稳定性进行考察。方法用细胞培养法制备的1组肠道病毒液、轮状病毒(rotavirus,RV)液及致腹泻的主要细菌培养物,建立RVA抗原检测试剂企业用参考品。阳性参考品(P1~P8)、阴性参考品(N1~N8)、检测限参考品S0、精密性参考品R0。随机抽取3套参考品(P1~P8、R0、S0),使用BioRad ChemiDoc MP系统将试剂盒条带亮度信号转化为灰度值,结果结合检测线(T线)灰度值的变异系数(coefficient of variation,CV)以及肉眼观察条带是否阳性且显色均一,考察分装均匀性;将参考品分别放置于4℃、25℃、37℃保存3、7 d及反复冻融2~6次,测定灰度值,利用Mann-Whitney U检验考察参考品的稳定性。结果阳性参考品、检测限参考品、精密性参考品显色条带均一,无肉眼可见的差异,灰度值CV在4%以内,参考品分装均匀性良好;冻融2~6次检测显色条带均一、无肉眼可见的差异,经灰度值检测及统计分析,差异无统计学意义(P>0.05);参考品在4℃、25℃及37℃放置7 d内,均具有较好的稳定性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立了RVA抗原检测试剂盒(胶体金法)企业用参考品,均一性、稳定性好,可用于RVA抗原检测试剂盒的质量控制。
