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大鼠DRG神经元膜SP自身受体存在的证明
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作者 胡宏镇 司军强 +2 位作者 李之望 刘长金 樊友珍 《郧阳医学院学报》 1995年第3期162-162,共1页
已知:P物质(SP)为初级感觉神经元小细胞(Aδ和C型细胞)所含肽类神经递质。然而有资料表明大鼠背根神经节(DRG)神经元膜存在有SP受体(Dray和Pinnock,1982).我室最近的研究工作在大鼠DRG神经元应用细胞内(司军强和李之望,1995)及全细... 已知:P物质(SP)为初级感觉神经元小细胞(Aδ和C型细胞)所含肽类神经递质。然而有资料表明大鼠背根神经节(DRG)神经元膜存在有SP受体(Dray和Pinnock,1982).我室最近的研究工作在大鼠DRG神经元应用细胞内(司军强和李之望,1995)及全细胞膜片钳(李之望等,1994)记录发现大多数(约90%)DRG细胞对SP敏感。因此我们推测DRG细胞膜可能存在有SP自身受体.最近我室应用电生理学方法在DRG分离细胞证明了膜NMDA受体后,结合免疫组织化学检测,在同一细胞显示胞内谷氨酸样免疫反应性(Glu-LI),从而确证了NMDA自身受体的存在(李之望等,1994)。 展开更多
关键词 自身受体 DRG 大鼠 感觉神经元 SP 细胞 免疫组织化学检测 存在 确证 同一
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L-ENK对DRG神经元膜GABR激活电流的调制
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作者 胡宏镇 李之望 樊友珍 《郧阳医学院学报》 1995年第3期163-163,共1页
已有的资料证明:背根神经节(DRG)神经元膜存在有多种受体,其中包括GABA(GABAA及GABAB)受体和脑啡肽(ENK)受体,这两类受体均与初级传人末梢膜突触前抑制的产生有关。本文研究的目的是探索此两种受体能否在同一细胞共存?二者之间有无... 已有的资料证明:背根神经节(DRG)神经元膜存在有多种受体,其中包括GABA(GABAA及GABAB)受体和脑啡肽(ENK)受体,这两类受体均与初级传人末梢膜突触前抑制的产生有关。本文研究的目的是探索此两种受体能否在同一细胞共存?二者之间有无相互作用?实验应用全细胞膜片钳技术在大鼠新鲜分离DRG神经元上观察了预加Leu-ENK对GABA激活电流的调制作用。在受检的101个细胞中大多数对GABA敏感(99/101),反应具有明显的浓度依赖性(10^-6~10^-3M),GABA激活电流去敏感现象非常明显,即GABA激活引起的内向流幅值急速增大,在达到峰值后尽管GABA持续存在且浓度不变但电流逐步地呈指数下降直至一稳定值为止,此激活电流可为muscimol,isoguvacine所模拟,并为bicuculline所阻断。 展开更多
关键词 GABA 受体 神经元 DRG 全细胞膜片钳技术 持续存在 脑啡肽 激活电流 调制作用 敏感
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P物质增强大鼠急性分离DRG细胞膜ATP激活电流
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作者 胡宏镇 李之望 《郧阳医学院学报》 1995年第3期162-163,共2页
已有的资料证明:背根神经节(DRG)神经元膜存在有SP受体(Dray和Pinnoek.1982;司军强和李之望,1995;李之望等,1995;胡宏镇等,1995)以及ATP受雄(Krishtal et al,1982;Bean et al,1990;Li et al。1993;胡宏镇和李之望,1995)... 已有的资料证明:背根神经节(DRG)神经元膜存在有SP受体(Dray和Pinnoek.1982;司军强和李之望,1995;李之望等,1995;胡宏镇等,1995)以及ATP受雄(Krishtal et al,1982;Bean et al,1990;Li et al。1993;胡宏镇和李之望,1995)。本文研究的目的是探索SP对ATP受体是否有调制作用。实验在用酶和机械分离的大鼠DRG神经元应用全细胞膜片钳技术记录ATP-激活内向电流,在所检测的85个细胞中绝大多数细胞均对ATP敏感(82/85,96.5%)。 展开更多
关键词 DRG 大鼠 ATP 急性分离 P物质 神经元 全细胞膜片钳技术 激活电流 调制作用 记录
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毛细管电泳安培测定鼠单个交感神经细胞中儿茶酚胺类神经递质 被引量:12
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作者 胡深 庞代文 +4 位作者 王宗礼 程介克 李之望 樊友珍 胡宏镇 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第6期752-756,共5页
用自组装的毛细管电泳微电极安培检测系统,分析了鼠的单个交感神经细胞。大白鼠经麻醉、微解剖及酶解分离出新鲜的单个交感神经细胞。采用全细胞进样,用异丙肾上腺素 作内标。测定了儿茶酚胺类神经递质去甲肾上腺素和肾上腺素。检测... 用自组装的毛细管电泳微电极安培检测系统,分析了鼠的单个交感神经细胞。大白鼠经麻醉、微解剖及酶解分离出新鲜的单个交感神经细胞。采用全细胞进样,用异丙肾上腺素 作内标。测定了儿茶酚胺类神经递质去甲肾上腺素和肾上腺素。检测限分别达 57 amol和 59 amol。八个活细胞分析结果,每个细胞平均含去甲肾上腺素 455 amol及肾上腺素 65 amol。 展开更多
关键词 分析 儿茶酚胺 神经递质 去甲肾上腺素 肾上腺素
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大鼠背根神经节同一分离神经元膜受体电生理学及细胞神经递质免疫组织化学检测方法 被引量:8
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作者 司军强 胡宏镇 +3 位作者 吴晓平 樊友珍 刘长金 李之望 《中国应用生理学杂志》 CSCD 1996年第1期77-81,共5页
在新鲜分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元应用全细胞膜片钳技术记录并证实了膜受体的存在,然后将此同一细胞吸入一较大口径的微吸管,再转移至载玻片上,在倒置显微镜下完成细胞的固定、漂洗及免疚组织化学抗原-抗体反应和显色等... 在新鲜分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元应用全细胞膜片钳技术记录并证实了膜受体的存在,然后将此同一细胞吸入一较大口径的微吸管,再转移至载玻片上,在倒置显微镜下完成细胞的固定、漂洗及免疚组织化学抗原-抗体反应和显色等步骤。应用这一方法成功地在单个DRG神经元膜上确证了N-甲基-D-天冬氨酸及P物质自身受体的存在。 展开更多
关键词 神经电生理 神经递质 背根神经节 神经元
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毛细管电泳安培法分析单个神经细胞 被引量:2
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作者 胡深 庞代文 +4 位作者 王宗礼 程介克 李之望 樊友珍 胡宏镇 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第8期1207-1209,共3页
毛细管电泳安培法分析单个神经细胞胡深,庞代文,王宗礼,程介克(武汉大学化学系,武汉,430072)李之望,樊友珍,胡宏镇(同济医科大学实验医学研究中心,武汉,430030)关键词毛细管电泳,安培法检测,单个细胞分析在... 毛细管电泳安培法分析单个神经细胞胡深,庞代文,王宗礼,程介克(武汉大学化学系,武汉,430072)李之望,樊友珍,胡宏镇(同济医科大学实验医学研究中心,武汉,430030)关键词毛细管电泳,安培法检测,单个细胞分析在生命科学研究中,单个水平的神经细胞... 展开更多
关键词 毛细管电泳 安培法 神经细胞
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Hu蛋白作为豚鼠小肠肌间丛神经元标志物的研究 被引量:6
7
作者 林中 胡宏镇 Jackie D Wood 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2002年第3期257-260,共4页
比较 5种神经元标志物在小肠肌间丛神经元中的特异性。应用新发现的神经元标志物Hu蛋白 ,对豚鼠肠神经系统 (ENS)的小肠肌间丛神经元进行免疫荧光染色研究 ,并与其他神经元标志物MAP 2 ,PGP 9 5 ,NSE ,TUJ 1进行比较。结果表明 :Hu蛋白... 比较 5种神经元标志物在小肠肌间丛神经元中的特异性。应用新发现的神经元标志物Hu蛋白 ,对豚鼠肠神经系统 (ENS)的小肠肌间丛神经元进行免疫荧光染色研究 ,并与其他神经元标志物MAP 2 ,PGP 9 5 ,NSE ,TUJ 1进行比较。结果表明 :Hu蛋白主要分布于神经元胞浆中 ,神经元核也有较浅的染色 ,尤其在whole mount上 ,每个神经元都清晰可见。MAP 2作为神经元标志物 ,也能显示完好的细胞形态 ,但由于粗大神经纤维的强染色 ,使神经元计数不准确。PGP 9 5 ,NSE和TUJ 1对体外培养的小肠肌间丛神经元染色良好 ,但在whole mount上 ,神经纤维强染色 ,无法计数分析。结果提示在豚鼠肠神经系统小肠肌间丛神经元的计数研究中 ,Hu蛋白是理想的神经元标志物。 展开更多
关键词 Hu蛋白 豚鼠 小肠肌间丛神经元 标志物 研究
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导致肺、脑血管缺氧反应差异的因素 被引量:1
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作者 王迪浔 金咸瑢 +6 位作者 刘声远 万有 李会革 彭远开 刘杰 胡宏镇 张业平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期341-346,共6页
大鼠,家兔和狗整体实验研究交感神经、感觉神经肽、花生四烯酸环氧合酶及脂氧合酶代谢产物,内皮源性舒张因子,活性氧和钾通道在缺氧性肺血管收缩(HPV)和脑血管舒张反应(HCVD)中的作用。结果发现缺氧时,交感神经收缩肺,脑血管;感觉神经... 大鼠,家兔和狗整体实验研究交感神经、感觉神经肽、花生四烯酸环氧合酶及脂氧合酶代谢产物,内皮源性舒张因子,活性氧和钾通道在缺氧性肺血管收缩(HPV)和脑血管舒张反应(HCVD)中的作用。结果发现缺氧时,交感神经收缩肺,脑血管;感觉神经肽、内皮源性舒张因子和4-AP敏感性钾通道的开放均使肺、脑血管舒张;环氧合酶代谢产物舒张肺血管和收缩脑血管,而脂氧合酶代谢产物则收缩肺血管和舒张脑血管。缺氧使肺组织活性氧减少从而促使肺血管收缩,而脑组织活性氧含量无明显变化;ATP敏感性钾通道关闭致肺血管收缩,而在脑血管反应中无作用。结果表明,在这些因子中主要是脂氧合酶代谢产物、活性氧和ATP敏感性钾通道的变化介导HPV,并介导或不影响HCVD,为导致肺、脑血管对缺氧反应差异的因素。 展开更多
关键词 缺氧症 肺循环 脑血管循环
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5-HT对大鼠新鲜分离DRG神经元GABA激活电流的调制作用
9
作者 李韶 崔存德 +2 位作者 关兵才 李之望 胡宏镇 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期368-377,共10页
本实验在新鲜分离的大鼠背根神经节(DRG)细胞上应用全细胞膜片钳技术,观察5-HT对GABA激活电流的调制作用。结果发现,绝大多数细胞(49/54)对GABA(10-8~10-3mol/L)产生浓度依赖性的内向电流,... 本实验在新鲜分离的大鼠背根神经节(DRG)细胞上应用全细胞膜片钳技术,观察5-HT对GABA激活电流的调制作用。结果发现,绝大多数细胞(49/54)对GABA(10-8~10-3mol/L)产生浓度依赖性的内向电流,并有明显的去敏感现象。在多数细胞预加5-HT(10-7~10-4mol/L),GABA激活电流受到明显抑制,抑制率分别为3.0%,13.5%,19.7%,24.7%,59.1%。5-HT(10-7~10-4mol/L)本身在部分细胞(24/40)可引起浓度依赖性的内向电流,部分细胞(12/40)未检测到膜电流,少数细胞(4/40)可引起微弱的外向电流。此结果提示5-HT可能作用于初级传入终末。 展开更多
关键词 5-HT GABA 背根神经节 全细胞膜片钳 激活电流
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新鲜分离大鼠脊神经节细胞分类的免疫细胞化学研究
10
作者 谷启海 胡宏镇 李之望 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期445-449,共5页
本文对应用酶及机械分离方法处理得到的新鲜分离DRG细胞的大小分布进行了统计分析,并且对单个细胞经免疫细胞化学处理前后的大小进行了比较。实验证明DRG细胞经免疫细胞化学处理后体积减小17.38%、据此我们提出对于新鲜分... 本文对应用酶及机械分离方法处理得到的新鲜分离DRG细胞的大小分布进行了统计分析,并且对单个细胞经免疫细胞化学处理前后的大小进行了比较。实验证明DRG细胞经免疫细胞化学处理后体积减小17.38%、据此我们提出对于新鲜分离DRG细胞,其形态学分类标准应在原标准的基础上放宽5μm,即大、中、小细胞的直径分别修改为>45μm,45—25μm和<25μm。本实验并对以往的单个细胞免疫细胞化学处理中的漂洗过程作了改进,设计出一种专门的单细胞漂洗方法,提高了单个细胞免疫细胞化学处理的稳定性和成功率。 展开更多
关键词 DRG细胞 分离 分类 免疫细胞化学
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神经细胞标志物Hu蛋白在豚鼠肌肠神经丛神经细胞定量研究中的意义
11
作者 林中 胡宏镇 《胃肠病学》 2001年第C00期74-75,共2页
关键词 神经细胞标志物 Hu蛋白 肌肠神经丛 神经细胞定量研究 肠道神经组织 动物实验
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背根神经节神经元胞体膜可能存在NMDA自身受体(英文)
12
作者 司军强 胡宏镇 +2 位作者 樊友珍 刘长金 李之望 《中国神经科学杂志》 CSCD 1999年第2期143-147,共5页
应用经酶和机械消化分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元进行实验。首先运用全细胞膜片箝技术找到NMDA可引起一内向电流的神经元,此内向电流可被甘氨酸明显增强,并被NMDA受体的特异性拮抗剂APV完全阻断。随后,把经电生... 应用经酶和机械消化分离的大鼠背根神经节(DRG)神经元进行实验。首先运用全细胞膜片箝技术找到NMDA可引起一内向电流的神经元,此内向电流可被甘氨酸明显增强,并被NMDA受体的特异性拮抗剂APV完全阻断。随后,把经电生理技术证实膜上存在NMDA受体的这一DRG神经元用微吸管转移到载玻片上,进行谷氨酸神经递质免疫组织化学检测。10/18的DRG细胞呈免疫反应阳性,结果为DRG神经元膜上存在NMDA自身受体提供了新证据。 展开更多
关键词 NMDA 背根神经节 细胞膜片箝 自身受体 神经元
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膜片钳技术结合免疫组织化学方法在同一细胞的应用
13
作者 司军强 胡宏镇 +3 位作者 吴晓平 樊友珍 刘长金 李之望 《郧阳医学院学报》 1995年第3期168-169,共2页
我室在以往的工作中曾提出背根神经节(DRG)神经元膜可能存在有谷氨酸(Glu)自身受体。为了确证这一推论.在技术上要求能在同一细胞证明膜受体的存在,并显示出胞内台有激活该受体的神经递质。最近我们创新了一种在同一分离的DRG细胞应... 我室在以往的工作中曾提出背根神经节(DRG)神经元膜可能存在有谷氨酸(Glu)自身受体。为了确证这一推论.在技术上要求能在同一细胞证明膜受体的存在,并显示出胞内台有激活该受体的神经递质。最近我们创新了一种在同一分离的DRG细胞应用全细胞膜片钳技术证明膜NMDA受体的存在,并结合免疫组织化学方法显示胞内谷氨酸样免疫反应性(Glu-LI),从而成功地确证了大鼠DRG神经元膜存在有NMDA自身受体.应用同一方法我们还证明了SP自身受体的存在。 展开更多
关键词 免疫组织化学方法 自身受体 DRG 膜片钳技术 细胞 神经元 谷氨酸 存在 确证 同一
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大鼠DRG神经元膜NMDA自身受体存在的证明
14
作者 李之望 司军强 +3 位作者 胡宏镇 刘长金 吴晓平 樊友珍 《郧阳医学院学报》 1995年第3期161-161,共1页
我室以往的研究证明;在蟾蜍大多数细胞(84%)对谷氨酸敏感,引起膜去极化反应,而免疫组织化学检测有86%的细胞呈谷氨酸样免疫反应性(Glu-LI),因而我们提出了初级感觉神经元膜可能存在有Glu自身受体的推断(周小萍等1991;李之望1992,1... 我室以往的研究证明;在蟾蜍大多数细胞(84%)对谷氨酸敏感,引起膜去极化反应,而免疫组织化学检测有86%的细胞呈谷氨酸样免疫反应性(Glu-LI),因而我们提出了初级感觉神经元膜可能存在有Glu自身受体的推断(周小萍等1991;李之望1992,1993)。此后日本大阪大学Tohyama实验室(Satoetsl,1993;Tohyama et a1。1994)应用原位杂交及免疫组化实验也提出了同样的推论。 展开更多
关键词 自身受体 NMDA 大鼠 神经元 DRG 谷氨酸 细胞 证明 推论 实验室
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二步式玻璃微电极拉制仪的研制 被引量:2
15
作者 王士端 胡宏镇 沈杰 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期480-481,共2页
二步式玻璃微电极拉制仪的研制王士端,胡宏镇,沈杰同济医科大学实验医学研究中心生物医学工程研究室,武汉430030关键词膜片钳;微电极;控制仪中图法分类号R764.9膜片钳技术是目前进行生物医学研究的重要手段之一,近年... 二步式玻璃微电极拉制仪的研制王士端,胡宏镇,沈杰同济医科大学实验医学研究中心生物医学工程研究室,武汉430030关键词膜片钳;微电极;控制仪中图法分类号R764.9膜片钳技术是目前进行生物医学研究的重要手段之一,近年来在我国的一些实验室已陆续开展起来... 展开更多
关键词 膜片钳 玻璃微电极 拉制仪
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Factors Accounting for Different Responses of Pulmonary and Cerebral Vessels to Hypoxia
16
作者 王迪浔 金咸瑢 +6 位作者 刘声远 万有 李会革 彭远开 刘杰 胡宏镇 张业平 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 1996年第2期65-69,共5页
The roles of sympathicus, sensory neuropeptides (SNP),cyclooxygenase metabolites (COX-M), lipoxygenase metabolites (LOX-M), endothelium derived relaxing factor (EDRF),reactive oxygen (ROS) and potassium channels (PC) ... The roles of sympathicus, sensory neuropeptides (SNP),cyclooxygenase metabolites (COX-M), lipoxygenase metabolites (LOX-M), endothelium derived relaxing factor (EDRF),reactive oxygen (ROS) and potassium channels (PC) in the hypoxic pulmonary vasoconstriction (HPV) and hypoxic cerebral vasodilation (HCVD) were investigated in intact rats, rabbits and dogs. The results showed that during hypoxia,the excitation of sympathicus caused a constriction of both pulmonary and cerebral vessels,while SNP, EDRF and the opening of voltage sensitive PC caused the dilation of both of them; LOX-M mediated HPV and HCVD, COX-M might serve as their modulators; the blockade of ATP sensitive PC induced by hypoxia mediated HPV, but had no effect on HCVD; the reduction of O_2 ̄- in the lung might potentiate HPV, however, O_2 ̄- remained unchanged in brain during hypoxia. It is suggested that the alterations of LOX-M,ROS and the ATP sensitive PC are the factors accounting for the difference in the response of pulmonary and cerebral vessels to hypoxia. 展开更多
关键词 HYPOXIA pulmonary circulation cerebral circulation mediator MODULATOR
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感觉神经肽在大鼠急性缺氧性肺及脑血管反应中的作用 被引量:7
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作者 胡宏镇 金咸甸 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期104-108,共5页
探讨感觉神经肽对大鼠急性缺氧性肺、脑血管反应的影响。方法用辣椒素毁损肽能感觉神经,观察对缺氧性肺血管收缩反应(HPV)和缺氧性脑血管舒张反应(HCVD)的影响;用放射免疫测定法和免疫组化法分别观察急性缺氧时肺循环中P... 探讨感觉神经肽对大鼠急性缺氧性肺、脑血管反应的影响。方法用辣椒素毁损肽能感觉神经,观察对缺氧性肺血管收缩反应(HPV)和缺氧性脑血管舒张反应(HCVD)的影响;用放射免疫测定法和免疫组化法分别观察急性缺氧时肺循环中P物质(SP)及肺组织中肽能神经纤维的变化;观察外源性SP对HPV和HCVD的影响。结果发现辣椒素处理的新生大鼠成年后平均肺动脉压(2.46±0.07kPa,1kPa=7.5mmHg)、肺血管阻力(3665±164kPa.s/L)和缺氧性肺血管阻力变化率(98.7%±4.1%)高于溶剂对照(t分别为2.89、3.49和12.18,P均〈0。01)和正常对照组(t分别为3.09、3.59和13.48,P均<0.01),差异均有非常显著意义;其基础脑阻抗血流图波幅(11.3±1.0mΩ)则低于二对照组(t分别为2.49和2.69,P均<0.05),差异有显著意义;急性缺氧时二对照组脑阻抗血流图波幅分别增高41.4%±6.7%和48.8%±6.1%,而辣椒素处理组反而降低23.6%±2.4%,(t分别为9.44和11.21,P均<0.01)差异有非常显著意义。急性缺氧鼠出肺血中SP较入肺血增多(139±? 展开更多
关键词 缺氧症 肺血管 肺动脉高压 脑血管 神经肽
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