[目的]探讨加味丹栀逍遥散对慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁小鼠模型的干预作用及可能机制.[方法]C57BL/6N小鼠分为正常组、模型组、加味丹栀逍遥散组和氟西汀组.采用CUMS复制抑郁模型,模型成功后灌胃给药4周.末次给药后进行行为学测...[目的]探讨加味丹栀逍遥散对慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁小鼠模型的干预作用及可能机制.[方法]C57BL/6N小鼠分为正常组、模型组、加味丹栀逍遥散组和氟西汀组.采用CUMS复制抑郁模型,模型成功后灌胃给药4周.末次给药后进行行为学测试,采用串联质谱标签法(TMT)蛋白质组学分析小鼠肝脏差异蛋白的表达谱,通过Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)通路富集加味丹栀逍遥散抗抑郁的相关通路和蛋白;血液生化检测总胆固醇及总胆汁酸含量.[结果]与正常组相比,模型组小鼠糖水偏好率下降,自主活动次数减少,加味丹栀逍遥散给药后上调小鼠糖水偏好率及自主活动次数.蛋白组学结果显示模型组与加味丹栀逍遥散给药组之间肝脏差异表达蛋白20个,其中上调11个,下调9个.KEGG通路富集分析发现差异表达蛋白主要参与了胆固醇代谢、初级胆汁酸的合成等.生化检测发现,与正常组相比,模型组总胆固醇含量下降而胆汁酸含量升高,加味丹栀逍遥散给药能显著增加总胆固醇含量而减少总胆汁酸含量.[结论]加味丹栀逍遥散具有良好的抗抑郁效应,其机制可能与调节肝脏胆固醇异常代谢、降低血液总胆汁酸有关.展开更多
由于能被多种类型的病原体或危险信号所激活,NLRP3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3)炎症小体在多种疾病过程中都发挥了关键作用.作为炎症反应的核心,NLRP3炎症小体可能为各种炎症性疾病的治疗提供新的靶点...由于能被多种类型的病原体或危险信号所激活,NLRP3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3)炎症小体在多种疾病过程中都发挥了关键作用.作为炎症反应的核心,NLRP3炎症小体可能为各种炎症性疾病的治疗提供新的靶点.泛素化作为一种多功能翻译后修饰,在NLRP3介导的炎症免疫反应中起着关键的调节作用.通过对NLRP3炎症小体的组成、结构及功能,泛素化过程,泛素化与去泛素化对NLRP3炎症小体的正、负性调控的详细阐述,对NLRP3泛素化靶向治疗的前景与现状深入分析,为炎症性疾病的治疗提供新思路.展开更多
为获得大量猪α干扰素的重组蛋白,研究了其发酵条件,并对目的蛋白进行分离纯化。考察了不同IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5mmol/L)、不同诱导温度(17、27、32、37℃)、不同诱导时间(0、2、3、4、5、6、7、8h)对...为获得大量猪α干扰素的重组蛋白,研究了其发酵条件,并对目的蛋白进行分离纯化。考察了不同IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5mmol/L)、不同诱导温度(17、27、32、37℃)、不同诱导时间(0、2、3、4、5、6、7、8h)对目的蛋白表达的影响;同时对包涵体进行提取、溶解变性进行研究,最后采用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。采用SDS-PAGE电泳及Image Pro Plus6.0软件分析电泳结果,结果显示,IPTG诱导浓度为1.0mmol/L、诱导温度为27℃、诱导时间为6h时,目的蛋白表达量最多;超声波破碎细菌的最优时长循环为10s/10s;8mol/L尿素溶解包涵体过夜可得到大量可溶性目的蛋白含量,Ni柱亲和层析后可去除大量杂蛋白,获得较纯的目的蛋白。可见本试验通过优化重组猪α干扰素诱导表达条件及纯化方法,获得了高表达、高纯度的重组猪α干扰素蛋白,为今后研究其生物活性奠定了初步基础。展开更多
文摘[目的]探讨加味丹栀逍遥散对慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁小鼠模型的干预作用及可能机制.[方法]C57BL/6N小鼠分为正常组、模型组、加味丹栀逍遥散组和氟西汀组.采用CUMS复制抑郁模型,模型成功后灌胃给药4周.末次给药后进行行为学测试,采用串联质谱标签法(TMT)蛋白质组学分析小鼠肝脏差异蛋白的表达谱,通过Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)通路富集加味丹栀逍遥散抗抑郁的相关通路和蛋白;血液生化检测总胆固醇及总胆汁酸含量.[结果]与正常组相比,模型组小鼠糖水偏好率下降,自主活动次数减少,加味丹栀逍遥散给药后上调小鼠糖水偏好率及自主活动次数.蛋白组学结果显示模型组与加味丹栀逍遥散给药组之间肝脏差异表达蛋白20个,其中上调11个,下调9个.KEGG通路富集分析发现差异表达蛋白主要参与了胆固醇代谢、初级胆汁酸的合成等.生化检测发现,与正常组相比,模型组总胆固醇含量下降而胆汁酸含量升高,加味丹栀逍遥散给药能显著增加总胆固醇含量而减少总胆汁酸含量.[结论]加味丹栀逍遥散具有良好的抗抑郁效应,其机制可能与调节肝脏胆固醇异常代谢、降低血液总胆汁酸有关.
基金Henan Provincial Science and Technology Research and Development Project(232301420018)Henan Provincial Medical Science and Technology Research Project(LHGJ20230715)Henan Provincial Natural Science Foundation Project(202300410249).
文摘由于能被多种类型的病原体或危险信号所激活,NLRP3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3)炎症小体在多种疾病过程中都发挥了关键作用.作为炎症反应的核心,NLRP3炎症小体可能为各种炎症性疾病的治疗提供新的靶点.泛素化作为一种多功能翻译后修饰,在NLRP3介导的炎症免疫反应中起着关键的调节作用.通过对NLRP3炎症小体的组成、结构及功能,泛素化过程,泛素化与去泛素化对NLRP3炎症小体的正、负性调控的详细阐述,对NLRP3泛素化靶向治疗的前景与现状深入分析,为炎症性疾病的治疗提供新思路.
文摘为获得大量猪α干扰素的重组蛋白,研究了其发酵条件,并对目的蛋白进行分离纯化。考察了不同IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5mmol/L)、不同诱导温度(17、27、32、37℃)、不同诱导时间(0、2、3、4、5、6、7、8h)对目的蛋白表达的影响;同时对包涵体进行提取、溶解变性进行研究,最后采用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。采用SDS-PAGE电泳及Image Pro Plus6.0软件分析电泳结果,结果显示,IPTG诱导浓度为1.0mmol/L、诱导温度为27℃、诱导时间为6h时,目的蛋白表达量最多;超声波破碎细菌的最优时长循环为10s/10s;8mol/L尿素溶解包涵体过夜可得到大量可溶性目的蛋白含量,Ni柱亲和层析后可去除大量杂蛋白,获得较纯的目的蛋白。可见本试验通过优化重组猪α干扰素诱导表达条件及纯化方法,获得了高表达、高纯度的重组猪α干扰素蛋白,为今后研究其生物活性奠定了初步基础。
