目的探讨慢病毒介导下靶向敲除Napsin A基因对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响,为非小细胞肺癌患者的个体化诊疗提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测74例非小细胞肺癌(鳞状细胞癌和腺癌)组织和细胞中Napsin A mRN...目的探讨慢病毒介导下靶向敲除Napsin A基因对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响,为非小细胞肺癌患者的个体化诊疗提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测74例非小细胞肺癌(鳞状细胞癌和腺癌)组织和细胞中Napsin A mRNA表达水平并进行比较。设计并构建pLent-shRNA-Napsin A和pLent-shRNA-Control重组慢病毒,分别转染人非小细胞肺腺癌/鳞状细胞癌(A549/H1703)细胞株,同时为两类细胞设定空白对照组,分别称为shRNA-Napsin A组、shRNA-Control组和空白对照组。采用CCK-8法、流式细胞仪和Transwell法检测A549和H1703细胞株中各组细胞增殖、凋亡及侵袭能力。结果与癌旁正常组织比较,非小细胞肺腺癌和鳞状细胞癌组织中Napsin A mRNA均明显升高(P﹤0.01);与鳞状细胞癌比较,肺腺癌组织和细胞中Napsin A mRNA均明显升高(P﹤0.01)。在第1天时,A549和H1703细胞株中各组细胞光密度(OD)值、凋亡率及侵袭细胞数比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);第2~5天,A549和H1703细胞株中shRNA-Napsin A组细胞OD值和侵袭细胞数均低于shRNA-Control组和空白对照组(P﹤0.05),凋亡率均高于shRNA-Control组和空白对照组(P﹤0.05);第2~5天,A549细胞株中shRNA-Napsin A组细胞OD值和侵袭细胞数均低于H1703细胞株(P﹤0.05),凋亡率均高于H1703细胞株(P﹤0.05)。结论Napsin A基因在人非小细胞肺鳞状细胞癌和肺腺癌中表达差异明显,且靶向下调Napsin A基因抑制A549细胞增殖、侵袭,促进凋亡能力高于H1703细胞,提示Napsin A基因有望成为非小细胞肺癌患者诊断、鉴别诊断及个体化治疗的重要指标。展开更多
文摘目的探讨慢病毒介导下靶向敲除Napsin A基因对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响,为非小细胞肺癌患者的个体化诊疗提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测74例非小细胞肺癌(鳞状细胞癌和腺癌)组织和细胞中Napsin A mRNA表达水平并进行比较。设计并构建pLent-shRNA-Napsin A和pLent-shRNA-Control重组慢病毒,分别转染人非小细胞肺腺癌/鳞状细胞癌(A549/H1703)细胞株,同时为两类细胞设定空白对照组,分别称为shRNA-Napsin A组、shRNA-Control组和空白对照组。采用CCK-8法、流式细胞仪和Transwell法检测A549和H1703细胞株中各组细胞增殖、凋亡及侵袭能力。结果与癌旁正常组织比较,非小细胞肺腺癌和鳞状细胞癌组织中Napsin A mRNA均明显升高(P﹤0.01);与鳞状细胞癌比较,肺腺癌组织和细胞中Napsin A mRNA均明显升高(P﹤0.01)。在第1天时,A549和H1703细胞株中各组细胞光密度(OD)值、凋亡率及侵袭细胞数比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);第2~5天,A549和H1703细胞株中shRNA-Napsin A组细胞OD值和侵袭细胞数均低于shRNA-Control组和空白对照组(P﹤0.05),凋亡率均高于shRNA-Control组和空白对照组(P﹤0.05);第2~5天,A549细胞株中shRNA-Napsin A组细胞OD值和侵袭细胞数均低于H1703细胞株(P﹤0.05),凋亡率均高于H1703细胞株(P﹤0.05)。结论Napsin A基因在人非小细胞肺鳞状细胞癌和肺腺癌中表达差异明显,且靶向下调Napsin A基因抑制A549细胞增殖、侵袭,促进凋亡能力高于H1703细胞,提示Napsin A基因有望成为非小细胞肺癌患者诊断、鉴别诊断及个体化治疗的重要指标。
