布鲁氏菌疫苗的研究现状 被引量：5

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作者 付莹莹 秦贵信 +6 位作者 钱军 赵思言 郑关雨 孙玉成 万家余 刘文森 刘林娜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期258-261,共4页

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病,该病不仅严重影响畜牧业的健康发展,对人类健康和社会公共卫生安全也存在着很大的威胁。现阶段对动物的主要防制措施为接种疫苗,国内外现已存在多个弱毒活疫苗,每种疫苗均各有利弊,目... 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病,该病不仅严重影响畜牧业的健康发展,对人类健康和社会公共卫生安全也存在着很大的威胁。现阶段对动物的主要防制措施为接种疫苗,国内外现已存在多个弱毒活疫苗,每种疫苗均各有利弊,目前尚无适合人类使用的疫苗,各个实验室也通过基因工程等技术手段来积极研制重组弱毒疫苗、分子标记疫苗、DNA疫苗等新型疫苗,作者现就新型疫苗的研究现状作一综述。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 布鲁氏菌 新型疫苗

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不同处理方法对细菌气溶胶样本基因组DNA回收率的影响 被引量：1

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作者 张毅 王中一 +7 位作者 赵思言 付莹莹 刘丽娜 郭振东 赵宗正 周博 刘林娜 钱军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期827-830,共4页

为分析不同处理方法对空气中细菌气溶胶样本基因组回收率的影响,本研究利用玻璃纤维滤膜采集空气样品中的微生物气溶胶后,针对采样膜的不同处理(钢珠敲打、研磨、MOBIO PowerWater试剂盒)进行DNA提取方法比较,结果表明利用MOBIO PowerWa... 为分析不同处理方法对空气中细菌气溶胶样本基因组回收率的影响,本研究利用玻璃纤维滤膜采集空气样品中的微生物气溶胶后,针对采样膜的不同处理(钢珠敲打、研磨、MOBIO PowerWater试剂盒)进行DNA提取方法比较,结果表明利用MOBIO PowerWater DNA Isolation Kit对采样膜进行基因组DNA的提取能获得高纯度的DNA(OD_(260nm)/OD_(280nm)=1.82);利用荧光定量PCR技术对所回收基因组进行定量分析,验证该处理方法的样品DNA得率最高,达到15.81%。起始模板浓度的对数与对应的CT值成反比且具有极强的线性关系,其线性相关系数R^2为0.9985。本研究将对养殖场等环境空气中病原体气溶胶样本处理具有重要指导意义。 展开更多

关键词 空气微生物 样本处理 qPCR

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重组蓖麻毒素A链表达及其与天然蓖麻毒素毒性比较研究 被引量：1

3

作者 曲英龙 钱爱东 +9 位作者 钱军 计越 郑关雨 郭振东 赵思言 付莹莹 张毅 赵红艳 陈龙 刘林娜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期950-957,共8页

本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链(r-RTA)并与天然蓖麻毒素(n-RT)进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段,并将其克隆于pET-28a载体后,利用大肠杆菌进行原核表达,镍柱亲和层析纯化上清,500mmol/L咪唑溶液洗脱获... 本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链(r-RTA)并与天然蓖麻毒素(n-RT)进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段,并将其克隆于pET-28a载体后,利用大肠杆菌进行原核表达,镍柱亲和层析纯化上清,500mmol/L咪唑溶液洗脱获得可溶性r-RTA蛋白,通过SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定并用ELISA测定其免疫原性后,对r-RTA与n-RT进行动物和细胞试验毒性比较研究。结果显示,该r-RTA在上清中表达率为31.2%;每升细菌培养物纯化后可得20mg目的蛋白,纯度≥90%,大小为32ku。其免疫原性约为n-RT的1.27倍;通过获取的n-RT细胞半抑制浓度(IC50为0.01μg/mL)及动物半数致死量(LD50为(3.27±0.44)μg/kg),以相同浓度进行细胞感染和动物攻毒试验,结果显示,同等剂量下,在细胞试验中,n-RT毒力是r-RTA的2 700倍;在动物试验中,n-RT组对动物致死率为40%,r-RTA组动物无死亡。结果表明,单独RTA,在没有RTB协助下,具有一定的毒性作用,但毒力将显著降低。该结果将为开发基于RTA的蓖麻毒素疫苗提供重要数据和理论支撑。 展开更多

关键词 蓖麻毒素A链(RTA) 原核表达 天然蓖麻毒素(n-RT) 毒性比较

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蓖麻毒素气源性中毒对小鼠免疫屏障的影响

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作者 王蒙 王全凯 +3 位作者 钱军 赵思言 郑关雨 刘林娜 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期479-483,共5页

蓖麻毒素来源广、毒性强、性质稳定,可通过注射、口服、气溶胶等多种方式中毒。为进一步优化蓖麻毒素气溶胶中毒模型,探讨蓖麻毒素气溶胶粒子对气—血屏障、血—胸屏障等免疫屏障的损伤过程,以及实质性免疫器官的病理改变,利用军事医学... 蓖麻毒素来源广、毒性强、性质稳定,可通过注射、口服、气溶胶等多种方式中毒。为进一步优化蓖麻毒素气溶胶中毒模型,探讨蓖麻毒素气溶胶粒子对气—血屏障、血—胸屏障等免疫屏障的损伤过程,以及实质性免疫器官的病理改变,利用军事医学科学院军事兽医研究所五室已经建立的气溶胶暴露系统,对小鼠进行蓖麻毒素气溶胶的暴露,并于气溶胶暴露后12,30,48 h采集小鼠气管、肺脏、胸腺、脾脏制作病理切片,观察病理变化。结果表明:蓖麻毒素气溶胶粒子能够引起间质性肺炎、脾脏及胸腺细胞变性坏死,从而验证吸入蓖麻毒素气溶胶粒子对免疫屏障的强烈损伤。 展开更多

关键词 蓖麻毒素 气溶胶 免疫屏障 病理变化

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基于BP神经网络的血液荧光光谱识别分类研究 被引量：15

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作者 高斌 赵鹏飞 +6 位作者 卢昱欣 范雅 周林华 钱军 刘林娜 赵思言 孔之丰 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第10期3136-3143,共8页

光谱技术在生物和医学检测方面具有积极的应用前景。由于血液成分的复杂性和类同性,有关不同动物血液光谱识别分类的技术研究尚未出现较为完善的结论。基于机器学习理论,以BP神经网络为工具,建立了对不同动物血液荧光光谱进行特征提取... 光谱技术在生物和医学检测方面具有积极的应用前景。由于血液成分的复杂性和类同性,有关不同动物血液光谱识别分类的技术研究尚未出现较为完善的结论。基于机器学习理论,以BP神经网络为工具,建立了对不同动物血液荧光光谱进行特征提取和识别分类的方法。实验采用Cary Eclipse光谱仪分别采集了鸽、鸡、鼠、羊四种动物不同浓度(1%和3%)的全血与红细胞荧光光谱数据(每个类型样本各50组数据);基于移动平滑算法对原始数据进行了平滑处理,以减少实验仪器噪声对特征提取和识别分类的影响;进一步根据血液光谱数据的特性,该文出了"组合放大"的特征提取方法,并建立了BP神经网络分类器进行训练和识别。相比于常用的光谱数据(单一)特征,提出的"组合放大"特征和所设计的BP神经网络能对不同动物、不同类型(全血与红细胞)、不同浓度(1%和3%)的血液荧光光谱实现100%的准确分类,同时神经网络测试误差均远小于设定的允许误差值。研究的动物血液光谱特征提取及识别技术具有较好的普适性和可靠性,在农业、食品检查、以及生物医学检测等方面均可发挥重要作用。 展开更多

关键词 荧光光谱 血液光谱识别 BP神经网络 组合放大法

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支持向量机的动物血液光谱特征提取和识别分类 被引量：6

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作者 卢鹏飞 范雅 +5 位作者 周林华 钱军 刘林娜 赵思言 孔之丰 高斌 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期3828-3832,共5页

利用光谱检测和数据挖掘实现不同种类动物血液光谱数据的精确识别与分类具有重要意义,目前尚未见到较为完善及普适的相关研究报道。实验采集了鸽、鸡、鼠、羊四种动物全血和红细胞溶液(浓度为1%)的荧光光谱数据;基于小波变换的软阈值去... 利用光谱检测和数据挖掘实现不同种类动物血液光谱数据的精确识别与分类具有重要意义,目前尚未见到较为完善及普适的相关研究报道。实验采集了鸽、鸡、鼠、羊四种动物全血和红细胞溶液(浓度为1%)的荧光光谱数据;基于小波变换的软阈值去噪方法,首先对原始光谱数据进行去噪处理,并确定了717个原始特征(包括荧光峰强度值、荧光峰连线斜率等4类特征);提出以"区分度统计量"为核心的特征提取方法,结合主成分分析法和平均影响值算法,实现了对717个原始特征到2个识别特征的高效筛选;进一步建立了径向基核函数的支持向量机分类器,对四类不同动物的全血荧光光谱数据实现了准确率为100%的识别分类,对红细胞荧光光谱数据实现了94.69%~99.12%的识别率;最后蒙特卡洛交叉验证的结果表明所提出的思路和方法对于动物全血溶液的识别分类具有较好的泛化能力,能对荧光光谱数据进行准确的识别分类,因此能够在进出口检查、食品安全、医药等领域发挥重要作用。针对动物血液荧光光谱,提出的基于"区分度统计量"的特征提取方法,相比于传统的人为特征选取方法,能够从大量原始特征中自动提取少量且有效的识别特征,具有较强的普适性和高效性,为其他领域的光谱特征提取和识别分类提供了一种新的思路。 展开更多

关键词 动物血液 荧光光谱 识别分类 特征提取 支持向量机

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驻甘、青、宁某部集体食堂食品安全问题及其预防对策 被引量：3

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作者 把文娟 刘小云 +2 位作者 石胜刚 赵思言 刘勇 《西北民族大学学报（自然科学版）》 2018年第3期89-91,共3页

目的:调查某部集体食堂卫生现况,为改善部队食堂卫生提供科学依据.方法:对驻甘、青、宁某部集体食堂卫生现状进行调查.结果:此次共检查了80个集体食堂.存在的主要食堂卫生问题有:(1)卫生制度落实不严.(2)功能间布局不合理.(3)食品贮存... 目的:调查某部集体食堂卫生现况,为改善部队食堂卫生提供科学依据.方法:对驻甘、青、宁某部集体食堂卫生现状进行调查.结果:此次共检查了80个集体食堂.存在的主要食堂卫生问题有:(1)卫生制度落实不严.(2)功能间布局不合理.(3)食品贮存环节不合理.(4)加工用具存在交叉污染,加工顺序不合理.(5)部分设施不能正常运转.(6)餐具抽检合格率不高.整改对策有:(1)严格卫生制度落实.(2)加大预防性监督力度.(3)加强炊管人员的卫生培训.(4)注重基层卫生监督的工作开展.结论:层出不穷的食品卫生与安全事件给卫生监督执法工作带来新的机遇与挑战,而加大预防性监督力度,是有效预防和控制食物中毒等食品卫生与安全事件发生的重要措施. 展开更多

关键词 集体食堂 食品安全 预防对策

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生物光谱技术在病原微生物检测中的应用进展 被引量：9

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作者 郭振东 赵思言 +7 位作者 张毅 付莹莹 赵红艳 曲英龙 王中一 赵宗正 钱军 刘林娜 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期311-315,共5页

病原微生物检测一直是微生物学研究领域的热点,常规检测方法,如分离培养、PCR、ELISA和基因组测序等,样品前处理复杂,耗时较长,不利于现场和实时在线检测。光谱技术因具有快速准确、安全高效、非破坏性和便于在线侦检等特点,成为一种新... 病原微生物检测一直是微生物学研究领域的热点,常规检测方法,如分离培养、PCR、ELISA和基因组测序等,样品前处理复杂,耗时较长,不利于现场和实时在线检测。光谱技术因具有快速准确、安全高效、非破坏性和便于在线侦检等特点,成为一种新型无创检测技术,在病原微生物检测、疾病诊断等领域得到迅速发展。该文就3种常用的光谱技术,即激光激发荧光光谱、红外光谱和拉曼光谱在病原微生物检测中的工作原理、研究进展作一综述,讨论各自优缺点,并展望其应用前景。 展开更多

关键词 病原微生物 光谱法 荧光 红外光谱 光谱分析 拉曼 检测技术

原文传递

埃博拉病毒生物学特性研究进展 被引量：2

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作者 张毅 曲英龙 +7 位作者 郭振东 赵思言 付莹莹 赵红艳 王中一 赵宗正 刘林娜 钱军 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期386-389,共4页

埃博拉病毒病是一种能够引发埃博拉出血热的人畜共患烈性传染病。2014年蔓延西非三国的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)已经成为全球性公共卫生新的重大威胁。该文综述了EBOV的结构特征、传播特点、作用方式、动物模型等方面的研究进展,... 埃博拉病毒病是一种能够引发埃博拉出血热的人畜共患烈性传染病。2014年蔓延西非三国的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)已经成为全球性公共卫生新的重大威胁。该文综述了EBOV的结构特征、传播特点、作用方式、动物模型等方面的研究进展,旨在对EBOV生物学特性的全面了解及针对该病新型疫苗和抗病毒药物的研制奠定基础。 展开更多

关键词 埃博拉病毒病 埃博拉病毒 生物学特性

原文传递

蓖麻毒素对原代培养小鼠肺泡上皮细胞的影响 被引量：1

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作者 王蒙 钱军 +7 位作者 穆成龙 赵思言 郑关雨 付莹莹 孙玉成 万家余 刘文森 刘林娜 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第8期1113-1116,共4页

目的探讨蓖麻毒素气源性中毒中的肺损伤机制。方法取BALB/c雌性小鼠,采用心脏灌注排血、胶原酶和胰蛋白酶原位消化法及组织块细胞迁出培养法,分离培养小鼠肺泡上皮细胞,经刮除法及差相消化贴壁法纯化小鼠肺泡上皮细胞,通过兔抗鼠角蛋白... 目的探讨蓖麻毒素气源性中毒中的肺损伤机制。方法取BALB/c雌性小鼠,采用心脏灌注排血、胶原酶和胰蛋白酶原位消化法及组织块细胞迁出培养法,分离培养小鼠肺泡上皮细胞,经刮除法及差相消化贴壁法纯化小鼠肺泡上皮细胞,通过兔抗鼠角蛋白单克隆抗体细胞爬片组化染色法对细胞进行纯度鉴定;经不同终浓度的蓖麻毒素(0、0.000 1、0.001、0.01、0.1、1、10、100μg/ml)处理细胞进行毒性分析;倒置显微镜下观察0.05μg/ml蓖麻毒素对细胞的毒性作用。结果获得的小鼠肺泡上皮细胞纯度达90%以上;随着蓖麻毒素浓度的增加,细胞活力降低,蓖麻毒素浓度与肺泡上皮细胞增殖抑制呈正相关;0.05μg/ml的蓖麻毒素即可引起细胞皱缩、空泡化变性。结论蓖麻毒素可引起原代培养肺泡上皮细胞变性损伤,损伤程度随蓖麻毒素浓度增高而加重,为蓖麻毒素气源性中毒中的肺损伤机制提供了理论依据,同时为进一步探讨蓖麻毒素的毒理作用提供了新的思路。 展开更多

关键词 蓖麻毒素 肺泡细胞 气源性中毒 培养

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重组蓖麻毒素A链与天然蓖麻毒素毒性与免疫效果比较

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作者 曲英龙 钱军 +3 位作者 郭振东 赵思言 钱爱东 刘林娜 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期719-725,共7页

为比较分析重组蓖麻毒素A链(r-RTA)、重组突变蓖麻毒素A链(m-RTA)和天然蓖麻毒素(n-RT)毒性及免疫效果。在鼠巨噬细胞(RAW264.7)试验中,n-RT毒力约是m-RTA与r-RTA的2 700倍。腹腔注射免疫无佐剂的r-RTA、m-RTA和n-RT,免疫过程中小鼠体... 为比较分析重组蓖麻毒素A链(r-RTA)、重组突变蓖麻毒素A链(m-RTA)和天然蓖麻毒素(n-RT)毒性及免疫效果。在鼠巨噬细胞(RAW264.7)试验中,n-RT毒力约是m-RTA与r-RTA的2 700倍。腹腔注射免疫无佐剂的r-RTA、m-RTA和n-RT,免疫过程中小鼠体重均有所减轻,相较于r-RTA组和n-RT组,m-RTA组小鼠体重变化最小。间接酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示:4次免疫以后血清抗体效价均达到10-4以上,以6 mg/kg m-RTA免疫小鼠可对20×LD50剂量蓖麻毒素提供完全保护。该结果表明r-RTA、m-RTA和nRT对小鼠均有一定毒性,m-RTA对小鼠刺激小,免疫鼠可获得较好的免疫保护。 展开更多

关键词 重组 突变 蓖麻毒素 免疫效果

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