截形苜蓿液泡膜H^＋ -PPase基因克隆与序列分析 被引量：10

1

作者 王建武 沈裕虎 +1 位作者 王沛 王海庆 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期435-442,共8页

采用EST电子克隆技术,以拟南芥AVP1基因cDNA序列为信息探针,在GenBank中对豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)的同源EST序列进行查询比较和拼接,获得了1个完整的cDNA序列跨叠群(con-tig),并通过RT-PCR成功获得了该cDNA序列,将... 采用EST电子克隆技术,以拟南芥AVP1基因cDNA序列为信息探针,在GenBank中对豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)的同源EST序列进行查询比较和拼接,获得了1个完整的cDNA序列跨叠群(con-tig),并通过RT-PCR成功获得了该cDNA序列,将其命名为MtVP1.该序列包含1个2 298 bp的最大读码框,编码765个氨基酸.MtVP1编码的氨基酸序列与来自绿豆、拟南芥等高等植物的Ⅰ类液泡膜H+-PPase的氨基酸序列的一致性高达84%~93%,疏水性分析和结构预测表明MtVP1编码蛋白是一个典型的膜蛋白,含有13个跨膜区,含有3个在液泡膜H+-PPase中高度保守的区域(CS1、CS2和CS3).从结构分析结果推测MtVP1与AVP1在功能上具有相似性. 展开更多

关键词 液泡膜H+-ppase 截形苜蓿 电子克隆

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刚毛柽柳液泡膜H^+-PPase基因的克隆与胁迫下的表达分析 被引量：4

2

作者 张春蕊 贾园园 +3 位作者 王艳敏 王玉成 杨传平 王超 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期881-887,共7页

通过对刚毛柽柳转录组分析,鉴定获得1个液泡膜H^+-PPase基因的cDNA序列,命名为ThVP1。该cDNA序列全长3 022bp,开放阅读框为2 298bp,编码765个氨基酸,编码蛋白相对分子质量80.37kD,理论等电点5.25。ThVP1编码蛋白的疏水性较强,含有13个... 通过对刚毛柽柳转录组分析,鉴定获得1个液泡膜H^+-PPase基因的cDNA序列,命名为ThVP1。该cDNA序列全长3 022bp,开放阅读框为2 298bp,编码765个氨基酸,编码蛋白相对分子质量80.37kD,理论等电点5.25。ThVP1编码蛋白的疏水性较强,含有13个跨膜区。氨基酸多序列比对结果显示,ThVP1具有典型的液泡膜H^+-PPase家族3个高度保守片段(CS1、CS2和CS3),与大豆VP1氨基酸序列一致性最高,为93%。系统进化分析表明,ThVP1属于I型液泡膜H^+-PPase基因。实时荧光定量RT-PCR分析显示,NaCl和PEG胁迫下,ThVP1在柽柳根和叶中均呈现明显上调表达,表达量最高达到对照的20.9倍,暗示ThVP1可能在刚毛柽柳抗旱耐盐过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 刚毛柽柳 液泡膜H^+-ppase 胁迫响应 基因表达

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过表达截形苜蓿液泡膜H^+-PPase基因促进拟南芥的生长和根围酸化

3

作者 王建武 相微微 《山西农业科学》 2016年第7期907-909,917,共4页

在前期研究工作中,中国科学研究院西北高原生物研究所分子实验室已从豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)中克隆到一种液泡膜焦磷酸酶(V-H^+-PPase)基因Mt VP1,并进行了序列分析。在前期工作的基础上,构建植物表达载体pBI121-Mt ... 在前期研究工作中,中国科学研究院西北高原生物研究所分子实验室已从豆科模式植物截形苜蓿(Medicago truncatula)中克隆到一种液泡膜焦磷酸酶(V-H^+-PPase)基因Mt VP1,并进行了序列分析。在前期工作的基础上,构建植物表达载体pBI121-Mt VP1,把Mt VP1基因转入到拟南芥中,观察转基因拟南芥的表型变化。结果表明,过表达Mt VP1能使转基因株系的根系更发达,主根数增多1~2条,地上部生物量增大,并且促进了转基因株系的根围酸化能力;但幼苗耐盐性试验表明,转基因株系与对照没有明显差异。 展开更多

关键词 液泡膜H+-ppase 根发育 根围酸化 耐盐性

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植物液泡膜H^+-ATPase和H^+-PPase 研究进展 被引量：2

4

作者 梁桂红 华营鹏 +2 位作者 周婷 宋海星 张振华 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期19-27,共9页

植物液泡膜ATP酶(H^+-ATPase)和液泡膜焦磷酸酶(H^+-PPase)是液泡膜上两个含量丰富的蛋白,其功能的正常发挥在植物生长发育过程中扮演着重要角色。液泡膜H^+-ATPase和H^+-PPase水解底物释放能量,同时产生大量H^+由胞质泵入液泡内,形成... 植物液泡膜ATP酶(H^+-ATPase)和液泡膜焦磷酸酶(H^+-PPase)是液泡膜上两个含量丰富的蛋白,其功能的正常发挥在植物生长发育过程中扮演着重要角色。液泡膜H^+-ATPase和H^+-PPase水解底物释放能量,同时产生大量H^+由胞质泵入液泡内,形成细胞质与液泡间的H^+电化学势梯度,为多种溶质分子的跨膜主动运输提供驱动力,维持细胞内的离子稳态和渗透平衡,为细胞内各种生理生化反应的正常运行提供保障。此外,液泡作为植物细胞离子养分的储存库,其膜上H^+-ATPase和H^+-PPase能够通过改变其活性来调控硝酸盐在胞质和液泡间的分配比例,进而影响植物的氮素利用效率。在逆境胁迫条件下,提高液泡膜H^+-ATPase和H^+-PPase的活性有利于提高植株对逆境的适应能力,从而减少逆境胁迫对植株生长发育造成的不利影响。介绍了植物液泡膜H^+-ATPase和H^+-PPase的结构特征及其在植物生长发育过程中的生理功能,并对其在植物抵御非生物逆境胁迫过程中发挥的重要作用进行阐述,为进一步提高作物的氮素利用率及逆境适应能力提供方向。 展开更多

关键词 液泡 液泡膜H^+-ATPASE 液泡膜H^+-ppase 硝酸盐 非生物胁迫

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植物中液泡膜H^+-PPase的研究进展

5

作者 李想 《现代农业科技》 2013年第23期105-105,107,共2页

液泡膜H+-PPase是一种广泛存在于很多生物体内的H+转运酶,主要介绍近年来该酶在植物抗逆性以及植物生长的调节作用上的研究进展。

关键词 液泡膜H+-ppase 植物抗逆性 植物生长激素 糖异生

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根系限制对番茄幼苗生长、根系呼吸、ATPase和PPase活性的影响 被引量：10

6

作者 师恺 胡文海 +5 位作者 董德坤 Ogweno Joshua Otieno 宋兴舜 夏晓剑 周艳虹 喻景权 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期853-855,共3页

采用营养液水培的方式,研究了根系限制处理对番茄幼苗生长、根系呼吸、质膜和液泡膜上相关酶以及根尖细胞超微结构的影响。结果表明,在处理初期,根系限制促进了番茄幼苗根系细胞色素途径呼吸而抑制了交替途径呼吸;而在后期,根系限制处... 采用营养液水培的方式,研究了根系限制处理对番茄幼苗生长、根系呼吸、质膜和液泡膜上相关酶以及根尖细胞超微结构的影响。结果表明,在处理初期,根系限制促进了番茄幼苗根系细胞色素途径呼吸而抑制了交替途径呼吸;而在后期,根系限制处理显著地抑制了番茄植株的生长,对根系的生长抑制更为明显,且抑制过程伴随着根系总呼吸、细胞色素途径呼吸的降低。此外,根系限制显著抑制了质膜H+-ATPase,液泡膜H+-ATPase和H+-PPase的活性并导致根尖细胞核的解体。 展开更多

关键词 番茄 根系限制 根系呼吸 质膜H^+-ATPASE 液泡膜H^+-ATPASE 液泡膜H^+-ppase

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过表达截形苜蓿液泡膜H^+-PPase基因提高马铃薯的抗旱性 被引量：2

7

作者 王建武 相微微 亢福仁 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1500-1506,共7页

本研究以过表达截形苜蓿类型ⅠH^+-焦磷酸酶编码基因MtVP1的转基因马铃薯为材料,对其抗旱性进行了检测。结果显示:(1)在正常生长条件下,与野生型植株相比,两个转基因株系的叶片相对含水量、叶绿素含量、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性... 本研究以过表达截形苜蓿类型ⅠH^+-焦磷酸酶编码基因MtVP1的转基因马铃薯为材料,对其抗旱性进行了检测。结果显示:(1)在正常生长条件下,与野生型植株相比,两个转基因株系的叶片相对含水量、叶绿素含量、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性差异均不显著,而脯氨酸含量均高于野生型植株,其中OE2株系脯氨酸含量显著高于野生型植株。随着干旱胁迫的持续,两个转基因株系的叶片相对含水量、叶绿素含量的下降趋势平缓,其含量均显著高于野生型对照,且两个转基因株系的脯氨酸含量和SOD活性显著高于野生型对照,而转基因株系的MDA含量显著低于野生型植株。(2)转MtVP1马铃薯表现出表皮毛增多的新表型,茎和叶表面的表皮毛明显比野生型植株多。以上结果表明,Mt VP1基因的过表达提高了马铃薯的渗透调节能力,从而增强了马铃薯的抗旱性;还表明植物类型ⅠH^+-焦磷酸酶基因可能参与调控其他的代谢通路,具有更复杂的生理功能。 展开更多

关键词 液泡膜H+-ppase MtVP1基因 马铃薯 抗旱性

原文传递

农杆菌介导AVP1基因转化甜菜 被引量：5

8

作者 王晓娇 孙亚卿 +2 位作者 李国龙 温丽 张少英 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第3期370-375,共6页

甜菜是我国重要的糖料作物之一。为了提高甜菜含糖量和产量,增强其抗逆性,本研究应用植物基因工程手段对甜菜进行遗传改良。实验以甜菜DF1031品系为受体材料,利用农杆菌介导法将AVP1基因转入甜菜子叶节,获得转基因植株。研究了菌液侵染... 甜菜是我国重要的糖料作物之一。为了提高甜菜含糖量和产量,增强其抗逆性,本研究应用植物基因工程手段对甜菜进行遗传改良。实验以甜菜DF1031品系为受体材料,利用农杆菌介导法将AVP1基因转入甜菜子叶节,获得转基因植株。研究了菌液侵染浓度、侵染时间、共培养时间、抗生素羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)以及筛选剂卡那霉素(Kan)等因素对遗传转化效率的影响,优化了甜菜的遗传转化体系。结果表明:菌液浓度0.4～0.5,侵染时间6～8min,共培养时间36～48h,Cef浓度500mg/L,卡那霉素(Kan)浓度100mg/L时得到较高转化率(11.3%),获抗性植株72株,检测到阳性植物37株,阳性率51.4%。 展开更多

关键词 甜菜 液泡膜H+-ppase 农杆菌介导 遗传转化

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费尔干猪毛菜液泡膜氢离子焦磷酸酶基因SfVP的克隆、序列分析及表达 被引量：3

9

作者 贺怡 钱雯婕 +4 位作者 袁磊 李榕 谭兰 谢全亮 李鸿彬 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第3期319-324,共6页

植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因... 植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因SfVP,该基因的cDNA全长2738 bp,包含1个2301 bp的完整开放读码框(ORF),编码766个氨基酸的多肽。氨基酸序列分析表明其属于H+-转运无机焦磷酸酶超家族成员,具有典型的H+-PPase结构域,其疏水性较强,含有12个跨膜螺旋结构。SfVP序列比对显示具有H+-PPase的3个保守序列CS1、CS2和CS3,其中CS1中含有保守的底物催化位点,与烟草的NtVP氨基酸序列相似性为95.3%。半定量RT-PCR结果表明,SfVP的转录表达丰度随着600 mmol/L NaCl处理时间的增加而升高,处理12 h后显著增加并一直维持在较高水平。 展开更多

关键词 费尔干猪毛菜 液泡膜氢离子焦磷酸酶 RACE 盐响应表达

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怀地黄液泡质子泵焦磷酸水解酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量：4

10

作者 周延清 张永华 +5 位作者 陈艳梅 张喻 李静云 陈娟娟 白妍妍 魏海方 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第3期107-111,114,共6页

为了克隆地黄功能基因,根据NCBI GenBank核酸数据库中5种已知植物生长素诱导的器官膨大基因(ARGOS)碱基序列的保守区,利用CLUSTAL 2.1和DNAMAN 4.0软件设计简并引物,采用RT-PCR技术扩增出一个cDNA片段,测序表明,获得基因cDNA片段序列长... 为了克隆地黄功能基因,根据NCBI GenBank核酸数据库中5种已知植物生长素诱导的器官膨大基因(ARGOS)碱基序列的保守区,利用CLUSTAL 2.1和DNAMAN 4.0软件设计简并引物,采用RT-PCR技术扩增出一个cDNA片段,测序表明,获得基因cDNA片段序列长度为495bp。经过NCBI数据库BLAST分析,发现它与莲花、蓖麻、烟草、苜蓿、葡萄、碧桃、灰绿藜7种植物的液泡膜质子泵焦磷酸水解酶基因同源性很高,在83%～86%,因此获得的基因是地黄液泡膜质子泵焦磷酸水解酶基因。 展开更多

关键词 怀地黄 液泡质子泵焦磷酸水解酶 基因克隆 cDNA末端快速扩增技术 生物信息学分析

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植物液泡膜H+-PPase在耐盐性调控中的作用 被引量：2

11

作者 张会龙 赵健宇 +2 位作者 武海雯 杨秀艳 张华新 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期247-253,共7页

液泡膜上的质子泵在实现液泡多种生理功能中起着关键作用,其中植物液泡膜质子焦磷酸酶(H^(+)-pyrophosphatase,H^(+)-PPase)能够通过水解无机焦磷酸(inorganic pyrophosphate,PPi)以维持胞内PPi稳态。液泡膜H^(+)-PPase将质子转移到液... 液泡膜上的质子泵在实现液泡多种生理功能中起着关键作用,其中植物液泡膜质子焦磷酸酶(H^(+)-pyrophosphatase,H^(+)-PPase)能够通过水解无机焦磷酸(inorganic pyrophosphate,PPi)以维持胞内PPi稳态。液泡膜H^(+)-PPase将质子转移到液泡中以维持液泡腔的酸度,为其他转运蛋白提供质子驱动力,进而广泛参与植物生长发育和逆境胁迫响应过程。本文综述了近年来植物液泡膜H^(+)-PPase的结构、分类以及功能研究进展,并重点介绍了植物液泡膜H^(+)-PPase在植物抵御盐胁迫中的作用。 展开更多

关键词 液泡膜H^(+)-ppase 逆境胁迫 耐盐性 离子平衡

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