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A study of the relationship between expression level of TRF1 protein and telomerase activity in human acute leukemia 被引量:4
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作者 施继敏 黄河 +1 位作者 陈巧芳 林茂芳 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2006年第2期154-158,共5页
Objective: To study the expression level of TRF1 (telomeric repeat binding factor 1) protein in human acute leukemia and relationship between expression level of TRF1 protein and telomerase, Methods: A quantitativ... Objective: To study the expression level of TRF1 (telomeric repeat binding factor 1) protein in human acute leukemia and relationship between expression level of TRF1 protein and telomerase, Methods: A quantitative Western±Blot technique was developed using anti±TRF1^33±277 monoclonal antibody and GST±TRFI purity protein as a standard to further determine the expression level of TRF1 protein in total proteins extracted from clinical specimens. Results: Bone marrow tissues of 20 acute leukemia patients were studied, 11 healthy donors' bone marrows were taken as a control. The expression level of TRF1 protein was significantly higher (P〈0.01) in normal bone marrow ((2.2174±0.462) μg/μl) than that of acute leukemia patients ((0.7544±0.343) μg/μl), But there was no remarkable difference between ALL and ANLL patients ((0.6184±0.285) μg/μl vs (0.8454±0.359) μg/μl, P〉0.05). After chemotherapy, TRFI expression level of patients with complete remission elevated ((0.7724±0.307)/μg/μl vs (1.6834±0,344)μg/μl, P〈0.01 ), but lower than that of normal ((2.2174±0.462)/μg/μl, P〈0.01). There was no significantly difference after chemotherapy ((0.7264±0.411) μg/μl vs (0.895±0.339) μg/μl,p〉0.05). TRF1 expression level of patients with complete remission is higher than that of patients without complete remission ((1,683±0.344)μg/μl vs (0.895±0.339)μg/μl P〈0.01). All samples were determined for telomerase activity. It was confirmed that the activity of telomerase in normal bone marrow was lower than that of acute leukemia patients ((0.125±0.078) μg/μl vs (0.765±0.284)μg/μl, P〈0.01). There was no significant difference of expression level ofTRF I protein between ALL and ANLL patients ((0.897±0.290) μg/μl vs (0.677±0.268) μg/μl, P〉0.05). After chemotherapy, telomerase activity of patients with complete remission decreased ((0.393±0.125) μg/μl), but was still higher than that of normal ((0.125±0.078) μg/μl, P〈0.01). Conclusion: The expression level of TRF1 protein has correlativity to the activity of telomerase (P〈0.001). 展开更多
关键词 Acute leukemia (AL) human telomeric repeat binding factor protein 1 (TRFI) Monoclonal antibody Expression level of TRF1 protein telomerase activity
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Immunolocalization assessment of metastasis-associated protein I in human and mouse mature testes and its association with spermatogenesis 被引量:3
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作者 Wei Li Xin-Ping Liu +1 位作者 Ruo-Jun Xu Yuan-Qiang Zhang 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期345-352,共8页
Aim: To investigate the stage-specific localization of metastasis-associated protein 1 (MTA1) during spermatogenesis in adult human and mouse testis. Methods: The immunolocalization of MTA1 was studied by immunohi... Aim: To investigate the stage-specific localization of metastasis-associated protein 1 (MTA1) during spermatogenesis in adult human and mouse testis. Methods: The immunolocalization of MTA1 was studied by immunohistochemistry and Western blot analysis. The distribution pattern of MTA1 in mouse testis was confirmed by using quantitative analysis of purified spermatogenic cells. Results: The specificity of polyclonal antibody was confirmed by Western blot analysis. MTA1 was found expressed in the nucleus of germ cells, except elongate spermatids, and in the cytoplasm of Sertoli cells; Leydig cells did not show any specific reactivity. MTA1 possessed different distribution patterns in the two species: in humans, the most intensive staining was found in the nucleus of round spermatids and of primary spermatocytes while in mice, the most intense MTA 1 staining was in the nucleus of leptotene, zygotene and pachytene spermatocytes. In both species the staining exhibited a cyclic pattern. Conclusion: The present communication initially provides new evidence for the potential role of MTA1 in mature testis. In addition, its distinctive expression in germ cells suggests a regulatory role of the peptide during spermatogenesis. 展开更多
关键词 human metastasis-associated proteinl mouse metastasis-associated protein 1 SPERMATOGENESIS nuclear remodeling anddeacetylation complex chromatin remodeling spermiogenesis deacetylation
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AGL患者端粒酶亚单位hTERT、hTEP1的表达
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作者 陈凤花 胡丽华 +1 位作者 李一荣 王琳 《临床输血与检验》 CAS 2003年第4期251-252,共2页
目的 检测急性粒细胞性白血病 ( AGL)患者端粒酶亚单位 -人端粒酶逆转录酶 ( h TERT)和端粒酶相关蛋白1 ( h TEP1 )的表达情况 ,并观察不同的亚单位在 AGL发病中的作用。方法 采用 RT-PCR法检测 3 1例 AGL首治患者、2 4例 AGL复发患者... 目的 检测急性粒细胞性白血病 ( AGL)患者端粒酶亚单位 -人端粒酶逆转录酶 ( h TERT)和端粒酶相关蛋白1 ( h TEP1 )的表达情况 ,并观察不同的亚单位在 AGL发病中的作用。方法 采用 RT-PCR法检测 3 1例 AGL首治患者、2 4例 AGL复发患者、2 1例 AGL完全缓解期患者以及 1 8例健康体检者外周血白细胞端粒酶亚单位 h TERT,h TEP1 m R-NA。结果  AGL首治患者、AGL复发患者、AGL完全缓解期患者以及健康体检者 h TERT m RNA的阳性率分别为 80 .6%、83 .3 %、9.5 %和 5 .6%。所有标本 h TEP1 m RNA的阳性率为 1 0 0 .0 %。结论 与 h TEP1比较 ,h TERT表达的上调在AGL的发生与复发中具有更重要的作用 ,而且可用于监测治疗是否有效以及治疗后是否复发。 展开更多
关键词 急性粒细胞性白血病 端粒酶亚单位 HTERT htepl RT-PCR法 复发
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外周血sFIt-1、β-hCG、PAPP-A、AFP的表达与早发型子痫前期的关系 被引量:17
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作者 杜娟 朱一麟 +1 位作者 高雪梅 贺漪 《疑难病杂志》 CAS 2016年第4期394-397,共4页
目的探讨外周血可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFIt-1)、人绒毛膜促性腺激素(β—hCG)、孕早期妊娠相关蛋白A(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)的表达与早发型子痫前期(PE)的相关性。方法选取2014年10月—2015年10月武汉市第一医院收治的PE患者84... 目的探讨外周血可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFIt-1)、人绒毛膜促性腺激素(β—hCG)、孕早期妊娠相关蛋白A(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)的表达与早发型子痫前期(PE)的相关性。方法选取2014年10月—2015年10月武汉市第一医院收治的PE患者84例,其中早发型48例,迟发型36例。选择同期正常妊娠妇女80例为对照组。应用ELISA法测定所有研究对象外周血sFIt-1、β—hCG、PAPP—A、AFP水平,应用受试者特异性曲线(ROC)分析sFIt—1、β-hCG、PAPP-A、AFP对早发型子痫前期的诊断价值。结果早发型组PE患者外周血sFIt—1、β—hCG、PAPP—A、AFP水平均高于对照组(t=9.236、10.422、11.986、14.785,P<0.05),早发型组sFIt—1、PAPP—A、AFP水平高于迟发型组(t=9.236、7.458、10.252,P<0.05),而迟发型组外周血sFIt—1、PAPP-A、AFP与对照组比较差异无统计学意义(t=0.785、0.902、0.525,P>0.05)。早发型组重度PE外周血sFIt-1、β-hCG、PAPP-A、AFP水平均高于轻度患者(t=6.271、31.680、3.449、5.045,P<0.05),而迟发型组重度患者外周血sFIt-1、PAPP—A、AFP水平与轻度患者比较差异无统计学意义(t=0.598、0.230、0.437,P>0.05),而β-hCG比较差异有统计学意义(t=6.043,P<0.05)。经ROC分析可知,sFIt-1+β-hCG+PAPP—A+AFP联合诊断早发型PE的灵敏度及特异度高于单一指标检测。结论外周血sFIt-1、β—hCG、PAPP-A、AFP水平与早发型PE发生发展有密切的关系,早发型与晚发型PE可能存在不同的发病机制。通过联合应用多种指标诊断可提高早发型子痫前期患者诊断灵敏度。 展开更多
关键词 可溶性血管内皮生长因子受体-1 人绒毛膜促性腺激素 孕早期妊娠相关蛋白A 甲胎蛋白 早发型子痫前期
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EBV LMP1通过诱导c-myc表达活化端粒酶hTERT 被引量:4
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作者 杨静 邓锡云 +4 位作者 邓琳 丁琳 顾焕华 易薇 曹亚 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期240-244,共5页
利用原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1HNE2等良好的细胞体系,采用报道基因法和Westernblot法等,分别检测Epstein Barr病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)诱导的c myc反式激活活性和蛋白表达水平,从LMP1诱导细胞内c myc表达的角度,探讨LMP1诱... 利用原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1HNE2等良好的细胞体系,采用报道基因法和Westernblot法等,分别检测Epstein Barr病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)诱导的c myc反式激活活性和蛋白表达水平,从LMP1诱导细胞内c myc表达的角度,探讨LMP1诱导端粒酶表达的分子机制。结果表明,LMP1促使细胞内c myc反式激活活性增强,c Myc蛋白表达量升高;导入反义LMP1表达质粒阻断LMP1表达后,c myc反式激活活性下降。将端粒酶hTERT启动子上c myc结合位点突变后,LMP1不能诱导端粒酶hTERT表达。因而认为,EB病毒LMP1通过诱导c myc表达而活化端粒酶hTERT。 展开更多
关键词 端粒酶 潜伏膜蛋白1 鼻咽癌 EB病毒
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RAD51相关蛋白1在宫颈癌组织中的表达及通过TGF-β/Smad通路参与调控人宫颈癌细胞的增殖和凋亡 被引量:3
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作者 梁殿迅 王秋宇 +5 位作者 姜平 李和丽 朱军义 许静 郭哲 孙慧霞 《解剖学杂志》 CAS 2022年第5期417-421,477,共6页
目的:探讨RAD51相关蛋白1(RAD51AP1)通过调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人宫颈癌细胞(SiHa)增殖和凋亡的影响。方法:收集2018年7月至2021年3月间南阳市中心医院51例宫颈癌组织与癌旁组织标本,免疫组织化学法检测宫颈癌组织R... 目的:探讨RAD51相关蛋白1(RAD51AP1)通过调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人宫颈癌细胞(SiHa)增殖和凋亡的影响。方法:收集2018年7月至2021年3月间南阳市中心医院51例宫颈癌组织与癌旁组织标本,免疫组织化学法检测宫颈癌组织RAD51AP1蛋白表达。筛选RAD51AP1高表达宫颈癌细胞系,体外培养SiHa细胞,分为对照组、si-RAD51AP1组(转染si-RAD51AP1质粒)、si-NC组(转染si-NC质粒)、抑制剂组(TGF-β/Smad通路抑制剂LY2109761)、si-RAD51AP1+激活剂组(转染si-RAD51AP1质粒+TGF-β/Smad通路激活剂人重组TGF-β1)。采用MTT法与平板克隆形成实验检测各组SiHa细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR法检测细胞中RAD51AP1、TGF-β1 mRNA水平;免疫印迹检测细胞中RAD51AP1蛋白、TGF-β/Smad通路相关蛋白及增殖、凋亡相关蛋白表达。结果:RAD51AP1在宫颈癌组织与SiHa细胞系中均显著高表达;抑制RAD51AP1表达或抑制TGF-β/Smad通路后,细胞增殖活性、细胞克隆形成率及cyclin D1、TGF-β1、p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达水平显著减低,细胞凋亡率、Bax、caspase-3、cleaved caspase 3蛋白表达水平显著升高,而抑制RAD51AP1表达基础上使用TGF-β/Smad通路激活剂后,可部分逆转上述变化。结论:RAD51AP1在宫颈癌中表达上调,抑制RAD51AP1表达可通过抑制TGF-β/Smad通路而抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 人宫颈癌细胞 RAD51相关蛋白1 转化生长因子β/Smad信号通路 增殖 凋亡
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AngⅡ对人脐动脉平滑肌细胞PAPP-A、IGF-1 mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 查政 张清华 +3 位作者 蒋知新 陈玲 林虎 梁雪梅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期195-198,共4页
目的探讨血管紧张素II(AngII)对人脐动脉平滑肌细胞妊娠相关蛋白-A(PAPP-A)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA表达的影响。方法(1)应用10-5mol/LAngII与人脐动脉平滑肌细胞及在Ox-LDL中刺激过的人脐动脉平滑肌细胞共同培养0、6、12、24... 目的探讨血管紧张素II(AngII)对人脐动脉平滑肌细胞妊娠相关蛋白-A(PAPP-A)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA表达的影响。方法(1)应用10-5mol/LAngII与人脐动脉平滑肌细胞及在Ox-LDL中刺激过的人脐动脉平滑肌细胞共同培养0、6、12、24、36、48h后收集细胞。(2)应用不同浓度的AngII(10-7、10-6、10-5、10-4mol/L)与上述两种细胞共同培养24h后收集细胞。(3)应用RT-PCR方法检测细胞内PAPP-A、IGF-1mRNA的表达量。结果在浓度为10-5mol/L的AngII作用下,PAPP-A、IGF-1表达量在12h时开始升高(P<0.05),24h左右达高峰(P<0.01),而后表达量无进一步上升(P>0.05)。在不同浓度AngII刺激下,PAPP-A、IGF-1表达量随着浓度的升高而增加(P<0.05),10-5mol/L时达高峰(P<0.01),进一步加大浓度表达量无进一步升高(P>0.05)。Ox-LDL刺激过的细胞不同时间点以及不同AngII浓度下表达量明显高于同一时间及同一浓度时未刺激细胞的表达量(P<0.05)。结论在一定的作用时间和浓度范围内,AngII呈浓度和时间依赖性升高PAPP-A、IGF-1,从而影响动脉粥样硬化斑块的稳定性而导致急性冠脉综合症的形成,Ox-LDL可以促进这种作用。 展开更多
关键词 人脐动脉平滑肌细胞 急性冠脉综合征 血管紧张素Ⅱ 妊娠相关蛋白-A 胰岛素样生长因子-1
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血清sST2、CTRP1与脓毒症患者病情的关系及预后影响因素分析 被引量:9
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作者 陈建玲 惠永林 谈晓侠 《海南医学》 CAS 2020年第19期2473-2476,共4页
目的研究血清可溶性人基质裂解素2(sST2)、补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)与脓毒症患者病情的关系及预后影响因素。方法将2016年10月至2019年10月西安医学院第二附属医院收治的100例脓毒症患者纳入研究,将其按照是否休克分为休克... 目的研究血清可溶性人基质裂解素2(sST2)、补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)与脓毒症患者病情的关系及预后影响因素。方法将2016年10月至2019年10月西安医学院第二附属医院收治的100例脓毒症患者纳入研究,将其按照是否休克分为休克组62例与非休克组38例。另选取同期于我院体检的40例健康志愿者作为对照组。比较三组受检者的血清sST2、CTRP1水平,分析血清sST2、CTRP1水平与脓毒症严重程度的关系。根据所有患者住院30 d内的存活状态将其分为存活组70例和死亡组30例,比较两组患者的基线资料和各项血清指标。采用多因素Logistic回归分析法分析脓毒症患者住院30 d内死亡的影响因素。结果休克组、非休克组和对照组受检者的血清sST2水平[(694.82±124.59)pg/mL vs(510.27±102.83)pg/mL vs(76.22±2.39)pg/mL]、CTRP1水平[(21.33±5.28)ng/mL vs(16.79±4.14)ng/mL vs(3.55±1.05)ng/mL]比较,休克组明显高于非休克组和对照组,非休克组又明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清sST2、CTRP1水平与脓毒症严重程度均呈正相关(r=0.628、0.647,P<0.05);死亡组患者的年龄、APACHEⅡ评分、血清肌酐、尿素氮、CRP、sST2、CTRP1水平明显高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,年龄较大、APACHEⅡ评分较高,血清尿素氮、CRP、sST2及CTRP1水平较高均是脓毒症患者住院30 d内死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论血清sST2、CTRP1水平升高预示着脓毒症患者病情加剧,患者预后影响因素包括年龄、APACHEⅡ评分、尿素氮、CRP、sST2及CTRP1等,均值得临床重点关注。 展开更多
关键词 脓毒症 预后 影响因素 补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1 可溶性人基质裂解素2
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潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞CNE1中端粒酶的激活作用及相关调控机制
9
作者 赵同伟 陈小毅 +1 位作者 罗伟仁 赵颖海 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期770-774,共5页
目的探讨LMP1对鼻咽癌上皮样细胞系CNE1(nasopharyngeal carcinoma epithelioid cell lines,CNE)中端粒酶活性的影响及相关调控机制。方法分别采用SP法、RT-PCR法和PCR-ELISA法检测鼻咽癌细胞CNE1、CNE1GL(转染了目的基因质粒PAT-GFP-L... 目的探讨LMP1对鼻咽癌上皮样细胞系CNE1(nasopharyngeal carcinoma epithelioid cell lines,CNE)中端粒酶活性的影响及相关调控机制。方法分别采用SP法、RT-PCR法和PCR-ELISA法检测鼻咽癌细胞CNE1、CNE1GL(转染了目的基因质粒PAT-GFP-LMP1的CNE1细胞株)和CNE-2Z中LMP1、NF-κB、c-myc和hTERT的表达、hTERT mRNA水平和端粒酶活性。结果(1)CNE1GL与CNE1细胞相比,LMP1、NF-κB、c-myc、hTERT的表达水平均高于CNE1细胞中各指标的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。CNE-2Z和CNE1GL、CNE1相比,细胞中各指标的表达水平均最高(P<0.01或P<0.05)。CNE1GL细胞中,LMP1与NF-κB、NF-κB与c-myc及LMP1与c-myc的表达之间均呈显著正相关(P<0.01或P<0.05)。(2)hTERT mRNA水平在CNE1GL细胞明显高于CNE1细胞,差异有统计学意义(P<0.01);在三种细胞中,CNE-2Z细胞中hTERT mRNA水平最高(P<0.01)。(3)CNE1GL细胞中的端粒酶活性明显高于CNE1细胞,差异有统计学意义(P<0.05);CNE1GL细胞中的端粒酶活性略低于CNE-2Z细胞(P>0.05);CNE-2Z细胞中的端粒酶活性明显高于CNE1细胞(P<0.01)。结论在CNE1GL细胞中,LMP1通过激活hTERT转录而激活端粒酶。此调控过程可能和NF-κB激活,NF-κB进而上调c-myc表达水平,c-myc提高hTERT转录水平有关。LMP1激活端粒酶可能是鼻咽癌癌变过程中的重要事件。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 潜伏膜蛋白1 激活 端粒酶逆转录酶 端粒酶
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多药耐药相关蛋白1在人肿瘤细胞系K562、A549、SGC7901和SGC7901/VCR的表达
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作者 曹兴玥 靳艳 +2 位作者 路军秀 王国栋 高福莲 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1049-1052,共4页
目的:探讨多药耐药相关蛋白1(MRPl)在常见人肿瘤细胞的表达。方法:培养K562、A549、SCK;7901和SGC7901/VCR细胞,RT-PCR检测ABCClmRNA的表达;SABC法检测MRPl蛋白的表达。结果:4种细胞均有ABCClmRNA的表达,SCK27901/VCR细胞的A... 目的:探讨多药耐药相关蛋白1(MRPl)在常见人肿瘤细胞的表达。方法:培养K562、A549、SCK;7901和SGC7901/VCR细胞,RT-PCR检测ABCClmRNA的表达;SABC法检测MRPl蛋白的表达。结果:4种细胞均有ABCClmRNA的表达,SCK27901/VCR细胞的ABCClmRNA水平显著高于SCX27901细胞;SGC7901/VCR细胞MRPl表达显著高于SGC7901。结论:ABCC1/MRP1可能参与SGC7901细胞获得性多药耐药。 展开更多
关键词 多药耐药相关蛋白1 人肿瘤细胞系
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Expression of Telomerase Subunits in Gastric Cancer
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作者 陈凤花 胡丽华 +1 位作者 李一荣 王琳 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2005年第6期741-743,共3页
To detect the expression of telomerase subunits (human telomerase reverse transcriptase, human telomerase associated protein 1 and human telomerase RNA) in gastric cancer and to examine the role that different telom... To detect the expression of telomerase subunits (human telomerase reverse transcriptase, human telomerase associated protein 1 and human telomerase RNA) in gastric cancer and to examine the role that different telomerase subunits play in the gastric carcinogenesis, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect telomerase suhunits messenger RNA in 24 samples of gastric cancer and corresponding non-cancerous tissue. The results showed that the positive rate of hTERT mRNA from gastric cancer and corresponding non-cancerous tissues was 100% and 25 %, respectively. The former was significantly higher than the latter (X^2 = 26.4, P〈0.01). The positive rate of hTEP1 mRNA from gastric cancer and corresponding non-cancerous tissues was 100 % and 91.7%, respectively and no significant difference was found between them (X^2 =2.1, P〉0.05). The positive rates of hTR for gastric cancer and corresponding non-cancerous tissues were both 100 % and no significant difference existed between them. It is concluded that in contrast to hTEP1 and hTR, the up-regulation of hTERT mRNA expression may play a more important role in the development of gastric cancer. 展开更多
关键词 gastric cancer human telomerase reverse transcriptase (hTERT) human telomerase associated protein 1 (htep1) human telomerase RNA (hTR)
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高迁移率族蛋白B1协同白介素-1β可增加人气道上皮细胞白介素-8的表达 被引量:2
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作者 张丹丹 赵海金 +4 位作者 周丽芹 宋甲富 董航明 邹飞 蔡绍曦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1764-1767,共4页
目的探讨损伤相关分子模式分子高迁移率族蛋白B1(HMGB1)单独或联合白介素-1β(IL-1β)对人气道上皮细胞(16HBE,A549)白介素-8(IL-8)表达水平的影响。方法重组人HMGB1与IL-1β复合物的制备:一定浓度的HMGB1与IL-1β混匀后于4℃冰箱静置1... 目的探讨损伤相关分子模式分子高迁移率族蛋白B1(HMGB1)单独或联合白介素-1β(IL-1β)对人气道上皮细胞(16HBE,A549)白介素-8(IL-8)表达水平的影响。方法重组人HMGB1与IL-1β复合物的制备:一定浓度的HMGB1与IL-1β混匀后于4℃冰箱静置16 h。实验分组:对照组,HMGB1-100 ng/ml,IL-1β-10 ng/ml,HMGB1-25 ng/ml+IL-1β-10 ng/ml,HMGB1-100 ng/ml+IL-1β-10 ng/ml处理气道上皮细胞24 h,四唑盐(MTT)法检测不同刺激组对气道上皮细胞活力的影响,实时荧光定量PCR检测细胞IL-8mRNA表达水平,ELISA检测细胞培养上清中IL-8的浓度。结果在不影响细胞活力的情况下,HMGB1-100 ng/ml对气道上皮细胞IL-8的表达水平无显著影响,但与IL-1β形成复合物后,可协同IL-1β显著增加16HBE和A549 IL-8的表达和释放(P<0.05),并具有浓度依赖趋势。结论 HMGB1可协同IL-1β促进气道上皮细胞IL-8的表达,可能为HMGB1参与气道中性粒细胞炎症提供新的证据。 展开更多
关键词 损伤相关分子模式分子 HMGB1 气道上皮细胞 气道炎症 白细胞介素-8
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免疫检查点HHLA2和PD-L1在肝癌组织中的表达及临床意义 被引量:5
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作者 杨静文 唐小童 +5 位作者 郭辉 朱悦 张甜甜 刘杨 吴穷 汪蕊 《蚌埠医学院学报》 CAS 2021年第4期425-430,共6页
目的:考察免疫检查点人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2(human endogenous retrovirus-H long terminal repeat-associating protein 2,HHLA2)和程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在肝细胞癌组织中的表达,分析两... 目的:考察免疫检查点人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2(human endogenous retrovirus-H long terminal repeat-associating protein 2,HHLA2)和程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在肝细胞癌组织中的表达,分析两者之间表达的相关性及与临床病理特征和临床预后关系。方法:应用免疫组织化学染色方法检测90例肝癌组织及相对应癌旁组织中HHLA2和PD-L1的表达,分析HHLA2和PD-L1在肝癌组织中表达的相关性,并分析HHLA2和PD-L1的表达与肝癌的临床分期、血清甲胎蛋白(AFP)水平、病理分级、慢性乙型肝炎病毒感染、血管侵犯等临床病理参数和总生存时间(OS)之间的关系。结果:在肝癌组织中,HHLA2阳性表达率(49/90,54.4%)高于癌旁组织(33/90,36.7%),但差异无统计学意义(P>0.05);PD-L1阳性表达率(52/90,57.7%)较癌旁组织(44/90,48.9%)差异无统计学意义(P>0.05)。HHLA2与PD-L1表达在肝癌组织中呈正相关关系(r=0.280,P<0.05)。HHLA2在肝癌组织中的表达与肝癌病人年龄、性别、病理分级、血清AFP水平、血管侵犯无关,与临床分期、慢性乙型肝炎病毒感染有关(P<0.05)。PD-L1的表达与肝癌病人年龄、性别、血清AFP水平、血管侵犯、慢性乙型肝炎病毒感染无关,与临床分期和病理分级有关(P<0.05)。HHLA2与PD-L1阳性表达的肝癌病人中位OS同阴性表达病人比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:免疫检查点分子HHLA2与PD-L1在肝癌组织表达有升高趋势,两者之间表达呈正相关关系,HHLA2和PD-L1的表达状态与临床预后无关。HHLA2作为新型免疫检查点分子能否成为晚期肝癌未来潜在的治疗靶点仍需进一步探索研究。 展开更多
关键词 肝肿瘤 免疫检查点 人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2 程序性死亡配体-1
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血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测联合超声对子宫瘢痕妊娠的诊断价值 被引量:2
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作者 王莉莉 康丽 +3 位作者 张春霞 张浩 张蕾 杨玉侠 《中国性科学》 2023年第10期51-55,共5页
目的 分析血清巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平检测联合超声对子宫瘢痕妊娠患者的诊断价值。方法 回顾性分析2021年2月至2022年2月在张家口市第五医院就诊的80例子宫瘢痕妊... 目的 分析血清巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平检测联合超声对子宫瘢痕妊娠患者的诊断价值。方法 回顾性分析2021年2月至2022年2月在张家口市第五医院就诊的80例子宫瘢痕妊娠患者的临床资料,将其作为观察组,另选取同期同一医院就诊的50例正常孕妇作为对照组。两组均接受血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测和超声检查,比较血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测和超声单独检查与联合检查对子宫瘢痕妊娠的诊断价值。结果 观察组血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平均低于对照组(P<0.05)。相较于对照组,观察组子宫内膜更厚,附件区包块更大,盆腔积液更深(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,相较于单独检查,血清水平检测联合超声检查对子宫瘢痕妊娠的诊断价值更高,差异具有统计学意义(P<0.05)。相较于单独检查,血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测联合超声检查对子宫瘢痕妊娠诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度均更高(P<0.05)。结论 血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测联合超声检查在子宫瘢痕妊娠诊断中应用价值较高。 展开更多
关键词 子宫瘢痕妊娠 巨噬细胞抑制因子-1 妊娠相关血浆蛋白A Β-人绒毛膜促性腺激素 超声
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LSD1、NUSAP1和TEAD4在人乳头瘤病毒感染尖锐湿疣及宫颈癌中的表达及意义 被引量:1
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作者 刘丽媛 冯晓阳 +2 位作者 牛艳东 齐海花 段昕所 《实用皮肤病学杂志》 2022年第3期139-142,共4页
目的观察组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(histone lysines demethylase 1,LSD1)、核仁纺锤体相关蛋白1(nucleolar and spindle-associated protein 1,NUSAP1)和转录增强因子4(TEA domain transcription factor4,TEAD4)在低危型、高危型人乳头... 目的观察组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(histone lysines demethylase 1,LSD1)、核仁纺锤体相关蛋白1(nucleolar and spindle-associated protein 1,NUSAP1)和转录增强因子4(TEA domain transcription factor4,TEAD4)在低危型、高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染尖锐湿疣组织及宫颈鳞状细胞癌(宫颈癌)组织中的表达变化及其临床意义。方法采用免疫组化法分别检测LSD1、NUSAP1和TEAD4在30例宫颈癌组织、30例高危型HPV感染尖锐湿疣组织、30例低危型HPV感染尖锐湿疣组织以及10例正常宫颈组织中的表达情况。结果宫颈癌组、高危型组、低危型组、正常对照组中LSD1阳性率分别为76.67%、53.33%、16.67%、0.00%,NUSAP1阳性率分别为90.00%、56.67%、20.00%、0.00%,TEAD4阳性率分别为86.67%、50.00%、13.33%、0.00%;组间多重比较结果显示,与正常对照组相比,宫颈癌组、高危型组LSD1、NUSAP1和TEAD4表达水平均显著升高:与低危型组相比,宫颈癌组、高危型组LSD1、NUSAP1和TEAD4表达水平均显著升高:与高危型组相比,宫颈癌组NUSAP1和TEAD4表达水平均显著升高:与高危型组相比,宫颈癌组LSD1的表达差异无显著性:与正常对照组相比,低危型组LSD1、NUSAP1和TEAD4的表达差异无显著性。结论LSD1、NUSAP1、TEAD4参与了高危型HPV感染向宫颈癌的发展,可能成为宫颈癌研究的新思路。 展开更多
关键词 宫颈 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 组蛋白赖氨酸去甲基化酶1 核仁纺锤体相关蛋白1 转录增强因子4
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miR-27a-3p靶向调控Yes相关蛋白1促进人牙髓干细胞成骨分化 被引量:2
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作者 王小娟 朱友明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1762-1767,共6页
目的探讨miR-27a-3p靶向调控Yes相关蛋白1(YAP1)基因对人牙髓干细胞(hDPSCs)成骨分化的影响。方法体外分离培养hDPSCs细胞,将miR-27a-3p模拟物(miR-27a-3p mimics,过表达组)、miR-27a-3p抑制剂(miR-27a-3p inhibitor,敲低组)、miR-NC(... 目的探讨miR-27a-3p靶向调控Yes相关蛋白1(YAP1)基因对人牙髓干细胞(hDPSCs)成骨分化的影响。方法体外分离培养hDPSCs细胞,将miR-27a-3p模拟物(miR-27a-3p mimics,过表达组)、miR-27a-3p抑制剂(miR-27a-3p inhibitor,敲低组)、miR-NC(对照组)分别转染至hDPSCs细胞中,检测miR-27a-3p表达水平的改变对YAP1表达的影响。采用TargetScan数据库检索miR-27a-3p的靶基因。应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-27a-3p和YAP1的靶向关系。将miR-27a-3p mimics、miR-NC转染到hDPSCs特定时间后收集细胞,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot等检测经典的成骨标志物骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、成骨转录因子-2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)、YAP1 mRNA和蛋白表达水平。应用MTT比色法验证miR-27a-3p和YAP1对细胞增殖活性的影响。结果过表达组hDPSCs细胞中miR-27a-3p的表达水平较对照组显著上调(P<0.05),YAP1 mRNA和蛋白的表达水平下调(P<0.05)。而敲低组miR-27a-3p的表达水平较对照组明显下降(P<0.05),YAP1 mRNA和蛋白的表达水平增高(P<0.05)。生物信息学分析表明,miR-27a-3p作用于YAP1的3′UTR区,双荧光素酶报告基因实验验证了YAP1是miR-27a-3p的靶基因。qRT-PCR、Western blot检测显示,与对照组相比,miR-27a-3p过表达时hDPSCs中BMP-2、RUNX2、OPN mRNA和蛋白的表达水平上调(P<0.05)。MTT检测显示,miR-27a-3p过表达可明显上调hDPSCs增殖率(P<0.05),而YAP1过表达则会降低hDPSCs的增殖率(P<0.05)。结论miR-27a-3p可能通过靶向调控YAP1促进hDPSCs成骨分化。 展开更多
关键词 miR-27a-3p Yes相关蛋白1 人牙髓干细胞 成骨分化
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Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进人视网膜微血管内皮细胞的血管生成 被引量:3
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作者 梁晓茜 陈王灵 陈运信 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第2期94-98,共5页
目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24... 目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24 h,GsMTx4+VP组用GsMTx4联合Yap1的拮抗剂VP(4μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h,GsMTx4+Stattic组则用GsMTx4联合STAT3的拮抗剂Stattic(1.5μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h。CCK-8法检测各组hRMECs的增殖能力。小管形成实验观察各组hRMECs的血管生成能力,记录小管分支数。qRT-PCR和Western blot检测对照组和GsMTx4组hRMECs中Piezo、Yap1、STAT3 mRNA和蛋白的表达水平。使用免疫共沉淀技术检测各组hRMECs中Yap1和STAT3的结合作用。结果与对照组相比,GsMTx4组hRMECs的增殖率和小管分支数均明显增加(均为P<0.05),Piezo蛋白表达下调,而Yap1、STAT3蛋白表达均上调,且Yap1和STAT3的结合作用明显增加(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs中Yap1和STAT3的蛋白表达均下调,且Yap1和STAT3的结合作用减弱(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs增殖率和小管分支数均降低(均为P<0.05)。结论Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进hRMECs的血管生成。 展开更多
关键词 Piezo拮抗剂GsMTx4 Yap1/STAT3信号通路 人视网膜微血管内皮细胞 血管生成
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MACC1和hTERT蛋白在胆管癌中的表达及其意义
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作者 廖小春 曹友德 +2 位作者 邓中华 乐杨桦 周玉杰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第9期698-702,共5页
目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)和人端粒酶逆转录酶(h TERT)蛋白在胆管癌中的表达及其意义。方法收集60例胆管癌、30例胆道良性病变患者术前血清和术后病理组织标本及30例体检健康者血清标本,分别采用免疫组化染色技术和ELISA法检... 目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)和人端粒酶逆转录酶(h TERT)蛋白在胆管癌中的表达及其意义。方法收集60例胆管癌、30例胆道良性病变患者术前血清和术后病理组织标本及30例体检健康者血清标本,分别采用免疫组化染色技术和ELISA法检测组织及血清中MACC1和h TERT蛋白的表达水平,并结合临床病理资料进行统计分析。结果 MACC1和h TERT蛋白在胆管癌患者组织和血清中的表达显著高于胆道良性病变组(P<0.01)。在胆管癌中,临床分期晚、伴有淋巴转移的癌组织中MACC1、h TERT蛋白表达较高(P<0.05)。胆管癌中MACC1蛋白与h TERT蛋白表达的一致性分析均具有良好的相关性(r=0.699,P<0.01)。血清中MACC1和h TERT单独和联合检测的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.896、0.909、0.916,两者联合检测的敏感性最高(91.7%),MACC1单独检测的特异性最高(90.0%)。结论 MACC1和h TERT可以较好地鉴别胆道恶性肿瘤与良性病变。 展开更多
关键词 结肠癌转移相关基因1 人端粒酶逆转录酶 胆管癌
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Detection of Telomerase Activity and the Expression of Telomerase Subunits in the Patients with Acute Myelogenous Leukaemia 被引量:1
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作者 李一荣 吴健民 +2 位作者 王琳 陈凤花 胡丽华 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2004年第1期48-51,共4页
Telomerase activity and the expression of telomerase subunits (for example, telomerase reverse transcriptase and telomerase associated protein 1 and telomerase RNA component) of peripheral white blood cells were detec... Telomerase activity and the expression of telomerase subunits (for example, telomerase reverse transcriptase and telomerase associated protein 1 and telomerase RNA component) of peripheral white blood cells were detected in the patients with acute myelogenous leukaemia (AML) and the correlation between telomerase activity and the expression of telomerase subunits was observed. In 94 peripheral white blood cells from 18 healthy volunteers and 76 patients with AML, including 31 AML at initial presentation, 24 at relapse and 21 at complete remission, the telomerase activity and telomerase subunits mRNA or RNA were detected by PCR ELISA and RT PCR respectively. The results showed that the positive rate of telomerase from patients with AML at initial presentation, at relapse and at complete remission was 74.1 %, 79.2 % and 4.8 % respectively. The positive rate of telomerase reverse transcriptase mRNA from healthy volunteers, AML at initial presentation, AML at relapse and AML at complete remission was 5.6 %, 80.6 %, 83.3 % and 9.5 % respectively. The positive rate of telomerase associated protein 1 mRNA and telomerase RNA component in all samples were 100 %. It was suggested that the up regulation of telomerase activity and the expression of telomerase reverse transcriptase is correlated closely with the occurrence and relapse of AML, so telomerase activity and the expression of telomerase reverse transcriptase may be used to estimate the curative effect and predict relapse of AML. Moreover, the up regulation of telomerase activity is correlated with the expression of telomerase reverse transcriptase significantly. 展开更多
关键词 acute myelogenous leukaemia telomerase telomerase reverse transcriptase telomerase associated protein 1 telomerase RNA component
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慢病毒敲减质粒pLKO.1-shDAPK1的构建及其对细胞凋亡的影响
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作者 秦坤 徐绍业 +3 位作者 韩雨 闫建国 夏春波 邵晓云 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期715-720,共6页
目的 构建敲减死亡相关蛋白激酶1(shDAPK1)基因的慢病毒质粒及稳转神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y),并检测SH-SY5Y细胞中DAPK1敲减后对细胞凋亡的影响。方法 设计并合成特异性敲减DAPK1基因的上下游引物,将引物退火后与双酶切PLKO.1载体经T... 目的 构建敲减死亡相关蛋白激酶1(shDAPK1)基因的慢病毒质粒及稳转神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y),并检测SH-SY5Y细胞中DAPK1敲减后对细胞凋亡的影响。方法 设计并合成特异性敲减DAPK1基因的上下游引物,将引物退火后与双酶切PLKO.1载体经T4连接酶连接、转化、提取质粒并进行DNA测序,获得重组正确的慢病毒干扰质粒pLKO.1-shDAPK1。将该重组的质粒与辅助质粒psPAX2和pMD2.G共转染HEK293T细胞,72 h后收集慢病毒上清液,感染SH-SY5Y细胞,利用嘌呤霉素进行阳性筛选,得到稳定敲减DAPK1的SH-SY5Y细胞系。利用Western blot检测SH-SY5Y稳转细胞系中DAPK1蛋白以及用1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)处理后的Bax、Bcl-2及Caspase-3的蛋白表达水平,并应用流式细胞术检测SH-SY5Y细胞的凋亡情况。结果 重组pLKO.1-shDAPK1质粒的测序比对结果正确,嘌呤霉素筛选后获得shDAPK1稳转SH-SY5Y细胞系(shDAPK1-SY5Y),该稳转细胞系中DAPK1蛋白表达水平与对照组相比显著下降,此外还上调了Bcl-2蛋白的表达,下调Bax、Caspase-3蛋白的表达且流式检测结果显示该细胞系凋亡发生率明显下降。结论 成功构建了慢病毒敲减质粒pLKO.1-shDAPK1,并建立了DAPK1低表达的SH-SY5Y稳定感染细胞系,明显抑制了细胞凋亡。 展开更多
关键词 死亡相关蛋白激酶1 慢病毒 质粒构建 人骨髓神经母细胞瘤细胞 细胞凋亡
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