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一株耐高温β-胡萝卜素降解菌的筛选及发酵工艺优化 被引量:1
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作者 张疏雨 张善林 +4 位作者 李剑梅 柴林山 谢存一 朱万芹 云晶 《农产品加工》 2024年第9期62-69,74,共9页
以提升烟叶香韵为目的,对4株产香酵母菌进行发酵培养,通过产香感官评价、酶活分析、烟叶发酵成分分析(GC-MS法),筛选得到1株β-胡萝卜素降解产香酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SC35。方法:①4株酵母菌发酵产香效果感官评价;②CS35... 以提升烟叶香韵为目的,对4株产香酵母菌进行发酵培养,通过产香感官评价、酶活分析、烟叶发酵成分分析(GC-MS法),筛选得到1株β-胡萝卜素降解产香酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SC35。方法:①4株酵母菌发酵产香效果感官评价;②CS35菌株β-胡萝卜素降解效果分析、样品萃取及GC-MS靶向测试分析;③酶活测定、酶促反应体系研究;④菌株SC35发酵工艺优化及响应面优化。SC35在70℃高温环境下能有效加速β-胡萝卜素的降解,降解产物为1,3-环己二酮、氧化异佛尔酮、β-紫罗兰酮等,通过单因素试验和响应面法优化菌株SC35的最佳培养基配方中各组分添加量依次为葡萄糖2.01%,NaNO20.20%,K2HPO40.10%,MgSO40.05%,FeSO4·7H2O 0.001%,KCl 0.05%;最佳发酵条件为发酵温度27.65℃,发酵时间72 h,接种量0.99%,摇床转速140 r/min,装液量100 mL/250 mL,pH值5.5(自然)。采用优化后发酵工艺SC35粗酶液降解效率可达86%以上。 展开更多
关键词 β-胡萝卜素降解率 发酵工艺优化 响应面法
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代谢工程改造酿酒酵母发酵生产β-胡萝卜素
2
作者 李渊涛 石贵阳 +4 位作者 张梁 丁重阳 周景文 李由然 徐沙 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期26-34,共9页
β-胡萝卜素属于多烯烃类,是水果和蔬菜中含量最高的类胡萝卜素,能够预防并减轻心脏病,白内障和癌症等疾病,市场需求量较大,利用生物合成法生产β-胡萝卜素具有较好的应用前景。胞质乙酰辅酶A是β-胡萝卜素合成的重要前体,如何提高胞质... β-胡萝卜素属于多烯烃类,是水果和蔬菜中含量最高的类胡萝卜素,能够预防并减轻心脏病,白内障和癌症等疾病,市场需求量较大,利用生物合成法生产β-胡萝卜素具有较好的应用前景。胞质乙酰辅酶A是β-胡萝卜素合成的重要前体,如何提高胞质乙酰辅酶A的含量是高效合成β-胡萝卜素的关键。该研究利用米曲霉(Aspergillus oryzae)来源的ATP-柠檬酸裂解酶基因(ATP-citrate lyase,ACL)转化出发菌株ZS20,同时过表达酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)自身CAB 1基因,从而增加胞质乙酰辅酶A含量,β-胡萝卜素产量显著提高,菌株L5的摇瓶发酵产量达到333.3 mg/L,是出发菌株的2.1倍。在此基础上,菌株L5回补缺陷的腺嘌呤、赖氨酸、亮氨酸和色氨酸合成关键基因得到菌株L11,β-胡萝卜素摇瓶发酵产量为378.1 mg/L。经发酵罐发酵优化后,产量提高到1152.7 mg/L。 展开更多
关键词 酿酒酵母 Β-胡萝卜素 乙酰辅A ATP-柠檬酸裂解 氨基酸
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草莓ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS的克隆及特征分析 被引量:17
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作者 李永平 朱海生 +2 位作者 温庆放 花秀凤 林珲 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期670-674,共5页
用RT-PCR和RACE技术从草莓(Fragaria ananassa Duchesne)果实中克隆到ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS,命名为FaZDS,其cDNA全长2148 bp,具有1个1710 bp的完整开放阅读框(ORF),编码569个氨基酸。序列分析表明,FaZDS编码的氨基酸序列与其它植物... 用RT-PCR和RACE技术从草莓(Fragaria ananassa Duchesne)果实中克隆到ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS,命名为FaZDS,其cDNA全长2148 bp,具有1个1710 bp的完整开放阅读框(ORF),编码569个氨基酸。序列分析表明,FaZDS编码的氨基酸序列与其它植物的ZDS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析表明,草莓与苹果的ZDS蛋白亲缘关系较近。原核表达结果表明FaZDS基因在大肠杆菌中能高效表达。用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析表明,FaZDS基因在草莓的花、叶片和果实中均有表达,表达量为花>红果>粉红果>白果>青果>叶。 展开更多
关键词 草莓 ζ-胡萝卜素脱氢 FaZDS基因 基因克隆
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β-胡萝卜素对阿霉素致大鼠心肌组织的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶mRNA表达改变的影响 被引量:20
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作者 阳冠明 孙胜涛 +5 位作者 李树全 林伟雄 刘微 叶司原 利基林 林善修 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期465-470,共6页
目的研究β-胡萝卜素(BC)对阿霉素(ADM)所致大鼠心肌组织的锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)mRNA、铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)mRNA、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)mRNA表达改变的影响,探讨BC拮抗ADM导致心肌组织的Mn SOD、Cu-Zn SOD、GPx活性... 目的研究β-胡萝卜素(BC)对阿霉素(ADM)所致大鼠心肌组织的锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)mRNA、铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)mRNA、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)mRNA表达改变的影响,探讨BC拮抗ADM导致心肌组织的Mn SOD、Cu-Zn SOD、GPx活性降低的机制。方法大鼠腹腔注射(ip)ADM(10·0mg·kg-1,1次);ADM处理的大鼠灌胃(ig)不同剂量的BC(每天1次,3次;ipADM前igBC,每天1次,11次行预处理)进行干预。分别用硫代巴比妥酸法、硝酸还原酶法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝基苯甲酸法、血红蛋白氧化法测定心肌组织的丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量、Mn SOD及Cu-Zn SOD活性、GPx活性、一氧化氮合酶活性;RT-PCR方法检测心肌组织的Mn SODmRNA、Cu-Zn SOD mRNA、GPx mRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达。结果BC(20·0,40·0,80·0mg·kg-1)拮抗ADM所致心肌组织的MDA含量及NO含量增加、iNOS mRNA表达水平增加及其酶活性增加(P<0·01);拮抗ADM所致心肌组织的Mn SOD mRNA、Cu-Zn SOD mR-NA、GPx mRNA表达水平降低及其酶活性降低(P<0·01)。结论BC拮抗ADM导致心肌组织的Mn SOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA表达降低而拮抗ADM导致Mn SOD、Cu-Zn SOD、GPx活性降低。其机制可能与BC抑制ADM诱导心肌组织的iNOS mRNA表达而降低iNOS活性使心肌组织产生NO减少,从而减少NO抑制Mn SOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA表达有关。 展开更多
关键词 Β-胡萝卜素 阿霉素 超氧化物歧化 谷胱甘肽过氧化物 一氧化氮合 一氧化氮 基因表达
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酶处理对胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量的影响 被引量:7
5
作者 车振明 朱秀灵 +1 位作者 万国福 王燕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期93-95,98,共4页
实验将纤维素酶、果胶酶以及两者复合处理的方法应用到胡萝卜汁生产工艺中,探索其对提高胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量的影响。结果表明,先经纤维素酶处理,再经果胶酶处理,胡萝卜汁中的β-胡萝卜素含量最高,与空白相比提取率约增加了140%,... 实验将纤维素酶、果胶酶以及两者复合处理的方法应用到胡萝卜汁生产工艺中,探索其对提高胡萝卜汁中β-胡萝卜素含量的影响。结果表明,先经纤维素酶处理,再经果胶酶处理,胡萝卜汁中的β-胡萝卜素含量最高,与空白相比提取率约增加了140%,且复合酶使用效果优于单一酶使用效果。 展开更多
关键词 Β-胡萝卜素 纤维素 果胶 复合
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小麦ζ-胡萝卜素脱氢酶cDNA全序列的克隆 被引量:7
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作者 丛玲 刘璐 +4 位作者 汪成 姚琴 汪越胜 杨广笑 何光源 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期1-3,共3页
目的:从普通小麦品种EM12中克隆ζ-胡萝卜素脱氢酶(ζ-carotene desaturase,ZDS)基因的cDNA全长序列。方法:根据已报道的EST序列,应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,对EST两端未知序列进行扩增、克隆和测序。结果:克隆得到cDNA全长序列215... 目的:从普通小麦品种EM12中克隆ζ-胡萝卜素脱氢酶(ζ-carotene desaturase,ZDS)基因的cDNA全长序列。方法:根据已报道的EST序列,应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,对EST两端未知序列进行扩增、克隆和测序。结果:克隆得到cDNA全长序列2150bp,其ORF序列为1707bp,预测编码568个氨基酸残基,推测蛋白质分子量62.5kDa,带有一段19aa的信号肽序列。结论:根据同源序列分析,该序列与水稻ZDS蛋白的同源性为97%,与玉米ZDS蛋白的同源性为91%,而且与其他高等植物的ZDS都具有较高的同源性。该基因序列的分离与克隆为进一步开展小麦β-胡萝卜素生物合成机制的研究和利用转基因技术提高小麦β-胡萝卜素含量的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 ζ-胡萝卜素脱氢(ZDS) 小麦 RACE RT-PCR
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具不同脂肪氧合酶同工酶的大豆种子提取液漂白β-胡萝卜素的能力差异(英文) 被引量:4
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作者 麻浩 张雪丹 +1 位作者 王显生 何小玲 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期681-687,共7页
大豆种子中含有3种脂肪氧合酶同工酶(Lox1、Lox2和Lox3)。以含有不同脂肪氧合酶同工酶大豆品系种子为材料,揭示不同提取和反应条件下,不同品系Lox提取液漂白β-胡萝卜素的特性差异。结果表明:Lox1,Lox2,Lox3,Lox1,2和Lox1,2,3的最适提... 大豆种子中含有3种脂肪氧合酶同工酶(Lox1、Lox2和Lox3)。以含有不同脂肪氧合酶同工酶大豆品系种子为材料,揭示不同提取和反应条件下,不同品系Lox提取液漂白β-胡萝卜素的特性差异。结果表明:Lox1,Lox2,Lox3,Lox1,2和Lox1,2,3的最适提取液是Tris-HCl缓冲液(pH6.8),而Lox1,3和Lox2,3的最适提取液是磷酸缓冲液(pH6.0)。完全漂白β-胡萝卜素所需反应时间长短顺序是Lox1,2,3,Lox3>Lox2,3,Lox1,3>Lox1,Lox2>Lox1,2;在最适反应温度条件下,Lox提取液的漂白能力大小顺序是Lox1,3>Lox1,2,3,Lox2,3>Lox3>Lox1,2,Lox1>Lox2,而在最适pH条件下,Lox提取液的漂白能力大小顺序是Lox1,3,Lox2,3>Lox1,2,3>Lox1,2>Lox2>Lox3>Lox1。随着Lox提取液的放置时间延长,其漂白能力下降。含有Lox3的品系提取液(也就是Lox1,3,Lox2,3和Lox1,2,3的提取液)比不含Lox3或仅含单一同工酶品系的提取液具有更好的漂白能力,说明Lox3是获得高效漂白能力必不可少的同工酶。 展开更多
关键词 大豆 脂肪氧合同工 Lox提取液 Β-胡萝卜素 漂白
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柿ζ-胡萝卜素脱氢酶基因的克隆与序列分析 被引量:4
8
作者 赵大球 周春华 +1 位作者 薛银芳 陶俊 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期103-106,共4页
通过对柿ζ-胡萝卜素脱氢酶(-ζCarotene desaturase,ZDS)基因的克隆及序列分析,旨在为改良柿果实品质奠定基础。根据GenBank中其他植物ZDS基因的保守序列设计了两条PCR扩增引物,以柿果实中所提取的RNA为模板,采用RACE技术扩增出一条约... 通过对柿ζ-胡萝卜素脱氢酶(-ζCarotene desaturase,ZDS)基因的克隆及序列分析,旨在为改良柿果实品质奠定基础。根据GenBank中其他植物ZDS基因的保守序列设计了两条PCR扩增引物,以柿果实中所提取的RNA为模板,采用RACE技术扩增出一条约为500bp的条带。经过序列分析,其长578bp,不含内含子,具有部分开放阅读框(177bp)、终止密码子(TGA)和poly(A)尾巴(11bp),共编码58个氨基酸。该序列及其所编码的氨基酸与其他植物ζ-胡萝卜素脱氢酶基因均具有较高的同源性。该基因已提交GenBank数据库,登录号为GU075728。 展开更多
关键词 胡萝卜素 ζ-胡萝卜素脱氢基因 克隆 序列分析
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烤烟ζ-胡萝卜素脱氢酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量:4
9
作者 胡重怡 雷波 +1 位作者 刘冬 蔡刘体 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2012年第3期34-37,63,共5页
利用同源克隆和电子克隆方法,从烤烟栽培品种韭菜坪2号(Nicotiana tobacum cul.Jiucaiping2)中克隆获得烤烟ζ-胡萝卜素脱氢酶(zeta-carotene desaturase,ZDS)基因的全长cDNA序列(命名为T-zds1),并对其编码蛋白的一级、二级进行了预测... 利用同源克隆和电子克隆方法,从烤烟栽培品种韭菜坪2号(Nicotiana tobacum cul.Jiucaiping2)中克隆获得烤烟ζ-胡萝卜素脱氢酶(zeta-carotene desaturase,ZDS)基因的全长cDNA序列(命名为T-zds1),并对其编码蛋白的一级、二级进行了预测。该基因在GenBank中的登录号为JF975566,全长为2312 bp,编码的蛋白含588个氨基酸,蛋白登录号AEG73891。BLASTp搜索结果及进化分析结果表明,烤烟T-zds1基因编码氨基酸序列与番茄、向日葵、胡萝卜ZDS基因编码氨基酸序列的相似性分别为97%,92%,90%。 展开更多
关键词 烤烟 基因 克隆 ζ-胡萝卜素脱氢
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烟草ζ-胡萝卜素脱氢酶基因的克隆和功能分析 被引量:3
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作者 史艳梅 魏攀 +7 位作者 陈媛媛 杨冉 金立锋 刘萍萍 李锋 屈凌波 林福呈 王燃 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1-8,共8页
为揭示烟草ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)基因的功能,采用同源克隆的方法从普通烟草(Nicotiana tabacum)中克隆了Nt ZDS基因,并进行了遗传进化分析。同时通过荧光定量PCR技术分析Nt ZDS的时空表达模式、利用烟草脆裂病毒诱导的基因沉默(VIGS)... 为揭示烟草ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)基因的功能,采用同源克隆的方法从普通烟草(Nicotiana tabacum)中克隆了Nt ZDS基因,并进行了遗传进化分析。同时通过荧光定量PCR技术分析Nt ZDS的时空表达模式、利用烟草脆裂病毒诱导的基因沉默(VIGS)体系抑制本氏烟草中ZDS基因的表达,在该基因沉默后再通过定量PCR技术分析Nt ZDS上下游基因的表达量变化,并检测了烟株色素含量的变化。结果显示:Nt ZDS基因在普通烟草中至少存在两个同源拷贝,其编码序列与番茄、马铃薯的ZDS基因相似度高于90%。Nt ZDS在烟草盛花期的叶和花中表达量最高。与对照比较,该基因沉默后,烟株新生叶片出现严重白化现象,能够为VIGS体系提供一个良好的候选报告基因;同时类胡萝卜素合成通路其他基因的表达量和烟株类胡萝卜素、叶绿素含量都显著降低,表明ZDS基因在烟草生长发育及类胡萝卜素合成过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 烟草 ζ-胡萝卜素脱氢 基因 克隆 表达模式 病毒诱导的基因沉默
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酶解水提法从胡萝卜中提取水溶性β-胡萝卜素 被引量:4
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作者 张玮玮 武彦文 欧阳杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期854-860,共7页
研究了酶法水解从胡萝卜中提取水溶性β-胡萝卜素的关键工艺参数。单因素实验结果表明,较优提取工艺条件为:取鲜胡萝卜50g,直接打浆后加入100mL 0.2g/100mL的吐温-80溶液,再加入1.5g纤维素酶和0.4g果胶酶,经超声波破碎40min后,调pH6.0,... 研究了酶法水解从胡萝卜中提取水溶性β-胡萝卜素的关键工艺参数。单因素实验结果表明,较优提取工艺条件为:取鲜胡萝卜50g,直接打浆后加入100mL 0.2g/100mL的吐温-80溶液,再加入1.5g纤维素酶和0.4g果胶酶,经超声波破碎40min后,调pH6.0,于40℃搅拌2h后加入2g硅藻土抽滤。响应面分析优化得到的较优提取条件为:果胶酶0.49g,酶解pH 6.08,超声波时间41.58min,优化后水溶性β-胡萝卜素提取率为12.23μg/g。 展开更多
关键词 胡萝卜 Β-胡萝卜素 水溶性 提取
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观赏向日葵ζ-胡萝卜素脱氢酶基因HaZDS的克隆与表达分析 被引量:3
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作者 钟淮钦 吴建设 +4 位作者 黄敏玲 樊荣辉 罗远华 林兵 叶秀仙 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期828-835,共8页
采用RT-PCR和RACE技术,从观赏向日葵新品种闽葵3号黄色花瓣中克隆获得类胡萝卜素合成途径关键酶基因ZDS,命名为Ha ZDS(Gen Bank No.KF263657),该基因c DNA全长2069 bp,具有一个1761 bp的完整开放阅读框(ORF),编码587个氨基酸。推导氨基... 采用RT-PCR和RACE技术,从观赏向日葵新品种闽葵3号黄色花瓣中克隆获得类胡萝卜素合成途径关键酶基因ZDS,命名为Ha ZDS(Gen Bank No.KF263657),该基因c DNA全长2069 bp,具有一个1761 bp的完整开放阅读框(ORF),编码587个氨基酸。推导氨基酸序列分析表明,Ha ZDS蛋白在N-末端区域含有一个叶绿体转运肽序列,含有一个典型的氨基氧化酶结构域和NAD(P)结合结构域,存在一个特征序列。系统发育分析表明,观赏向日葵Ha ZDS与万寿菊、菊花蛋白的同源性分别达96.4%、90.1%,亲缘关系较近。利用实时荧光定量PCR技术分析结果显示,Ha ZDS基因在盛花期表达量最高,不同组织中的表达量舌状花瓣>绿色管状花>苞片>叶片>黑色管状花,随着花瓣黄色的加深,基因表达量逐渐增加。推测Ha ZDS基因在转录水平上参与观赏向日葵花色形成的调控。 展开更多
关键词 观赏向日葵 ζ-胡萝卜素脱氢 基因克隆 基因表达
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番木瓜ζ-胡萝卜素脱氢酶基因时空表达的荧光定量PCR分析 被引量:9
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作者 高新征 言普 +1 位作者 沈文涛 周鹏 《热带作物学报》 CSCD 2009年第4期510-514,共5页
ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)是类胡萝卜素生物合成过程中的关键酶之一,它催化ζ-胡萝卜素转化成链孢红素,并催化链孢红素向番茄红素的转化。ZDS是限速酶,在植物果实颜色和花色发育过程中起着重要作用。本研究以番木瓜黄果品种Dwarf solo和... ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)是类胡萝卜素生物合成过程中的关键酶之一,它催化ζ-胡萝卜素转化成链孢红素,并催化链孢红素向番茄红素的转化。ZDS是限速酶,在植物果实颜色和花色发育过程中起着重要作用。本研究以番木瓜黄果品种Dwarf solo和红果品种Sunrise solo为材料,采用实时荧光定量PCR SYBR GreenI荧光染料法,对2个番木瓜品种的不同组织器官及果实发育成熟过程中的ZDS基因在转录水平上的表达进行了相对定量分析。结果表明,2个番木瓜品种的果实、花、叶片中均可检测到ZDS基因在转录水平上的表达,但表达量存在组织和部位上的差异。ZDS基因在成熟果实中的表达量比花中的高,花中的比叶中的高。ZDS基因在Sunrisesolo(红果肉)番木瓜果实发育成熟过程中的表达逐渐增强,且变化显著,而在Dwarf solo(黄果肉)番木瓜果实早期表达增强,成熟后期则表达趋为稳定。2个番木瓜品种成熟果肉中ZDS基因表达量存在差异,红果肉中的表达量高于黄果肉。 展开更多
关键词 番木瓜 ζ-胡萝卜素脱氢基因 实时荧光定量PCR 基因表达
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胆酸盐、游离脂肪酸、黄体素对β-胡萝卜素-15,15′-加双氧酶活性的影响 被引量:2
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作者 宋建婷 周光宏 高峰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期70-73,共4页
用体外实验研究了胆酸盐、游离脂肪酸、黄体素对 β 胡萝卜素 15 ,15′ 加双氧酶 ( βCDIOX)活性的影响。结果表明 ,4和 8mmol·L -1的牛磺胆酸钠显著 (P <0 0 5 )或极显著 (P <0 0 1)促进 βCDIOX的活性 ,而且牛磺胆酸钠... 用体外实验研究了胆酸盐、游离脂肪酸、黄体素对 β 胡萝卜素 15 ,15′ 加双氧酶 ( βCDIOX)活性的影响。结果表明 ,4和 8mmol·L -1的牛磺胆酸钠显著 (P <0 0 5 )或极显著 (P <0 0 1)促进 βCDIOX的活性 ,而且牛磺胆酸钠和胆酸对 βCDIOX活性的促进作用相近 ,脱氧胆酸钠的作用高于前两者 ,但差异不显著 (P >0 0 5 ) ;5mmol·L-1油酸对βCDIOX活性的促进作用显著高于对照 (P <0 0 5 ) ;软脂酸、硬脂酸对 βCDIOX活性无促进作用 ,亚油酸、亚麻酸能促进 βCDIOX活性 ,但差异不显著 (P >0 0 5 ) ;随着黄体素浓度的增加 ,βCDIOX活性逐步降低 ,黄体素生成的维生素A很少。 展开更多
关键词 胆酸盐 游离脂肪酸 黄体素 Β-胡萝卜素 β-胡萝卜素-15 15′-加双氧
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一株降解β-胡萝卜素细菌的分离鉴定及产酶条件优化 被引量:2
15
作者 李金鹏 刘建花 +1 位作者 齐晓琴 张惠玲 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第12期113-117,共5页
从枸杞汁中分离得到一株降解β-胡萝卜素产香菌株GQ-16,根据形态特征及分子生物学分析初步鉴定菌株GQ-16为库特氏菌(Kurthia sp.)。采用单一成分缺失法研究确定了该菌的必需营养素与β-胡萝卜素降解最佳条件,并利用顶空固相微萃取及气... 从枸杞汁中分离得到一株降解β-胡萝卜素产香菌株GQ-16,根据形态特征及分子生物学分析初步鉴定菌株GQ-16为库特氏菌(Kurthia sp.)。采用单一成分缺失法研究确定了该菌的必需营养素与β-胡萝卜素降解最佳条件,并利用顶空固相微萃取及气相色谱-质谱联用(GC-MS)法,分析测定了该菌降解β-胡萝卜素的产物成分。结果表明,酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Try)、亮氨酸(Leu)、苏氨酸(Thr)和FeSO_4·7H_2O等物质是菌株GQ-16菌体生长的必需营养素,该菌降解β-胡萝卜素产物中主要香气物质为β-环柠檬醛和β-紫罗兰酮。 展开更多
关键词 β-胡萝卜素 降解 产香细菌 分离鉴定 条件
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β-胡萝卜素对染镍肺泡巨噬细胞抗氧化酶活性的影响 被引量:2
16
作者 张敬 刘艺敏 +3 位作者 张军 邱水强 龙继贤 蔡亚滨 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期325-327,共3页
目的 研究 β -胡萝卜素拮抗三氧化二镍的细胞毒作用。 方法 采用体外细胞培养法测定在β-胡萝卜素(2 5 ,5 0 ,10 0 μmol/L)作用下 ,体外染镍肺泡巨噬细胞 (AM)的存活率及活力。同时观察细胞内活性氧的产生 ,以及过氧化氢酶 (CAT)和... 目的 研究 β -胡萝卜素拮抗三氧化二镍的细胞毒作用。 方法 采用体外细胞培养法测定在β-胡萝卜素(2 5 ,5 0 ,10 0 μmol/L)作用下 ,体外染镍肺泡巨噬细胞 (AM)的存活率及活力。同时观察细胞内活性氧的产生 ,以及过氧化氢酶 (CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活力的变化。结果 在体外染镍肺泡巨噬细胞中加入不同浓度的 β -胡萝卜素后可提高该细胞的存活率和活力 ,可增强细胞内CAT、GSH Px的活性 ,其中以 10 0 μmol/L的 β -胡萝卜素最为明显。 结论 镍可致细胞脂质过氧化 ,β -胡萝卜素具有拮抗镍对肺泡巨噬细胞的细胞毒作用 ,可能与抗氧化损伤有关。 展开更多
关键词 肺泡巨噬细胞 Β-胡萝卜素 过氧化氢 谷胱甘肽过氧化物 肺癌 致癌机制
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黄瓜ζ-胡萝卜素脱氢酶基因克隆及表达分析 被引量:7
17
作者 王柬人 李锡香 +4 位作者 王海平 邱杨 宋江萍 张晓辉 沈镝 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期520-527,共8页
以西双版纳黄瓜为试材,从黄瓜果肉中克隆ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)基因的cDNA序列,命名为CsZds。获得目的片段长度为1805bp,该序列具有完整的开放阅读框,位于31~1761bp,编码576个氨基酸。序列比对分析结果显示,该蛋白在氨基端变... 以西双版纳黄瓜为试材,从黄瓜果肉中克隆ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)基因的cDNA序列,命名为CsZds。获得目的片段长度为1805bp,该序列具有完整的开放阅读框,位于31~1761bp,编码576个氨基酸。序列比对分析结果显示,该蛋白在氨基端变化十分明显,中部较为保守,存在一个特征序列。系统进化分析表明,推测的CsZDS蛋白与南瓜中ZDS蛋白同源性最高,达到91.84%。利用实时荧光定量PCR技术分析结果显示,随着果实成熟期的延长,西双版纳黄瓜CsZds基因的表达量呈明显上升的趋势,在转色期达到最大。在果实发育过程中,西双版纳黄瓜CsZds基因的表达量高于普通黄瓜。 展开更多
关键词 西双版纳黄瓜 ζ-胡萝卜素脱氢 基因克隆 表达
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库特氏杆菌β-类胡萝卜素降解酶的酶学性质 被引量:2
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作者 李金鹏 齐晓琴 +1 位作者 刘建花 张惠玲 《中国食品添加剂》 北大核心 2017年第4期59-66,共8页
从库特氏杆菌发酵液中分离出可降解β-类胡萝卜素的酶,经初步纯化,研究其生化性质,为后续研究纯酶性质和应用打基础。以β-胡萝卜素标准品为底物,通过检测其反应最适温度、耐热性、反应最适pH、耐酸性、活化能、米氏常数,最大反应速率... 从库特氏杆菌发酵液中分离出可降解β-类胡萝卜素的酶,经初步纯化,研究其生化性质,为后续研究纯酶性质和应用打基础。以β-胡萝卜素标准品为底物,通过检测其反应最适温度、耐热性、反应最适pH、耐酸性、活化能、米氏常数,最大反应速率等研究该类胡萝卜素降解酶的生化性质。试验结果表明:80℃为最适反应温度,具有较稳定的耐热性。该酶的耐酸性较强,在pH=3.0时活性最高。Fe^(2+)、Mn^(2+),Zn^(2+)抑制酶的活性,Al^(3+)、Fe^(3+),Mg^(2+),Ca^(2+)促进酶活性。由阿伦尼乌斯方程得酶反应的活化能Ea为230.3KJ/mol。在70℃和p H 3.0的条件下,其反应动力学常数Km为4.13 mmol/L,最大反应速率Vmax为1.1842umol/(L·min)。 展开更多
关键词 库特氏菌 β-胡萝卜素 学性质
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西红花β-胡萝卜素羟化酶CsBCH1-z基因的分离与生物信息学分析 被引量:2
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作者 蒋璐 束红梅 +3 位作者 巩元勇 孙雨茜 郭书巧 倪万潮 《中国农学通报》 2019年第16期46-53,共8页
为更好地理解西红花类胡萝卜素合成代谢途径,从西红花中分离和克隆了1个新的β-胡萝卜素羟化酶基因CsBCH1-z,并从柱头cDNA中克隆了该基因的全长编码序列为906 bp,编码301个氨基酸残基,对应的基因组序列为1261 bp,5个外显子由4个内含子... 为更好地理解西红花类胡萝卜素合成代谢途径,从西红花中分离和克隆了1个新的β-胡萝卜素羟化酶基因CsBCH1-z,并从柱头cDNA中克隆了该基因的全长编码序列为906 bp,编码301个氨基酸残基,对应的基因组序列为1261 bp,5个外显子由4个内含子子间隔开。与已知的CsBCH1基因的氨基酸序列比较,发现在N端由于6个碱基的缺失,造成了2个氨基酸的缺失和1个氨基酸由异亮氨酸突变为亮氨酸,另外还有一处单碱基的变异造成苏氨酸突变为丙氨酸。通过预测其蛋白含有3个明显的跨膜结构域,C端包含了2组'HXXXXH'和'HXXHH'结构域,是典型的脂肪酸羟化酶。β-胡萝卜素羟化酶是西红花苷合成的重要前体物质,CsBCH1-z柱头中的表达量>叶片>花瓣;雄蕊中表达很低;球茎中表达不可见。 展开更多
关键词 西红花 β-胡萝卜素 克隆 生物信息学分析
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雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因在莱茵衣藻叶绿体中的表达 被引量:1
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作者 檀琮萍 阎斌伦 +2 位作者 梁成伟 苏忠亮 秦松 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期67-72,共6页
雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)的β-胡萝卜素酮化酶是虾青素生物合成途径中关键酶之一,本研究通过基因枪法将克隆出的β-胡萝卜素酮化酶基因(bkt),转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)的叶绿体中,经过含100mg/L壮观霉素固... 雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)的β-胡萝卜素酮化酶是虾青素生物合成途径中关键酶之一,本研究通过基因枪法将克隆出的β-胡萝卜素酮化酶基因(bkt),转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)的叶绿体中,经过含100mg/L壮观霉素固体培养基筛选得到转化子。通过PCR和基因组酶切Southern杂交分析,证明bkt基因通过同源重组定点整合到转化子的叶绿体基因组中。进一步通过RT-PCR和RT-PCR Southern杂交分析,表明bkt在衣藻转化子中得到表达。 展开更多
关键词 莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii) 叶绿体转化 β-胡萝卜素酮化基因(bkt)
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