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人脂肪间充质干细胞的分离培养及其鉴定 被引量:6
1
作者 殷莉波 赵文秀 +3 位作者 尹震宇 杨中萌 张琼 王效民 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第32期5997-6000,共4页
背景:人脂肪间充质干细胞在不同的条件下被成功诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞、肝脏细胞等中胚层细胞,同时也可以向其他胚层分化,证明脂肪间充质干细胞是多分化潜能干细胞。目的:探讨人脂肪间充质干细胞的分离、鉴定方法。... 背景:人脂肪间充质干细胞在不同的条件下被成功诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞、肝脏细胞等中胚层细胞,同时也可以向其他胚层分化,证明脂肪间充质干细胞是多分化潜能干细胞。目的:探讨人脂肪间充质干细胞的分离、鉴定方法。方法:整形外科吸脂术获得腹部皮下脂肪,0.075%Ⅰ型胶原酶消化,贴壁培养获得人脂肪间充质干细胞,绘制细胞增殖曲线,进行流式细胞、细胞周期、免疫荧光等检测,并验证其是否具有多功能分化潜能。结果与结论:获得形态较均一的长梭形的人脂肪间充质干细胞,细胞增殖良好,有明显的指数生长期,体外能长期培养存活,并保持不分化状态;流式检测细胞高表达CD105、CD90,低表达CD34、CD45;多数细胞周期检测G0/G1期占80%以上。能向成脂、成骨诱导分化。结果表明,实验分离获得的细胞是具有脂肪间充质干细胞特性的细胞,为深入研究人脂肪间充质干细胞打下基础。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 干细胞 分离 培养 鉴定
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人腹膜间皮细胞的改良分离及其鉴定 被引量:4
2
作者 殷莉波 赵文秀 +1 位作者 尹震宇 王效民 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第27期5007-5010,共4页
背景:腹膜间皮细胞作为腹膜的重要组分,分泌多种细胞因子,在参与抗炎、免疫调节、腹膜纤维化等方面起着重要作用,如何获得优质、均一的腹膜间皮细胞成为解决这些问题的关键。目的:拟建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。方法:0.1%胶原... 背景:腹膜间皮细胞作为腹膜的重要组分,分泌多种细胞因子,在参与抗炎、免疫调节、腹膜纤维化等方面起着重要作用,如何获得优质、均一的腹膜间皮细胞成为解决这些问题的关键。目的:拟建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。方法:0.1%胶原酶Ⅰ消化腹部大网膜组织,去除红细胞后用含体积分数为10%胎牛血清的1640培养基培养。在培养过程中以倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8观察培养液对间皮细胞生长的促进作用,透射电子显微镜观察细胞超微结构,激光共聚焦免疫荧光鉴定细胞。结果与结论:分离培养的细胞为多角形,汇合时呈铺路石样排列,培养细胞的纯度达90%以上;生长良好,迅速,可传代至四五代。透射电子显微镜下见细胞表面大量的微绒毛,免疫荧光显示角蛋白、波形蛋白抗原阳性,白细胞CD45、第Ⅷ因子相关抗原阴性;所有被鉴定特征均符合间皮细胞的特点。结果提示胶原酶Ⅰ消化法是一种简单、高效、重复性高的分离腹膜间皮细胞的方法。 展开更多
关键词 腹膜 间皮细胞 细胞培养 胶原酶Ⅰ 消化培养
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脂肪间充质干细胞诱导向肝系细胞分化 被引量:1
3
作者 殷莉波 王效民 《肝脏》 2009年第1期62-64,共3页
关键词 肝系细胞分化 脂肪间充质干细胞 动物肝脏 导向 细胞替代治疗 细胞再生 肝功能障碍 疾病终末期
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TLR4的表达与急性胆道梗阻时内毒素致小鼠肝脏损伤的关系 被引量:5
4
作者 李敏 殷莉波 +4 位作者 刘平果 赵文秀 王效民 尹震宇 高翔 《肝胆外科杂志》 2010年第3期224-227,共4页
目的探讨急性胆道梗阻时内毒素损伤小鼠肝脏的机制及其与TLR4表达的关系。方法雄性C57BL/10J(WT)小鼠42只,随机分为生理盐水组(NS组,n=21)、内毒素处理组1(LPS1组,n=21),C57BL/10ScnJ(TLR4-/-)小鼠21只,为内毒素处理组2(LPS2组)。3组均... 目的探讨急性胆道梗阻时内毒素损伤小鼠肝脏的机制及其与TLR4表达的关系。方法雄性C57BL/10J(WT)小鼠42只,随机分为生理盐水组(NS组,n=21)、内毒素处理组1(LPS1组,n=21),C57BL/10ScnJ(TLR4-/-)小鼠21只,为内毒素处理组2(LPS2组)。3组均行胆总管结扎术,LPS1、LPS2组小鼠于胆总管内注射LPS(8ng/μL,10ng/g体重),NS组注射同等剂量的生理盐水,术后6、12、24h采集标本,RT-PCR检测肝脏组织TLR4mRNA的表达情况,全自动生化分析仪检测血清ALT、TBIL、DBIL水平,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6的水平。病理观察肝脏损伤情况,免疫组织化学染色观察肝脏NF-κB的表达。结果 LPS1组与NS组比较肝脏组织TLR4mRNA在6h时表达已有升高,于24h达高峰,ALT、TBIL各时点均明显升高(P<0.01),TNF-α、IL-6表达亦增高(P<0.01),LPS1病理损伤程度较NS组重,免疫组化显示术后24小时NF-κB在LPS1组可见肝细胞明显的核表达。LPS2组与LPS1组比较各血清学指标均明显下降,病理损伤减轻,24h时肝细胞NF-κB核表达较少。结论在急性胆道梗阻时LPS可以加重肝脏组织损伤和机体炎症反应,可能与TLR4的表达增高及NF-κB的表达有关。阻断LPS-TLR4信号通路可以减轻LPS引起的机体损伤。 展开更多
关键词 胆道梗阻 LPS TOLL-LIKE receptor4
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间苯三酚对肝缺血再灌注损伤的作用及机制研究 被引量:1
5
作者 吴建波 杨建纲 +4 位作者 殷莉波 倪沂江 周照 程宇 李圆 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期196-200,共5页
目的 :研究间苯三酚(phloroglucinol,Phlo)在肝脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中的作用。方法 :将40只C57BL/6小鼠随机分为假手术(sham)组、IR组、IR+Phlo组、IR+磷酸缓冲盐(phosphate buffer saline,PBS)组4组,每... 目的 :研究间苯三酚(phloroglucinol,Phlo)在肝脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中的作用。方法 :将40只C57BL/6小鼠随机分为假手术(sham)组、IR组、IR+Phlo组、IR+磷酸缓冲盐(phosphate buffer saline,PBS)组4组,每组10只。Sham组仅分离暴露门静脉,不夹闭。另3组建立小鼠部分肝缺血再灌注模型(70%)。利用小鼠正常巨噬细胞系RAW264.7,进行体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激,建立体外模型。通过血清丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天门冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)的水平和组织病理学评价肝脏损伤,利用实时荧光定量PCR检测肝内IL-1β和TNF-α的m RNA水平变化,细胞培养上清液IL-1β和TNF-α的水平由ELISA检测,RAW264.7细胞内p-p65蛋白表达情况经Western blot进行测定。结果 :IR+Phlo组小鼠肝损伤情况明显低于IR组与IR+PBS组(P<0.01),肝内IL-1β和TNF-α的m RNA水平均降低(P<0.05)。体外试验证实间苯三酚与RAW264.7共培养时,可减少其分泌的IL-1β和TNF-α(P<0.05),细胞中NF-κB的活性也明显下降。结论:间苯三酚在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中具有保护作用,该作用部分是通过间苯三酚抑制巨噬细胞内NF-κB的活性实现。 展开更多
关键词 肝缺血再灌注损伤 间苯三酚 RAW264.7 NF-ΚB
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自体脾组织大网膜移植术治疗小儿脾破裂的临床分析 被引量:7
6
作者 程宇 殷莉波 +4 位作者 倪沂江 周照 杨建纲 刘俊 翁立新 《实用临床医药杂志》 CAS 2015年第9期124-124,131,共2页
外伤性脾破裂临床上较为常见,是腹部外科常见的急症,如不及时处理,可危及生命,以往通常采用全脾脏切除治疗。随着人们对脾脏功能的深入了解和脾脏解剖学的研究进展,发现脾脏在免疫细胞发育成熟过程中发挥重要作用,结合临床需求发明了多... 外伤性脾破裂临床上较为常见,是腹部外科常见的急症,如不及时处理,可危及生命,以往通常采用全脾脏切除治疗。随着人们对脾脏功能的深入了解和脾脏解剖学的研究进展,发现脾脏在免疫细胞发育成熟过程中发挥重要作用,结合临床需求发明了多种保脾手术,如脾脏缝合修补术、部分脾脏切除术、自体脾组织大网膜移植术、脾动脉栓塞术等。 展开更多
关键词 脾破裂 自体脾组织大网膜移植术 小儿
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桃红四物汤治疗增生性瘢痕的作用机制
7
作者 钱则尔 黄志广 +3 位作者 翁志伟 丁滨 金哲 殷莉波 《浙江临床医学》 2024年第8期1112-1115,共4页
目的应用网络药理学筛选桃红四物汤(DSO)中的活性成分,预测其对增生性瘢痕(HS)的作用机制。方法通过TCMSP、NCBI数据库和PharmMapper数据库预测DSO的潜在靶点,用GeneCards、OMIM、PharmGKB等数据库收集HS的相关靶点。将DSO的潜在靶点与H... 目的应用网络药理学筛选桃红四物汤(DSO)中的活性成分,预测其对增生性瘢痕(HS)的作用机制。方法通过TCMSP、NCBI数据库和PharmMapper数据库预测DSO的潜在靶点,用GeneCards、OMIM、PharmGKB等数据库收集HS的相关靶点。将DSO的潜在靶点与HS的靶点交集,获得共同靶点。通过STRING蛋白数据库并采用Cytoscape 3.8.2绘制DSO-HS的蛋白质-蛋白质相互作用图(PPI),筛选核心靶点。将共同靶点上传至DAVID数据库进行GO和KEGG分析。通过免疫印迹实验(Western blot)验证DSO对筛选出的通路的调控作用。结果共筛选出DSO潜在靶点425个,HS相关靶点1285个,共同靶点112个,其中核心靶点为ALB、AKT1、MMP-9。通路分析结果显示DSO参与多条相关通路的调控,主要涉及PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、MAPK信号通路等。免疫印迹试验实验结果验证DSO对AKT通路的调控作用。结论DSO中的多个组分可能通过AKT等多核心靶点,影响多个通路治疗HS。 展开更多
关键词 桃红四物汤 网络药理学 增生性瘢痕 AKT信号通路
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止咳平喘合剂干预哮喘大鼠气道炎症及IL-12、IL-13水平的实验研究 被引量:10
8
作者 王真 周忠辉 +3 位作者 俞亚丽 洪波 殷莉波 王媛 《中华中医药学刊》 CAS 2012年第6期1268-1270,I0008,I0009,共5页
目的:观察止咳平喘合剂对哮喘大鼠气道炎症及血清白介素12(Interleukin-12,IL-12)、白介素13(Interleukin-13,IL-13)水平的影响,探讨其抑制哮喘气道炎症的作用机制。方法:用改良的卵白蛋白多点注射致敏与雾化吸入激发法建立大鼠哮喘模... 目的:观察止咳平喘合剂对哮喘大鼠气道炎症及血清白介素12(Interleukin-12,IL-12)、白介素13(Interleukin-13,IL-13)水平的影响,探讨其抑制哮喘气道炎症的作用机制。方法:用改良的卵白蛋白多点注射致敏与雾化吸入激发法建立大鼠哮喘模型。将40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为空白对照组、哮喘模型组、强的松对照组和中药治疗组(止咳平喘合剂组)。实验第15天起,空白对照组、哮喘模型组分别给予生理盐水10mL.kg-1,强的松对照组给予强的松混悬液10mg.kg-1,中药治疗组给予止咳平喘合剂15g.kg-1,每天1次给药,连续5天。末次雾化激发后24h处死各组大鼠留取标本。镜下观察各组哮喘大鼠肺组织病理形态变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、嗜酸粒细胞(EOS)数量;用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血清中IL-12、IL-13含量。结果:与哮喘模型组相比,中药治疗组大鼠BALF中白细胞总数和EOS数量均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);与哮喘模型组相比,中药治疗组大鼠肺组织气道黏膜及黏膜下层的炎性细胞浸润明显减轻;中药治疗组大鼠血清中细胞因子IL-12浓度明显高于哮喘模型组(P<0.01),而IL-13浓度明显低于哮喘模型组(P<0.01)。结论:止咳平喘合剂可通过提高细胞因子IL-12水平、降低IL-13的水平,来调节细胞因子失衡,从而减轻哮喘大鼠的气道炎症。 展开更多
关键词 止咳平喘合剂 哮喘 IL-12 IL-13
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试论“通因通用”法及其在咳喘病中的运用 被引量:2
9
作者 殷莉波 付淑艳 徐志瑛 《江苏中医药》 CAS 2004年第11期47-48,共2页
“通因通用”法实为因势利导之意 ,并不仅限于下利 ;而“通”的病症也不仅仅是指腹泻、下利、漏下 ,凡人体某些孔窍所表现“通”的征象均可视为“通”的病症。如咳喘病的症象表现除咳嗽外 ,常见咯痰、流涕等 ,此即“通”的病症 ,而咳喘... “通因通用”法实为因势利导之意 ,并不仅限于下利 ;而“通”的病症也不仅仅是指腹泻、下利、漏下 ,凡人体某些孔窍所表现“通”的征象均可视为“通”的病症。如咳喘病的症象表现除咳嗽外 ,常见咯痰、流涕等 ,此即“通”的病症 ,而咳喘病的治疗亦取“通因通用”法之意 ,即治疗的关键在于化痰 ,痰去则肺络通畅 ,不止咳而咳自止 ,而不宜见咳止咳。 展开更多
关键词 通因通用 历史 咳喘 病案
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脉冲二氧化碳激光联合调Q翠绿宝石激光治疗黑色素痣的疗效观察 被引量:1
10
作者 殷莉波 王雅飞 +5 位作者 朱卫菊 毕博文 沈聪聪 车菲 曾海峰 曹毅 《浙江临床医学》 2022年第3期411-412,共2页
目的探讨脉冲二氧化碳激光联合调Q翠绿宝石激光治疗黑色素痣的疗效。方法采用脉冲二氧化碳激光联合调Q翠绿宝石激光治疗黑色素德,首先用脉冲二氧化碳激光祛除所有肉眼可见的黑色素,然后再予翠绿宝石激光相同部位重复治疗1~2次,祛除肉眼... 目的探讨脉冲二氧化碳激光联合调Q翠绿宝石激光治疗黑色素痣的疗效。方法采用脉冲二氧化碳激光联合调Q翠绿宝石激光治疗黑色素德,首先用脉冲二氧化碳激光祛除所有肉眼可见的黑色素,然后再予翠绿宝石激光相同部位重复治疗1~2次,祛除肉眼不可见的黑色素细胞,创面每日清沽消毒,直至痂皮脱落。结果一次治疗治愈率98%,无一例发生严重增生性瘢痕或凹陷性瘢痕、色素沉着无明显增加。结论脉冲二氧化碳激光联合翠绿宝石激光治疗黑色素痣安全有效,简单易行,值得临床推广。 展开更多
关键词 黑色素痣 二氧化碳激光 翠绿宝石激光
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王会仍用膏方治疗呼吸系统疾病经验 被引量:9
11
作者 殷莉波 徐婷贞 《山东中医杂志》 北大核心 2004年第11期689-690,共2页
关键词 呼吸病 膏方 王会仍 名医经验
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宋康治疗慢性咳嗽经验撷萃 被引量:4
12
作者 殷莉波 徐婷贞 《江苏中医药》 CAS 2004年第3期8-9,共2页
关键词 慢性咳嗽 辨证论治 辨病 顾护脾胃 饮食调护 调畅肝气 宋康
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王会仍治疗特发性肺纤维化的用药特色 被引量:5
13
作者 殷莉波 徐婷贞 《浙江中医杂志》 北大核心 2004年第2期64-65,共2页
关键词 特发性肺纤维化 王会仍 中医药疗法 病因病机 清肺 甘寒 滋阴 补气
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消喘膏穴位敷贴防治支气管哮喘52例 被引量:12
14
作者 殷莉波 《山东中医杂志》 2009年第3期174-174,共1页
关键词 消喘膏 穴位敷贴 支气管哮喘 疗效观察
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试论从气治疗慢性咳嗽 被引量:1
15
作者 殷莉波 《新中医》 CAS 北大核心 2009年第5期114-115,共2页
咳嗽是呼吸门诊常见的主症之一,也是患者就诊最多的主诉。慢性咳嗽是指以咳嗽为唯一或主要症状、时间超过8周、胸部X线检查无明显异常的一类咳嗽。现代医学认为慢性咳嗽由多种原因引起,最常见的为慢性上呼吸道咳嗽综合征、咳嗽变异型... 咳嗽是呼吸门诊常见的主症之一,也是患者就诊最多的主诉。慢性咳嗽是指以咳嗽为唯一或主要症状、时间超过8周、胸部X线检查无明显异常的一类咳嗽。现代医学认为慢性咳嗽由多种原因引起,最常见的为慢性上呼吸道咳嗽综合征、咳嗽变异型哮喘、胃一食管反流性咳嗽、嗜酸粒细胞性支气管炎等。临床上慢性咳嗽治疗仍比较棘手,笔者从气论治,取得一定疗效,现不揣浅陋,略述如下。 展开更多
关键词 咳嗽 中医治法 从气论治
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自拟补肾益肺汤防治支气管哮喘42例 被引量:6
16
作者 殷莉波 《中医药临床杂志》 2004年第1期92-92,共1页
关键词 补肾益肺汤 支气管哮喘 中医药疗法 缓解期 肺功能
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痰热清注射液治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期32例 被引量:4
17
作者 殷莉波 《江西中医药》 2009年第10期25-26,共2页
目的:观察痰热清注射液治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期的临床疗效。方法:将COPD急性加重期患者62例随机分为治疗组32例、对照组30例,均以西药常规处理,治疗组加用痰热清注射液静滴;治疗10天评价疗效。结果:治疗组有效率达90.6%,... 目的:观察痰热清注射液治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期的临床疗效。方法:将COPD急性加重期患者62例随机分为治疗组32例、对照组30例,均以西药常规处理,治疗组加用痰热清注射液静滴;治疗10天评价疗效。结果:治疗组有效率达90.6%,明显高于对照组。治疗组治疗前后C反应蛋白差异有统计意义(P<0.01、0.05),而对照组C反应蛋白差异无统计意义;动脉血气在提高血氧分压上两组治疗前后差异均有显著性(P<0.01、0.05),而在降低二氧化碳分压上,治疗组差异有统计意义(P<0.05),对照组无差异(结论:痰热清注射液治疗COPD急性加重期疗效满意,可以较快改善动脉血气、C反应蛋白情况,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 痰热清注射液 慢性阻塞性肺疾病 急性加重期 中医药疗法
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三子平喘汤治疗小儿哮喘52例疗效观察 被引量:2
18
作者 殷莉波 《甘肃中医》 2003年第7期13-14,共2页
关键词 哮喘/中药疗法 三子平喘汤 儿童
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银翘止咳散治疗小儿外感咳嗽56例 被引量:1
19
作者 殷莉波 《实用中医药杂志》 2004年第3期134-135,共2页
关键词 银翘止咳散 小儿 外感咳嗽 中医药疗法
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桑杏止咳汤治疗咳嗽变异性哮喘疗效观察
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作者 殷莉波 《中国中医急症》 2010年第1期8-8,12,共2页
目的观察自拟桑杏止咳汤治疗咳嗽变异性哮喘的临床疗效。方法48例咳嗽变异性哮喘患者给服自拟桑杏止咳汤,并随证加减。结果本组临床总有效率83.33%,治疗后患者肺功能改善明显。结论自拟桑杏止咳汤治疗咳嗽变异性哮喘疗效满意。
关键词 咳嗽变异性哮喘 桑杏止咳汤
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