PDGFRα^(+)细胞上P2Y1-SK3通路对功能性消化不良大鼠胃肠动力的调控机制

1

作者 杨德茜 陈琪 +1 位作者 潘小丽 徐派的 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期599-607,共9页

目的探究血小板衍生生长因子受体α^(+)(PDGFRα^(+))细胞上P2Y1-小电导Ca^(2+)激活K^(+)(SK3)通道对功能性消化不良(FD)大鼠胃肠动力的影响。方法将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、P2Y1受体抑制剂(MRS2500)组,每组10只。除空白组外... 目的探究血小板衍生生长因子受体α^(+)(PDGFRα^(+))细胞上P2Y1-小电导Ca^(2+)激活K^(+)(SK3)通道对功能性消化不良(FD)大鼠胃肠动力的影响。方法将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、P2Y1受体抑制剂(MRS2500)组,每组10只。除空白组外,其余两组采用多因素干预法建立FD大鼠模型。造模成功后抑制剂组予以尾静脉注射P2Y1抑制剂MRS2500,其他组不采取干预措施。处理结束后进行行为学和胃肠动力学检测;用BL-420S生物信号系统采集并分析胃肠生物电信息;取胃窦组织评估病理变化;采用免疫印迹、实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠胃窦PDGFRα、C-kit(卡介尔间质细胞特异性指标)、P2Y1和SK3的表达情况;采用免疫荧光法检测胃窦PDGFRα和C-kit、P2Y1、SK3的组织表达和共定位情况;用钙检测试剂盒检测胃窦组织中Ca^(2+)含量变化。结果FD模型建立后,大鼠活动度、体重增长速度和进食量都显著降低,胃肠动力减弱,胃窦内PDGFRα、C-kit、P2Y1和SK3表达水平降低。MRS2500干预后,P2Y1受体抑制剂组大鼠较模型组大鼠体重增长率和进食量升高,胃肠动力减弱情况改善,PDGFRα、P2Y1和SK3表达水平进一步降低,C-kit表达水平升高,Ca^(2+)含量降低。PDGFRα与C-kit在胃窦中不存在共表达,而PDGFRα与P2Y1、SK3共表达。结论长期的饮食和情绪失调会刺激肠神经系统释放抑制性神经递质,这一过程通过PDGFRα^(+)细胞上P2Y1受体引起SK3通道的Ca^(2+)敏感性降低,在多因素刺激诱导的FD模型大鼠胃肠动力障碍中起重要作用。 展开更多

关键词 功能性消化不良 血小板衍生生长因子受体α^(+)细胞 卡介尔间质细胞 P2Y1 小电导Ca^(2+)激活k^(+)通道

在线阅读 下载PDF 职称材料

参麦注射液对晚期癌症患者sIL－2R、LAK及NK细胞活性影响 被引量：89

2

作者 冯培芳 刘鲁明 沈玉英 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期87-89,共3页

本研究测定了６０例晚期癌症患者用参麦注射液治疗前后血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、淋巴因子活化的杀伤细胞（ＬＡＫ）和天然杀伤细胞（ＮＫ）的活性，并以４０例正常人为对照。结果显示：治疗前癌症患者ｓＩＬ－２... 本研究测定了６０例晚期癌症患者用参麦注射液治疗前后血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、淋巴因子活化的杀伤细胞（ＬＡＫ）和天然杀伤细胞（ＮＫ）的活性，并以４０例正常人为对照。结果显示：治疗前癌症患者ｓＩＬ－２Ｒ显著升高（Ｐ＜０．０５），ＬＡＫ细胞与ＮＫ细胞活性显著减低（Ｐ＜０．０５）。而上述变化在胃癌、肠癌与肺癌之间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。治疗后３种癌症患者的ｓＩＬ－２Ｒ均有显著下降（Ｐ＜０．０５），ＬＡＫ与ＮＫ细胞活性均有显著增强（Ｐ＜０．０５）。而ｓＩＬ－２Ｒ与ＬＫＡ及ＮＫ细胞活性之间无相关性。提示晚期癌症患者免疫功能低下，参麦注射液对癌症患者的免疫功能有广泛的调节作用。 展开更多

关键词 参麦注射液 晚期 癌 白细胞介素2 自然杀伤细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

NK细胞表面免疫球蛋白受体KIR基因的分析 被引量：6

3

作者 付绍杰 于立新 +5 位作者 罗敏 肖露露 王亦斌 徐健 杜传福 邓文锋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期109-113,共5页

目的为了探讨人类自然杀伤(NK)细胞的自然杀伤作用机制。方法采用PCR-SSP技术,调查和分析67例国人的KIR基因型和组合型频率。结果在表达出16个KIR基因中,87.5%的KIR基因的频率>0.35;由14个KIR功能基因组成的KIR基因组合型25个,其中仅... 目的为了探讨人类自然杀伤(NK)细胞的自然杀伤作用机制。方法采用PCR-SSP技术,调查和分析67例国人的KIR基因型和组合型频率。结果在表达出16个KIR基因中,87.5%的KIR基因的频率>0.35;由14个KIR功能基因组成的KIR基因组合型25个,其中仅KIR-2DL1-2DL3-2DL4-3DL1-3DL2-3DL3-2DS4的分布频率达到0.373,而其余频率均≤0.09。比较本文、日本人群、韩国人群和高加索人群中已报道的56个KIR基因组合型,4个民族和地区间基因组合型共享率为8.93%;本文、韩国人群和高加索人群间为5.36%;本文和高加索人群间为1.79%;28.58%为本文首先报道的基因组合型。结论本文证实单个KIR基因多态性有较高的分布频率;在25个KIR基因组合型中,仅有以传导抑制信号为主的组合型KIR-2DL1-2DL3-2DL4-3DL1-3DL2-3DL3-2DS4的分布频率达到0.373(4%),远低于87.5%的单个KIR基因的频率。但是,KIR-2DL1-2DL3-2DL4-3DL1-3DL2-3DL3-2DS4的分布频率在四个民族和地区人群中均列第一,提示KIR基因组合型以抑制性信号通路为主是一种常态,使自身细胞不会遭受自然杀伤。研究为可能探讨改变肾移植术通过KIR基因调节NK自然杀伤作用活性的增强或抑制功能,改变终生使用免疫抑制药物的相关研究提供可利用的数据。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 免疫球蛋白家族受体 kIR基因 抑制型 活化型

在线阅读 下载PDF 职称材料

KIR不相合的NK细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤作用 被引量：6

4

作者 叶韵斌 周智锋 +3 位作者 郑蕊蕊 陈强 林建银 李洁羽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第1期26-30,共5页

目的:研究自然杀伤(natural killer,NK)细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer immunoglobulin-like recep-tor,KIR)和HLA-Cw配体不相合的异基因NK细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤作用;分析杀伤活化受体NKG2D及其MICA配体表达水平与NK细... 目的:研究自然杀伤(natural killer,NK)细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer immunoglobulin-like recep-tor,KIR)和HLA-Cw配体不相合的异基因NK细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤作用;分析杀伤活化受体NKG2D及其MICA配体表达水平与NK细胞对乳腺癌细胞杀伤敏感性之间的关系。方法:取10例健康人及5例乳腺癌患者外周血10ml,采用MACS系统NK细胞免疫磁珠分选试剂盒负向分选高纯度NK细胞。取乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-435s和SK-Br3)和NK细胞各1×105个,碱裂解法抽提DNA,PCR-SSP方法分别检测HLA-Cw位点、KIR位点表达。MTT法检测KIR相合与不相合组的NK细胞对乳腺癌细胞的杀伤率。流式细胞术检测NK细胞NKG2D表达水平以及RT-PCR方法检测乳腺癌细胞MICA表达。结果:MACS系统分选出的NK细胞,经流式细胞术检测,其纯度在90%以上;KIR与HLA-Cw相合组的NK细胞对乳腺癌细胞株的杀伤率明显高于不相合组,G1组和G2组NK细胞对MDA-MB-435s(G1组)杀伤率分别为(73.2±14.5)%和(34.2±7.6)%,对SK-Br3(G1组)杀伤率为(67.3±12.5)%和(36.5±7.7)%,而对MCF-7(G2组)杀伤率分别为(36.7±8.5)%和(76.5±11.7)%。结果还显示,3株乳腺癌细胞均表达MICA分子;NK细胞与MCF-7细胞共培养,可上调NK细胞表面NKG2D的表达。结论:NK细胞对乳腺癌细胞的杀伤并非由KIR的不相合机制介导;乳腺癌细胞表面表达的MICA分子可上调NK细胞表面NKG2D的表达,激发NK细胞对乳腺癌细胞的细胞毒效应。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 乳腺癌 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 激活性受体 主要组织相容性复合物Ⅰ类相关抗原A

在线阅读 下载PDF 职称材料

达沙替尼对NK细胞的体外扩增、细胞亚群、受体表达及细胞毒功能的调节作用 被引量：4

5

作者 盛立霞 王佳萍 +5 位作者 赖艳丽 吴昊 孙永城 周淼 欧阳桂芳 黄河 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1762-1768,共7页

目的:探讨达沙替尼对NK细胞的体外扩增作用,以及对NK细胞的亚群、受体表达及细胞毒功能的影响。方法:从健康成人外周血中分离单个核细胞(PBMC),采用添加过IL-2、IL-15的SCGM培养液进行NK细胞的扩增培养,培养体系中添加不同浓度的达沙替... 目的:探讨达沙替尼对NK细胞的体外扩增作用,以及对NK细胞的亚群、受体表达及细胞毒功能的影响。方法:从健康成人外周血中分离单个核细胞(PBMC),采用添加过IL-2、IL-15的SCGM培养液进行NK细胞的扩增培养,培养体系中添加不同浓度的达沙替尼,细胞计数结合FCM检测分析扩增效率,FCM检测NK细胞表面受体表达以及亚群的分布;采用脱颗粒试验结合CFSE/7AAD杀伤试验检测NK细胞对白血病细胞株K562的细胞毒功能。结果:5-50 nmol/L的达沙替尼能够在体外增加NK细胞的扩增效率,NK细胞的扩增效率在达沙替尼浓度为20 nmol/L时达到峰值。20 nmol/L达沙替尼培养组的NK细胞对K562细胞的细胞毒作用强于对照组。达沙替尼体外扩增的NK细胞中,CD226、NKP46及NKG2D等活化型受体的MFI上调;NKG2A^+CD57^-亚群比例下调,而NKG2A^-CD57^+亚群比例增高,NKG2A^-CD57^+NK细胞对K562细胞的脱颗粒反应强于NKG2A^+CD57^-NK细胞。结论:20 nmol/L的达沙替尼可以增强NK细胞体外扩增的效率,并能够上调扩增的NK细胞表面活化型受体的表达和优先扩增胞毒功能较强的NKG2A^-CD57^+亚群,从而增强NK细胞对白血病细胞株的细胞毒作用。 展开更多

关键词 达沙替尼 自然杀伤细胞 体外扩增 细胞毒作用 激活型受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

急性髓系白血病患者NK细胞表达及功能变化研究 被引量：4

6

作者 刘露 陈肖 +4 位作者 金慧敏 赵四书 朱毅 钱思轩 吴雨洁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期49-55,共7页

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者自然杀伤(NK)细胞的抗原表达特征和功能标记物的表达特点。方法:采用多参数流式细胞术检测56例初诊AML患者临床样本以及24例健康对照样本中的NK细胞表面标记物以及其功能指标,包括激活性受体NKG2D、NK... 目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者自然杀伤(NK)细胞的抗原表达特征和功能标记物的表达特点。方法:采用多参数流式细胞术检测56例初诊AML患者临床样本以及24例健康对照样本中的NK细胞表面标记物以及其功能指标,包括激活性受体NKG2D、NKP46、DNAM-1和杀伤标记颗粒酶B、穿孔素。结果:56例AML患者参照WHO造血和淋巴组织肿瘤分类标准大致分为AML未分化型(M_(1))、AML部分分化型(M_(2))和急性粒/单核细胞白血病(M_(4)/M_(5))3类,但3类患者的NK细胞并无差异,因而不再细分。NK细胞分为CD3^(-)CD56^(hi)CD16^(-)(简称CD56^(hi)NK)和CD3^(-)CD56^(dim)CD16^(+)(简称CD56^(dim)NK)两个细胞群来分析。AML患者CD56^(hi)NK细胞群与CD56^(dim)NK细胞群相比,除NKP46外,CD56^(hi)NK细胞的NKG2D等受体阳性百分比均明显降低(P<0.001)。与健康对照相比,AML患者CD56^(hi)NK细胞比例明显增高,而NK细胞数量、比例和CD56^(dim)NK细胞比例明显降低(P<0.05);CD56^(hi)NK细胞胞内穿孔素分子比例明显增高(P<0.05);CD56^(hi)NK细胞表面DNAM-1分子,CD56^(dim)NK细胞表面NKG2D、DNAM-1分子以及胞内穿孔素分子表达明显减低(P<0.05)。AML患者其余功能指标表达与健康对照对应指标相比差异均无统计学意义(P>0.05)。另外,AML患者CD56^(hi)NK细胞比例与CD34^(+)表达呈正相关关系(r=0.303)。结论:与CD56^(dim)NK相比,AML患者的CD56^(hi)NK比例及功能标记物表达量都较低;与健康对照相比,AML患者的NK细胞数量及表达比例降低且功能标记物表达异常,提示其功能受损。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 自然杀伤细胞 激活性受体 颗粒酶 穿孔素

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫球蛋白样抑制性受体KIR基因与HLA-Cw的匹配对NK细胞活性的影响 被引量：2

7

作者 赖艳丽 曹祥山 +1 位作者 吴强 邱国强 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期637-642,共6页

本研究探索自然杀伤(natural killer,NK)细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样抑制性受体(killer immunoglob-ulin-like inhibition receptor,KIR)基因与HLA-Cw配体匹配对NK细胞活性的影响。对27名健康人取新鲜外周血20ml,用NK细胞免疫磁珠分... 本研究探索自然杀伤(natural killer,NK)细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样抑制性受体(killer immunoglob-ulin-like inhibition receptor,KIR)基因与HLA-Cw配体匹配对NK细胞活性的影响。对27名健康人取新鲜外周血20ml,用NK细胞免疫磁珠分选试剂盒负向分选高纯度NK细胞。对30例初治确诊急性髓系白血病(AML)患者取新鲜骨髓液10ml,分离单个核细胞作为靶细胞。流式细胞仪检测NK细胞CD158a,CD158b表达水平。取健康人和患者的外周血各2ml,以PROTRANS法抽提DNA,采用序列特异性引物PCR-SSP分型技术分别检测HLA-Cw、KIR基因。MTT法检测KIR与HLA-Cw基因不同组合的NK细胞对AML患者白血病细胞的杀伤率。结果表明:分选后的NK细胞,纯度为(90.8±6.08)%。NK细胞KIR基因与靶细胞HLA-Cw等位基因的匹配数少则NK细胞的杀伤效应强,0个等位基因匹配的杀伤率为(50.66±8.40)%,1个匹配与2个匹配的杀伤率分别为(38.28±6.71)%,(19.74±4.15)%,(F=20.226,p<0.001)。NK细胞的KIR表达水平与杀伤作用也有一定的联系(F=16.276,p值<0.001)。结论:NK细胞对AML白血病细胞的杀伤作用与抑制性KIR/HLA-Cw的匹配数及KIR的表达相关,匹配越少、KIR表达越低,杀伤率越高。 展开更多

关键词 免疫球蛋白样抑制性受体 Nk细胞活性 CD158 HLA—Cw

在线阅读 下载PDF 职称材料

LAK细胞治疗对肝癌患者免疫功能影响的研究 被引量：1

8

作者 王小众 郑祥雄 +2 位作者 林谷珍 陈道纯 卢贤立 《世界华人消化杂志》 CAS 1994年第4期221-222,198,共3页

目的:研究LAK细胞治疗前后免疫功能的改变。方法:应用人胚胎脾脏及胸腺制备同种异体LAK细胞治疗晚期肝癌30例。在治疗前及治疗10d后检测末梢T细胞亚群、mIL—2R表达(间接免疫荧光法).NK细胞活性(^(125)I—UdR释放法)及血清sIL-2R水平(EL... 目的:研究LAK细胞治疗前后免疫功能的改变。方法:应用人胚胎脾脏及胸腺制备同种异体LAK细胞治疗晚期肝癌30例。在治疗前及治疗10d后检测末梢T细胞亚群、mIL—2R表达(间接免疫荧光法).NK细胞活性(^(125)I—UdR释放法)及血清sIL-2R水平(ELISA法)。结果:治疗后患者末梢血CD_4/CD_8比值增加(1.11± 0.24→1.31±0.25,P<0.01)NK细胞活性提高(36.4％→24.3％→47.6％±25.1％,P<0.01)、mIL-2R表达阳性率增高(33.3％±7.2％→±39.5％±8.4％,P<0.05)、而血清中sIL-2R含量降低[280.8±96.5→248.4±89.4(×10~3U/L)P<0.05]。结论:LAK细胞治疗可增强肝癌患者的免疫功能。 展开更多

关键词 淋巴因子激活杀伤细胞 肝癌 T细胞亚群 自然杀伤细胞活性 白细胞介素Ⅱ

在线阅读 下载PDF 职称材料

NK细胞活化受体NKG2D及sMICA在晚期肺癌免疫监视中的作用 被引量：3

9

作者 梁晶 韩福才 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第1期59-63,共5页

背景与目的NK细胞活化受体NKG2D及sMICA是近来肿瘤研究领域热点之一。本研究旨在观察晚期肺癌患者外周血中NK细胞受体NKG2D及sMICA表达水平的变化,并探讨它们在晚期肺癌免疫监控中的作用及其临床意义。方法采用流式细胞术检测115例肺癌... 背景与目的NK细胞活化受体NKG2D及sMICA是近来肿瘤研究领域热点之一。本研究旨在观察晚期肺癌患者外周血中NK细胞受体NKG2D及sMICA表达水平的变化,并探讨它们在晚期肺癌免疫监控中的作用及其临床意义。方法采用流式细胞术检测115例肺癌患者外周血NK细胞受体NKG2D、T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比,采用酶联免疫吸附反应检测肺癌患者外周血sMICA值,并以50例健康人作为对照。结果晚期肺癌患者外周血sMICA、CD8+T细胞、NK细胞数量较对照组明显升高,而NK细胞受体NKG2D、CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+T/CD8+T值较对照组下降。NK细胞受体NKG2D和sMICA呈负相关(r=-0.319,P<0.05)。NK细胞受体NKG2D与CD4+T细胞、CD4+T/CD8+T成正相关(P<0.05),与CD8+T细胞成负相关(P<0.05);sMICA与CD4+T细胞、CD4+T/CD8+T成负相关(P<0.05),与CD8+T细胞成正相关(P<0.05);它们与CD3+T、NK细胞均无相关性(P>0.05)。结论外周血sMICA上调介导NK细胞活化受体NKG2D下调机制参与了晚期肺癌以肿瘤为中心抑制免疫网络的形成,它们可作为监视晚期肺癌患者免疫状态的参考指标,也可作为评估肺癌发生、发展的参考依据。 展开更多

关键词 SMICA NkG2D 肺肿瘤 免疫监测

在线阅读 下载PDF 职称材料

α7尼古丁受体参与100Hz电针调节小鼠NK细胞活性 被引量：2

10

作者 黄诚 韩立民 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1079-1081,共3页

目的探讨α7尼古丁受体(α7nAChR)是否参与100 Hz电针调节小鼠免疫功能的作用。方法应用MTT法测定NK细胞活性,免疫荧光方法观察α7尼古丁受体在的定位。结果连续给予3 d 100 Hz电针,1次/d,小鼠脾脏的NK细胞活性明显下降(P<0.05)。α7... 目的探讨α7尼古丁受体(α7nAChR)是否参与100 Hz电针调节小鼠免疫功能的作用。方法应用MTT法测定NK细胞活性,免疫荧光方法观察α7尼古丁受体在的定位。结果连续给予3 d 100 Hz电针,1次/d,小鼠脾脏的NK细胞活性明显下降(P<0.05)。α7nAChR可在小鼠的巨噬细胞上表达。此外,给予小鼠α7nAChR抗体后,100 Hz电针明显提高了小鼠NK细胞活性(P<0.05)。结论α7nAChR可能在100Hz电针调节小鼠免疫功能中发挥了重要作用。 展开更多

关键词 α7尼古丁受体 电针 自然杀伤细胞活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

桑黄多糖调控MICB/NKG2D信号通路增强机体对脑胶质瘤细胞的免疫监视作用 被引量：1

11

作者 张正平 李坤正 +1 位作者 巨虎 刘熹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期578-585,共8页

目的:探讨桑黄多糖对脑胶质瘤细胞免疫监视的增强作用及其对主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因B(MICB)/自然杀伤细胞活化性受体2D(NKG2D)信号通路的调控机制。方法:取6~8周龄C57BL/6小鼠60只和GL261细胞株培养传代,随机取其中的50只小... 目的:探讨桑黄多糖对脑胶质瘤细胞免疫监视的增强作用及其对主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因B(MICB)/自然杀伤细胞活化性受体2D(NKG2D)信号通路的调控机制。方法:取6~8周龄C57BL/6小鼠60只和GL261细胞株培养传代,随机取其中的50只小鼠建立脑胶质瘤模型,其余10只小鼠记为对照组,另将建模成功小鼠采用随机数字表分组,榄香烯组予以100 mg/kg榄香烯与1 ml/100 g生理盐水混匀灌胃,桑黄多糖各剂量组分别予以50、100、200 mg/kg桑黄多糖溶于1 ml/100 g生理盐水中灌胃,对照组和模型组均予以等量生理盐水灌胃,均1次/d,共4周。干预后处死小鼠,比较各组瘤重和抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色观察瘤组织病理变化;以CD57抗体标记检测瘤组织中NK细胞浸润;实时-逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测瘤组织主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、MICB、UL16结合蛋白1(ULBP1)、UL16结合蛋白2(ULBP2)、UL16结合蛋白3(ULBP3)mRNA表达,Western blot检测瘤组织MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3蛋白表达;采用磁珠亲和细胞分选法分离各组组织中NK细胞,采用流式细胞仪检测其表面NKG2D活性。结果:与模型组比较,榄香烯组和桑黄多糖各剂量组瘤重下降,抑瘤率升高,瘤组织细胞变性、坏死增多,NK细胞浸润增多,MICA、ULBP2、ULBP3 mRNA和蛋白表达下降,MICB、ULBP1 mRNA和蛋白表达升高,且NK细胞表面NKG2D活性增强,上述差异均有统计学意义(P<0.05);桑黄多糖的作用呈剂量依赖性,桑黄多糖低剂量组和榄香烯组所有指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:桑黄多糖可抑制脑胶质瘤增长,促进瘤细胞变性、坏死,增加NK细胞浸润,推测d与调控MICB/NKG2D信号通路,增加MICB、ULBP1表达和NK细胞表面NKG2D活性,下调MICA、ULBP2、ULBP3表达,增强对脑胶质瘤细胞的免疫监视有关。 展开更多

关键词 桑黄多糖 主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因B 自然杀伤细胞活化性受体2D 脑胶质瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果

12

作者 叶琳洁 黄庆生 +4 位作者 李琦 张明杰 马旭东 杨慧 师俊玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期537-542,共6页

目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合I... 目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 细胞毒活性 抗体依赖性细胞介导的细胞毒活性 体外扩增 活化性受体 抑制性受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

人参皂苷CK活化糖皮质激素受体抑制佐剂型关节炎大鼠T细胞活化 被引量：6

13

作者 司敏 陈镜宇 +2 位作者 马旸 常艳 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第10期1567-1573,共7页

目的探讨人参皂苷CK对活化的T细胞的抑制作用及机制。方法完全弗氏佐剂(CFA)诱导大鼠佐剂型关节炎(AA),分离纯化正常和AA大鼠的T细胞,分离培养AA大鼠的成纤维样滑膜细胞(FLS)和骨髓来源的树突细胞(DC)。体外分别以刀豆蛋白A(Con A)、AA... 目的探讨人参皂苷CK对活化的T细胞的抑制作用及机制。方法完全弗氏佐剂(CFA)诱导大鼠佐剂型关节炎(AA),分离纯化正常和AA大鼠的T细胞,分离培养AA大鼠的成纤维样滑膜细胞(FLS)和骨髓来源的树突细胞(DC)。体外分别以刀豆蛋白A(Con A)、AA大鼠FLS、AA大鼠DC诱导T细胞活化,以不同浓度的人参皂苷CK(1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L、1μmol/L、10μmol/L)以及糖皮质激素受体(GR)拮抗剂(RU486 10μmol/L)预处理,CCK法检测T细胞增殖能力,流式细胞术检测T细胞CD25、DC表面分子(CD40、CD80、CD86、MHCⅡ)的表达。结果 CK(10nmol/L、100 nmol/L、1μmol/L、10μmol/L)体外给药能明显抑制刀豆蛋白A(Con A)诱导的AA大鼠T细胞的增殖,GR拮抗剂RU486可以阻断CK(10、100 nmol/L)的作用,但是对CK(1、10μmol/L)引起的T细胞增殖的抑制作用没有影响。AA大鼠FLS和DC可以诱导正常大鼠T细胞表面CD25的表达增加,CK(1μmol/L)预处理的AA大鼠FLS和DC与分离纯化的正常大鼠T细胞进行共培养,T细胞表面分子CD25表达明显减少,而RU486可以阻断CK(1μmol/L)的这种作用。CK(1μmol/L)体外给药能明显抑制上述(CD40、CD80、CD86、MHCⅡ)DC表面分子的表达,RU486可以阻断CK对上述分子(CD40、CD86)表达的抑制作用。结论CK可能通过多个环节发挥对T细胞活化的抑制作用,包括直接抑制T细胞的活化,以及抑制FLS和DC对T细胞的活化,CK的这些作用与其活化GR有关,GR可能是CK发挥作用的靶点之一。 展开更多

关键词 人参皂苷Ck 佐剂型关节炎 T细胞活化 糖皮质激素受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

扩增的NK细胞对胃癌细胞的杀伤作用及其机制 被引量：2

14

作者 石光环 周世平 +1 位作者 徐东升 王琇 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期530-535,共6页

目的:探讨扩增的自然杀伤(NK)细胞对胃癌细胞的杀伤作用,阐明其作用机制。方法:提取和分离15例胃癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)。观察扩增前后NK细胞形态表现,检测扩增前后NK细胞百分比,计算扩增后NK细胞扩增倍数,检测扩增前后NK细胞... 目的:探讨扩增的自然杀伤(NK)细胞对胃癌细胞的杀伤作用,阐明其作用机制。方法:提取和分离15例胃癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)。观察扩增前后NK细胞形态表现,检测扩增前后NK细胞百分比,计算扩增后NK细胞扩增倍数,检测扩增前后NK细胞对胃癌细胞的杀伤作用,流式细胞术检测NK细胞表面活化性受体NKG2D和DNAM-1以及抑制性受体KIR2DL1和KIR3DL1的表达百分比。结果:扩增前NK细胞呈圆形,细胞体积比较小,细胞呈散在分布,扩增后NK细胞体积明显增大,细胞呈不规则形态。扩增后NK细胞百分比明显高于扩增前(P<0.01),扩增后NK细胞数是扩增前的(596±152)倍。在效靶比为5∶1时,扩增后NK细胞对胃癌细胞的杀伤活性明显强于扩增前(P<0.01)。扩增后NK细胞表面活化性受体NKG2D和DNAM-1表达百分比明显高于扩增前(P<0.01)。扩增后NK细胞表面抑制性受体KIR2DL1和KIR3DL1表达百分比明显低于扩增前(P<0.05)。结论:扩增后NK细胞对胃癌细胞杀伤作用明显强于扩增前,其机制可能与扩增后NK细胞表面活化性受体表达升高和抑制性受体表达降低有关联。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 胃肿瘤 杀伤作用 杀伤活化性受体 杀伤抑制性受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

NK细胞免疫缺陷在急性白血病免疫逃逸中的研究进展 被引量：2

15

作者 张玉玲 俞钟 李海亮 《赣南医学院学报》 2018年第2期186-190,共5页

NK细胞免疫缺陷在肿瘤中表现多样、机制复杂。NK细胞免疫缺陷与急性白血病免疫逃逸关系密切。本文从NK细胞免疫缺陷的表现及发生原因角度探讨急性白血病免疫逃逸机制。

关键词 Nk细胞 活化型杀伤细胞受体 抑制型杀伤细胞受体 MicroRNA-29b UL16结合蛋白3

在线阅读 下载PDF 职称材料

NK细胞表面受体KIR2DS1 mRNA表达水平检测方法的建立

16

作者 王甜 李颖 +5 位作者 胡星 张环环 陈璐瑶 鲍晓晶 史进方 何军 《临床检验杂志》 CAS 2019年第11期825-830,共6页

目的建立检测NK细胞表面免疫球蛋白样受体基因KIR2DS1 mRNA表达水平的荧光定量PCR方法并评价其性能。方法以行异基因造血干细胞移植的供患者共57对为研究对象,针对KIR2DS1基因设计特异性引物及探针,构建TaqMan-MGB荧光定量PCR反应体系,... 目的建立检测NK细胞表面免疫球蛋白样受体基因KIR2DS1 mRNA表达水平的荧光定量PCR方法并评价其性能。方法以行异基因造血干细胞移植的供患者共57对为研究对象,针对KIR2DS1基因设计特异性引物及探针,构建TaqMan-MGB荧光定量PCR反应体系,并评价该实验方法的性能,包括:总符合率、重复性、灵敏度及仪器适用范围、技术人员再现性。结果以KIR-SSO基因定性分型法为金标准,通过检测其中35例样品,荧光定量PCR方法对KIR2DS1基因阳性及阴性检测率均为100%。在重复性试验中,选取Ct值分别为高、中、低值3个样品的批内、批间CV分别为0.09%~0.46%、0.71%~1.13%。该方法的灵敏度达10~2 copies/μL,且对拷贝数为10^2 copies/μL的3个样品进行5次重复试验的CV分别为5.37%、2.71%、5.51%。仪器比对结果显示,参比仪器ABI-7500与实验仪器LC-480之间的拟合直线回归方程为Y=0.9736X+0.1183(R^2=0.9619,R^2>0.95)。2名技术人员对10个KIR2DS1基因阳性样品的再现性比对试验结果显示其偏倚(%)均<±5%。结论建立了TaqMan-MGB荧光定量PCR检测KIR2DS1 mRNA表达水平的检测方法,其性能良好。 展开更多

关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 激活 基因 定量 聚合酶链反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

结肠直肠癌患者围手术期NK细胞活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达

17

作者 张健 马莉 +2 位作者 刘俊 董明国 程静 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第2期167-168,170,共3页

目的观察结肠直肠癌(CRC)患者手术前后自然杀伤细胞(NK细胞)活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达,探讨NKG2D-MIC系统与肿瘤逃避免疫监视的关系。方法流式细胞术检测45例CRC患者和35例健康体检者(对照组)外周血NK细胞活化性受体NKG2D的... 目的观察结肠直肠癌(CRC)患者手术前后自然杀伤细胞(NK细胞)活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达,探讨NKG2D-MIC系统与肿瘤逃避免疫监视的关系。方法流式细胞术检测45例CRC患者和35例健康体检者(对照组)外周血NK细胞活化性受体NKG2D的表达,组织MICA/B的表达;ELISA检测血清MICA(sMICA)的浓度。结果 CRC组术前NKG2D、MICA/B的表达均降低,sMICA浓度增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术后NKG2D的表达无显著增高,sMICA浓度无显著降低,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CRC患者血清高水平的sMICA,抑制了NKG2D-MIC介导的抗肿瘤免疫,导致CRC患者NK细胞抗肿瘤免疫低下。NKG2D低表达,sMICA高浓度的情况术后短期内不能迅速逆转。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 杀伤细胞 自然 自然杀伤细胞凝集素样活化受体k 主要组织相容性复合体I类分子链相关蛋白A/B 可溶性主要组织相容性复合体Ⅰ类分子链相关蛋白A

在线阅读 下载PDF 职称材料

多种血液肿瘤中NK细胞受体表达差异的临床意义 被引量：3

18

作者 李依 刘晓倩 +4 位作者 郭佳丽 刘鑫梅 张颖琪 阮珺 常伟 《内科急危重症杂志》 2022年第3期220-224,261,共6页

目的:检测几种血液肿瘤患者中自然杀伤(NK)细胞受体变化,以探究NK细胞功能状态。方法:收集多发性骨髓瘤(MM)患者38例,其中IgG-k型18例、IgG-λ型10例、IgA-k型4例、IgA-λ型6例;非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者27例,其中弥漫性大B细胞淋巴瘤18... 目的:检测几种血液肿瘤患者中自然杀伤(NK)细胞受体变化,以探究NK细胞功能状态。方法:收集多发性骨髓瘤(MM)患者38例,其中IgG-k型18例、IgG-λ型10例、IgA-k型4例、IgA-λ型6例;非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者27例,其中弥漫性大B细胞淋巴瘤18例、边缘区淋巴瘤3例、滤泡性淋巴瘤1例、套细胞淋巴瘤2例、免疫母性T细胞淋巴瘤1例、外周T细胞淋巴瘤2例;慢性髓系细胞白血病(CML)患者10例;30例健康志愿者为正常对照组。通过流式细胞术测定外周血中NK细胞占有核细胞比例,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测NK细胞表面抑制性受体(PD-1)及活化性受体(CD69、NKG2D)的基因表达水平。结果:与正常对照组比较,MM、NHL患者外周血NK细胞占有核细胞比例比较,差异无统计学意义(P均>0.05);而CML患者NK细胞占有核细胞数显著减少(P<0.05);MM、NHL及CML患者的NK细胞表面活化性受体(CD69、NKG2D)水平较正常对照组明显降低,NK细胞表面抑制性受体(PD-1)表达显著高于正常对照组(P均<0.05);MM、NHL及CML患者间受体(PD-1、CD69、NKG2D)表达比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:MM、NHL及CML患者外周血NK细胞表面活化性受体(CD69、NKG2D)水平明显降低,抑制性受体(如PD-1)表达明显增高,提示NK细胞功能耗竭。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 血液肿瘤 抑制性受体(PD-1) 活化性受体(CD69、NkG2D)

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺腺癌患者血清B7-H3、NKG2D的表达及其与化疗耐药性的关系

19

作者 马丽敏 汪思颖 《河南医学研究》 CAS 2022年第18期3352-3355,共4页

目的观察肺腺癌患者血清共刺激分子(B7-H3)、自然杀伤细胞活化性受体2D(NKG2D)的表达,分析二者与患者接受培美曲塞联合顺铂(简称PP)化疗后耐药性的关系。方法选取许昌市人民医院2018年3月至2019年3月接收的95例肺腺癌患者(均接受PP化疗... 目的观察肺腺癌患者血清共刺激分子(B7-H3)、自然杀伤细胞活化性受体2D(NKG2D)的表达,分析二者与患者接受培美曲塞联合顺铂(简称PP)化疗后耐药性的关系。方法选取许昌市人民医院2018年3月至2019年3月接收的95例肺腺癌患者(均接受PP化疗)作为研究对象。化疗4个周期后随访1个月,根据化疗效果分为耐药组和敏感组。比较两组患者基线资料和血清B7-H3、NKG2D水平,探讨血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药的关系。结果肺腺癌患者经PP治疗后耐药率为58.95%。耐药组血清B7-H3水平高于敏感组,NKG2D水平低于敏感组(P<0.05)。logistic回归结果显示,血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药有关(P<0.05);绘制受试者工作特征(ROC)曲线,化疗前血清B7-H3、NKG2D水平预测肺腺癌患者PP化疗耐药的曲线下面积(AUC)分别为0.824、0.772,联合预测为0.853。结论肺腺癌化疗耐药患者血清B7-H3升高、NKG2D降低,且二者均与PP化疗耐药性有关,二者联合预测肺腺癌患者化疗耐药性的价值最高。 展开更多

关键词 肺腺癌 共刺激分子 自然杀伤细胞活化性受体 化疗耐药

在线阅读 下载PDF 职称材料

莫诺苯宗对肺腺癌细胞自噬和凋亡的分子机制研究

20

作者 刘亚 庞亚梅 +3 位作者 李宏 阳甜 宁谦 任徽 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第7期879-883,共5页

目的:探究莫诺苯宗和自然杀伤细胞激活受体基因(KLRC3)对肺腺癌(LUAD)细胞凋亡和自噬的影响,为LUAD的治疗提供理论基础。方法:分别使用不同浓度莫诺苯宗处理LUAD细胞,并采用CCK-8法检测莫诺苯宗对LUAD细胞活力的影响;随后,使用80μmol/... 目的:探究莫诺苯宗和自然杀伤细胞激活受体基因(KLRC3)对肺腺癌(LUAD)细胞凋亡和自噬的影响,为LUAD的治疗提供理论基础。方法:分别使用不同浓度莫诺苯宗处理LUAD细胞,并采用CCK-8法检测莫诺苯宗对LUAD细胞活力的影响;随后,使用80μmol/L的莫诺苯宗、50 nmol/L的KLRC3干扰质粒(si-KLRC3)、和100 nmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)1.5μg/ml KLRC3过表达载体(pcDNA-KLRC3)处理细胞后采用流式细胞术和Western blotting检测细胞凋亡以及凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的表达量。结果:莫诺苯宗浓度大于20μmol/L时可有效减弱LUAD细胞活力,且以剂量依赖性地促进了LUAD细胞的凋亡和自噬(均P<0.05)。KLRC3在LUAD细胞中低表达,干扰KLRC3减弱了莫诺苯宗对LUAD细胞自噬和凋亡的促进作用,比较差异有统计学意义(均P<0.05)。此外,过表达KLRC3也促进了LUAD细胞的凋亡和自噬,而KLRC3和莫诺苯宗对LUAD细胞凋亡和自噬的促进作用均可被3-MA所抵消,比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:莫诺苯宗可能通过促进KLRC3的表达诱导自噬进而促进LUAD细胞的凋亡。 展开更多

关键词 肺腺癌 莫诺苯宗 自然杀伤细胞激活受体基因 自噬 细胞凋亡 细胞活力

在线阅读 下载PDF 职称材料