目的探索芹菜素对H2O2致人肝细胞L02损伤模型的保护作用。方法以H2O2诱导L02细胞建立氧化损伤模型,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA法检测细胞活性氧的生成,试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)活...目的探索芹菜素对H2O2致人肝细胞L02损伤模型的保护作用。方法以H2O2诱导L02细胞建立氧化损伤模型,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA法检测细胞活性氧的生成,试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,试剂盒检测caspase-3的活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果芹菜素浓度为≥20μmol/L时对L02细胞的增殖有显著抑制作用(P值均<0.01);与空白对照组L02细胞活力相比,500μmol/L及以上的H2O2浓度均可使细胞活力极显著降低(P值均<0.001),500μmol/L为H2O2的建模浓度;模型组细胞活力与空白对照组相比差异显著(P<0.01),与模型组相比,芹菜素5、10μmol/L组细胞存活率显著提高(P值均<0.01);空白对照组细胞状态较好,模型组细胞间收缩变圆,细胞破损变形严重,芹菜素5μmol/L组与模型组相比,明显得到改善,变圆破损细胞较少;空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间相对荧光强度比较差异有统计学意义(1.00±0.26 vs 32.94±1.29 vs 13.49±1.23,F=1.10,P<0.001),模型组相对荧光强度较空白对照组明显增强(P<0.001),芹菜素5μmol/L组与模型组比较,芹菜素可明显清除H2O2诱发的ROS(P<0.001);模型组中LDH和MDA水平均明显升高,SOD水平明显降低,与正常对照组相比差异均有统计学意义(F值分别为3.21、2.03、3.32,P值均<0.05),芹菜素(5μmol/L)处理后,与模型组相比,LDH和MDA水平均明显降低,SOD水平明显升高(P值均<0.05);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间细胞凋亡率比较差异有统计学意义(7.54%±0.52%vs 39.77%±3.44%vs 14.40%±0.79%,F=9.44,P<0.01);模型组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01);给与芹菜素处理后,相比于模型组凋亡率明显降低(P<0.01);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间caspase-3活性比较差异有统计学意义[(4.38±0.59)U/mg vs(16.44±1.13)U/mg vs(10.60±1.04)U/mg,F=1.17,P<0.05],模型组细胞caspase-3活性与对照组相比明显增强(P<0.05),芹菜素处理后,相比于模型组caspase-3活性明显降低(P<0.05)。结论芹菜素可能通过消除ROS的生成、降低caspase-3活性对H2O2诱导的L02细胞损伤产生保护作用。展开更多
文摘目的探索芹菜素对H2O2致人肝细胞L02损伤模型的保护作用。方法以H2O2诱导L02细胞建立氧化损伤模型,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA法检测细胞活性氧的生成,试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,试剂盒检测caspase-3的活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果芹菜素浓度为≥20μmol/L时对L02细胞的增殖有显著抑制作用(P值均<0.01);与空白对照组L02细胞活力相比,500μmol/L及以上的H2O2浓度均可使细胞活力极显著降低(P值均<0.001),500μmol/L为H2O2的建模浓度;模型组细胞活力与空白对照组相比差异显著(P<0.01),与模型组相比,芹菜素5、10μmol/L组细胞存活率显著提高(P值均<0.01);空白对照组细胞状态较好,模型组细胞间收缩变圆,细胞破损变形严重,芹菜素5μmol/L组与模型组相比,明显得到改善,变圆破损细胞较少;空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间相对荧光强度比较差异有统计学意义(1.00±0.26 vs 32.94±1.29 vs 13.49±1.23,F=1.10,P<0.001),模型组相对荧光强度较空白对照组明显增强(P<0.001),芹菜素5μmol/L组与模型组比较,芹菜素可明显清除H2O2诱发的ROS(P<0.001);模型组中LDH和MDA水平均明显升高,SOD水平明显降低,与正常对照组相比差异均有统计学意义(F值分别为3.21、2.03、3.32,P值均<0.05),芹菜素(5μmol/L)处理后,与模型组相比,LDH和MDA水平均明显降低,SOD水平明显升高(P值均<0.05);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间细胞凋亡率比较差异有统计学意义(7.54%±0.52%vs 39.77%±3.44%vs 14.40%±0.79%,F=9.44,P<0.01);模型组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01);给与芹菜素处理后,相比于模型组凋亡率明显降低(P<0.01);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间caspase-3活性比较差异有统计学意义[(4.38±0.59)U/mg vs(16.44±1.13)U/mg vs(10.60±1.04)U/mg,F=1.17,P<0.05],模型组细胞caspase-3活性与对照组相比明显增强(P<0.05),芹菜素处理后,相比于模型组caspase-3活性明显降低(P<0.05)。结论芹菜素可能通过消除ROS的生成、降低caspase-3活性对H2O2诱导的L02细胞损伤产生保护作用。
