期刊文献+
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
人CD80基因的cDNA克隆及其在肿瘤细胞中的表达 被引量:2
1
作者 熊宇芳 李清芬 +2 位作者 章洁 屈伸 邓耀祖 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第3期169-173,共5页
采用巢式PCR(nested PCR)的方法从Raji细胞中扩增出人CD80 cDNA,并将这一cDNA克隆入载体pUC19中。经PCR扩增和限制性酶切分析,进行初步鉴定后,再将人CD80 cDNA克隆到pcD-NA表达载体上,构建成为pCD-CD80重组质粒。应用脂质体介导的基因... 采用巢式PCR(nested PCR)的方法从Raji细胞中扩增出人CD80 cDNA,并将这一cDNA克隆入载体pUC19中。经PCR扩增和限制性酶切分析,进行初步鉴定后,再将人CD80 cDNA克隆到pcD-NA表达载体上,构建成为pCD-CD80重组质粒。应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入小鼠黑色素瘤B16细胞后,用SABC法进行瞬时表达的检测。结果表明,转染后48h就具有明显人CD80基因的表达产物。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 CD80基因 表达 分子克隆 基因治疗
在线阅读 下载PDF
人CD80基因的重组真核表达载体的构建及其在体内外的表达
2
作者 熊宇芳 屈伸 +2 位作者 邓耀祖 章洁 刘然义 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 1998年第6期340-342,共3页
构建了人CD80cDNA重组真核表达载体pCD-CD80,并将这一重组表达载体用脂质体介导的基因转移技术转染至体外培养的小鼠黑素瘤B16细胞系,并经直接注射将裸露DNA导入小鼠肌肉组织。最后,利用单克隆抗体的亲合细胞... 构建了人CD80cDNA重组真核表达载体pCD-CD80,并将这一重组表达载体用脂质体介导的基因转移技术转染至体外培养的小鼠黑素瘤B16细胞系,并经直接注射将裸露DNA导入小鼠肌肉组织。最后,利用单克隆抗体的亲合细胞化学技术中的SABC法进行检测,结果表明:人CD80基因在体内外均得以表达。可望进一步开展CD80基因的抗瘤效应研究。 展开更多
关键词 基因表达 小鼠 CD80基因 黑素瘤
在线阅读 下载PDF
内质网应激介导过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡 被引量:10
3
作者 孔曼 陈娟 +4 位作者 周洁 朱文德 万丽敏 熊宇芳 李子希 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期253-257,共5页
目的探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡是否与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的调控机制有关。方法给予乳鼠心肌细胞高低两种浓度(500、100μmol/L)和不同时间(0、4、8、12、24h)过氧化氢(H2O2)刺激。采用流式细胞仪检测各... 目的探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡是否与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的调控机制有关。方法给予乳鼠心肌细胞高低两种浓度(500、100μmol/L)和不同时间(0、4、8、12、24h)过氧化氢(H2O2)刺激。采用流式细胞仪检测各组心肌细胞的凋亡率;苏木精-伊红染色法(HE)观察心肌细胞凋亡的典型形态;通过Western blot检测ERS标志蛋白p-PERK和CHOP的表达变化。进一步采用ERS抑制剂化学伴侣PBA(4-phenylbutyric acid)抑制心肌细胞ERS,Western blot检测p-JNK、p-PERK和CHOP蛋白的表达变化;采用流式细胞仪检测Caspase-12和Caspase-3的活性。结果①低浓度H2O2可显著诱导心肌细胞凋亡,高浓度H2O2则导致心肌细胞发生坏死;100μmol/L H2O2刺激心肌细胞8h时其凋亡率最高。②心肌细胞发生凋亡时ERS标志蛋白p-PERK和CHOP表达显著增高。③ERS抑制剂PBA预处理心肌细胞,可有效抑制H2O2诱导的p-PERK、CHOP表达及Caspase-3、Caspase-12活性的上调,与单纯H2O2处理组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论低浓度H2O2可通过促发ERS整合调控机制介导心肌细胞凋亡。这一结果将从ERS整合调控细胞应激的角度为心血管疾病的防治提供新思路。 展开更多
关键词 内质网应激 氧化应激 细胞凋亡 心肌细胞
在线阅读 下载PDF
转染人CD80基因的黑色素瘤细胞生长特性及免疫原性探讨 被引量:3
4
作者 刘然义 熊宇芳 +2 位作者 屈伸 尤颖健 邓耀祖 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第5期562-565,共4页
目的:初步探讨弱免疫原性肿瘤细胞导入CD80 基因后免疫源性是否增强,以及肿瘤免疫原性与细胞表面分子的关系。方法:通过脂质体介导将CD80 基因导入小鼠黑色素瘤B16 细胞后,利用SABC 法检测CD80 的表达;MTT ... 目的:初步探讨弱免疫原性肿瘤细胞导入CD80 基因后免疫源性是否增强,以及肿瘤免疫原性与细胞表面分子的关系。方法:通过脂质体介导将CD80 基因导入小鼠黑色素瘤B16 细胞后,利用SABC 法检测CD80 的表达;MTT 法测定肿瘤细胞体外增殖能力;将肿瘤细胞接种至同源小鼠皮下后观察成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节生长速度;在同源淋巴细胞肿瘤细胞混合培养( MLTCs) 后,通过测定淋巴细胞增殖指数( MTT 法) 和CTL 杀伤活性(LDH 释放改良法) 检测肿瘤细胞的免疫原性。结果:CD80 基因转染的B16 细胞中存在CD80 的稳定表达;与野生型B16 细胞和模拟转染的B16 细胞比较,CD80 转染的B16 细胞体外生长速度无明显变化( P > 0-05) ,体内生长速度明显减慢( P< 0-05) ,体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs 的能力明显增强( P< 0-05) 。结论:弱免疫原性肿瘤细胞导入CD80 基因可增强免疫原性,其作用强弱与肿瘤细胞表达MHC 及ICAM1 等分子的状况有关。 展开更多
关键词 黑色素瘤 免疫原性 CD80基因 B7-1分子
在线阅读 下载PDF
RhoC GTP酶的表达与宫颈癌侵袭和转移的关系
5
作者 贺晓琪 熊宇芳 +2 位作者 钱颖 蔡惠兰 王泽华 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期452-456,共5页
目的研究RhoC GTP酶的表达及其与宫颈癌侵袭和转移的关系。方法半定量RT-PCR法和免疫组化方法分别检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样变(CIN)组织和宫颈癌组织中RhoC基因mRNA和蛋白的表达;半定量RT-PCR法和Western blot分别检测人宫颈癌... 目的研究RhoC GTP酶的表达及其与宫颈癌侵袭和转移的关系。方法半定量RT-PCR法和免疫组化方法分别检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样变(CIN)组织和宫颈癌组织中RhoC基因mRNA和蛋白的表达;半定量RT-PCR法和Western blot分别检测人宫颈癌细胞株SiHa、HeLa和C33a中RhoC mRNA和蛋白的表达,基质胶粘附实验、Transwell体外侵袭实验和迁移实验分别比较3株宫颈癌细胞的粘附率、侵袭能力和运动能力。结果 RhoC的mRNA和蛋白表达在正常宫颈组织、CIN组织和宫颈癌组织中逐渐增高,在宫颈癌组织中的表达明显高于CIN组织;RhoC在C33a细胞中的表达明显低于SiHa和HeLa细胞,C33a细胞对细胞外基质的粘附率、体外侵袭能力和运动能力明显低于其它2种细胞。结论宫颈癌组织中,RhoC GTP酶的表达与宫颈癌的进展和淋巴结转移有关;在宫颈癌细胞中,RhoCGTP酶的表达与细胞的粘附能力、侵袭能力和运动能力呈正相关。 展开更多
关键词 RhoCGTP酶 宫颈癌 粘附 侵袭 迁移
在线阅读 下载PDF
NS398对白血病细胞K562凋亡的时间和剂量效应机制(英文)
6
作者 张连生 熊宇芳 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期3041-3047,3052,共8页
目的探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制。方法采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(cometassay)测定K562... 目的探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制。方法采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(cometassay)测定K562细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达。结果 NS398抑制K562细胞增殖存在时间和剂量效应关系,各浓度间差异有显著性(P<0.05)。NS398激活caspase-3和caspase-9,促进P53蛋白的积聚、Bax蛋白表达的上调和Bcl-xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使K562细胞凋亡。结论 NS398可抑制K562细胞增殖,其诱导细胞凋亡的途径可能经过P53介导Bax的Caspase-3、Caspase-9的激活,揭示COX-2抑制剂可能存在着一个影响细胞翻译的新机制。 展开更多
关键词 NS398 K562细胞 细胞凋亡 环氧合酶-2
在线阅读 下载PDF
Experimental Study of Vascular Endothelial Growth Factor Gene Therapy for Avascular Necrosis of the Femoral Head 被引量:6
7
作者 杨操 杨述华 +3 位作者 杜靖远 李进 许伟华 熊宇芳 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2003年第3期297-299,316,共4页
To explore a new method for the therapy of the avascular necrosis of the femoral head, the recombinant plasmid pCD-hVEGF 165 was mixed with collagen and was implanted in the necrotic femoral head The expression... To explore a new method for the therapy of the avascular necrosis of the femoral head, the recombinant plasmid pCD-hVEGF 165 was mixed with collagen and was implanted in the necrotic femoral head The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) was detected by RNA dot hybridization and immunohistochemical method The repair of the femoral head was observed by histological method The results showed that the expression of VEGF was detectable in the femoral head treated with VEGF gene Angiogenesis in these femoral heads was more abundant than the control Bone repairing was augmented in the femoral head treated with VEGF gene The results suggest that angiogenesis in bone tissue could be augmented by gene transfection of VEGF and bone repairing would be accelerated accordingly 展开更多
关键词 vascular endothelial growth factor gene therapy avascular necrosis of the femoral head
在线阅读 下载PDF
B7-CD28/CTLA4共刺激旁路的组成、功能及其在肿瘤基因治疗中的应用 被引量:2
8
作者 熊宇芳 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 1998年第3期130-133,共4页
B7-CD28/CTLA4共刺激旁路组成复杂,功能重要,对此共刺激旁路的探索将有助于更好地了解机体的免疫调控及免疫监视;B7分子的肿瘤基因疗法,尤其是B7分子联合其它免疫刺激分子的基因疗法是目前肿瘤基因治疗的热点和方向,并已在临床应用中获... B7-CD28/CTLA4共刺激旁路组成复杂,功能重要,对此共刺激旁路的探索将有助于更好地了解机体的免疫调控及免疫监视;B7分子的肿瘤基因疗法,尤其是B7分子联合其它免疫刺激分子的基因疗法是目前肿瘤基因治疗的热点和方向,并已在临床应用中获得成功,本文就此几方面作一介绍。 展开更多
关键词 B7分子 基因治疗 肿瘤
原文传递
RIZ1基因表达缺陷对结肠癌细胞增殖凋亡的影响 被引量:2
9
作者 肖勇 王雪松 +3 位作者 王国斌 熊宇芳 卢晓明 舒晓刚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1035-1037,共3页
目的 观察抑癌基因Rb结合锌指结构基因(RIZ1)表达缺陷对结肠癌细胞增殖和凋亡能力的影响.方法 以表达RIZ1的LoVo细胞和不表达RIZ1的SW480细胞作为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测2株结肠癌细胞的RIZ1基因启动子的甲基化状... 目的 观察抑癌基因Rb结合锌指结构基因(RIZ1)表达缺陷对结肠癌细胞增殖和凋亡能力的影响.方法 以表达RIZ1的LoVo细胞和不表达RIZ1的SW480细胞作为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测2株结肠癌细胞的RIZ1基因启动子的甲基化状况;以3×105/瓶为细胞观察单位,5 μmol/L的5-杂氮2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对细胞进行去甲基化处理48 h,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测RIZ1的mRNA和蛋白表达,观察处理前后的差异;细胞增殖实验和流式细胞仪分别检测细胞的增殖和凋亡.结果 在SW480细胞中可以扩增出RIZ1基因启动子的甲基化条带,经去甲基化处理后,则能检测出该基因的mRNA和蛋白的表达条带,其增殖速度明显减慢,凋亡率从(4.4±1.7)%增高到(23.8±2.6)%,差异有统计学意义(P<0.05),5 μmol/L的5-aza-CdR可显著上调SW480中RIZ1的表达;而LoVo细胞中未检测到基因启动子的甲基化,处理前后其基因表达、增殖和凋亡差异均无统计学意义(P>O.05).结论 抑癌基因RIZ1启动子异常甲基化在调节其表达中发挥重要作用,对RIZ1进行去甲基化处理使其重新表达能明显减缓结肠癌SW480细胞的生长,促进其凋亡. 展开更多
关键词 结肠癌 RIZ1基因 DNA甲基化 增殖
原文传递
Vascular endothelial growth factor gene transfection to enhance the repair of avascular necrosis of the femoral head of rabbit 被引量:40
10
作者 杨操 杨述华 +3 位作者 杜靖远 李进 许伟华 熊宇芳 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2003年第10期1544-1548,共5页
Objective To explore a new method for the therapy of avascular necrosis of the femoral head. Methods The recombinant plasmid pCD-hVEGF 165 was mixed with collagen and was implanted in the necrotic femoral head. The... Objective To explore a new method for the therapy of avascular necrosis of the femoral head. Methods The recombinant plasmid pCD-hVEGF 165 was mixed with collagen and was implanted in the necrotic femoral head. The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) was examined by RNA dot hybridization and immunohistochemical techniques. Repair of the femoral head was observed by histological and histomorphometric analysis.Results The expression of VEGF was detected in the femoral head transfected with the VEGF gene. The femoral head transfected with the VEGF gene showed a significant increase in angiogenesis 2 and 4 weeks after gene transfection and a significant increase in bone formation 6 and 8 weeks after gene transfection on histomorphometric analysis ( P <0.01).Conclusions Transfection of the VEGF gene enhances bone tissue angiogenesis. Repair of osteonecrosis could be accelerated accordingly,thus providing a potential method for therapy of osteonecrosis. 展开更多
关键词 vascular endothelial growth factor gene transfection avascular necrosis femoral head
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部