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沈阳及其周边地区鸡大肠杆菌的分离及对氟喹诺酮类药物的敏感性试验 被引量:7
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作者 舒秀伟 李子玉 于莲智 《中国兽药杂志》 2001年第3期7-10,共4页
从沈阳及其周边 9市县区分离培养出 34株鸡大肠埃希氏菌 ,研究其培养、染色形态、生化等特性 ;并用 8种氟哇诺酮类药物完成药敏试验。结果表明 ,不同地区乃至同一地区来源不同的菌株对各种氟喹诺酮类药物的敏感性不同。其中 ,氧氟沙星... 从沈阳及其周边 9市县区分离培养出 34株鸡大肠埃希氏菌 ,研究其培养、染色形态、生化等特性 ;并用 8种氟哇诺酮类药物完成药敏试验。结果表明 ,不同地区乃至同一地区来源不同的菌株对各种氟喹诺酮类药物的敏感性不同。其中 ,氧氟沙星抗菌效果最佳 ,高度敏感率达 88.9% ,均无耐药 :环丙沙星和洛美沙星较好 ;培氟沙星和双氟沙星欠佳 。 展开更多
关键词 大肠杆菌 氟喹诺酮类药物 敏感性试验 沈阳地区
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猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 被引量:8
2
作者 舒秀伟 宣华 +1 位作者 王文成 段文龙 《中国兽药杂志》 2005年第8期36-40,共5页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征的病原体,本文对PRRSV的分子生物学研究进展进行了综述,主要包括PRRSV的基因组结构、病毒蛋白及其功能、抗原变异等,旨在为诊断技术、免疫机理研究、疫苗设计与疫病防制提供借鉴。
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分子生物学 病毒蛋白
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鸡IL-2基因的克隆与序列分析 被引量:1
3
作者 舒秀伟 宣华 卫广森 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期555-560,共6页
根据GenBank上登录的鸡IL2基因序列设计合成了1对特异性引物,以ConA诱导的鸡脾淋巴细胞提取的总RNA为模板进行RTPCR。结果显示,扩增出一450bp的目的片段,将该基因片段克隆到pBluescriptⅡKS(+)载体上,经酶切鉴定及序列测定证实为鸡IL2基... 根据GenBank上登录的鸡IL2基因序列设计合成了1对特异性引物,以ConA诱导的鸡脾淋巴细胞提取的总RNA为模板进行RTPCR。结果显示,扩增出一450bp的目的片段,将该基因片段克隆到pBluescriptⅡKS(+)载体上,经酶切鉴定及序列测定证实为鸡IL2基因,与GenBank上已知的鸡IL2基因相比,其在编码氨基酸的第49位有一个氨基酸的缺失,序列分析表明,该基因是目前发现的在该位置唯一有氨基酸缺失的鸡IL2基因。另外,它与Broiler、SC和Xiaoshan鸡在编码的氨基酸上完全一致,具有较近的亲缘关系,而与Kestrel来航鸡、来航SPF鸡、Obese、Silky、Chenren和Xianju鸡在编码的氨基酸上有1~4个氨基酸的差异。 展开更多
关键词 鸡IL-2基因 反转录聚合酶链反应 克隆 序列分析
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猪链球菌病二价灭活疫苗候选株培养条件的优化及其安全性试验
4
作者 王卓 舒秀伟 王文成 《中国兽药杂志》 2004年第7期34-36,共3页
筛选对猪致病力强、免疫原性良好的猪链球菌病兰氏C群LN0 1株和猪链球菌Ⅱ型LN0 5株 ,通过优化培养条件 ,LN0 1株和LN0 5株培养菌数最高分别为 1.2× 10 9和 2 .8× 10 9CFU/mL ;LN0 1株未见溶血素产生 ,LN0 5株溶血素效价为 1... 筛选对猪致病力强、免疫原性良好的猪链球菌病兰氏C群LN0 1株和猪链球菌Ⅱ型LN0 5株 ,通过优化培养条件 ,LN0 1株和LN0 5株培养菌数最高分别为 1.2× 10 9和 2 .8× 10 9CFU/mL ;LN0 1株未见溶血素产生 ,LN0 5株溶血素效价为 1∶6 4;脱毒剂A (甲醛 )对其毒素的脱毒作用不明显 ,37℃脱毒 30d ,对仔猪的安全剂量为 5mL ;脱毒剂B的脱毒时间缩短为 3d ,安全剂量增加到 10mL ;试验还证实 ,37℃和 6 展开更多
关键词 猪链球菌病 二价灭活疫苗 候选株 培养条件 安全性试验
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巴维特可溶性粉治疗人工诱发雏鸡大肠杆菌病的效果
5
作者 于连智 张德新 +5 位作者 李红梅 魏峰 马成国 苗玉和 李子玉 舒秀伟 《饲料工业》 北大核心 2000年第8期43-44,共2页
关键词 雏鸡大肠杆菌病 巴维特可溶性粉 药物治疗
全文增补中
犬细小病毒悬浮培养工艺研究
6
作者 李凤艳 陈生雷 +3 位作者 刘艳霞 刘梦成 姜斌 舒秀伟 《现代畜牧兽医》 2024年第3期29-31,共3页
研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立... 研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立了Tide-cell生物反应器大规模培养CPV P6株抗原制备工艺。结果显示:生物反应器Tide-cell载体罐内接入1.0×10^(10)个F81种子细胞,在优化的参数条件下培养,用RPMI 1640培养液经过96 h培养,细胞总数为1.0×10^(11)个;在葡萄糖消耗量约为5 g/(L·h)时,按照病毒感染复数(MOI)=0.02将生产种毒CPV P6株接入Tide-cell微载体细胞培养瓶内,补加含8%血清的RPMI 1640病毒维持液至50 L,调整pH值为7.2~7.3,培养48 h收获,病毒含量至少为10^(7.43)TCID^(50)/mL。 展开更多
关键词 生物反应器 犬细小病毒 CPV P6株 微载体 疫苗
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猪囊虫病免疫机制及疫苗研究进展
7
作者 张烈 李尚波 +1 位作者 舒秀伟 李子玉 《辽宁畜牧兽医》 2002年第5期28-31,共4页
猪囊虫病是由猪带绦虫的幼虫囊尾蚴寄生在猪的肌肉、心脏、脑等处所引起的寄生虫病.该病为人兽共患寄生虫病,囊尾蚴不仅寄生在猪、猫、野猪等体内,还可以寄生在人的脑、心脏等处,引起人的多种类型的囊虫病如皮肤型囊虫病、脑囊虫病(脑... 猪囊虫病是由猪带绦虫的幼虫囊尾蚴寄生在猪的肌肉、心脏、脑等处所引起的寄生虫病.该病为人兽共患寄生虫病,囊尾蚴不仅寄生在猪、猫、野猪等体内,还可以寄生在人的脑、心脏等处,引起人的多种类型的囊虫病如皮肤型囊虫病、脑囊虫病(脑实质囊虫病、脑室囊虫病)、心肌囊虫病、口腔囊虫病、眼囊虫病及椎管囊虫病等.人是囊尾蚴的中间宿主,也是其终末宿主. 展开更多
关键词 囊虫病 免疫机制 疫苗 免疫接种
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应用小鼠替代仔猪检验仔猪水肿病灭活疫苗效力研究
8
作者 苗玉和 舒秀伟 陆承平 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第8期69-70,共2页
用小鼠替代仔猪进行仔猪水肿病灭活疫苗效力检验,结果表明,疫苗免疫小鼠能达9/10保护的最小免疫剂量是0.05 mL/只(4×10^8CFU),免疫仔猪能达5/5保护的最小免疫剂量是1.5 mL/头(1.20×10^10CFU)。用疫苗0.01 mL免疫小鼠所产... 用小鼠替代仔猪进行仔猪水肿病灭活疫苗效力检验,结果表明,疫苗免疫小鼠能达9/10保护的最小免疫剂量是0.05 mL/只(4×10^8CFU),免疫仔猪能达5/5保护的最小免疫剂量是1.5 mL/头(1.20×10^10CFU)。用疫苗0.01 mL免疫小鼠所产生的抵抗致死量强毒菌的免疫力,相当于用疫苗1.0 mL免疫14-18日龄仔猪所产生的抵抗致死量毒素静脉注射的免疫力;用疫苗0.05 mL免疫小鼠所产生的抵抗致死量强毒菌的免疫力,相当于用疫苗1.5 mL免疫14-18日龄仔猪所产生的抵抗致死量毒素静脉注射的免疫力。疫苗0.05 mL免疫小鼠可以替代仔猪作为效力检验的模型。 展开更多
关键词 仔猪 水肿病 小鼠 灭活疫苗 效力检验
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鹅副粘病毒YF株的分离鉴定与生物学特性研究 被引量:3
9
作者 舒秀伟 陈生雷 +3 位作者 周丽 刘艳霞 苗玉和 李学志 《中国兽药杂志》 2013年第2期18-20,23,共4页
从辽宁省某鹅场病死鹅中分离到1株禽I型副粘病毒。应用鸡胚传代、电镜形态学观察、红细胞凝集、红细胞凝集抑制试验、血清中和试验、动物回归试验、免疫保护试验进行了研究,并进行了最小致死量平均死亡时间(MDT)、脑接种致病指数(ICPI)... 从辽宁省某鹅场病死鹅中分离到1株禽I型副粘病毒。应用鸡胚传代、电镜形态学观察、红细胞凝集、红细胞凝集抑制试验、血清中和试验、动物回归试验、免疫保护试验进行了研究,并进行了最小致死量平均死亡时间(MDT)、脑接种致病指数(ICPI)、静脉内接种致病指数(IVPI)三项毒力指标的测定。参照新城疫病毒毒力判定的标准及其方法,分别测定该分离株的鸡(鹅)胚MDT、1日龄鸡(鹅)ICPI和6周龄鸡(鹅)IVPI为51.6/68.6 h、1.75/1.70和1.68/1.72。结果表明,该分离株为鹅副粘病毒强毒株,命名为YF株。应用YF毒株制备的油乳剂灭活苗免疫实验鸡和雏鹅,结果表明有良好的保护率。 展开更多
关键词 鹅副粘病毒 分离鉴定 生物学特性
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铝胶佐剂对狂犬病灭活疫苗(Flury株)效力的影响 被引量:2
10
作者 舒秀伟 边少国 苗玉和 《现代畜牧兽医》 2012年第8期66-67,共2页
氢氧化铝胶是一种广泛应用于疫苗的佐剂,具有抗原吸附力强的特点,注入机体后可持续释放出抗原物质,刺激机体产生抗体,从而提高免疫效果,其主要用于细菌类灭活疫苗,在病毒类疫苗中也有应用,如狂犬病灭活疫苗等^[1]。为了解不同浓... 氢氧化铝胶是一种广泛应用于疫苗的佐剂,具有抗原吸附力强的特点,注入机体后可持续释放出抗原物质,刺激机体产生抗体,从而提高免疫效果,其主要用于细菌类灭活疫苗,在病毒类疫苗中也有应用,如狂犬病灭活疫苗等^[1]。为了解不同浓度铝胶佐剂对狂犬病灭活疫苗(Flury株)效力的影响,进行了如下试验。 展开更多
关键词 氢氧化铝胶 灭活疫苗 狂犬病 佐剂 效力 持续释放 免疫效果 吸附力
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鸡IL-2基因的克隆及GST-chIL2融合蛋白的表达 被引量:2
11
作者 王文成 舒秀伟 +1 位作者 宣华 陆承平 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第1期14-17,共4页
根据Sundick等发表的鸡IL-2基因(chIL2)序列设计合成特异性引物,用RT-PCR从ConA诱导的鸡脾淋巴细胞扩增出450 bp的目的片段,酶切鉴定及序列测定结果表明为鸡IL-2基因。该基因包括鸡IL-2基因的全部开放阅读框,编码142个氨基酸组成的蛋白... 根据Sundick等发表的鸡IL-2基因(chIL2)序列设计合成特异性引物,用RT-PCR从ConA诱导的鸡脾淋巴细胞扩增出450 bp的目的片段,酶切鉴定及序列测定结果表明为鸡IL-2基因。该基因包括鸡IL-2基因的全部开放阅读框,编码142个氨基酸组成的蛋白质,与GenBank鸡IL-2基因相比,在编码氨基酸的49位有一个氨基酸缺失;而与Broiler、SC、Chenren和Xiaoshan鸡在编码氨基酸上完全一致,具有较近的亲缘关系;与Kestrel来航鸡、来航SPF鸡、Obese、Silky和Xianju鸡等有1-4个氨基酸的差异;与火鸡和鹌鹑的氨基酸同源性分别为69.9%和59.4%。将克隆到的基因插入到融合蛋白原核表达载体pGEX-6p-1中,得到重组表达质粒pGEX-IL2。将此重组质粒转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导,表达出了大小约为40 ku的GST-chIL2融合蛋白,其中GST部分为26 ku,鸡IL-2为14 ku,与预期的鸡IL-2成熟蛋白大小一致。 展开更多
关键词 IL-2 融合蛋白 表达
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兽用狂犬病灭活疫苗(Flury株)免疫效力试验 被引量:2
12
作者 舒秀伟 王革新 +4 位作者 边少国 项伟 张华春 苗玉和 李尚波 《现代畜牧兽医》 2013年第2期60-64,共5页
为了检测兽用狂犬病灭活疫苗(Flury株)对本动物的免疫效力,采用中试生产的3批疫苗和OIE参考疫苗以2.0IU剂量对3月龄健康比格犬进行免疫,分别检测在第一次免疫后14d和第二次免疫后7d血清中狂犬病病毒抗体效价。结果表明,无论是一次免疫,... 为了检测兽用狂犬病灭活疫苗(Flury株)对本动物的免疫效力,采用中试生产的3批疫苗和OIE参考疫苗以2.0IU剂量对3月龄健康比格犬进行免疫,分别检测在第一次免疫后14d和第二次免疫后7d血清中狂犬病病毒抗体效价。结果表明,无论是一次免疫,还是二次加强免疫,与采用同样剂量的OIE狂犬病参考疫苗的免疫效果差异不显著(P>0.05),中和抗体均达到有效保护水平(≥0.5IU)。 展开更多
关键词 狂犬病 灭活疫苗 效力
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猪繁殖与呼吸综合征病毒国内分离经典株与变异株的全基因组序列分析 被引量:3
13
作者 王文成 边少国 +1 位作者 舒秀伟 陆承平 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第7期34-38,共5页
通过分段设计引物,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LX、JX株基因组进行RT-PCR扩增,对各片段cDNA进行克隆和序列测定,拼接后获得全基因组序列。结果,PRRSV LX株全基因组序列长度为15 412 bp(不包括PolyA尾),PRRSV JX株全基因组序列长度... 通过分段设计引物,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LX、JX株基因组进行RT-PCR扩增,对各片段cDNA进行克隆和序列测定,拼接后获得全基因组序列。结果,PRRSV LX株全基因组序列长度为15 412 bp(不包括PolyA尾),PRRSV JX株全基因组序列长度为15 320 bp(不包括PolyA尾)。序列分析表明,JX株全基因组核苷酸序列与LX株、JXA1、VR2332、CH-1a、BJ-4、LV同源性分别为91.1%、98.6%、91.0%、94.6%、90.9%、61.7%;LX株全基因组核苷酸序列与JX株、JXA1、VR2332、CH-1a、BJ-4、LV同源性分别为91.1%、89.7%、99.7%、91.5%、99.7%、62.2%。对不同分离株的5′-UTR、Nsp2进行了序列比较,并根据5′-UTR、Nsp2、ORF5的基因序列和氨基酸序列,对国内外分离株进行了系统进化分析。根据5′-UTR核苷酸序列,可将PRRSV美洲型毒株分为4个亚群,LX株和JX株分别属于经典美洲型和"高热病"变异型。根据Nsp2氨基酸序列分析了不同分离株的分子进化关系,表明依据Nsp2序列美洲型分离株可初步划分为5个亚群,JX株独立于其他毒株,独自处于一个分支。依据ORF5序列也可将美洲型分离株划分为5个亚群。本研究为探讨PRRSV的分子进化奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因组 序列分析
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鸡传染性法氏囊病冻干卵黄抗体治疗效力试验报告 被引量:3
14
作者 张亚坤 胥桂华 +4 位作者 张勇飞 李阳 舒秀伟 项伟 夏春雷 《现代畜牧兽医》 2012年第7期55-56,共2页
用IBDV强毒TL株攻击21日龄SPF鸡,12h后分别用3批鸡传染性法氏囊病冻干卵黄抗体进行1羽份的3次被动免疫治疗,末次治疗72h结果:3个试验组雏鸡均存活90%(27/30)以上;阳性对照组的死亡率在90%以上,鸡只法氏囊均有病变发生;阴性对照组100%(30... 用IBDV强毒TL株攻击21日龄SPF鸡,12h后分别用3批鸡传染性法氏囊病冻干卵黄抗体进行1羽份的3次被动免疫治疗,末次治疗72h结果:3个试验组雏鸡均存活90%(27/30)以上;阳性对照组的死亡率在90%以上,鸡只法氏囊均有病变发生;阴性对照组100%(30/30)存活,鸡只法氏囊无病变发生。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病 冻干卵黄抗体 治疗 试验
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猪源乳酸杆菌的分离鉴定及生物学特性分析 被引量:11
15
作者 苗玉和 刘岩 +2 位作者 闫艳丽 郭宇 舒秀伟 《中国兽药杂志》 2011年第8期12-14,23,共4页
乳酸杆菌制剂可以替代抗生素,用于预防和治疗细菌性腹泻。为获取可作为微生态制剂的候选菌株,从健康仔猪肠道分离到5株乳酸杆菌,经抑菌试验、生长曲线测定、耐酸、耐胆盐、耐胰酶试验等,筛选到1株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌... 乳酸杆菌制剂可以替代抗生素,用于预防和治疗细菌性腹泻。为获取可作为微生态制剂的候选菌株,从健康仔猪肠道分离到5株乳酸杆菌,经抑菌试验、生长曲线测定、耐酸、耐胆盐、耐胰酶试验等,筛选到1株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌有较好的抑制作用,对低pH值、高胆盐、胰酶均有一定耐受能力的乳酸杆菌,命名为LY7。经PCR鉴定,该菌株为约氏乳杆菌。 展开更多
关键词 乳酸杆菌 分离鉴定 生物学特性 PCR
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鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗耐热保护剂筛选和优化 被引量:1
16
作者 陈生雷 李凤艳 +3 位作者 高洪霞 李沂 王岩 舒秀伟 《现代畜牧兽医》 2014年第8期1-4,共4页
应用冻干制品加速热稳定试验,测试7组冻干保护剂配方对鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)的耐热保护效果。试验筛选出用于鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗的耐热保护剂,使用该保护剂的疫苗表现为37℃保存10... 应用冻干制品加速热稳定试验,测试7组冻干保护剂配方对鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)的耐热保护效果。试验筛选出用于鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗的耐热保护剂,使用该保护剂的疫苗表现为37℃保存10d,病毒含量下降0.4个滴度,常规疫苗下降2~2.4个滴度;25℃保存30d,病毒含量下降0.4~0.6个滴度,常规疫苗下降1.8~2.6个滴度。证明此保护剂具有良好的耐热效果。 展开更多
关键词 活疫苗 耐热保护剂 热稳定性试验
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一株新型鸭肝炎病毒的分离与鉴定 被引量:2
17
作者 陈生雷 李凤艳 +4 位作者 郭华 边少国 项伟 舒秀伟 苗玉和 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第1期19-23,共5页
从辽宁省某鸭场疑似鸭病毒性肝炎病料中分离到一株病毒,经PCR检测初步鉴定其为鸭肝炎病毒,命名为YK株,应用易感鸭胚和雏鸭进行传代及病毒含量测定,E_1~E_5代鸭胚适应毒病毒含量在10^(6.5)~10^(6.9)ELD_(50)/0.2 m L之间,E2代鸭肝组织毒... 从辽宁省某鸭场疑似鸭病毒性肝炎病料中分离到一株病毒,经PCR检测初步鉴定其为鸭肝炎病毒,命名为YK株,应用易感鸭胚和雏鸭进行传代及病毒含量测定,E_1~E_5代鸭胚适应毒病毒含量在10^(6.5)~10^(6.9)ELD_(50)/0.2 m L之间,E2代鸭肝组织毒病毒含量为10^(6.3)LD_(50)/0.1 m L。动物试验结果表明,YK株鸭胚适应毒E_2代对7日龄雏鸭的致死率高达100%。序列测定分析表明,YK株与DHV-A的VP1基因同源性在71.4%~72.3%之间,与DHV-B的VP1基因同源性在71.9%~72.3%之间,与DHV-C的VP1基因同源性在94.3%~98.8%之间。试验表明,YK株与韩国新型鸭肝炎病毒在同一分支上,属于基因C型DHV。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒 分离 鉴定
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重组禽流感三价灭活疫苗免疫商品肉鸡和蛋鸡效果的研究 被引量:2
18
作者 刘超 陈生雷 +5 位作者 佟晖 曹祁峰 杨淑芳 郑鑫 侯芳芳 舒秀伟 《现代畜牧兽医》 2023年第2期5-8,共4页
研究旨在评价重组禽流感三价灭活疫苗在临床中的效果。将40 000只三黄肉鸡分为A组、B组、C组,A组20 000只,B组19 900只,C组100只。A组与B组分别免疫疫苗A与疫苗B,C组为不免疫对照组。2周龄首免,颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免... 研究旨在评价重组禽流感三价灭活疫苗在临床中的效果。将40 000只三黄肉鸡分为A组、B组、C组,A组20 000只,B组19 900只,C组100只。A组与B组分别免疫疫苗A与疫苗B,C组为不免疫对照组。2周龄首免,颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。20 000只蛋鸡分为D组、E组、F组,D组10 000只,E组9 900只,F组100只。D组与E组分别免疫疫苗A与疫苗B,F组为不免疫对照组。2周龄首免颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。13周龄进行三免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。免疫后进行安全性评价,并于不同时间监测抗体水平。结果显示,免疫后14 d,各组三黄肉鸡和蛋鸡均未出现副反应,且2~3次免疫后,疫苗基本吸收完全。免疫效力试验结果显示,三黄鸡首免2周后HI抗体即可达到5.0以上,3周后可达到完全保护水平;蛋鸡在产蛋高峰前可达到7.5 log2以上,2~3次免疫后抗体即可达到峰值9~10 log2。研究表明,不同厂家疫苗免疫后抗体均可产生100%保护,但抗体水平略有差异。 展开更多
关键词 禽流感 重组禽流感三价灭活疫苗 三黄鸡 蛋鸡
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犬细小病毒的分离鉴定研究 被引量:2
19
作者 李凤艳 陈生雷 +3 位作者 刘艳霞 王一平 王博 舒秀伟 《现代畜牧兽医》 2023年第5期28-31,共4页
试验旨在了解犬细小病毒(CPV)生物学特性,采集辽宁省某养殖场CPV病犬病料,通过分子生物学鉴定、病毒分离、抗性测定、电镜观察、病毒特异性鉴定和动物回归试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究。结果显示,通过PCR扩增可得到390... 试验旨在了解犬细小病毒(CPV)生物学特性,采集辽宁省某养殖场CPV病犬病料,通过分子生物学鉴定、病毒分离、抗性测定、电镜观察、病毒特异性鉴定和动物回归试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究。结果显示,通过PCR扩增可得到390 bp的特异性核酸片段;通过核苷酸序列分析,分离株与GenBank上登录的国内外已发表CPV参考序列的核苷酸序列同源性最高达99.4%;分离株与2009年中国分离株GU452715亲缘关系较近,处于同一分支,属于Subgroup I亚群,为国内分离株,基因型为CPV-2a;分离株可在F81细胞上连续传代,病毒含量可达10^(5.0)TCID_(50)/0.1 mL以上;电镜观察可见圆形、无囊膜、直径约20 nm的典型病毒粒子;病毒特异性鉴定表明分离株为CPV;动物回归试验结果表明,分离株为中等毒力毒株。研究表明,分离毒株为CPV,可在细胞上增殖,研究结果为后续疫苗研发奠定基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离鉴定 生物学特性
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鹅星状病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量:7
20
作者 李阳 刘英姿 +5 位作者 李阁锦 曹祁峰 王家英 舒秀伟 周铁忠 高慎阳 《现代畜牧兽医》 2021年第4期1-4,共4页
为建立一种鉴定鹅星状病毒(GAstV)的RT-PCR方法,试验根据GenBank中GAstV ORF1b基因序列设计1对特异性引物,构建重组质粒pMD18-T-GAstV,以其作为标准品建立GAstV的RT-PCR检测方法。通过对GAstV及其他4种病毒进行检测,优化其反应条件并进... 为建立一种鉴定鹅星状病毒(GAstV)的RT-PCR方法,试验根据GenBank中GAstV ORF1b基因序列设计1对特异性引物,构建重组质粒pMD18-T-GAstV,以其作为标准品建立GAstV的RT-PCR检测方法。通过对GAstV及其他4种病毒进行检测,优化其反应条件并进行特异性、敏感性和重复性试验以及临床样本检测。结果显示,除GAstV外,鹅细小病毒(GPV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、鸡病毒性关节炎(AVAV)、坦布苏病毒(TmuV)等常见禽病病原利用该方法检测均呈阴性,表明其特异性良好;建立的RT-PCR检测方法的最低检出限可达5.5×103,敏感性较高;重复性试验显示其重复性良好。利用该方法对10份人工模拟病料进行检测限LOD分析,阳性样品10倍系列稀释浓度。结果表明,最低检出限可达1.21×103copies/μL。研究表明,成功建立了一种鉴定GAstV的RT-PCR方法,且该方法具有快速、廉价、特异性强、敏感性高和重复性好的优点,可用于GAstV的临床诊断。 展开更多
关键词 鹅星状病毒 RT-PCR ORF1b基因 检测
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