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17α雌二醇对转基因细胞株(APP/PS1N_2a)β-淀粉样蛋白生成的影响
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作者 李建明 曾杰 +1 位作者 罗学港 雷德亮 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期772-777,共6页
目的探讨17α雌二醇(E2α)对稳定表达人β-淀粉样前体蛋白(APP)/早老因子-1(PS1)即APP/PS1基因的神经母细胞瘤细胞株(Neuro-2a)(APP/PS1 N2a)β-淀粉样蛋白(Aβ)产生的影响及可能机制。方法将APP/PS1 N2a细胞用10×10-9mol/L E2α... 目的探讨17α雌二醇(E2α)对稳定表达人β-淀粉样前体蛋白(APP)/早老因子-1(PS1)即APP/PS1基因的神经母细胞瘤细胞株(Neuro-2a)(APP/PS1 N2a)β-淀粉样蛋白(Aβ)产生的影响及可能机制。方法将APP/PS1 N2a细胞用10×10-9mol/L E2α预处理2d,更换培养液后,分别进行如下处理:1.加入不同浓度E2α(25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)和溶媒(对照组),用免疫印迹法(Western blotting)检测APP/PS1 N2a细胞内和细胞外的Aβ蛋白水平及细胞BACE1蛋白水平;2.加入100nmol/L E2α、20nmol/L葡萄糖和5mIU葡萄糖氧化酶(GOX)。24h后,进行二氢乙啶(DHE)染色观察APP/PS1 N2a细胞中活性氧(ROS)含量的变化。结果不同浓度E2α(25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)处理后,细胞外Aβ蛋白水平明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);而细胞内Aβ蛋白水平无明显变化(P>0.05);细胞β-分泌酶-1(BACE1)的表达水平无明显变化(P>0.05);E2α可以减少G/GOX所致APP/PS1 N2a细胞ROS的产生。结论 E2α可以减少细胞外Aβ的产生,其机制可能与抗氧化损伤有关。 展开更多
关键词 17α雌 神经母细胞瘤细胞株 Β-淀粉样前体蛋白 早老因子-1 Β-淀粉样蛋白 免疫印迹法 二氢乙啶染色
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银耳多糖提取工艺优化及对人体细胞毒性检测 被引量:10
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作者 段超 王昌涛 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期101-105,共5页
以多糖提取率为指标,以料液比(g∶m L)、提取温度和提取时间为影响因素进行热水浸提银耳多糖的单因素试验,在此基础上应用Box-Behnken进行响应面分析。得到较佳工艺条件:料液比为1∶60,提取时间为5.57 h,提取温度为97.18℃,理论多糖... 以多糖提取率为指标,以料液比(g∶m L)、提取温度和提取时间为影响因素进行热水浸提银耳多糖的单因素试验,在此基础上应用Box-Behnken进行响应面分析。得到较佳工艺条件:料液比为1∶60,提取时间为5.57 h,提取温度为97.18℃,理论多糖提取率为20.52%,实际测得值为20.25%,说明该方法可靠。采用MTT(四甲基偶氮唑盐)实验和二氢乙啶(DHE)染色实验检测水提银耳多糖对人皮肤成纤维细胞(HSF)的毒性。MTT实验表明,银耳多糖溶液质量浓度在0~200 mg/L范围内HSF成活率为1,DHE染色实验结果为阴性,说明水提银耳多糖对HSF没有毒性。 展开更多
关键词 化妆品 银耳多糖 响应面法 MTT 二氢乙啶染色
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