α-酮戊二酸半醛脱氢酶的定点突变及酶学性质变化 被引量：2

1

作者 秦海彬 熊涛 +1 位作者 张博 牛坤 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期180-185,共6页

3-HP是一种性质优良的化学中间体,以甘油为底物生产3-HP的研究备受青睐,而限制3-HP产量的主要原因是Ald H活力过低。对源于Azospirillam brasilense的α-酮戊二酸半醛脱氢酶(KGSADH)基因同源建模和结构分析,采用定点突变方法得到高活力K... 3-HP是一种性质优良的化学中间体,以甘油为底物生产3-HP的研究备受青睐,而限制3-HP产量的主要原因是Ald H活力过低。对源于Azospirillam brasilense的α-酮戊二酸半醛脱氢酶(KGSADH)基因同源建模和结构分析,采用定点突变方法得到高活力KGSADH,将突变酶表达纯化,探讨酶学性质的变化。结果表明,TU-KGSADH(E120D/P219A)酶活力达6.03U/mg,比原始酶比酶活提高了322%,最适温度由35℃降低为30℃,且热稳定性降低,最适p H为8.0,在p H 6.0-8.0条件下酶活力有所提高。Zn^(2+)对KGSADH的酶活有较强的抑制作用,而Co^(2+)、Fe^(3+)、Fe^(2+)对KGSADH的酶活有较大的激活作用。在酶的动力学方面,TU-KGSADH对乙醛的K_m由7.58降为6.28 mmol/L,V_(max)由10.6提高为12.3 U/mg。对酶学性质改变的因素分析发现,120位突变与最适p H下降和p H稳定性向酸性偏移有关,219位突变可能是最适温度和热稳定性降低的原因,为醛脱氢酶进一步定向改造提供参考。 展开更多

关键词 α-酮戊二酸半醛脱氢酶 定点突变 表达纯化 酶学性质

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高湿环境对大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶的影响 被引量：6

2

作者 李昆 郭鑫 +4 位作者 杨芸 李薇 王超 宋富强 呼永河 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期2595-2596,共2页

目的观察高湿环境对肝脏异柠檬酸脱氢酶（IDH）与α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDHc）含量的影响。方法32只sD大鼠按随机数字表法分为常温常湿对照组及高湿环境20、30、40d组，每组8只大鼠。采用人工气候箱模拟高湿环境，条件设置为温度25℃... 目的观察高湿环境对肝脏异柠檬酸脱氢酶（IDH）与α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDHc）含量的影响。方法32只sD大鼠按随机数字表法分为常温常湿对照组及高湿环境20、30、40d组，每组8只大鼠。采用人工气候箱模拟高湿环境，条件设置为温度25℃、相对湿度90％～95％RH。实验组大鼠每天置于箱中10h，其余时间与常温常湿对照组饲养于清洁环境（温度22～26℃，相对湿度40％～60％RH）。动物模型制作完成后，取腹主动脉血及肝组织，酶联免疫法（EusA）检测肝脏组织IDH及α-KGDHc，比色法检测血清乳酸含量，并行肝组织HE病理切片观察。结果高湿环境20d组，肝脏IDH、α-KGDHc及血清乳酸含量较常温常湿对照组无显著变化。高湿环境30、40d组，肝脏IDH含量分别降至常温常湿对照组的75.98％和79.90％（P〈0.05），α-KGDHc含量分别降至常温常湿对照组的80.00％和81.01％（P〈0.05）。血清乳酸含量较常温常湿对照组分别升高了34.58％和23.33％（P〈0.01）。病理切片显示高湿环境40d大鼠肝脏点状坏死灶增多。结论高湿环境可致大鼠肝脏组织IDH、α-KGDHc含量降低，血乳酸升高，机体有氧代谢功能不足。 展开更多

关键词 高湿 异柠檬酸脱氢酶 α-酮戊二酸脱氢酶 乳酸

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创伤性脑损伤大鼠脑组织中α-酮戊二酸脱氢酶的活性变化及意义 被引量：2

3

作者 陆兆丰 陆若玉 +5 位作者 吴亚芳 朱刚毅 郏建臣 郭新民 陈悦华 亢崇仰 《新乡医学院学报》 CAS 2020年第4期306-311,共6页

目的探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织中α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)活性变化及意义。方法将80只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI-溶剂对照组、TBI-3-甲基-2-氧基戊酸(KMV)组,每组20只。TBI组、TBI-溶剂对照组和TBI-KM... 目的探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织中α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)活性变化及意义。方法将80只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI-溶剂对照组、TBI-3-甲基-2-氧基戊酸(KMV)组,每组20只。TBI组、TBI-溶剂对照组和TBI-KMV组大鼠建立中度液压TBI模型,假手术组大鼠给予相同的手术步骤,但不实施液压冲击。TBI前24 h,TBI-KMV组大鼠侧脑室注射10μL KMV,TBI-溶剂对照组大鼠侧脑室注射10μL生理盐水,注射速度为lμL·min^-1;假手术组和TBI组大鼠侧脑室不做注射。分别于TBI后24、72 h及7 d时,每组随机选取5只大鼠,采用Shapira和Wahl脑损伤神经功能评分法进行神经功能评分,Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆功能;Morris水迷宫实验后快速断头处死大鼠,完整取出脑组织,迅速分离出损伤侧大脑皮层、海马及丘脑,采用比色法检测脑组织中α-KGDHC活性。TBI后72 h,每组随机选取5只大鼠,应用40 g·L^-1多聚甲醛溶液灌注固定,断头取脑组织,采用Fluoro-Jade染色液对坏死神经元进行染色并计数。结果TBI后24、72 h及7 d,TBI组和TBI-溶剂对照组大鼠神经功能评分显著低于假手术组(P<0.05),TBI-KMV组大鼠神经功能评分显著低于TBI-溶剂对照组和TBI组(P<0.05),TBI-溶剂对照组与TBI组大鼠神经功能评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。TBI后24、72 h及7 d,TBI组和TBI-溶剂对照组大鼠登台时间及登台累计距离显著长于假手术组(P<0.05),TBI-KMV组大鼠登台时间及登台累计距离显著长于TBI-溶剂对照组和TBI组(P<0.05),TBI-溶剂对照组与TBI组登台时间及登台累计距离比较差异无统计学意义(P>0.05)。TBI后24、72 h及7 d,TBI组和TBI-溶剂对照组大鼠损伤侧大脑皮层、海马及丘脑组织中α-KGDHC活性显著低于假手术组(P<0.05),TBI-KMV组大鼠大脑皮层、海马及丘脑组织中α-KGDHC活性显著低于TBI组和TBI-溶剂对照组(P<0.05),TBI-溶剂对照组与TBI组大鼠大脑皮层、海马及丘脑组织中α-KGDHC活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。TBI后72 h,TBI组和TBI-溶剂对照组大鼠损伤侧大脑皮层、海马和丘脑坏死神经元数显著多于假手术组(P<0.05),TBI-KMV组大鼠损伤侧大脑皮层、海马和丘脑坏死神经元数显著多于TBI组和TBI-溶剂对照组(P<0.01),TBI组与TBI-溶剂对照组大鼠损伤侧大脑皮层、海马和丘脑坏死神经元数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TBI大鼠脑组织中α-KGDHC活性降低,抑制α-KGDHC活性可加重脑损伤,α-KGDHC可能参与了TBI和继发性脑损伤的发生与发展。 展开更多

关键词 创伤性脑损伤 α-酮戊二酸脱氢酶 神经功能 学习记忆功能

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尿素酶预处理-气相色谱-质谱法诊断琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病 被引量：1

4

作者 宋元宗 柳国胜 +1 位作者 张霆 王自能 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第3期327-330,共4页

本文探讨琥珀酸半醛脱氢酶 (succinicsemialdehydedehydrogenase ,SSADH)缺陷病各尿液标志物的气相色谱 质谱法 (GasChromatography MassSpectrometry,GC MS)分析特征。收集SSADH患儿的尿液标本 ,经去尿素、加内标 (正十七酸 )、除蛋... 本文探讨琥珀酸半醛脱氢酶 (succinicsemialdehydedehydrogenase ,SSADH)缺陷病各尿液标志物的气相色谱 质谱法 (GasChromatography MassSpectrometry,GC MS)分析特征。收集SSADH患儿的尿液标本 ,经去尿素、加内标 (正十七酸 )、除蛋白、真空干燥处理 ,残余物进行三甲基硅烷化衍生后进样行GC MS法分析。尿液中可检测到明显的 4 羟基丁酸、2 ,4 二羟基丁酸、3,4 二羟基丁酸和 4 ,5 二羟基己酸信号。在TIC图上 ,其绝对保留时间 (相对保留时间 )分别是 6 32min(0 4 34) ,7 80min(0 5 36 ) ,7 94min(0 5 4 6 ) ,8 80min ,8 90min(0 6 0 5 ,0 6 12 )。在质谱图上 ,其特征离子 (m z,TMS)分别是M 15 (2 33,2 ) ,M 15 (32 1,3) ,M 15 (32 1,3) ,M 15 (349,3)。GC MS法分离鉴定尿液代谢成分 ,可作为诊断该病的一种可靠手段。 展开更多

关键词 琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病 尿素酶 气相色谱-质谱法 遗传性代谢病

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酶解和碱处理对半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体结构的影响 被引量：1

5

作者 孙雪 谢益民 +3 位作者 杨海涛 姚兰 王鹏 范建云 《中国造纸学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期52-55,共4页

以果胶结构单元D-半乳糖醛酸和木素前驱物松柏醇-β-D-葡萄糖苷为原料,在多种生物酶的协同作用下合成了半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体(GDHPC),并分别用酶解(果胶酶)和碱法(1 mol/L的NaOH)对GDHPC进行处理。FT-IR和13C-NMR分析表明,D... 以果胶结构单元D-半乳糖醛酸和木素前驱物松柏醇-β-D-葡萄糖苷为原料,在多种生物酶的协同作用下合成了半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体(GDHPC),并分别用酶解(果胶酶)和碱法(1 mol/L的NaOH)对GDHPC进行处理。FT-IR和13C-NMR分析表明,D-半乳糖醛酸和木素脱氢聚合物之间形成了以苯甲醚键和酯键2种形式连接的木素-碳水化合物连接键;酶解和碱法处理都能在一定程度上削弱D-半乳糖醛酸的特征峰;碱法处理能降解酯键,但对苯甲醚键的降解作用并不明显;酶解对酯键和苯甲醚键的降解效果均较差。 展开更多

关键词 半乳糖醛酸-木素脱氢聚合物复合体 果胶酶 漆酶 13C-NMR

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α-酮戊二酸脱氢酶复合物在缺血性脑卒中后的适应性再灌注中的保护作用研究 被引量：3

6

作者 陈作乾 林国诗 +5 位作者 戴学军 王梦莹 陈炳宏 杨建 邱永明 林瑞生 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第9期961-967,共7页

目的:研究α-酮戊二酸脱氢酶复合物(α-KGDHC)在大鼠缺血性脑卒中后的适应性再灌注中的保护作用,且探讨其作用机制。方法:建立脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠的缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型,TT... 目的:研究α-酮戊二酸脱氢酶复合物(α-KGDHC)在大鼠缺血性脑卒中后的适应性再灌注中的保护作用,且探讨其作用机制。方法:建立脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠的缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型,TTC染色后使用成像软件计算缺血后的脑梗死体积。化学方法检测α-KGDHC活性,评估α-KGDHC活性随脑缺血时间的变化趋势,并比较普通再灌注组和适应性再灌注组的差异;用CoCl 2处理大鼠神经母细胞瘤细胞B35和人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y模拟细胞缺氧,用E1K siRNA抑制α-KGDHC活性,Western blot检测凋亡抑制蛋白Bcl-2,促凋亡蛋白Bax和Caspase 3的表达变化。结果:在MCAO模型中适应性再灌注较普通再灌注进一步减少了脑梗死体积(P<0.05),凋亡蛋白Caspase 3表达量降低;大脑皮层和海马脑组织中α-KGDHC活性随着缺血时间延长而降低(P<0.05),适应性再灌注抑制了α-KGDHC活性衰减的速率(P<0.05)。通过干扰α-KGDHC的组分E1K可以抑制Bcl-2的表达(P<0.05),促进Bax的表达(P<0.05)和Caspase 3的表达(P<0.05)。结论:研究表明,α-KGDHC是脑缺血后适应性再灌注脑保护作用的重要因子,其发挥脑保护作用可能与抑制凋亡通路的活化有关。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 适应性再灌注 α-酮戊二酸脱氢酶复合物 凋亡

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睾丸酮丛毛单胞菌CNB1中2–氨基–5–氯粘康酸半醛脱氢酶的表达纯化与结晶

7

作者 陈文成 谢元美 +1 位作者 刘祥 赵树欣 《天津科技大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期19-23,29,共6页

硝基苯类化合物作为一种重要的化工原料,在工业广泛应用的同时也产生了环境污染.目前降解硝基苯类污染物的方法有物理法、化学法和生物法,其中生物修复法具有低成本、无二次污染、生态恢复性好等优点.硝基苯类化合物中的对氯硝基苯是一... 硝基苯类化合物作为一种重要的化工原料,在工业广泛应用的同时也产生了环境污染.目前降解硝基苯类污染物的方法有物理法、化学法和生物法,其中生物修复法具有低成本、无二次污染、生态恢复性好等优点.硝基苯类化合物中的对氯硝基苯是一种高毒、危险的合成品,会对人体造成直接或间接的生理损伤.来源于睾丸酮丛毛单胞菌CNB1(Comamonas testosteroni CNB1)的2–氨基–5–氯粘康酸半醛脱氢酶(2-amino-5-chloromuconic semialdehyde dehydrogenase,Cnb D)是对氯硝基苯降解通路中的关键酶.研究Cnb D的晶体结构有助于完善生物修复治理对氯硝基苯污染的机制.实验以睾丸酮丛毛单胞菌CNB1中的Cnb D为研究对象,将基因cnb D克隆到p ET-28,a(+)上进行原核表达.通过镍离子亲和层析和凝胶过滤层析等纯化方法获得重组蛋白Cnb D.在289,K下获取了2种重组蛋白Cnb D晶体,并在同步辐射光源BL19,U光束线的0.10,nm波长X射线衍射下得到最高衍射分辨率分别为0.18,nm和0.22,nm的衍射数据.采用分子置换法,初步解析了Cnb D的同源四聚体结构. 展开更多

关键词 2–氨基–5–氯粘康酸半醛脱氢酶 对氯硝基苯 睾丸酮丛毛单胞菌 蛋白晶体 分子置换法

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桥联黄素再生NAD^(+)耦联L-谷氨酸脱氢酶高效产α-酮戊二酸

8

作者 谭卓涛 付静雯 +4 位作者 张肖旺 韩耀颖 付亚萍 朱晨杰 应汉杰 《生物加工过程》 CAS 2021年第2期136-141,共6页

在L-谷氨酸脱氢酶(EC 1.4.1.3,L-GluDH)催化L-谷氨酸氧化脱氨过程中涉及昂贵的氧化型烟酰胺辅因子NAD^(+),因此需要构建其再生体系以降低成本。通过构建桥联黄素(F4)耦联L-谷氨酸脱氢酶催化L-谷氨酸生产α-酮戊二酸(α-KG)的新型均相体... 在L-谷氨酸脱氢酶(EC 1.4.1.3,L-GluDH)催化L-谷氨酸氧化脱氨过程中涉及昂贵的氧化型烟酰胺辅因子NAD^(+),因此需要构建其再生体系以降低成本。通过构建桥联黄素(F4)耦联L-谷氨酸脱氢酶催化L-谷氨酸生产α-酮戊二酸(α-KG)的新型均相体系,桥联黄素能高效氧化天然还原型烟酰胺辅因子NADH至其氧化态NAD^(+),从而减缓NADH对L-谷氨酸脱氢酶的抑制,提高α-KG产率的同时降低NAD^(+)用量。通过单因素考察,筛选得到来自艰难梭菌的L-谷氨酸脱氢酶作为酶源,在Tris-HCl缓冲液环境下进行氧化脱氨反应,结合响应面法(RSM)确立了最佳反应条件:NAD^(+)浓度1 mmol/L,F4浓度1 mmol/L,pH 8。在底物L-谷氨酸15 mmol/L条件下放大反应,24 hα-KG的收率达到92%。 展开更多

关键词 α-酮戊二酸 L-谷氨酸脱氢酶 酶催化 桥联黄素 辅因子再生 生物制造

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琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症研究进展 被引量：2

9

作者 舒剑波 姜淑贞 孟英韬 《继续医学教育》 2014年第10期16-20,共5页

琥珀酸半醛脱氢酶缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传病,属于γ-氨基丁酸代谢性疾病中的一种。临床表现主要以神经系统异常为主,包括发育落后、抽搐、肌张力低下等。气相色谱/质谱技术在尿中检出4-羟基丁酸是诊断的重要依据,确诊需依... 琥珀酸半醛脱氢酶缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传病,属于γ-氨基丁酸代谢性疾病中的一种。临床表现主要以神经系统异常为主,包括发育落后、抽搐、肌张力低下等。气相色谱/质谱技术在尿中检出4-羟基丁酸是诊断的重要依据,确诊需依靠酶学检测和基因分析。ALDH5A1基因是本病的致病基因,已发现的基因突变超过50余种,但没有热点突变。治疗方面主要是对症治疗,没有特效药物。从琥珀酸半醛脱氢酶缺乏症发现过程、致病机理、临床表现、诊断治疗、动物模型及分子遗传学等方面对该病进行综述。 展开更多

关键词 琥珀酸半醛脱氢酶 4-羟基丁酸 ALDH5A1基因

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钙浓度对聚谷氨酸合成通路中α-酮戊二酸脱氢酶的表达调控

10

作者 张宸 韩真 《生物化工》 2019年第4期24-26,共3页

本文研究了钙离子在纳豆芽孢杆菌HSF1410发酵聚谷氨酸过程中对α-酮戊二酸脱氢酶调控机制。实验发现,随着发酵液中添加钙离子浓度不断增大,ogdh基因转录水平也逐渐提高,进而提高酶表达量、增强酶活、提高聚谷氨酸产量。本实验为下一步... 本文研究了钙离子在纳豆芽孢杆菌HSF1410发酵聚谷氨酸过程中对α-酮戊二酸脱氢酶调控机制。实验发现,随着发酵液中添加钙离子浓度不断增大,ogdh基因转录水平也逐渐提高,进而提高酶表达量、增强酶活、提高聚谷氨酸产量。本实验为下一步从分子生物学角度研究聚谷氨酸合成途径与调节机制提供思路。 展开更多

关键词 钙 α-酮戊二酸脱氢酶 聚谷氨酸 纳豆芽孢杆菌

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琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病MRI影像表现一例

11

作者 黄卫保 林剑军 +1 位作者 马慧 耿国兴 《放射学实践》 北大核心 2020年第5期696-697,共2页

琥珀酸半醛脱氢酶(succinic semialdehyde dehydrogenase,SSADH)缺陷病是一种罕见的常染色体隐性遗传病,由SSADH缺陷引起,当此酶活性下降,琥珀酸半醛则通过琥珀酸半醛还原酶生成4-羟基丁酸(Gamma-Hydroxybutyrate,GHB),造成GHB在血清、... 琥珀酸半醛脱氢酶(succinic semialdehyde dehydrogenase,SSADH)缺陷病是一种罕见的常染色体隐性遗传病,由SSADH缺陷引起,当此酶活性下降,琥珀酸半醛则通过琥珀酸半醛还原酶生成4-羟基丁酸(Gamma-Hydroxybutyrate,GHB),造成GHB在血清、尿液、脑脊液中大量蓄积,引发临床症状,所以本病也称为4-羟基丁酸尿症。现将本院诊断的1例SSADH缺陷病患儿的临床及影像表现报道如下。临床资料患儿,女,1岁1个月,因抽搐再发1天于2018年10月20日入院。 展开更多

关键词 琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病 磁共振成像 常染色体隐性遗传病 遗传代谢性脑病 4-羟基丁酸尿症

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尿素酶-谷氨酸脱氢酶偶联法测定尿素氮的实验观察

12

作者 庄一义 吴建平 《医学研究生学报》 CAS 1989年第2期34-36,共3页

以本科自制的尿素酶和谷氨酸脱氢酶用于美国 IL-508生化自动分析仪的尿素氮酶偶联法测定,经实验取得的最适试剂配方为尿素酶12 000 IU/L,谷氨酸脱氨酶1200IU/L,α-酮戊二酸3mmol/L,ADP 0.5mmol/L 和 NADH 0.3mmol/L。本科测定与进口、... 以本科自制的尿素酶和谷氨酸脱氢酶用于美国 IL-508生化自动分析仪的尿素氮酶偶联法测定,经实验取得的最适试剂配方为尿素酶12 000 IU/L,谷氨酸脱氨酶1200IU/L,α-酮戊二酸3mmol/L,ADP 0.5mmol/L 和 NADH 0.3mmol/L。本科测定与进口、国产试剂盒对照结果一致,方法性能良好。本文讨论了酶的配比、ADP 和α-酮戊二酸用量等对酶速率测定的影响。 展开更多

关键词 偶联法 尿素酶 实验观察 生化自动分析仪 脱氨酶 α-酮戊二酸 方法性能 谷氨酸脱氢酶 试剂盒 NADH

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α-酮戊二酸介导异柠檬酸脱氢酶3A发挥抑制心肌细胞肥大的作用

13

作者 伍华燕 温艺红 +5 位作者 赵亨利 高原 周川孟 王娅 朱杰宁 单志新 《中山大学学报(医学科学版)》 2025年第2期275-283,共9页

【目的】探究异柠檬酸脱氢酶3A(IDH3A)对心肌细胞肥大的调控作用和潜在机制。【方法】通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot实验检测健康志愿者(n=10)与心力衰竭患者(n=10)心肌组织标本、假手术组与主动脉弓缩窄术(TAC)小鼠心肌... 【目的】探究异柠檬酸脱氢酶3A(IDH3A)对心肌细胞肥大的调控作用和潜在机制。【方法】通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot实验检测健康志愿者(n=10)与心力衰竭患者(n=10)心肌组织标本、假手术组与主动脉弓缩窄术(TAC)小鼠心肌标本以及去氧肾上腺素(PE)诱导的乳大鼠心肌细胞(NRVCs)中IDH3A的表达水平。利用腺病毒介导在PE诱导的NRVCs中过表达IDH3A,检测其对NRVCs肥厚相关基因表达的影响,并通过鬼笔环肽染色检测IDH3A对NRVCs面积的影响。利用序列突变方式构建消除IDH3A酶活性的突变体(IDH3A_D208A),通过检测其对NRVCs肥大表型、ATP和ROS水平影响来验证IDH3A是否依赖酶活性发挥调节心肌细胞肥大作用。Western blot和鬼笔环肽染色检测外源给予α-酮戊二酸(AKG)对心肌细胞肥大的影响。【结果】IDH3A在心衰患者心肌、TAC手术小鼠心肌、PE诱导的NRVCs中表达均显著下调(分别为P=0.0052、P=0.0266、P=0.0413和P=0.0066)。过表达IDH3A可显著抑制PE诱导的NRVCs中肥厚相关基因表达和细胞表面积增大(分别为P<0.0001、P=0.0001和P=0.0002)。ATP和ROS水平检测结果表明过表达IDH3A能够抑制PE诱导的NRVCs中ATP和ROS水平的增加(分别为P=0.0012和P<0.0001),而无酶活性的IDH3A突变体则不具备该作用。外源给予AKG可以,而无酶活性的IDH3A突变体无法抑制PE诱导的NRVCs肥大。【结论】IDH3A通过生成AKG发挥抑制心肌细胞肥大的作用,为以IDH3A为靶点的心肌肥厚治疗研究提供科学资料。 展开更多

关键词 心肌肥厚 异柠檬酸脱氢酶3A α-酮戊二酸 心肌细胞 线粒体

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荧光半定量逆转录-聚合酶链式反应检测大鼠死后肾mRNA 被引量：4

14

作者 朱方成 蔡成忠 +3 位作者 王树法 刘良 任亮 朱少华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1628-1630,共3页

目的探讨荧光半定量逆转录-聚合酶链式反应(fluorescencesemi-quantitativereversetranscrip-tase-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测大鼠死后不同时间肾3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA含量变化对死亡时间(postmorteminterval,P... 目的探讨荧光半定量逆转录-聚合酶链式反应(fluorescencesemi-quantitativereversetranscrip-tase-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测大鼠死后不同时间肾3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA含量变化对死亡时间(postmorteminterval,PMI)推断的应用价值。方法28只大鼠断颈处死后置于20℃温控系统内,利用荧光标记半定量RT-PCR技术检测大鼠肾GAPDHmRNA在死后48h内相对表达量的变化情况。结果在死后即刻至40h内大鼠肾均可检测出GAPDHmRNA,且其扩增产物呈规律性下降。结论荧光半定量RT-PCR技术检测大鼠死后肾GAPDHmRNA含量变化对PMI推断具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 死亡时间(PMI) 荧光半定量技术 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)

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醛酮还原酶AKR1C3促进前列腺癌进展、转移和耐药的研究进展

15

作者 严婧 姚洲 +3 位作者 李方琪 张琦 钟文韬 李晶 《国际老年医学杂志》 2022年第4期476-479,共4页

前列腺癌是男性高发癌症,雄激素剥夺治疗(ADT)后易发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC),经免疫组化和标本活检发现癌细胞内雄激素的再次增多是导致CRPC的主要原因之一。2型3α-羟基类固醇脱氢酶醛酮还原酶(AKR1C3)与CRPC细胞中雄激素自身合... 前列腺癌是男性高发癌症,雄激素剥夺治疗(ADT)后易发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC),经免疫组化和标本活检发现癌细胞内雄激素的再次增多是导致CRPC的主要原因之一。2型3α-羟基类固醇脱氢酶醛酮还原酶(AKR1C3)与CRPC细胞中雄激素自身合成途径密切相关,并促进CRPC进展为耐药或转移侵袭,因此靶向抑制AKR1C3可治疗CRPC。本文对AKR1C3在前列腺癌进展、转移和耐药中的作用机制及新型AKR1C3抑制剂对CRPC的治疗作一综述。 展开更多

关键词 2型3α-羟基类固醇脱氢酶醛酮还原酶 去势抵抗性前列腺癌 雄激素 抑制剂

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异柠檬酸脱氢酶2突变或诱导机体产生肉瘤

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作者 陈曦 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期452-452,共1页

线粒体内依赖辅酶NADP＋的异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）在新陈代谢中起重要作用,IDH2催化异柠檬酸脱氢生成α-酮戊二酸（αKG）,参与三羧酸循环。而当其发生突变时,IDH2则催化异柠檬酸生成2-羟戊二酸（2HG）,并竞争性抑制αKG的DNA-组蛋白... 线粒体内依赖辅酶NADP＋的异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）在新陈代谢中起重要作用,IDH2催化异柠檬酸脱氢生成α-酮戊二酸（αKG）,参与三羧酸循环。而当其发生突变时,IDH2则催化异柠檬酸生成2-羟戊二酸（2HG）,并竞争性抑制αKG的DNA-组蛋白脱甲基酶,导致细胞分化功能受损。 展开更多

关键词 异柠檬酸脱氢酶 α-酮戊二酸 三羧酸循环 致癌作用 基因甲基化 细胞分化 竞争性抑制 间质干细胞 DNA 无限增殖

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2024年国际SSADHD共识小组《琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病的诊断和管理共识指南》解读

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作者 康贝贝 徐磊 +5 位作者 余强 范艳萍 祝莉洁 郑雪媚 曹建国 王家勤 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期738-742,共5页

琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病(SSADHD)是一种罕见的常染色体隐性遗传的神经代谢性疾病。ALDH5A1基因致病性变异导致琥珀酸半醛脱氢酶的结构、活性及功能异常而引起一系列神经系统损害。由于SSADHD的罕见性及其临床表现的巨大差异性,往往导致... 琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病(SSADHD)是一种罕见的常染色体隐性遗传的神经代谢性疾病。ALDH5A1基因致病性变异导致琥珀酸半醛脱氢酶的结构、活性及功能异常而引起一系列神经系统损害。由于SSADHD的罕见性及其临床表现的巨大差异性,往往导致误诊或诊断滞后,本病尚无特效药物或治疗方法,治疗以对症为主。2024年3月,来自11个国家和地区的19个机构的SSADHD研究人员组成共识小组发布了《琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病的诊断和管理共识指南》,对SSADHD的定义、流行病学、临床表现、诊断、治疗等方面进行了阐述,旨在规范、统一SSADHD的诊断和管理。现就该指南的重点内容进行解读,以期为我国SSADHD的早期筛查、诊断、治疗提供指导。 展开更多

关键词 琥珀酸半醛脱氢酶缺陷病 4-羟基丁酸 Γ-氨基丁酸 ALDH5A1基因

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亚低温对创伤性脑损伤后线粒体α-酮戊二酸脱氢酶活性的影响 被引量：29

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作者 陆兆丰 贾锋 +2 位作者 邱永明 罗其中 江基尧 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第11期659-662,共4页

目的研究亚低温对脑损伤后病理学,α-酮戊二酸脱氢酶(α-ketoglutarate dehydrogenase complex,α-KGDHC)活性以及Caspase-3活性的影响。方法雄性SD大鼠50只随机分七组：假手术组(n=5),液压脑损伤常温组(1．8～2．2atm)(n=25),液压脑损... 目的研究亚低温对脑损伤后病理学,α-酮戊二酸脱氢酶(α-ketoglutarate dehydrogenase complex,α-KGDHC)活性以及Caspase-3活性的影响。方法雄性SD大鼠50只随机分七组：假手术组(n=5),液压脑损伤常温组(1．8～2．2atm)(n=25),液压脑损伤亚低温组(n=20)。常温组伤后6h,24h,72h,7d检测创伤侧皮层、海马及丘脑线粒体α-KGDHC活性及Caspase-3的活性。伤后15min应用亚低温,30min内脑温降至33℃并维持4h,检测24h及72h酶活性以及Caspase-3的活性。以及亚低温对损伤后24h皮层丘脑及海马CA3区神经病理的影响。结果Fluoro-jade染色显示亚低温显著减少损伤后24h坏死神经元数目(P＜0．05),伤后24h及72h KGDHC酶的活性显著增加(P＜0．05)。伤后24h Caspase-3的活性显著降低(45%)。结论创伤性脑损伤后早期亚低温能够恢复能量代谢酶的活性,抑制神经元凋亡,减轻损伤后神经元的变性。 展开更多

关键词 创伤性脑损伤 α-酮戊二酸脱氢酶 亚低温 细胞凋亡 大鼠

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电针对脑卒中肢体痉挛大鼠γ-氨基丁酸代谢酶的影响 被引量：25

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作者 毛雪莲 秦思 +3 位作者 金荣疆 朱天民 沈小雨 冯丽娟 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期22-28,共7页

目的:探讨电针通过调控γ-氨基丁酸代谢酶改善脑卒中肢体痉挛大鼠肌张力的作用机制。方法:将24只SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组和电针组。用大脑中动脉栓塞法建立局灶性脑缺血模型。电针组造模成功后第3天开始取申脉,照海针刺治疗... 目的:探讨电针通过调控γ-氨基丁酸代谢酶改善脑卒中肢体痉挛大鼠肌张力的作用机制。方法:将24只SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组和电针组。用大脑中动脉栓塞法建立局灶性脑缺血模型。电针组造模成功后第3天开始取申脉,照海针刺治疗6天,其余组在同等条件下饲养,不做其他处理。采用Bederson评定神经功能,Ashworth分级评定肌张力,Feeney平衡木评分标准评定运动功能,免疫组化染色SP法、实时定量PCR测定各组标本中GABA-T、SSADH的表达。结果:与模型组相比,治疗后电针组神经功能缺损症状改善(P<0.05);肌张力降低(P<0.05);运动功能提高(P<0.05)。免疫组化染色SP法示GABA-T平均光密度值电针组颈膨大(模型组:0.2256±0.0190;电针组:0.2094±0.0083)和腰膨大中(模型组:0.2163±0.0088;电针组:0.1988±0.0054)较模型组明显下降(P<0.05);而脑干中较模型组表达也有下降趋势(模型组:0.2129±0.0086;电针组:0.2072±0.0119)。实时定量PCR测定SSADHm RNA结果与模型组比较显示电针组脑干(模型组:1.67±0.38;电针组:1.22±0.07)、颈膨大(模型组:1.27±0.28;电针组:0.96±0.09)和腰膨大中(模型组:1.07±0.32;电针组:1.08±0.07)表达均降低(P<0.05)。结论:电针阴阳跷脉腧穴通过降低中枢系统中GABA-T和SSADH的释放使GABA的降解速度减慢,从而增加突触间隙的GABA浓度,增强GABA的抑制作用是改善偏瘫肢体痉挛的可能机制之一。 展开更多

关键词 脑卒中 肢体痉挛 电针 γ-氨基丁酸转氨酶 琥珀酸半醛脱氢酶

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补肾、健脾、活血法对骨质疏松症小鼠骨骼、骨骼肌α-酮戊二酸脱氢酶的影响 被引量：5

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作者 杨芳 孙鑫 +2 位作者 郑洪新 林庶如 王拥军 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期586-588,共3页

目的:观察中医不同治法对骨质疏松症小鼠骨骼、骨骼肌α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)含量变化的影响。方法:除正常组外,将护骨素(OPG)基因敲除小鼠随机分为模型组、补肾组、健脾组、活血组和福善美组。测定小鼠骨骼、骨骼肌α-KGDHC含量... 目的:观察中医不同治法对骨质疏松症小鼠骨骼、骨骼肌α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)含量变化的影响。方法:除正常组外,将护骨素(OPG)基因敲除小鼠随机分为模型组、补肾组、健脾组、活血组和福善美组。测定小鼠骨骼、骨骼肌α-KGDHC含量变化。结果:与正常组比较,模型组、健脾组、活血组小鼠骨骼、骨骼肌的α-KGDHC显著降低(P<0.01);与模型组比较,补肾组和福善美组小鼠骨骼、骨骼肌的α-KGDHC明显升高(P<0.01)。结论:①骨质疏松症的形成,可能与骨骼、骨骼肌α-KGDHC含量异常变化有关。②补肾、健脾方法通过提高骨质疏松症小鼠的骨骼、骨骼肌α-KGDHC,对骨质疏松症具有一定的防治作用。 展开更多

关键词 骨质疏松症 α-酮戊二酸脱氢酶 骨骼肌 补肾 健脾 活血

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