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基于羟基氧化钴氧化酶特性比色法检测乙酰胆碱酯酶
1
作者 赵灵芝 赵柳 +3 位作者 刘春叶 张小清 王龙杰 杨喆 《化学研究与应用》 北大核心 2025年第3期585-591,共7页
本研究基于羟基氧化钴CoOOH和四甲基联苯胺(TMB)显色反应发展了检测乙酰胆碱酯酶的比色法。在最佳条件下,CoOOH-TMB显色体系的吸光度与乙酰胆碱酯酶活力在0.5~7.0 U·L^(-1)范围内呈线性关系,检出限可达0.15 U·L^(-1)。将CoOOH... 本研究基于羟基氧化钴CoOOH和四甲基联苯胺(TMB)显色反应发展了检测乙酰胆碱酯酶的比色法。在最佳条件下,CoOOH-TMB显色体系的吸光度与乙酰胆碱酯酶活力在0.5~7.0 U·L^(-1)范围内呈线性关系,检出限可达0.15 U·L^(-1)。将CoOOH-TMB显色体系结合纸芯片构建的纸基比色体系RGB值与乙酰胆碱酯酶活力在3~20 U·L^(-1)范围内呈线性关系,检出限可达0.5 U·L^(-1)。所构建的比色法可用于人血清中乙酰胆碱酯酶的检测,在临床分析和即时检测中显示出巨大应用潜力。 展开更多
关键词 羟基氧化钴纳米片层(CoOOH) 3 3' 5 5'-四甲基联苯胺(TMB) 生物硫醇 乙酰胆碱酯酶 纸基比色法
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N型乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征小鼠炎症反应的影响
2
作者 殷宗宝 余燕梅 刘凡 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第2期133-138,共6页
目的 探讨激活N型乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠白细胞介素-18 (IL-18)、PD-1和T淋巴细胞等的影响。方法 将6周龄健康清洁级雄性BALB/c小鼠60只按照完全数字随机法分为正常组(N组)、生理盐水对照组(NS组)、生理盐水+切断... 目的 探讨激活N型乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠白细胞介素-18 (IL-18)、PD-1和T淋巴细胞等的影响。方法 将6周龄健康清洁级雄性BALB/c小鼠60只按照完全数字随机法分为正常组(N组)、生理盐水对照组(NS组)、生理盐水+切断颈部两侧迷走神经组(NS+D组)、ARDS+切断颈部两侧迷走神经组(A+D组)、ARDS组(A组)、ARDS+切断迷走神经给予乙酰胆碱受体激动剂组(A+J组),每组10只。用荧光显微镜观察小鼠右肺下叶组织结构变化。用免疫印迹法检测各组小鼠左肺磷酸化核因子κB (p-NF-κB) P65和PD-1的水平,用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法测定各组小鼠血清IL-18和PD-1含量,用流式细胞仪检测小鼠右肺中叶CD3^(+)、CD25^(+)Foxp3^(+)T淋巴细胞百分比。结果 荧光显微镜下,N组和NS组小鼠右肺下叶间质未发现炎症细胞浸润,NS+D组肺间质有少量炎症细胞浸润,而A组和A+D组小鼠肺间质有大量炎症细胞浸润、肺泡壁增厚、肺泡结构破坏,肺泡腔消失;A+J组小鼠右肺下叶间质炎症细胞浸润较少,肺泡腔有少许破损。A组和A+D组小鼠血清IL-18和PD-1水平高于其他4组,差异有统计学意义(P <0.05)。A组和A+D组小鼠左肺p-NF-κBP65和PD-1蛋白含量显著高于N组、NS组、J组(P <0.05);A组和A+D组小鼠肺泡灌洗液CD3^(+)、CD25^(+)Foxp3^(+)T淋巴细胞百分比高于其他3组,A+J组显著低于A+D组、A组(P <0.05)。结论 激活N型乙酰胆碱受体可通过T淋巴细胞负向调节作用直接抑制IL-18和p-NF-κBP65的释放,还可抑制肺组织PD-1的生成,从而抑制ARDS的炎症反应,减轻ARDS病理变化。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 N型乙酰胆碱受体 炎症
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α7烟碱型乙酰胆碱受体与阿尔茨海默病的关系
3
作者 张松江 李龙洋 周春光 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第18期3915-3924,共10页
背景:α7烟碱型乙酰胆碱受体在大脑皮质和海马高度表达,并在阿尔茨海默病的病理发展过程中起重要调控作用,是阿尔茨海默病治疗的潜在靶点。目的:总结α7烟碱型乙酰胆碱受体和阿尔茨海默病的密切关系和相互作用机制。方法:检索中国知网、... 背景:α7烟碱型乙酰胆碱受体在大脑皮质和海马高度表达,并在阿尔茨海默病的病理发展过程中起重要调控作用,是阿尔茨海默病治疗的潜在靶点。目的:总结α7烟碱型乙酰胆碱受体和阿尔茨海默病的密切关系和相互作用机制。方法:检索中国知网、PubMed数据库中相关文献,中文检索词为“α7烟碱型乙酰胆碱受体,阿尔茨海默病,β-淀粉样蛋白,激动剂,正变构调节剂,拮抗剂”;英文检索词为“alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,Alzheimer’s disease,beta amyloid protein,agonist,positive allosteric modulator,antagonist”,文献检索时限为各数据库建库至2024年7月,依据入选标准对检索结果进行录用或排除,最终纳入符合标准的83篇文献进行综述。结果与结论:α7烟碱型乙酰胆碱受体通过与β-淀粉样蛋白的相互作用减轻β-淀粉样蛋白的神经毒性,如促进阿尔茨海默病的突触可塑性和胆碱能突触的快速传递、减轻β-淀粉样蛋白诱导的神经中枢炎症反应、抵抗神经细胞凋亡,从而对阿尔茨海默病患者的脑具有保护作用等。α7烟碱型乙酰胆碱受体作为阿尔茨海默病治疗靶标具有很大的潜能,但是又存在一系列问题有待解决,比如α7烟碱型乙酰胆碱受体的脱敏性、适度活性稳定性及基因多态性等问题。筛选高特异、安全性和以α7烟碱型乙酰胆碱受体为核心的多靶点结合作用的药物,将成为未来阿尔茨海默病治疗研究的一个方向。 展开更多
关键词 7烟碱型乙酰胆碱受体 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 完全激动剂 部分激动剂 沉默激动剂 正变构调节剂 拮抗剂 工程化组织构建
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豆浆乳酸菌发酵对乙酰胆碱酯酶抑制活性的影响
4
作者 刘耀辉 张彩猛 +3 位作者 孔祥珍 李兴飞 陈业明 华欲飞 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第5期52-60,共9页
抑制乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的活性有利于提高乙酰胆碱水平,从而缓解老年人认知障碍和记忆力衰退。该研究采用乙醇溶剂提取豆浆和发酵豆浆中的活性成分,并测定2种提取物对AChE的抑制活性,随后通过超高效液相色谱-四级... 抑制乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的活性有利于提高乙酰胆碱水平,从而缓解老年人认知障碍和记忆力衰退。该研究采用乙醇溶剂提取豆浆和发酵豆浆中的活性成分,并测定2种提取物对AChE的抑制活性,随后通过超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱鉴定提取物中的化学成分,并通过SIMCA软件筛选出发酵前后含量显著变化的成分,最后通过分子对接技术筛选差异成分中的活性成分,并研究其与AChE的结合能力和相互作用力。结果表明,乳酸菌发酵能显著(P<0.05)提高豆浆对AChE的抑制活性,其IC50值由3.24 mg/mL降低至2.55 mg/mL;在豆浆和发酵豆浆提取物中共鉴定出84个成分,从中发现19个成分在发酵前后存在明显含量变化;分子对接结果表明,有13个成分能与AChE紧密结合,这些活性成分主要通过氢键和疏水相互作用与AChE活性位点中的氨基酸残基相互作用,进而抑制AChE活性。 展开更多
关键词 豆浆 发酵 乙酰胆碱酯酶 成分鉴定 分子对接
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柳杉叶马尾杉生物碱成分及抑制乙酰胆碱酯酶活性研究
5
作者 姜雨辰 崔佳 +3 位作者 黄昕玥 陈小华 廖珅 李丽梅 《西南民族大学学报(自然科学版)》 2025年第1期65-70,共6页
柳杉叶马尾杉(Phlegmariurus cryptomerinus(Maxim.)Satou)的生物碱成分及神经保护活性至今未见研究报道。为探索其生物碱成分及抑制乙酰胆碱酯酶活性,采用薄层层析、柱层析和高效液相色谱等方法对其全草中生物碱成分进行分离和纯化,通... 柳杉叶马尾杉(Phlegmariurus cryptomerinus(Maxim.)Satou)的生物碱成分及神经保护活性至今未见研究报道。为探索其生物碱成分及抑制乙酰胆碱酯酶活性,采用薄层层析、柱层析和高效液相色谱等方法对其全草中生物碱成分进行分离和纯化,通过ESI-MS、^(1)H-NMR、^(13)C-NMR和ECD等波谱技术鉴定生物碱化合物的结构,采用改进的Ellman法对分离得到的化合物进行抑制乙酰胆碱酯酶活性筛选,并通过分子对接技术研究化合物与乙酰胆碱酯酶蛋白的作用机制.结果表明,从柳杉叶马尾杉全草总生物碱中分离得到3个生物碱化合物,分别鉴定为:4R,15R-huperzine R(1)、phlegmariurine B(2)和nankakurine A(3),其中nankakurine A(3)对乙酰胆碱酯酶活性的IC_(50)值为(46.51±0.49)μM,同时,分子对接结果显示,nankakurine A(3)可以作用于乙酰胆碱酯酶的外周阴离子位点,与作用位点亲和力良好达到了一定抑制作用.化合物1~3均为首次从该植物中分离得到,其中4R,15R-huperzine R(1)为首次从马尾杉属中分离得到。 展开更多
关键词 柳杉叶马尾杉 石松生物碱 4R 15R-huperzine R 乙酰胆碱酯酶
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α7烟碱型乙酰胆碱受体mRNA和乙酰胆碱及胆碱酯酶对急性呼吸窘迫综合征患者早期病情评估及预测其发生多器官功能障碍综合征的价值研究
6
作者 杨小蕾 杨义 《中国医药》 2024年第3期361-365,共5页
目的探讨外周血中α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者早期病情评估及预测其发生多器官功能障碍综合征(MODS)的价值。方法本研究采用前瞻性观察性研究方法。选取2020年8月至2022年1... 目的探讨外周血中α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者早期病情评估及预测其发生多器官功能障碍综合征(MODS)的价值。方法本研究采用前瞻性观察性研究方法。选取2020年8月至2022年10月在重庆市人民医院重症医学科住院的需要呼吸机治疗的ARDS患者65例。于确诊ARDS后24 h内检测外周血单个核细胞α7nAchR mRNA及外周血乙酰胆碱和胆碱酯酶水平,并进行与患者疾病严重程度有关的急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)和MODS评分。观察治疗28 d期间MODS发生情况,据此分为MODS组(31例)和非MODS组(34例)。比较2组上述临床资料。分析α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平与APACHEⅡ、MODS评分的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶对ARDS患者发生MODS的预测价值。结果MODS组α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平明显低于非MODS组[0.23(0.12,0.32)比0.69(0.58,0.87)、(201±79)mg/L比(317±80)mg/L、2319(1893,4241)U/L比4788(3831,5379)U/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平与APACHEⅡ、MODS评分均呈负相关(APACHEⅡ评分:r=-0.789、-0.650、-0.635,均P<0.001;MODS评分:r=-0.832、-0.658、-0.674,均P<0.001)。α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶预测ARDS患者发生MODS的ROC曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.964、100.0%、83.9%,0.848、88.2%、77.4%,0.845、100.0%、58.1%;前二者预测价值较高。结论α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平可反映ARDS患者早期病情及预测MODS发生,其中α7nAchR mRNA、乙酰胆碱预测价值较高。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 乙酰胆碱 胆碱酯酶 多器官功能障碍综合征
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干燥方式对绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病及乙酰胆碱酯酶抑制活性的影响 被引量：4
7
作者 张倜培 李青 +5 位作者 包鸿慧 沈正兴 石娟 唐前勇 程一方 周睿 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期77-84,共8页
研究不同干燥方式处理的绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病活性及对乙酰胆碱酯酶抑制作用。以绿碎茶为试验材料,采用蒸干结合真空干燥与真空冷冻干燥2种干燥工艺对绿碎茶乙酸乙酯萃取相进行干燥处理,比较研究了2种提取物的色泽,DPP... 研究不同干燥方式处理的绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病活性及对乙酰胆碱酯酶抑制作用。以绿碎茶为试验材料,采用蒸干结合真空干燥与真空冷冻干燥2种干燥工艺对绿碎茶乙酸乙酯萃取相进行干燥处理,比较研究了2种提取物的色泽,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、羟自由基(·OH)清除能力和铁离子还原能力以及α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶的抑制能力和抗糖基化能力。结果表明,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-FD)较蒸干结合真空干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-SVD)颜色相对偏黄,具有较强的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH清除能力和铁离子还原能力,其IC_(50)值分别为2.64、5.17、247.01、27.73 mg/L。同时,BGTE-FD具有较高的α-淀粉酶、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用,IC_(50)值分别为85.84、416.45、4.38 mg/L,且其对α-葡萄糖苷酶的抑制能力显著强于阿卡波糖(IC_(50)值为929.59 mg/L)。此外,BGTE-FD和BGTE-SVD对晚期糖基化终产物抑制率分别高达65.28%和63.66%,略低于氨基胍(71.81%)。因此,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物具有较强的体外抗氧化和抗糖尿病活性及一定的乙酰胆碱酯酶抑制能力,绿碎茶可作为降血糖和抗痴呆产品的潜在资源。 展开更多
关键词 绿碎茶 多酚提取物 抗氧化活性 抗糖尿病活性 乙酰胆碱酯酶抑制活性
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马醉木二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究 被引量：1
8
作者 李慧娟 全伟 +2 位作者 罗娥娥 秦徐杰 华燕 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期327-332,共6页
为研究马醉木叶中的二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性,该研究根据薄层色谱显色特征,使用硅胶、MCI和半制备高效液相等色谱技术对其进行分离与纯化,并通过波谱数据(NMR和MS)分析且结合文献报道数据进行对比,鉴定了所得化合物的结构,同... 为研究马醉木叶中的二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性,该研究根据薄层色谱显色特征,使用硅胶、MCI和半制备高效液相等色谱技术对其进行分离与纯化,并通过波谱数据(NMR和MS)分析且结合文献报道数据进行对比,鉴定了所得化合物的结构,同时采用Ellman法首次对其乙酰胆碱酯酶抑制活性进行评价。结果表明:从马醉木叶中分离并鉴定了8个二萜化合物,分别是pierisformoside F(1)、3-epi-grayanotoxinⅩⅧ(2)、3-epi-grayanotoxin B(3)、asebotoxin-X(4)、pierisformosin B(5)、asebotoxinⅢ(6)、rhodojaponinⅢ(7)和pierisformosin C(8)。其中,化合物1为首次从该植物中分离得到,化合物8表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。综上表明,马醉木中含有丰富的二萜成分和活性成分。该研究结果丰富了马醉木的化学成分多样性,为其后续综合开发和利用提供了一定的理论依据,也为寻求更多的活性成分提供了借鉴。 展开更多
关键词 杜鹃花科 马醉木 二萜 pierisformoside F 乙酰胆碱酯酶抑制活性
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α7烟碱型乙酰胆碱受体对围手术期神经认知功能的影响研究进展 被引量：1
9
作者 司尚坤 徐迎雪 +2 位作者 张维亮 季加富 张栋斌 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期343-348,共6页
α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7n... α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7nAChR作为胆碱能抗炎通路的重要组成部分,参与调节中枢系统炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬等生理、病理过程,发挥免疫调节和神经保护作用,是改善围手术期神经认知功能的潜在靶点。本文对α7nAChR的生物学特征及其对围手术期神经认知功能的影响进行综述,以期为临床改善手术患者的围手术期神经认知功能提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 围手术期 神经认知功能 胆碱能抗炎通路 中枢神经系统疾病
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α7烟碱型乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病中的作用
10
作者 丁道波 牟文君 +3 位作者 李鑫 陈欢 侯宏卫 胡清源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2897-2904,共8页
随着全球人口老龄化的加剧,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病率持续上升,目前已成为最常见的神经退行性疾病之一。尽管研究人员对AD的病理特征有深入的了解,如淀粉样斑块、Tau蛋白异常磷酸化形成神经元纤维缠结等,但其确切的... 随着全球人口老龄化的加剧,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病率持续上升,目前已成为最常见的神经退行性疾病之一。尽管研究人员对AD的病理特征有深入的了解,如淀粉样斑块、Tau蛋白异常磷酸化形成神经元纤维缠结等,但其确切的病因和发病机制仍不完全清楚。α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)是中枢神经系统中重要的乙酰胆碱受体亚型,广泛分布于大脑的多个区域,尤其是与学习和记忆相关的海马和皮质区域,在神经递质释放、神经可塑性、细胞信号转导以及炎症反应中发挥重要功能。近年来,α7nAChR在AD中的作用受到广泛关注。研究表明,α7nAChR参与β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)代谢、Tau蛋白磷酸化、神经炎症反应、氧化应激等AD发病进程中的多个重要环节,提示α7nAChR在AD的发病机制中扮演着重要角色,有望作为AD潜在治疗靶点。本综述旨在总结α7nAChR与AD发病的关联及其研究进展,为未来的疾病治疗提供可能的研究方向。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 Β淀粉样蛋白 TAU蛋白 神经炎症
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沙棘叶提取物的体外抗氧化及乙酰胆碱酯酶抑制能力 被引量：7
11
作者 黄瑜 张锡宇 +3 位作者 赵海桃 石统帅 邱隽蒙 符群 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期391-400,共10页
以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除能力、总还原力为指标,评估了沙棘叶提取物的体外抗氧化活性,考察其对乙酰胆碱酯酶的抑制能力。结果表明:5种不同乙醇体积分数的(40%、50%、60%、70%、80%)沙棘叶提取物均有较好的抗氧... 以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除能力、总还原力为指标,评估了沙棘叶提取物的体外抗氧化活性,考察其对乙酰胆碱酯酶的抑制能力。结果表明:5种不同乙醇体积分数的(40%、50%、60%、70%、80%)沙棘叶提取物均有较好的抗氧化活性及乙酰胆碱酯酶抑制能力。以体积分数为60%乙醇水溶液提取的沙棘叶提取物的DPPH·清除率、总还原力及乙酰胆碱酯酶抑制能力最强,分别为85.80%±1.39%,2.45±0.18,97.14%±0.81%,可作为抗氧化剂与乙酰胆碱酯酶抑制剂。该沙棘叶提取物对乙酰胆碱酯酶有较强的抑制能力,半数抑制浓度(IC50)为(1.086±0.144) g/L,对乙酰胆碱酯酶的抑制类型是竞争性大于非竞争性的混合可逆抑制。Auto Dock分子对接及剂效相关性分析表明,沙棘叶活性成分与乙酰胆碱酯酶具有一定的对接亲和力,沙棘叶提取物的抗氧化、酶抑制活性与功能成分之间均存在良好的正相关性(P<0.05),沙棘叶提取物中起主要抗氧化与酶抑制作用的成分为多酚类化合物。 展开更多
关键词 沙棘叶 活性成分 乙酰胆碱酯酶 体外抗氧化 分子对接 中药现代化技术
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活化α7乙酰胆碱受体促进LPS刺激的人牙髓干细胞牙/骨向分化
12
作者 李梦圆 王宇萌 +4 位作者 徐青清 关卓 卞成玥 江飞 张光东 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期145-153,共9页
目的:探讨活化α7乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)联合钙离子(calcium ion,Ca^(2+)对LPS刺激的人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)牙/骨向分化的影响。方法:分离培养DPSC,流式细胞术对DPSC进... 目的:探讨活化α7乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)联合钙离子(calcium ion,Ca^(2+)对LPS刺激的人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)牙/骨向分化的影响。方法:分离培养DPSC,流式细胞术对DPSC进行表面标志物表达鉴定。CCK-8检测α7-nAChR激动剂PNU-282987和Ca^(2+)对DPSC增殖的影响。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和染色筛选PNU-282987促进DPSC表达ALP活性的最佳浓度。用大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)模拟炎性微环境刺激DPSC。采用免疫印迹分析(Western blot,WB)、实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)和茜素红染色等方法检测牙/骨向分化的相关蛋白:Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,COL-I)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、骨钙素(osteopontin,OPN)、ALP、核心转录因子-2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX),相关基因(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)和矿化基质表达情况。Fura-2AM用于检测细胞内Ca^(2+)流动情况。结果:CCK-8实验显示,PNU-282987浓度低于10μmol/L时对细胞增殖无抑制作用,且此浓度处理LPS刺激的DPSC后ALP活性增加最明显;Ca^(2+)浓度低于2 mmol/L对细胞增殖无抑制作用;Western blot和RT-qPCR实验显示,PNU-282987及Ca^(2+)处理后的LPS刺激的DPSC牙/骨向分化相关蛋白(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)和相关基因(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)的表达及矿化基质形成均明显上调,二者联合后上调最显著(P <0.001)。Fura-2 AM钙离子探针结果显示DPSC细胞内Ca^(2+)浓度增加。结论:10μmol/L PNU-282987联合2 mmol/L Ca^(2+)可以促进LPS刺激的DPSC的牙/骨向分化能力。 展开更多
关键词 α7乙酰胆碱受体 牙/骨向分化 人牙髓干细胞 钙离子 脂多糖
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卵叶远志内生真菌分离鉴定及乙酰胆碱酯酶抑制活性评价
13
作者 申开泽 胡祖茂 +4 位作者 尤梦吉 罗丽花 朱睿 吴道秀 华燕 《西南林业大学学报（自然科学）》 CAS 北大核心 2024年第4期106-115,共10页
从云南双江采集的卵叶远志中分离可培养内生真菌,采用ITS测序对其进行鉴定,并对所得真菌的发酵提取物进行乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选,以期探明卵叶远志内生真菌的多样性及其用于发掘治疗阿尔茨海默病先导化合物的潜力。结果表明:从卵叶... 从云南双江采集的卵叶远志中分离可培养内生真菌,采用ITS测序对其进行鉴定,并对所得真菌的发酵提取物进行乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选,以期探明卵叶远志内生真菌的多样性及其用于发掘治疗阿尔茨海默病先导化合物的潜力。结果表明:从卵叶远志中共分离到23株内生真菌,其中地上部分18株,根部5株,归属于1门4纲8目11科13属,优势属为刺盘孢属、镰刀菌属和附球酶属。采用Ellman法测定了内生真菌的甲醇提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性,在测试浓度为0.5 mg/mL时,其中12株菌株表现出中等及以上强度的抑制作用(抑制率>30%),Boeremia exigua PSA002、Fusarium oxysporum PSA008、Penicillium brefeldianum PSB007等3株表现出较强的抑制作用(抑制率>50%),其中,F.oxysporum PSA008的抑制率高达75.35%。采用UPLC-QTOF/MS对PSA002、PSA008和PSB007等3株真菌大米培养物的甲醇提取物进行分析,3个样品的质谱数据点响应强度和数量都较为明显且存在差异,且与大米培养基相比也均存在不同,表明真菌代谢转化形成了一定的化学多样性成分。本研究可为后续发掘卵叶远志相关活性化合物提供基础研究材料和理论参考。 展开更多
关键词 卵叶远志 内生真菌 真菌多样性 抗乙酰胆碱酯酶 阿尔茨海默病
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基于“治痿独取阳明”理论探讨乙酰胆碱与缺血性脑卒中后偏瘫的关系 被引量：1
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作者 杨正宁 何旭 +2 位作者 姚震 解晓霞 陈钧 《西部中医药》 2024年第2期31-35,共5页
从中医学的文献和理论研究入手,系统地阐述“治痿独取阳明”理论,并从乙酰胆碱在中枢神经系统和胃肠道中的作用机制方面对“治痿独取阳明”理论与缺血性脑卒中后偏瘫的联系进行阐述论证,以期为缺血性脑卒中后偏瘫提供更多的临床诊疗思路。
关键词 缺血性脑卒中后 偏瘫 乙酰胆碱 治痿独取阳明
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基于同源建模和分子对接技术研究不同物种乙酰胆碱酯酶和有机磷农药的相互作用 被引量：1
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作者 王佳琪 《农业与技术》 2024年第3期26-31,共6页
研究25种有机磷农药与30个不同物种乙酰胆碱酯酶(Acethlcholinesterase, AChE)的相互作用,分析分子结合过程中的关键氨基酸残基所产生的正向作用,并阐明内在结合机制。旨在为对有机磷农药敏感的AChE定点突变寻找潜力位点和为有机磷农药... 研究25种有机磷农药与30个不同物种乙酰胆碱酯酶(Acethlcholinesterase, AChE)的相互作用,分析分子结合过程中的关键氨基酸残基所产生的正向作用,并阐明内在结合机制。旨在为对有机磷农药敏感的AChE定点突变寻找潜力位点和为有机磷农药中毒的治疗在分子结构层面提供理论依据。30个物种AChE蛋白质序列来自于NCBI和Uniport;25种有机磷农药二维结构分子来自于ZINC15在线检索器,三维结构模型使用Chem 3D软件生成;模板蛋白晶体结构来自于ProteinDataBank数据库;同源建模采用SWISS-MODEL服务器进行3D结构建模;采用UCLA-DOELAB-SAVESv6.0在线服务器进行模型质量评估;分子对接采用Discovery Studio 2019软件中Flexible Docking模块进行。同源建模结果经过SAVESv6.0服务器的ERRAT、Verift-3D和PROCHECK程序评估质量可靠可进行下一步分子对接研究。分子对接结果显示绝大部分物种的AChE对25种有机磷农药都有亲和力,仅个别有机磷农药对某些物种未体现出对接构象,而不同物种与不同有机磷农药分子以氢键、疏水作用等相互作用提供结合力,分子作用模式符合外周阴离子位点、酰胺骨架、酰基口袋、氧离子洞和芳香引导机制等乙酰胆碱酯酶功能位点假说。与大部分有机磷农药展现出普遍亲和力的物种如家蝇、桔小实蝇、三化螟和斜纹夜蛾等可作为有机磷农药快检的新酶源开展研究。 展开更多
关键词 有机磷农药 乙酰胆碱酯酶 同源建模 分子对接
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功能性消化不良小儿血清一氧化氮、乙酰胆碱酯酶水平及营养状况分析
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作者 秦晓红 《妇儿健康导刊》 2024年第20期97-100,共4页
目的检测功能性消化不良(FD)患儿血清一氧化氮(NO)、乙酰胆碱酯酶(AChE)水平,并分析不同病情患儿的营养状况。方法选取2019年1月至2021年12月吉林省前卫医院收治的FD患儿88例为观察组,同期80例健康体检儿童为对照组,检测入组儿童的血清N... 目的检测功能性消化不良(FD)患儿血清一氧化氮(NO)、乙酰胆碱酯酶(AChE)水平,并分析不同病情患儿的营养状况。方法选取2019年1月至2021年12月吉林省前卫医院收治的FD患儿88例为观察组,同期80例健康体检儿童为对照组,检测入组儿童的血清NO、AChE水平,分析营养状况差异。结果观察组血清NO水平高于对照组,AChE水平低于对照组(P<0.05);中重度组患儿血清NO水平高于轻度组,AChE水平低于轻度组(P<0.05);中重度组患儿各项营养指标均低于轻度组(P<0.05)。结论随着疾病发展,FD患儿血清NO水平升高,AChE水平降低,病情发展越严重,营养状况越差。 展开更多
关键词 功能性消化不良 血清一氧化氮 血清乙酰胆碱酯酶 营养状况
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望春花花蕾化学成分及其乙酰胆碱酯酶体外抑制活性研究
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作者 曹彦刚 王建超 +5 位作者 王梦娜 何玉环 李红伟 郝志友 郑晓珂 冯卫生 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2278-2283,共6页
目的研究望春花MagnoliabiondiiPamp.花蕾化学成分及其乙酰胆碱酯酶体外抑制活性。方法望春花花蕾50%丙酮提取物采用DiaionHP-20、ToyopearlHW-40C、ODS、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。按课题... 目的研究望春花MagnoliabiondiiPamp.花蕾化学成分及其乙酰胆碱酯酶体外抑制活性。方法望春花花蕾50%丙酮提取物采用DiaionHP-20、ToyopearlHW-40C、ODS、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。按课题组前期方法测定化合物的乙酰胆碱酯酶体外抑制活性。结果从中分离得到17个化合物,分别鉴定为crassifolioside(1)、magnolosideB(2)、芦丁(3)、异槲皮苷(4)、槲皮素(5)、northalifoline(6)、cordysininB(7)、脱氧胸腺嘧啶核苷(8)、吲唑(9)、dihydrodehydrodiconiferylalcohol(10)、秦皮乙素(11)、C-藜芦酰乙二醇(12)、3,4-二羟基苯乙醇(13)、3-甲氧基-4-羟基苯乙醇(14)、原儿茶酸(15)、2,4,6-三甲氧基苯酚(16)、丁香酸(17)。结论化合物1~17均为首次从该植物中分离得到,在20μmol/L浓度下均未显示出乙酰胆碱酯酶抑制活性。 展开更多
关键词 望春花 花蕾 化学成分 分离鉴定 乙酰胆碱酯酶
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元宝草中一个新的间苯三酚及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究
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作者 高圆媛 邓青 +2 位作者 何清 李娜娜 何洁 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1900-1905,共6页
目的研究元宝草化学成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性。方法元宝草二氯甲烷部位采用硅胶柱色谱、Sephedex LH-20、MCI和半制备HPLC等进行化分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用Ellman法测定其乙酰胆碱酯酶抑制活性... 目的研究元宝草化学成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性。方法元宝草二氯甲烷部位采用硅胶柱色谱、Sephedex LH-20、MCI和半制备HPLC等进行化分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用Ellman法测定其乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为元宝草素A(1)、hyperbeanin A(2)、hyperpatulol I(3)、hyperhenone I(4)、hypercohone G(5)、hyperbeanol G(6)、hyperlagarin A(7)、hyperascyrone D(8)。化合物抑制乙酰胆碱酯酶IC 50值均在1.16~5.15μmol/L之间。结论化合物1为间苯三酚类新化合物。所有化合物均具有一定程度的乙酰胆碱酯酶抑制活性,是阿尔茨海默病治疗药物的潜在活性先导化合物。 展开更多
关键词 元宝草 二氯甲烷部位 间苯三酚 分离鉴定 乙酰胆碱酯酶抑制活性 阿尔茨海默病
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美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶活性抑制作用及抗氧化能力观察
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作者 管堂飞 杨鑫 +3 位作者 洪灿辉 肖培云 张成桂 何正春 《山东医药》 CAS 2024年第11期1-5,共5页
目的探讨美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性和抗氧化活性。方法根据预实验确定最佳酶促反应条件得到的数据,AChE浓度为0.425U/mL、底物碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)浓度为15mmol/L、反应时间为20min,采用改良的Ellman法进行... 目的探讨美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性和抗氧化活性。方法根据预实验确定最佳酶促反应条件得到的数据,AChE浓度为0.425U/mL、底物碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)浓度为15mmol/L、反应时间为20min,采用改良的Ellman法进行酶促反应,检测不同浓度(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250μg/mL)PAS840对AChE催化ATCI分解的抑制率,计算其半数抑制浓度(IC_(50)),采用米氏方程相关的酶动力学实验测定PAS840对AChE的抑制类型。取不同浓度的PAS840溶液或维生素C(VC),采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法检测其对DPPH自由基的清除率,采用总还原能力测定法检测其对铁氰化钾的还原率,采用水杨酸法检测其对羟自由基的清除率,并计算相关的IC_(50)。结果PAS840对AChE催化反应进程具有抑制作用,且随着PAS840作用浓度增加和时间延长,其抑制作用更为明显;随着PAS840作用浓度增加,AChE抑制率先逐渐升高再趋于平缓。PAS840抑制AChE催化ATCI分解的IC_(50)为22.30μg/mL,其抑制类型是混合性抑制。随着浓度的增加,PAS840、Vc对DPPH自由基的清除率均呈先升高后平稳的趋势;500μg/mLPAS840对DPPH自由基的清除率为93.95%,同等浓度Vc的清除率为97.31%;PAS840清除DPPH自由基的IC_(50)为43.21μg/mL。随着浓度的增加,PAS840对铁氰化钾的还原率呈先升高后平稳的趋势,Vc对铁氰化钾的还原率呈比较高的平稳趋势;3.0mg/mLPAS840对铁氰化钾的还原率为93.95%,同等浓度Vc的还原率为82.2%;PAS840还原铁氰化钾的IC_(50)为0.498mg/mL。随着浓度的增加,PAS840对羟自由基的清除率呈比较中等的平稳趋势,Vc对羟自由基的清除率呈逐渐升高趋势;1.8mg/mLPAS840对羟自由基的清除率为45.72%,其后逐渐趋于平缓,同等浓度Vc的清除率为74.06%;3.0mg/mLPAS840对羟自由基的清除率为47.83%,同等浓度Vc的清除率为89.73%;PAS840清除羟自由基的IC_(50)为3.65mg/mL。结论PAS840具有较强的AChE活性抑制作用和抗氧化能力。 展开更多
关键词 PAS840 美洲大蠊 乙酰胆碱酯酶 神经退行性疾病 氧化应激
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M1型乙酰胆碱受体在微波辐射致小鼠认知行为改变中的作用
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作者 何钢华 潘婷 +5 位作者 冯志华 崔智琳 杨镁楹 李杨 左红艳 邓桦 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期43-49,共7页
为了研究微波辐射对海马乙酰胆碱受体(AChRs)表达的影响,探讨微波辐射敏感的AChRs亚型及其在微波辐射致认知行为改变中的作用。本试验以C57BL/6N小鼠为试验对象,建立微波辐射动物模型,通过脑组织石蜡切片和苏木精-伊红(H.E.)染色,观察... 为了研究微波辐射对海马乙酰胆碱受体(AChRs)表达的影响,探讨微波辐射敏感的AChRs亚型及其在微波辐射致认知行为改变中的作用。本试验以C57BL/6N小鼠为试验对象,建立微波辐射动物模型,通过脑组织石蜡切片和苏木精-伊红(H.E.)染色,观察海马阿蒙氏角1(CA1)、阿蒙氏角2(CA2)、阿蒙氏角3(CA3)和齿状回(DG)各亚区组织病理学变化;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测海马组织AChRs的表达;微波辐射后,采用M1型AChR激动剂VU0357017 hydrochloride以10 mg/(kg·bw)腹腔注射小鼠,利用新物体识别和Y迷宫试验评价小鼠认知行为改变。结果显示,微波辐射后7 d,小鼠海马CA3区病理改变较为明显,主要表现为神经元核固缩深染、血管周围间隙增宽;RT-qPCR结果显示,与空白对照组相比较,微波辐射后海马组织M1和M3型AChR mRNA相对表达量均显著下调(M1-AChR,P<0.01;M3-AChR,P<0.05),而M2、M4、α4和α7型AChR mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05);新物体识别试验结果显示,与空白对照组相比较,微波辐射后小鼠的辨别指数(DI)和认知指数(RI)均显著降低(P<0.05);而VU0357017 hydrochloride给药后,与辐射对照组相比较,辐射给药组小鼠的DI和RI明显升高(P<0.05),且与空白对照组无显著性差异(P>0.05);Y迷宫试验结果显示,辐射前后小鼠的自由交替率均未见统计学差异(P>0.05)。结果表明,微波辐射可引起海马AChRs亚基构成比发生变化,海马CA3区组织病理学改变,M1型AChR对于微波辐射所致认知行为功能下降具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 乙酰胆碱受体 海马 微波辐射
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