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牙鲆秦皇岛弧菌HQ010712-1外膜蛋白及其抗原性分析 被引量：6
1
作者 程顺峰 邓灯 +1 位作者 张毅 姜有声 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1272-1277,共6页
采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)和苯甲基磺酰氟(PMSF)2种方法提取秦皇岛弧菌HQ010712-1(Vibrio qinhuangdaora sp.nov.)外膜蛋白,结果显示Sarkosyl法提取效果较好,且所提取的主要外膜蛋白分子量为102kD、45kD、39kD、36kD、30kD、28kD... 采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)和苯甲基磺酰氟(PMSF)2种方法提取秦皇岛弧菌HQ010712-1(Vibrio qinhuangdaora sp.nov.)外膜蛋白,结果显示Sarkosyl法提取效果较好,且所提取的主要外膜蛋白分子量为102kD、45kD、39kD、36kD、30kD、28kD、24kD、22kD;为比较该菌株与弧菌属其他细菌外膜蛋白组分及抗原性异同,以鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻胶弧菌(Vibrio alginolyticus)为对照,电泳图谱显示4种弧菌外膜蛋白的分子量主要集中在22～48kD之间;利用抗秦皇岛弧菌HQ010712-1血清的免疫印迹表明菌株HQ010712-1外膜蛋白中分子量为45kD、36kD的蛋白条带呈现阳性反应,其他3种弧菌外膜蛋白中均有与该抗血清反应的条带,且分子量为36kD的反应带为菌株HQ010712-1、副溶血弧菌、溶藻胶弧菌共有。本研究旨在为进一步筛选和研究致病性弧菌的共同保护性抗原提供参考。 展开更多
关键词 秦皇岛弧菌 外膜蛋白 抗原性
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淋巴囊肿病毒结构蛋白及其抗原性分析 被引量：4
2
作者 程顺峰 战文斌 绳秀珍 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期415-420,共6页
病鱼为威海水产养殖场感染淋巴囊肿病的牙鲆（Paralichthys olivaceus）,收集病鱼的囊肿组织,匀浆破碎,采用差速离心和蔗糖密度梯度离心方法,分离纯化淋巴囊肿病毒粒子.负染后,电镜观察证实获得的病毒纯度高,杂质极少,病毒粒子呈近似于... 病鱼为威海水产养殖场感染淋巴囊肿病的牙鲆（Paralichthys olivaceus）,收集病鱼的囊肿组织,匀浆破碎,采用差速离心和蔗糖密度梯度离心方法,分离纯化淋巴囊肿病毒粒子.负染后,电镜观察证实获得的病毒纯度高,杂质极少,病毒粒子呈近似于圆形的多角形,结构完整.纯化的淋巴囊肿病毒粒子经SDS-PAGE,硝酸银染色后,电泳图谱清晰显示病毒结构蛋白带共有22条,且分子量主要集中在123～26 kD.应用Western blotting法分析病毒结构蛋白的抗原性,结果显示,分子量分别为123.55 kD、65.292 kD和54.438 kD的3条蛋白带发生了免疫反应,其中分子量为65.292 kD的蛋白带反应强度明显高于其他2条蛋白带.本研究旨为确定淋巴囊肿病毒主要衣壳蛋白提供基础依据.[中国水产科学,2006,13（3）：415-420] 展开更多
关键词 淋巴囊肿病毒 结构蛋白 抗原性
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牙鲆淋巴囊肿病毒一抗原蛋白的确认及定位 被引量：1
3
作者 程顺峰 战文斌 +2 位作者 邢婧 周丽 绳秀珍 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期544-548,共5页
以牙鲆淋巴囊肿病毒(LCDV)为抗原免疫Balb/c小鼠,而后将小鼠脾细胞与P3U1骨髓瘤细胞融合,以囊肿组织冰冻切片的免疫荧光染色筛选杂交瘤细胞,阳性结果显示特异性块状荧光信号集中在囊肿细胞的细胞质边缘部分,且多个荧光信号相连呈现链圈... 以牙鲆淋巴囊肿病毒(LCDV)为抗原免疫Balb/c小鼠,而后将小鼠脾细胞与P3U1骨髓瘤细胞融合,以囊肿组织冰冻切片的免疫荧光染色筛选杂交瘤细胞,阳性结果显示特异性块状荧光信号集中在囊肿细胞的细胞质边缘部分,且多个荧光信号相连呈现链圈状,有限稀释法克隆阳性杂交瘤细胞,三次克隆后获得4株稳定产生抗LCDV抗体的单克隆杂交瘤细胞株(1A8、1D72、B6、2D11)。应用Western blotting法分析单抗识别蛋白的分子量,结果显示,单抗1D7和2B6均能特异性结合一条分子量116kD病毒多肽;应用免疫电镜技术定位单抗识别的抗原决定簇,结果发现胶体金颗粒集中吸附在病毒粒子衣壳周围,且背景清洁,无散在的金颗粒或其他污染物。实验结果说明分子量约为116kD的蛋白多肽为LCDV病毒衣壳蛋白,且具有线性抗原决定簇。 展开更多
关键词 牙鲆 淋巴囊肿病毒 单克隆抗体 结构蛋白 定位
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管道弯头漏磁无损检测仪的研究 被引量：3
4
作者 程顺峰 武新军 +2 位作者 康宜华 李春树 李涛 《无损检测》 2004年第2期59-61,共3页
对弯头漏磁无损检测仪进行了研究,运用漏磁检测原理,采用固定的磁化器对弯头进行整体磁化,检测探头沿弯头外表面扫描运动并结合空间位置测量编码器实现漏磁信号的高精度定位和空间相关处理,解决了弯头表面漏磁场信号复杂、缺陷检测信号... 对弯头漏磁无损检测仪进行了研究,运用漏磁检测原理,采用固定的磁化器对弯头进行整体磁化,检测探头沿弯头外表面扫描运动并结合空间位置测量编码器实现漏磁信号的高精度定位和空间相关处理,解决了弯头表面漏磁场信号复杂、缺陷检测信号信噪比低的难题,为铁磁性管道弯头的无损探伤提供了一种有效的方法。 展开更多
关键词 漏磁检测 管道弯头 空间采样 无损检测仪 磁化器
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工业管道漏磁无损检测传感器的研制 被引量：4
5
作者 程顺峰 武新军 +2 位作者 康宜华 李涛 王江源 《无损检测》 2002年第12期512-514,共3页
研制了一种高灵敏度的工业管道漏磁无损检测仪 ,其传感器由多个独立的检测模块拼装而成 ,每个检测模块的磁化器与检测部件分开。检测部件由相互独立的检测单元铰接而成 ,能适应工业管道的工况特点 ,具有极大的灵活性和可扩展性。
关键词 工业管道 无损检测 石油化工
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牙鲆淋巴囊肿病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：6
6
作者 程顺峰 《水产科学》 CAS 北大核心 2009年第7期374-377,共4页
以牙鲆淋巴囊肿病毒(Lymphocystis disease virus,LCDV)特异性单克隆抗体为捕获抗体,纯化的兔抗LCDV血清为检测抗体,建立了LCDV病毒双抗夹心间接ELISA检测方法。该方法最佳反应条件为:单克隆抗体包被质量浓度为2μg/ml,兔抗血清工作浓度... 以牙鲆淋巴囊肿病毒(Lymphocystis disease virus,LCDV)特异性单克隆抗体为捕获抗体,纯化的兔抗LCDV血清为检测抗体,建立了LCDV病毒双抗夹心间接ELISA检测方法。该方法最佳反应条件为:单克隆抗体包被质量浓度为2μg/ml,兔抗血清工作浓度为1∶1200稀释,以3%牛血清白蛋白作为封闭液。应用本方法对体表具有明显发病症状的牙鲆、与发病鱼同池但体表无症状的牙鲆及健康牙鲆的肝、脾、肾、胃、肠、心脏、鳃等7种组织进行检测,在前两种鱼的胃、肠、鳃等组织检测到病毒,而健康牙鲆各组织器官反应结果均为阴性,试验结果表明,所建立的ELISA检测方法具有特异性强、可靠性高的特点,可用于养殖牙鲆LCDV的检测。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病毒 ELISA 建立 双抗体夹心
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钙离子的体内代谢及其药理作用 被引量：8
7
作者 程顺峰 《医药导报》 CAS 2000年第1期63-63,共1页
关键词 钙离子 体内代谢 药理作用 合理应用
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鱼肠道弧菌疫苗制备及免疫保护效果 被引量：2
8
作者 程顺峰 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第17期306-310,共5页
通过比较不同灭活剂及灭活条件对鱼肠道弧菌(Vibrio ichthyoenteri)的灭活效果,确定以0.4%(v/v)福尔马林溶液在25℃下处理30h作为疫苗的最佳灭活条件,用灭活的鱼肠道弧菌疫苗免疫大菱鲆并测定了该疫苗针对鱼肠道弧菌、溶藻弧菌(Vibrio a... 通过比较不同灭活剂及灭活条件对鱼肠道弧菌(Vibrio ichthyoenteri)的灭活效果,确定以0.4%(v/v)福尔马林溶液在25℃下处理30h作为疫苗的最佳灭活条件,用灭活的鱼肠道弧菌疫苗免疫大菱鲆并测定了该疫苗针对鱼肠道弧菌、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、副溶血弧菌(Vibri parahaemolyticus)、鳗弧菌(Vibrio anguillarium)等的免疫保护力,结果表明,采用注射免疫方式接种后,针对鱼肠道弧菌的免疫保护率达75%;溶藻弧菌免疫保护率为67.6%;鳗弧菌免疫保护率为50%;副溶血弧菌免疫保护率为57.2%;采用浸浴免疫方式接种后,疫苗针对鱼肠道弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌的免疫保护力分别为25%、22.3%、11.1%、12.5%。 展开更多
关键词 鱼肠道弧菌 疫苗 免疫保护力
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溶藻弧菌疫苗对牙鲆免疫效果的研究 被引量：4
9
作者 程顺峰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2009年第2期124-127,共4页
利用福尔马林灭活法制备了溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）疫苗，腹腔注射接种牙鲆（Paralichthys olivaceus），在以牙鲆血清为抗原制备兔抗鱼血清多克隆抗体的基础上，采用ELISA方法检测了接种疫苗后鱼血清中特异性抗体的变化；此... 利用福尔马林灭活法制备了溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）疫苗，腹腔注射接种牙鲆（Paralichthys olivaceus），在以牙鲆血清为抗原制备兔抗鱼血清多克隆抗体的基础上，采用ELISA方法检测了接种疫苗后鱼血清中特异性抗体的变化；此外通过攻毒实验测定了疫苗对牙鲆的保护率。ELISA检测结果表明在接种疫苗后第7d抗体效价为1：64，在免疫后第7～8周达到最高抗体效价1：2048；攻毒实验结果显示受免鱼对溶藻弧菌的免疫保护率为73．3％，且溶藻弧菌疫苗对鳗弧菌（Vibrio anguillarium）、副溶血弧菌（Vibrio prarhaemolyticus）也具有一定的免疫保护性，其免疫保护率分别为56．25％、64．71％。 展开更多
关键词 溶藻弧菌疫苗 牙鲆 免疫保护率
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甘遂炮制的历史沿革及现代研究 被引量：3
10
作者 程顺峰 杨德斋 王建民 《内蒙古中医药》 1995年第S1期88-91,共4页
甘遂炮制的历史沿革及现代研究程顺峰中国铁道建筑总公司总医院（１０００４３）杨德斋伊盟医院（０１７０００）王建民中国科学院动物研究所（１０００８０）中药甘遂为大戟科植物甘遂ＥｕｐｈｏｒｂｉａＫａｎｓｕｉＪ·Ｎ·... 甘遂炮制的历史沿革及现代研究程顺峰中国铁道建筑总公司总医院（１０００４３）杨德斋伊盟医院（０１７０００）王建民中国科学院动物研究所（１０００８０）中药甘遂为大戟科植物甘遂ＥｕｐｈｏｒｂｉａＫａｎｓｕｉＪ·Ｎ·ＬｉｏｎｅｓＴ·Ｐ·Ｗａｎｇ的干燥块根，具... 展开更多
关键词 中药炮制 炮制历史沿革 人民卫生出版社 甘遂 炮制方法 科学技术出版社 炮制品 《本草纲目》 临床应用 炮制工艺
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鱼类淋巴囊肿病毒免疫诊断技术的研究 被引量：2
11
作者 程顺峰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2009年第3期225-228,共4页
在获得鱼类淋巴囊肿病毒(lymphocystis disease virus,LCDV)单克隆抗体的基础上,建立了淋巴囊肿病毒的免疫电镜(IEM)和斑点免疫印迹(Dot-blot)诊断方法。应用免疫电镜方法检测样品,观察结果显示:胶体金颗粒集中结合在淋巴囊肿病毒粒子... 在获得鱼类淋巴囊肿病毒(lymphocystis disease virus,LCDV)单克隆抗体的基础上,建立了淋巴囊肿病毒的免疫电镜(IEM)和斑点免疫印迹(Dot-blot)诊断方法。应用免疫电镜方法检测样品,观察结果显示:胶体金颗粒集中结合在淋巴囊肿病毒粒子囊膜周围,在病毒外区域没有胶体金颗粒散布,整个视野背景清洁,无散在的金颗粒和其他污染物;斑点免疫印迹诊断结果显示:在使用EDTA抑制内源酶后,所检测样品发色后呈明显褐色,呈现明显的LCDV阳性反应,而设立的两组阴性对照结果均不发色;诊断结果说明所建立的淋巴囊肿病毒单克隆抗体诊断技术灵敏、稳定、特异、可靠。 展开更多
关键词 单克隆抗体 淋巴囊肿病毒 诊断技术
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牙鲆淋巴囊肿病毒纯化及不同来源病毒免疫特性比较
12
作者 程顺峰 绳秀珍 战文斌 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期49-54,共6页
比较了3种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下:剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1800×g差速离心,30%(W/W)蔗糖垫底超速离心(78500×g)浓缩病毒,最后蔗糖密度... 比较了3种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下:剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1800×g差速离心,30%(W/W)蔗糖垫底超速离心(78500×g)浓缩病毒,最后蔗糖密度梯度超速离心(78500×g)纯化病毒。电镜观察发现,出现在47%～52%蔗糖密度区域的病毒带含有多量、纯净和结构一致的病毒粒子。此外,利用制备的兔抗血清对不同地区的病毒进行了免疫特性分析,Westernblotting检测显示来自威海、青岛及秦皇岛3个地区的淋巴囊肿病毒反应结果是一致的,均有3条蛋白带发生反应,其分子量分别为125、66和55kDa。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病毒 超速离心 分离纯化 免疫特性比较
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复生烧伤霜剂用于烧伤创面治疗的临床疗效
13
作者 程顺峰 宁淑华 陈勇坤 《中国临床药学杂志》 CAS 2002年第6期365-366,共2页
目的 :观察复生烧伤霜剂对于Ⅱ度烧伤创面的愈合及抗感染作用。方法 :治疗组复生烧伤霜剂采用半暴露疗法及包扎疗法用于烧伤创面。对照组美宝湿润烧伤膏采用同样方法用于烧伤创面。共治疗 145例烧伤患者 ,2 5 8个烧伤创面 ,包括浅Ⅱ度... 目的 :观察复生烧伤霜剂对于Ⅱ度烧伤创面的愈合及抗感染作用。方法 :治疗组复生烧伤霜剂采用半暴露疗法及包扎疗法用于烧伤创面。对照组美宝湿润烧伤膏采用同样方法用于烧伤创面。共治疗 145例烧伤患者 ,2 5 8个烧伤创面 ,包括浅Ⅱ度烧伤和深Ⅱ度烧伤。观察浅Ⅱ度烧伤创面用药后 8d ,深Ⅱ度烧伤创面用药后 18d创面愈合率比较 ,创面完全愈合时间比较 ,创面表面细菌培养结果对比及复生烧伤霜剂对全身情况的影响。结果 :在浅Ⅱ度烧伤和深Ⅱ度烧伤创面愈合时间上 ,治疗组比对照组提前 2～ 3d。细菌学调查结果表明在用药过程中治疗组其抗菌作用明显优于对照组。用药患者未出现疼痛、皮疹、过敏反应和其他药物不良反应。结论 :复生烧伤霜剂对Ⅱ度烧伤创面愈合有促进作用 。 展开更多
关键词 复生烧伤霜剂 烧伤 创面 治疗 疗效
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水生生物免疫学教学方法探讨 被引量：2
14
作者 程顺峰 《科技信息》 2009年第19期136-136,共1页
水生生物免疫学是一门新发展起来的水产养殖专业基础课程,该课程内容抽象,学生较难理解,本文就选用教材,教学内容选择,采用多种教学方法,合理应用多媒体教学手段等方面结合实践教学进行了探讨,以求达到激发学生学习兴趣,提交教学效果的... 水生生物免疫学是一门新发展起来的水产养殖专业基础课程,该课程内容抽象,学生较难理解,本文就选用教材,教学内容选择,采用多种教学方法,合理应用多媒体教学手段等方面结合实践教学进行了探讨,以求达到激发学生学习兴趣,提交教学效果的目的。 展开更多
关键词 水生生物免疫学 教学方法 探讨
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鱼类淋巴囊肿病毒感染牙鲆鳃细胞系的研究
15
作者 程顺峰 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第18期457-460,共4页
以患病牙鲆的囊肿组织为试验材料,冰浴匀浆后采用低速离心的方法提取淋巴囊肿病毒,用粗提的病毒液感染牙鲆鳃细胞系FG-9307,同时应用以抗淋巴囊肿病毒单克隆抗体为第一抗体的间接免疫荧光抗体技术检测淋巴囊肿病毒是否感染了牙鲆鳃细胞... 以患病牙鲆的囊肿组织为试验材料,冰浴匀浆后采用低速离心的方法提取淋巴囊肿病毒,用粗提的病毒液感染牙鲆鳃细胞系FG-9307,同时应用以抗淋巴囊肿病毒单克隆抗体为第一抗体的间接免疫荧光抗体技术检测淋巴囊肿病毒是否感染了牙鲆鳃细胞并在其中增殖。结果发现生长旺盛的单层牙鲆鳃细胞接种淋巴囊肿病毒2天后出现明显的细胞病变效应,形成空斑,应用间接免疫荧光抗体方法检测结果为抗淋巴囊肿病毒单抗与未接种淋巴囊肿病毒的牙鲆鳃细胞呈阴性反应,而接种病毒的牙鲆鳃细胞,细胞质中有明显的特异性荧光,该结果说明牙鲆鳃细胞系是淋巴囊肿病毒的敏感细胞系。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病毒 牙鲆鳃细胞系 细胞病变效应
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水生生物免疫学使用多媒体教学的体会
16
作者 程顺峰 邓灯 《科技信息》 2008年第34期248-248,共1页
水生生物免疫学是一门理论性和实践性紧密结合的水产医学基础学科,该学科内容抽象,采用传统教学方式学生较难理解,本文采用了多媒体技术进行教学,优化了教学手段,激发了学习动机,最终达到学习的目的。
关键词 水生生物免疫学 大学生 多媒体教学 体会
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应用免疫技术检测牙鲆组织内的淋巴囊肿病毒 被引量：11
17
作者 徐宋娟 邢婧 +1 位作者 程顺峰 战文斌 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B12期101-105,共5页
应用免疫荧光抗体技术(IFAT)和标记链亲和素-生物素(LSAB)免疫组化法对患淋巴囊肿病牙鲆(Paralichthys olivaceus的肝、脾、肾、胃、幽门、肠、心脏、性腺、鳃、表皮10种组织进行了检测，结果发现体表有囊肿症状病鱼的胃、肠、鳃和表皮... 应用免疫荧光抗体技术(IFAT)和标记链亲和素-生物素(LSAB)免疫组化法对患淋巴囊肿病牙鲆(Paralichthys olivaceus的肝、脾、肾、胃、幽门、肠、心脏、性腺、鳃、表皮10种组织进行了检测，结果发现体表有囊肿症状病鱼的胃、肠、鳃和表皮组织内有淋巴囊肿病毒存在；体表未见囊肿症状病鱼的胃、肠和表皮组织内也检测到了病毒，说明这两种免疫技术可以应用于牙鲆淋巴囊肿病的检测与诊断。同时本文还对淋巴囊肿病毒通过消化道感染的可能进行了探讨。 展开更多
关键词 牙鲆 淋巴囊肿病毒 免疫技术 免疫荧光抗体技术 标记链亲和素-生物素免疫组化法 检测
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对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19的单克隆抗体制备及其定位 被引量：8
18
作者 姜有声 战文斌 +1 位作者 程顺峰 王世表 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-74,共6页
为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰... 为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,然后洗脱提纯其病毒蛋白VP19并免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光技术(IFAT)和Western-Blot技术筛选出1株阳性杂交瘤细胞,将检测出的阳性杂交瘤细胞经有限稀释法克隆,研制出抗VP19的单抗,再利用免疫胶体金技术对病毒蛋白VP19进行定位,结果显示,胶体金粒子位于WSSV病毒的囊膜上,说明病毒蛋白VP19位于WSSV囊膜上。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 VP19 单克隆抗体 定位
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鱼肠道弧菌外膜蛋白抗原性分析 被引量：8
19
作者 王忠 邓灯 +3 位作者 程顺峰 王仁杰 秦志华 王文琪 《水产科学》 CAS 北大核心 2010年第8期455-459,共5页
采用十二烷基肌氨酸钠法和苯甲基磺酰氟法提取鱼肠道弧菌外膜蛋白。SDS-PAGE图谱显示,PMSF提取的鱼肠道弧菌有19条带,Sarkosyl法提取的鱼肠道弧菌有14条带,其中111、105、87、78、61、58、53、48、45、40、36、33、32、31 kD蛋白带为2... 采用十二烷基肌氨酸钠法和苯甲基磺酰氟法提取鱼肠道弧菌外膜蛋白。SDS-PAGE图谱显示,PMSF提取的鱼肠道弧菌有19条带,Sarkosyl法提取的鱼肠道弧菌有14条带,其中111、105、87、78、61、58、53、48、45、40、36、33、32、31 kD蛋白带为2种方法共同条带,101、55、42、27、25 kD为PMSF法特有条带。此外,以制备的兔抗鱼肠道弧菌全菌血清为第一抗体,应用Western-blotting技术分析了鱼肠道弧菌外膜蛋白的抗原性,结果显示分子量为106、87、61、58、55、42、36、32 kD的8条蛋白带发生了免疫反应。 展开更多
关键词 鱼肠道弧菌 外膜蛋白 抗原性
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鱼肠道弧菌间接ELISA快速检测法的建立 被引量：7
20
作者 吴晓春 邓灯 +2 位作者 程顺峰 刘慧 姜令绪 《水产科学》 CAS 北大核心 2013年第5期284-288,共5页
为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。... 为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。病原菌检测灵敏度为每孔105 cfu/mL。抗血清与迟缓爱德华氏菌、杀鲑气单胞菌、恶臭假单胞菌、鱼肠道弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻胶弧菌、秦皇岛弧菌8种水产致病菌的交叉反应结果呈阴性。用该法检测人工感染后的牙鲆和健康牙鲆,在发病鱼的肝脏、肾脏、脾脏、腹水等处检测出病原菌而健康鱼则为阴性。该技术能够准确、快速检测出鱼肠道弧菌。 展开更多
关键词 鱼肠道弧菌 间接ELISA技术 检测方法
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