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以疾病案例为导向的医学生物化学模块式教学法初探 被引量:8
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作者 樊建慧 王冬梅 +2 位作者 薛恺 宋嘉哲 田余祥 《中国高等医学教育》 2014年第7期79-80,共2页
医学生物化学是医学生必修的一门主干专业基础课,它与其他基础医学和临床医学课程的联系非常密切,特别是对于认识病因和发病机制、疾病诊断和防治以及疾病预后的判定都十分重要。以疾病案例为导向的医学生物化学模块式教学法的目的是改... 医学生物化学是医学生必修的一门主干专业基础课,它与其他基础医学和临床医学课程的联系非常密切,特别是对于认识病因和发病机制、疾病诊断和防治以及疾病预后的判定都十分重要。以疾病案例为导向的医学生物化学模块式教学法的目的是改革传统的灌输式教学模式,培养和提高学生的独立思考能力和判断能力,培养学生学习的主动性和创造性。以适应国家"卓越医师"培养计划的实施。 展开更多
关键词 医学生物化学 案例 模块式教学 早期临床 自主学习
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方钢管柱-钢梁穿芯螺栓连接节点拟静力试验 被引量:4
2
作者 樊建慧 王顺华 黄炳生 《南京工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第3期314-321,共8页
为研究方钢管柱与H形钢梁穿芯螺栓T形钢连接节点抗震性能,对方钢管柱与H形钢梁穿芯螺栓T形钢装配式连接钢框架边节点和中节点试件进行拟静力加载试验,研究节点在反复循环荷载作用下的滞回性能、耗能能力、延性、应力分布。结果表明:在... 为研究方钢管柱与H形钢梁穿芯螺栓T形钢连接节点抗震性能,对方钢管柱与H形钢梁穿芯螺栓T形钢装配式连接钢框架边节点和中节点试件进行拟静力加载试验,研究节点在反复循环荷载作用下的滞回性能、耗能能力、延性、应力分布。结果表明:在对穿螺栓拉力作用下,方钢管翼缘产生面外变形,节点滞回曲线呈S形,有明显的捏拢现象,刚度退化明显,耗能能力低;装配式梁柱节点抗震性能差,能量耗散系数和等效黏滞阻尼系数远小于方钢管混凝土柱、H形钢柱端板连接节点;节点的骨架曲线分为弹性阶段、强化阶段和破坏阶段,可以用双线性曲线表达;当节点破坏时,T形钢腹板达到屈服,但应变分布不均匀。方钢管柱-钢梁的穿芯螺栓连接宜在节点区对柱壁进行加强,以提高节点的承载力和耗能能力。 展开更多
关键词 方钢管柱 H形钢梁 装配式梁柱节点 拟静力试验 抗震性能
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高表达人核糖核酸酶抑制因子的乳腺癌细胞株的建立及其鉴定 被引量:1
3
作者 樊建慧 刘鹏 +1 位作者 崔秀云 田余祥 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期203-204,共2页
目的建立稳定高表达人核糖核酸酶抑制因子(hRI)的真核细胞系:乳腺癌细胞系,为进一步研究hRI抗肿瘤、抗氧化的作用机制奠定实验基础。方法将hRI通过逆转录病毒载体(pLNCX-hRI)经过病毒包装细胞(PA317)包装后的高滴度病毒上清,感染乳腺癌(... 目的建立稳定高表达人核糖核酸酶抑制因子(hRI)的真核细胞系:乳腺癌细胞系,为进一步研究hRI抗肿瘤、抗氧化的作用机制奠定实验基础。方法将hRI通过逆转录病毒载体(pLNCX-hRI)经过病毒包装细胞(PA317)包装后的高滴度病毒上清,感染乳腺癌(MCF-7)细胞系,经G418筛选后,运用RT-PCR、Western blot等方法进行鉴定hRI在MCF-7中的高表达。结果hRI克隆到乳腺癌细胞(MCF-7)基因组,并随着基因组稳定高表达hRI。结论利用逆转录病毒载体感染真核细胞后获得高表达hRI的肿瘤细胞株,从而为进一步研究真核细胞内hRI的抗肿瘤作用机制提供条件。 展开更多
关键词 人核糖核酸酶抑制因子 逆转录病毒 乳腺癌细胞
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基于学研融合的医学创新人才培养模式探索 被引量:5
4
作者 樊建慧 孔英 田余祥 《卫生职业教育》 2016年第8期2-3,共2页
以医学实验教学和科研活动为主线,以学生科研素质和创新能力提高为目标,积极开展医学实验教学改革,建立层层递进的实践教学模式,并注重培养学生的科研创新意识及整体思维,为进一步探索医学创新人才的培养提供有力支持。
关键词 学研融合 创新人才培养 医学教育
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方钢管混凝土柱-钢梁半刚性节点研究综述 被引量:2
5
作者 樊建慧 黄炳生 吴文平 《江苏建筑》 2007年第4期31-33,38,共4页
文章介绍了目前方钢管混凝土柱-钢梁半刚性连接节点的形式,概述了近年来国内外关于方钢管混凝土柱-钢梁半刚性连接节点研究,提出方钢管混凝土柱-钢梁半刚性连接研究方向的一些看法和建议。
关键词 方钢管混凝土柱 钢梁 半刚性连接 节点
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医学留学生生物化学实验教学探索 被引量:2
6
作者 樊建慧 徐跃飞 《卫生职业教育》 2014年第6期82-83,共2页
通过近十年的教学实践,就如何提高医学留学生生物化学实验教学质量,从教师、教材、课前准备、授课过程及课后小结方面进行初步探索与实践,希望进一步提高医学留学生生物化学的教学质量和教学效果。
关键词 医学留学生 生物化学 实验教学
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重组人核糖核酸酶抑制因子 基因的siRNA表达载体构建及B16细胞中基因沉默的鉴定 被引量:5
7
作者 李坤 田余祥 +4 位作者 陈海波 杨帆 樊建慧 赵宝昌 崔秀云 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期519-522,共4页
人核糖核酸酶抑制因子(Human ribonuclease inhibitor, hRI)是细胞质中的一种酸性糖蛋白,可以与血管生长因子(Angiogenin, Ang)紧密结合从而抑制血管形成.利用全基因组合成法合成针对人核糖核酸酶抑制因子基因(hri)的发夹shRNA序列,亚... 人核糖核酸酶抑制因子(Human ribonuclease inhibitor, hRI)是细胞质中的一种酸性糖蛋白,可以与血管生长因子(Angiogenin, Ang)紧密结合从而抑制血管形成.利用全基因组合成法合成针对人核糖核酸酶抑制因子基因(hri)的发夹shRNA序列,亚克隆到siRNA表达载体pKD;重组载体经酶切鉴定后,用脂质体法与报告基因绿色荧光蛋白重组融合的人核糖核酸酶抑制因子的逆转录病毒载体pLNCX-EGFP-C1-hri共转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测干扰效果.用Image-Pro plus 4.5软件对绿色荧光照片半定量分析干扰效率.结果表明,荧光显微镜显示B16中表达的绿色荧光被干扰,荧光强度半定量分析干扰效率可达80%以上.成功重组构建了针对hri的siRNA表达载体. 展开更多
关键词 人核糖核酸酶抑制因子 SIRNA 构建 基因沉默
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绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP-C1-hri的构建及鉴定 被引量:4
8
作者 李坤 田余祥 +3 位作者 于丽华 樊建慧 杨帆 崔秀云 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期371-372,共2页
目的构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP-C1-hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础。方法用亚克隆法,将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上,用双酶切筛选得到阳性重组... 目的构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP-C1-hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础。方法用亚克隆法,将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上,用双酶切筛选得到阳性重组质粒pEGFP-C1-hri,用脂质体法将其瞬时转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测其表达。结果pEGFP-C1-hri中插入了hri序列,绿色荧光高效表达于B16细胞浆中。结论pEGFP-C1-hri表达载体已成功构建。 展开更多
关键词 人核糖核酸酶抑制因子 绿色荧光蛋白 载体 构建
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3种不同钢管混凝土本构关系模型研究 被引量:14
9
作者 吴文平 黄炳生 樊建慧 《四川建筑科学研究》 北大核心 2009年第6期19-23,共5页
对韩林海,Susantha,Saenz 3种钢管混凝土核心混凝土的单轴应力—应变关系做了介绍,对采用不同混凝土强度等级、不同径厚比(宽厚比)的圆钢管(方钢管)混凝土的应力—应变关系作了分析,并对3种不同本构关系作了对比分析研究。结果表明:对... 对韩林海,Susantha,Saenz 3种钢管混凝土核心混凝土的单轴应力—应变关系做了介绍,对采用不同混凝土强度等级、不同径厚比(宽厚比)的圆钢管(方钢管)混凝土的应力—应变关系作了分析,并对3种不同本构关系作了对比分析研究。结果表明:对于相同等级的混凝土,径厚比(宽厚比)越小,钢管对核心混凝土的约束效应越好,即核心混凝土强度提高越大;Saenz模型的延性好于其他两种模型,应力峰值较大;3种模型中,圆钢管对混凝土的约束效应明显好于方钢管。 展开更多
关键词 钢管混凝土 单轴应力-应变关系 约束效应 混凝土强度 径厚比(宽厚比)
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方钢管混凝土柱-钢梁竖向加劲板连接节点抗震性能分析 被引量:3
10
作者 吴文平 黄炳生 樊建慧 《防灾减灾工程学报》 CSCD 2008年第2期223-229,共7页
在合理选择材料本构关系、破坏准则的基础上,采用通用有限元软件ANSYS对方钢管混凝土柱-钢梁竖向加劲板式节点进行了低周反复荷载试验,以及在低周反复荷载下的抗震性能分析。结果表明:有限元分析得到的滞回曲线和骨架曲线与试验结果吻... 在合理选择材料本构关系、破坏准则的基础上,采用通用有限元软件ANSYS对方钢管混凝土柱-钢梁竖向加劲板式节点进行了低周反复荷载试验,以及在低周反复荷载下的抗震性能分析。结果表明:有限元分析得到的滞回曲线和骨架曲线与试验结果吻合较好;试件破坏为梁端破坏,塑性铰出现在梁端,在梁变截面附近出现了局部屈曲,也与试验结果一致。 展开更多
关键词 非线性有限元 方钢管混凝土柱 竖向加劲板 抗震性能 低周反复荷载
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人核糖核酸酶抑制因子基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量:1
11
作者 刘鹏 赵宝昌 +3 位作者 樊建慧 田余祥 杨帆 崔秀云 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期547-549,共3页
目的构建含有人核糖核酸酶抑制因子(hRI)基因的重组腺病毒载体。方法以含有全长cDNA的pT7-RI为模板,PCR扩增hRI,经T载体克隆后,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组。筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴... 目的构建含有人核糖核酸酶抑制因子(hRI)基因的重组腺病毒载体。方法以含有全长cDNA的pT7-RI为模板,PCR扩增hRI,经T载体克隆后,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组。筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴定,线性化后脂质体法转染293细胞进行包装、扩增。通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。结果酶切鉴定及PCR结果证明hRI基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度为1.5×1010pfu/ml。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含hRI基因的重组腺病毒载体。 展开更多
关键词 人核糖核酸酶抑制因子 腺病毒载体 基因治疗
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方钢管混凝土柱—钢梁外隔板式节点非线性有限元分析 被引量:1
12
作者 黄炳生 杜培源 樊建慧 《四川建筑科学研究》 北大核心 2009年第1期59-64,共6页
选择合适的材料本构模型,利用三维实体单元,对方钢管混凝土柱—钢梁外隔板式节点建立了同时考虑几何非线性和材料非线性的有限元分析模型,模拟分析了单调加载下节点的受力性能,较为精确地分析了节点区应力分布。结果表明,由有限元模型... 选择合适的材料本构模型,利用三维实体单元,对方钢管混凝土柱—钢梁外隔板式节点建立了同时考虑几何非线性和材料非线性的有限元分析模型,模拟分析了单调加载下节点的受力性能,较为精确地分析了节点区应力分布。结果表明,由有限元模型所得的位移曲线与试验所得的低周反复荷载作用下的骨架曲线极为相似,由有限元模型所得的应变分布和发展规律与试验结果一致。外隔板式节点的梁端弯矩一部分通过柱腹板两侧隔板传递到柱钢管腹板和核心混凝土,另一部分则主要通过柱角两内侧各0.25倍柱宽范围内的隔板直接传递给柱钢管翼缘和核心混凝土,柱角附近的隔板出现严重的应力集中,节点因受压翼缘屈曲、梁翼缘变截面最窄处形成塑性铰而破坏。节点核心区混凝土符合斜压杆受力机制。 展开更多
关键词 方钢管混凝土柱 钢梁 外隔板式节点 非线性有限元 应力分布
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方钢管混凝土柱-钢梁刚性节点研究综述 被引量:2
13
作者 吴文平 黄炳生 樊建慧 《低温建筑技术》 2007年第6期53-55,共3页
综合国内外的相关资料,介绍了方钢管混凝土柱-钢梁刚性节点的各种形式,并就各种节点形式的特点、受力性能及研究现状做了阐述。最后,对方钢管混凝土柱-钢梁节点的进一步研究工作做了探讨。
关键词 方钢管混凝土柱 梁柱节点 钢梁 综述
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下调窖蛋白-1表达抑制小鼠肝癌H22细胞侵袭能力
14
作者 汪淑晶 樊建慧 +1 位作者 于生金 张嘉宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期323-329,共7页
窖蛋白-1在不同肿瘤中发挥作用不同.本研究以小鼠肝癌细胞H22为研究对象,观察下调窖蛋白-1表达对H22细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制.利用RT-PCR和Western印迹法检测了窖蛋白-1在H22及小鼠正常肝细胞IAR20中的表达.结果显示... 窖蛋白-1在不同肿瘤中发挥作用不同.本研究以小鼠肝癌细胞H22为研究对象,观察下调窖蛋白-1表达对H22细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制.利用RT-PCR和Western印迹法检测了窖蛋白-1在H22及小鼠正常肝细胞IAR20中的表达.结果显示,窖蛋白-1在H22中的表达高于其在IAR20中的表达,提示窖蛋白-1高表达可能与H22细胞恶性表型有关.RNA干扰和凝集素印记实验结果显示,窖蛋白-1-siRNA能够有效抑制窖蛋白-1mRNA和蛋白表达,并抑制细胞表面N-聚糖β1,6GlcNAc分支形成.Transwell细胞迁移和侵袭实验结果显示,与未转染组和siRNA对照组比较,转染窖蛋白-1-siRNA的H22细胞迁移和侵袭数目明显减少.本研究证明,下调窖蛋白-1表达可抑制H22细胞表面N-聚糖β1,6GlcNAc分支形成,从而抑制细胞迁移和侵袭能力. 展开更多
关键词 窖蛋白-1 肝癌 侵袭 糖基化
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分泌性表达载体V-pLNCX-s-hri对小鼠B16黑色素瘤生长的抑制作用 被引量:3
15
作者 盛甫秀 樊建慧 +3 位作者 王冬梅 赵宝昌 崔秀云 田余祥 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期236-243,共8页
背景与目的:已有研究表明从人胎盘中提取纯化的人核糖核酸酶抑制因子(human ribonuclease inhibitor,hRI)对小鼠某些实体肿瘤的生长具有明显的抑制作用。本研究的目的是构建分泌性表达载体V-pLNCX-s-hri,并观察其对小鼠B16黑色素瘤生长... 背景与目的:已有研究表明从人胎盘中提取纯化的人核糖核酸酶抑制因子(human ribonuclease inhibitor,hRI)对小鼠某些实体肿瘤的生长具有明显的抑制作用。本研究的目的是构建分泌性表达载体V-pLNCX-s-hri,并观察其对小鼠B16黑色素瘤生长的抑制作用。方法:将合成的小鼠IgG信号肽碱基序列与hRI基因序列连接后,重组到逆转录病毒载体V-pLNCX上构建分泌性表达载体V-pLNCX-s-hri。将PA137细胞用于病毒包装,NIH3T3细胞用于测定病毒滴度。采用RT-PCR和Western blot法检测hRI基因的表达。构建小鼠荷B16黑色素瘤模型,注射V-pLNCX-s-hri,同时用生理盐水、V-pLNCX和V-pLNCX-hri作为对照,用肿瘤组织重和微血管密度来评价V-pLNCX-s-hri对小鼠B16黑素瘤生长的抑制作用。采用ELISA方法测定B16细胞培养上清和小鼠血清中RI含量。结果:V-pLNCX-s-hri对培养的B16细胞的感染效率为38.5%。在感染V-pLNCX-s-hri后的B16细胞中检测到RI mRNA和蛋白的表达。感染后的B16细胞的培养上清中hRI的含量为0.228μg/mL。V-pLNCX-s-hri组小鼠外周血中RI的含量为0.249μg/mL,明显高于生理盐水组、V-pLNCX组和V-pLNCX-hri组的0.035μg/mL、0.028μg/mL和0.169μg/mL(P值均<0.01)。生理盐水组、V-pLNCX组和V-pLNCX-hri组小鼠的瘤组织重分别为(1.90±1.12)g、(1.77±0.21)g和(1.10±0.46)g,显微镜下每10个视野的微血管平均数分别为89±6、87±7和41±8;而V-pLNCX-s-hri组的瘤组织重为(0.82±0.34)g,血管平均数为34±4。V-pLNCX-s-hri组与各对照组相比,其瘤组织重和血管数量的差异都有统计学意义(P值均<0.01)。结论:构建的分泌性表达载体V-pLNCX-s-hri能对B16细胞进行有效的感染,且在感染的B16细胞中分泌性高表达。V-pLNCX-s-hri对小鼠B16黑色素瘤的生长有明显的抑制作用,且效果优于V-pLNCX-hri。 展开更多
关键词 核糖核酸酶 抑制因子 信号肽 逆转录病毒 载体 黑色素瘤 基因治疗 小鼠
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P-糖蛋白对结肠癌多药耐药的影响 被引量:9
16
作者 丛熙 樊建慧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期19-26,共8页
结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤。对术后患者以及无法采用手术治疗的患者,临床多采用化疗、放疗等综合性治疗方法。随着大量化疗药物在临床的广泛使用,结肠癌多药耐药性成为化疗失败的最主要原因。研究表明,P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-... 结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤。对术后患者以及无法采用手术治疗的患者,临床多采用化疗、放疗等综合性治疗方法。随着大量化疗药物在临床的广泛使用,结肠癌多药耐药性成为化疗失败的最主要原因。研究表明,P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)作为ATP结合盒(ABC)转运蛋白超家族成员之一,与多种肿瘤的多药耐药相关,其介导的多药耐药已经成为目前研究的热点。本文旨在通过对P-糖蛋白的结构、耐药机制以及逆转P-糖蛋白介导的结肠癌多药耐药新发现进行阐述,引导读者对P-糖蛋白在结肠癌多药耐药中的作用有更深入的了解。 展开更多
关键词 P-糖蛋白 结肠癌 多药耐药
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基于BIM的工程量统计实践——以句容市人民医院项目应用为例 被引量:1
17
作者 樊建慧 蒋琴华 林凡舟 《土木建筑工程信息技术》 2018年第4期84-90,共7页
在国内的BIM工程量统计应用中,由于BIM技术体系本地化不足的原因,在实际项目中存在准确性、时效性和适用性不足的问题。在部分BIM项目中,BIM和传统工程量甚至采取了双轨制,非但没能提高效率,而且形成了重复劳动,造成了资源浪费。本文以... 在国内的BIM工程量统计应用中,由于BIM技术体系本地化不足的原因,在实际项目中存在准确性、时效性和适用性不足的问题。在部分BIM项目中,BIM和传统工程量甚至采取了双轨制,非但没能提高效率,而且形成了重复劳动,造成了资源浪费。本文以示范项目为例,分析了工程量统计中的挑战及难点,从项目应用需求出发,借鉴国际标准的标准化方向,创新性的提出了基于BIM的工程量统计的技术路线,总结出构件编码和属性信息本地化的技术解决方案,为实现基于BIM的工程量统计的快速生成提供新思路。 展开更多
关键词 BIM 工程量统计 构件分类体系 编码标准化 属性信息标准化
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多平台多维度生物医学工程实验课程远程教学实践
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作者 王晶 徐银冬 +1 位作者 王昱然 樊建慧 《科技创新导报》 2020年第32期169-173,共5页
生物医学工程实验课程操作性强,需要采取理论与实践结合的教学形式。在某些无法实现面授教学的特殊情况下,采用雨课堂、云班课、QQ直播、融智云考题库等多平台多维度的远程教学方式进行生物医学工程实验远程教学实践活动,完全可以满足... 生物医学工程实验课程操作性强,需要采取理论与实践结合的教学形式。在某些无法实现面授教学的特殊情况下,采用雨课堂、云班课、QQ直播、融智云考题库等多平台多维度的远程教学方式进行生物医学工程实验远程教学实践活动,完全可以满足教学大纲要求,并让教师在更好地了解每个学生学习状态的同时,能够让学生保持充足的学习动力、增加动手锻炼的机会,帮助学生更好地理解实验,提升学生素质,为线上线下相结合的混合式教育教学实践奠定基础。 展开更多
关键词 实验教学 网络平台教学 生物医学工程
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浅议凉城县经济林产业发展
19
作者 牛润军 郑志宏 +1 位作者 李燕 樊建慧 《内蒙古林业》 2014年第8期28-29,共2页
经济林是指以生产果品、食用油料、饮料、调料、工业原料和药材等为主要目的的林木.经济林不仅能为人们提供粮食、果品和油料产品,而且具备净化空气、保持水土、涵养水源等功能,在国民经济中具有重要的作用,具体应用在经济林木繁殖、良... 经济林是指以生产果品、食用油料、饮料、调料、工业原料和药材等为主要目的的林木.经济林不仅能为人们提供粮食、果品和油料产品,而且具备净化空气、保持水土、涵养水源等功能,在国民经济中具有重要的作用,具体应用在经济林木繁殖、良种选育、丰产栽培、科学经营、产品贮运和加工、商品流通等各个生产环节. 展开更多
关键词 经济林产业 凉城县 经济林木 生产环节 工业原料 净化空气 保持水土 涵养水源
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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶干扰慢病毒载体系统的建立及应用 被引量:2
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作者 樊建慧 何静娜 +3 位作者 汪淑晶 郑伟龙 靳利远 张嘉宁 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期518-521,557,共5页
目的构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnT)Ⅲ、Ⅳa和Ⅴ的RNA干扰(RNAi)慢病毒系统,并检测干扰慢病毒在体外小鼠肝癌细胞中对不同GnT表达的抑制作用。方法针对三种基因序列设计合成特异的shRNA序列,并构建干扰慢病毒表达载体,利用病毒包... 目的构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnT)Ⅲ、Ⅳa和Ⅴ的RNA干扰(RNAi)慢病毒系统,并检测干扰慢病毒在体外小鼠肝癌细胞中对不同GnT表达的抑制作用。方法针对三种基因序列设计合成特异的shRNA序列,并构建干扰慢病毒表达载体,利用病毒包装细胞293T包装生产病毒,感染靶细胞Hca-F后,应用RT-PCR和免疫印迹检测干扰慢病毒对三种N-乙酰氨基葡萄糖转移酶表达的抑制。结果经测序证实三种干扰慢病毒表达载体构建成功,并获得高滴度的感染慢病毒。干扰慢病毒感染靶细胞后能够有效下调三种N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的表达。结论干扰慢病毒可有效地抑制三种N-乙酰氨基葡萄糖转移酶GnT-Ⅲ、GnT-Ⅳa和GnT-Ⅴ的表达。 展开更多
关键词 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶 慢病毒载体 RNA干扰
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