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基于生物素亲和素时间分辨荧光免疫法检测血清可溶性fms样酪氨酸激酶-1的方法建立及性能评价
1
作者 谭玉华 于婷 +2 位作者 余海枷 李高成 冯健明 《现代检验医学杂志》 2025年第2期186-190,201,共6页
目的建立检测血清可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)的生物素-亲和素时间分辨荧光免疫法(BAS-TRFIA),并对其性能进行评价。方法利用链霉亲和素包被微孔板、生物素标记捕获sFlt-1单克隆抗体和铕标记检测sFlt-1单克隆抗体,建立一种BAS-TRFI... 目的建立检测血清可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)的生物素-亲和素时间分辨荧光免疫法(BAS-TRFIA),并对其性能进行评价。方法利用链霉亲和素包被微孔板、生物素标记捕获sFlt-1单克隆抗体和铕标记检测sFlt-1单克隆抗体,建立一种BAS-TRFIA定量测定孕妇血清中的sFlt-1浓度。对该方法的检测低限、生物检测限、功能灵敏度、精密度、线性、干扰试验和高剂量钩状效应等性能指标进行评价。选择106份孕周大于9周的无溶血、黄疸和脂血的孕妇血清剩余样本,用于BAS-TRFIA和电化学发光法的比对研究,比对试验结果的相关性采用线性回归分析。结果该方法的样本最适反应时间为90min,检测低限为1.00pg/ml,生物检测限为10.00pg/ml,功能灵敏度为10.00pg/ml,批内和批间变异系数均在5.00%以内,线性范围为20.00~40000.00pg/ml,分别在低浓度和高浓度质控品中添加有干扰物的17种干扰样本与基础样本检测结果的相对偏倚在-4.94%~4.24%内;检测样品sFlt-1浓度高达150000pg/ml时未出现高剂量钩状效应;样本sFlt-1浓度在105.40~40972.00pg/ml间,与电化学发光法(ECL)检测结果的线性回归方程为Y=1.0867X+17.946(r=0.9944,t=96.26,P<0.05)。结论BAS-TRFIA具有灵敏度高、精密度好、线性范围较宽和抗干扰能力强,与参比方法检测结果的相关性良好等优点,可以满足临床需要。 展开更多
关键词 生物素 亲和素 时间分辨荧光免疫法 可溶性fms样酪氨酸激酶-1 性能评价
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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立 被引量：6
2
作者 杨静 曾昭伟 +3 位作者 王学谦 赵倩 孙辉 李会强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期871-873,875,共4页
目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-... 目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。 展开更多
关键词 癌胚抗原 乳腺癌 生物素-亲和素酶联免疫吸附法 生物素 亲和素
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半乳糖化链霉亲和素、亲和素和链霉亲和素的实验研究 被引量：2
3
作者 吴湖炳 黄祖汉 +2 位作者 彭武和 高晓 刘华盛 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期184-185,共2页
将亲和素生物素预定位系统（ＡＢＳ）引入肿瘤放免显像，结果显示预定位法特别是三步法，优于传统一步法［１，２］。在三步法中，第２步所用的药物主要为亲和素（Ａｖ）和链霉亲和素（ＳＡ），但它们在药代动力学及生物分布上各有优... 将亲和素生物素预定位系统（ＡＢＳ）引入肿瘤放免显像，结果显示预定位法特别是三步法，优于传统一步法［１，２］。在三步法中，第２步所用的药物主要为亲和素（Ａｖ）和链霉亲和素（ＳＡ），但它们在药代动力学及生物分布上各有优缺点［３］。为了获得更合适的药物，... 展开更多
关键词 半乳糖化 链霉亲和素 亲和素 肿瘤 放射免疫显像
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利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因 被引量：1
4
作者 谢月辉 余睿 +2 位作者 班韶 赵冲 孟照辉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期171-175,共5页
目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离。方法:利用NCB I、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的... 目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离。方法:利用NCB I、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因。将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速纯化生物素化的DNA。结果:用化学与酶促相结合一步法合成链霉亲和素全基因序列,用较短寡聚核苷酸链及较低的引物浓度合成该基因突变率很低,链霉亲和素在大肠杆菌中得到高效表达。用硅酸包衣的磁性微球对磁场反应良好且无磁记忆性,用碳二亚胺可实现活性羧基磁性微球与链霉亲和素两者的交联,反应条件温和。结论:制备的链霉亲和素磁珠复合物可用于生物素化的PCR产物纯化。 展开更多
关键词 生物信息学 基因合成 链霉亲和素 链霉亲和素磁珠
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生物素-亲和素系统在MR靶向成像中的应用 被引量：1
5
作者 刘岘 许乙凯 叶靖 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第10期1130-1132,共3页
目的探讨利用生物素-亲和素系统的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子成像的敏感性。方法制备生物素化HAb18单克隆抗体并测定其生物素化程度及抗原结合活性。将8只荷人肝细胞癌裸鼠静脉注射生物素化单克隆抗体600 μg,24 h后腹腔注... 目的探讨利用生物素-亲和素系统的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子成像的敏感性。方法制备生物素化HAb18单克隆抗体并测定其生物素化程度及抗原结合活性。将8只荷人肝细胞癌裸鼠静脉注射生物素化单克隆抗体600 μg,24 h后腹腔注射80 μg 亲和素,30 min后再静脉给予Gd-DTPA-链霉亲和素。对实验动物行MR扫描,测量SE T1WI平扫及增强后10、30 min及2、6、12、24 h图像内肿瘤、肝脏、肌肉的信号强度,绘制信号强度-时间曲线,并计算其强化率及对比度噪声比。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。增强后肿瘤信号强度缓慢升高,在注射对比剂后第6小时,肿瘤的强化率、比度噪声比达到最大值,与其他各时间点有显著性差异。肝脏在注射对比剂后第6小时的信号强度达到最高,而后信号强度下降,增强后12 h的信号强度与平扫相似。肌肉表现为轻度强化,增强后各时间点的信号强度与平扫相比无明显差异。结论利用生物素-亲和素技术对肿瘤进行MR靶向成像,具有特异性强化作用并能延长肿瘤的强化时间,但Gd-DTPA-SA的血池效应也造成了肝脏的持续强化。 展开更多
关键词 生物素-亲和素系统 链霉亲和素 磁共振成像 单克隆抗体
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新型磁共振靶向对比剂Gd-DTPA-链霉亲和素的制备及其反应条件的实验研究 被引量：1
6
作者 刘岘 许乙凯 黄其鎏 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期15-17,共3页
目的探讨制备Gd3+标记的二乙三胺五乙酸-链霉亲和素(Gd-DTPA-SA)的最佳反应条件。方法选择不同pH值的反应体系(pH值分别为5、6、7、8)及不同DTPA-SA的摩尔比率(1000、500、200、100),测定不同反应条件下的每个SA分子所结合的Gd3+数目及G... 目的探讨制备Gd3+标记的二乙三胺五乙酸-链霉亲和素(Gd-DTPA-SA)的最佳反应条件。方法选择不同pH值的反应体系(pH值分别为5、6、7、8)及不同DTPA-SA的摩尔比率(1000、500、200、100),测定不同反应条件下的每个SA分子所结合的Gd3+数目及Gd-DTPA-SA的结合活性。结果随着反应体系pH值的增高,每个SA分子所结合的Gd3+数目增高;当DTPA-SA摩尔比率低于500时,DTPA-SA联结Gd的数目随着DTPA-SA摩尔比的增高而增高;而当摩尔比率为1 000时,则出现下降。各实验组Gd-DTPA-SA复合物的生物素结合活性无明显差异。结论SA分子所结合的Gd3+数目依赖于反应体系的pH值及DTPA环酐-蛋白的摩尔比值,而Gd-DTPA-SA的生物素结合活性与反应条件无关。 展开更多
关键词 磁共振靶向对比剂 Gd-DTPA-链霉亲和素 制备 实验 二乙三胺五乙酸-链霉亲和素 最佳反应条件 磁共振免疫成像
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固相亲和素制备技术及初步鉴定 被引量：1
7
作者 宋世平 唐国忠 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期305-308,共4页
将亲和素（Ａｖ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）通过偶合试剂连接制成联接物，利用活化后ＢＳＡ的改性使联接物一步包被到疏水固相上形成更加易于定量的固相亲和素。实验鉴定证明，这种固相亲和素具有良好的生物活性，初步应用效果良好，可... 将亲和素（Ａｖ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）通过偶合试剂连接制成联接物，利用活化后ＢＳＡ的改性使联接物一步包被到疏水固相上形成更加易于定量的固相亲和素。实验鉴定证明，这种固相亲和素具有良好的生物活性，初步应用效果良好，可推广应用于生物素－亲和素系统的免疫分析。 展开更多
关键词 固相亲和素 生物素 亲和素系统 放射免疫分析
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^(125)I 标记的亲和素及其衍生物在小鼠体内的生物分布
8
作者 陈来 周桢堂 +1 位作者 庄道玲 包伯荣 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 1997年第11期676-678,共3页
为了降低鸟亲和素（Ａｖ）的高肝摄取，延长Ａｖ在血液中的滞留时间，对Ａｖ进行化学修饰。修饰后的Ａｖ衍生物用１２５Ｉ标记示踪，观察小鼠体内生物分布。结果表明，Ａｖ衍生物１２５Ｉ－ｓｕｃ－Ａｖ减少肝、肾、脾中摄取最佳；衍生... 为了降低鸟亲和素（Ａｖ）的高肝摄取，延长Ａｖ在血液中的滞留时间，对Ａｖ进行化学修饰。修饰后的Ａｖ衍生物用１２５Ｉ标记示踪，观察小鼠体内生物分布。结果表明，Ａｖ衍生物１２５Ｉ－ｓｕｃ－Ａｖ减少肝、肾、脾中摄取最佳；衍生物１２５Ｉ－ｏｃｔｏ－Ａｖ在肾中摄取较链霉亲和素低，而在肝中仍有较高放射性浓集；衍生物１２５Ｉ－ｏｃｔｏ－Ａｖ－ｓｕｃ的肾摄取虽较高，但代谢较１２５Ｉ－ＳＡ快，然而肝摄取没有明显降低。三种Ａｖ衍生物的血中放射性都低于Ａｖ。 展开更多
关键词 鸟亲和素 链霉亲和素 生物分布 碘125标记
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亲和素结合蛋白性质的研究
9
作者 彭民 顾天爵 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第6期712-716,共5页
前曾发现在日本血吸虫虫卵中，存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质，称为亲和素结合蛋白（ＡＢＰ）。在分离纯化ＡＢＰ的基础上，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量，并做了糖蛋白染色及... 前曾发现在日本血吸虫虫卵中，存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质，称为亲和素结合蛋白（ＡＢＰ）。在分离纯化ＡＢＰ的基础上，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量，并做了糖蛋白染色及等电，大测定。实验结果表明ＡＢＰ是一个分子量为６５ｋＤ的碱性糖蛋白，由数个相同的分子量为１２．７ｋＤ的亚单位组成。ＳＤＳ、β－巯基乙醇处理的ＡＢＰ仍能与亲和素结合，提示ＡＢＰ的亚单位能与亲和素结合。氨基酸修饰剂ＮＡＩ、ＤＴＮＢ、ＮＥＭ及ＮＢＳ对ＡＢＰ与亲和素的结合有不同程度的影响，而ＨＮＢＢ、ＴＮＢＳ及ＩＡＡ对ＡＢＰ与亲和素的结合无影响，提示ＡＢＰ分子中氨基酸残基Ｔｙｒ、Ｃｙｒ是ＡＢＰ与亲和素结合所必需的，可能参与结合位点的形成。另外，测得ＡＢＰ与亲和素结合的结合常数为１．４×１０^（－７）ｍｏｌ／Ｌ。 展开更多
关键词 亲和素 亲和素结合蛋白
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核心链霉亲和素的原核表达 被引量：1
10
作者 彭福中 陈雪岚 +1 位作者 徐锋 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第23期286-289,共4页
以链霉菌(Streptomyces avidinii)的基因组为模板通过PCR扩增得到354bp的核心链霉亲和素基因Stv13,并将其与pET22b+、pGEX-4T-1连接构建大肠杆菌表达载体,与P43连接构建枯草芽孢杆菌分泌型表达载体。大肠杆菌表达的核心链霉亲和素Stv13... 以链霉菌(Streptomyces avidinii)的基因组为模板通过PCR扩增得到354bp的核心链霉亲和素基因Stv13,并将其与pET22b+、pGEX-4T-1连接构建大肠杆菌表达载体,与P43连接构建枯草芽孢杆菌分泌型表达载体。大肠杆菌表达的核心链霉亲和素Stv13大部分以包涵体的形式存在,而枯草芽孢杆菌则无核心链霉亲和素Stv13分泌表达。 展开更多
关键词 链霉亲和素 核心链霉亲和素 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌
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生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定双酚A 被引量：31
11
作者 魏孔吉 赵美萍 +1 位作者 李元宗 常文保 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1122-1124,共3页
建立了可用于快速、灵敏地检测双酚A的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法,测得最佳实验条件为包被抗原浓度为13.8 mg/L、抗体稀释为2.4×105倍,生物素化二抗和酶标亲和素的最佳稀释倍数分别为2000倍和500倍.在优化条件下,方法的... 建立了可用于快速、灵敏地检测双酚A的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法,测得最佳实验条件为包被抗原浓度为13.8 mg/L、抗体稀释为2.4×105倍,生物素化二抗和酶标亲和素的最佳稀释倍数分别为2000倍和500倍.在优化条件下,方法的线性范围0.2～1000 μg/L;最低检出限0.05 μg/L.所建立的方法用于食品和唾液中双酚A含量的测定,样品处理简单,结果满意. 展开更多
关键词 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法 含量测定 双酚A 食品 唾液
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生物素-亲和素标记技术 被引量：22
12
作者 孔令青 李勇 +1 位作者 高洪 严玉霖 《动物医学进展》 CSCD 2008年第4期100-102,共3页
生物素-亲和素系统(BAS)是一种具有高亲和力、灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点的信号放大标记技术,研究证明生物素与亲和素依靠接触表面均一的多层膜来维系其稳定的结合。随着不断的探索和研究,该技术现已发展出多种标记方法,例如桥... 生物素-亲和素系统(BAS)是一种具有高亲和力、灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点的信号放大标记技术,研究证明生物素与亲和素依靠接触表面均一的多层膜来维系其稳定的结合。随着不断的探索和研究,该技术现已发展出多种标记方法,例如桥-亲和素-生物素标记法、亲和素-生物素-过氧化物酶法、标记生物素-抗生物素法,由于该标记技术具有优秀的性质,因此很快渗透到多个学科,在细胞和抗原的定位和检测中体现出极其重要的作用。目前,BAS已广泛应用于免疫学、分子生物学和组织化学等领域,并取得较好的效果。文章对该技术的特点、方法和应用做了简述。 展开更多
关键词 生物素 亲和素 亲和力 免疫-PCR
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双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法检测相思子毒素 被引量：15
13
作者 穆晞惠 童朝阳 +3 位作者 郝兰群 许秀玲 刘冰 田艳慧 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期571-574,共4页
目的建立相思子毒素(abrin)的酶联免疫检测方法,为abrin临床诊断、中毒治疗、法医学鉴定等应用领域提供技术基础和参考依据。方法采用双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法来检测微量abrin。结果该法检测abrin线性范围为0.125～31.25μg/L,... 目的建立相思子毒素(abrin)的酶联免疫检测方法,为abrin临床诊断、中毒治疗、法医学鉴定等应用领域提供技术基础和参考依据。方法采用双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法来检测微量abrin。结果该法检测abrin线性范围为0.125～31.25μg/L,线性回归方程为Y=0.52369X+0.51632(r=0.9816,P<0.0001,n=9),检测限为0.125μg/L。不同浓度蓖麻毒素(ricin)、葡萄球菌肠毒素(SEB)对检测结果基本无干扰,表明该法检测abrin具有很好的特异性。该法能用于abrin毒素污染水样、土样、食品、血液等模拟样品的分析,相对标准差为2.35%～4.14%,具有较好的重现性。结论成功建立了夹心BA-ELISA法检测abrin,巧妙地将多克隆抗体的强富集能力、单克隆抗体的特异性以及生物素-亲和素系统的放大作用结合起来,达到了提高检测的灵敏度和特异性的目的,可适用于各种微量abrin样品的分析。 展开更多
关键词 相思子毒素 双抗体夹心法 生物素-亲和素 酶联免疫吸附试验
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量子点标记链霉亲和素及其生物活性检测 被引量：8
14
作者 邵君 尤晓刚 +2 位作者 高峰 贺蓉 崔大祥 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1625-1628,共4页
选用无机盐为前驱体,在水相中合成CdTe量子点,并用此量子点标记链霉亲和素,通过SephadexG-100层析分离纯化量子点标记的链霉亲和素,采用磁颗粒标记的链霉亲和素与量子点标记的链霉亲和素竞争结合辣根过氧化酶标记的生物素,即酶联免疫竞... 选用无机盐为前驱体,在水相中合成CdTe量子点,并用此量子点标记链霉亲和素,通过SephadexG-100层析分离纯化量子点标记的链霉亲和素,采用磁颗粒标记的链霉亲和素与量子点标记的链霉亲和素竞争结合辣根过氧化酶标记的生物素,即酶联免疫竞争抑制分析法检测链霉亲和素标记量子点后的生物活性,计算约70.3%的链霉亲和素标记到量子点上,且具有生物活性。每毫克量子点大约可偶联0.14 mg的链霉亲和素。采用荧光光谱研究量子点标记前后的荧光变化,标记后量子点的最大发射波长蓝移了8 nm,而发射光谱的半峰宽基本不变,说明量子点与链霉亲和素结合后粒子没有团聚,分散性好。 展开更多
关键词 量子点标记 链霉亲和素 竞争抑制反应
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结合链霉亲和素的高分子造影剂的制备及其初步应用 被引量：10
15
作者 张辉 冉海涛 +3 位作者 张亚萍 骆杰 郝兰 王志刚 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2010年第6期997-1000,共4页
目的制备一种结合链霉亲和素的高分子超声造影剂,并与生物素化抗体结合,考察其体外寻靶能力。方法采用双乳化法制备高分子材料PLGA-COOH超声造影剂;并用碳二亚胺法将造影剂与亲和素耦联,制备出结合链霉亲和素的高分子超声造影剂。检测... 目的制备一种结合链霉亲和素的高分子超声造影剂,并与生物素化抗体结合,考察其体外寻靶能力。方法采用双乳化法制备高分子材料PLGA-COOH超声造影剂;并用碳二亚胺法将造影剂与亲和素耦联,制备出结合链霉亲和素的高分子超声造影剂。检测该造影剂一般特性;采用红外与免疫荧光检测亲和素与PLGA-COOH超声造影剂连接的情况。检测生物素-亲和素技术使该造影剂与生物素化抗体结合后其体外寻靶能力。结果红外检测与免疫荧光检测显示亲和素被成功地连接在高分子造影剂上,并存在活性。体外寻靶实验显示,与生物素化单抗结合后的靶向高分子造影剂较多并牢固地聚集到肝癌细胞表面。结论成功制备了结合链霉亲和素的高分子超声造影剂,该造影剂与生物素化抗体结合后于体外对肝癌细胞具有较强的亲和力。 展开更多
关键词 超声微泡 造影剂 链霉亲和素
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基于生物素-亲和素放大的SPR传感器检测大肠杆菌研究 被引量：10
16
作者 刘儒平 王程 +3 位作者 徐万帮 岳钊 牛文成 刘国华 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期757-761,共5页
建立了一种基于表面等离子体共振(SPR)技术的大肠杆菌特异性快速检测方法。采用EDC/NHS将葡聚糖修饰的CM5芯片表面活化,通过亲和素固定生物素标记的二抗(羊抗兔IgG抗体),利用一抗(兔抗大肠杆菌ATCC25922单克隆抗体)和二抗反应,将兔抗大... 建立了一种基于表面等离子体共振(SPR)技术的大肠杆菌特异性快速检测方法。采用EDC/NHS将葡聚糖修饰的CM5芯片表面活化,通过亲和素固定生物素标记的二抗(羊抗兔IgG抗体),利用一抗(兔抗大肠杆菌ATCC25922单克隆抗体)和二抗反应,将兔抗大肠杆菌单克隆抗体固定在传感芯片表面。利用一抗和二抗的质量扩增效应和生物素-亲和素的多级放大效应,实现了对低浓度大肠杆菌ATCC25922的快速检测,提高了SPR传感器灵敏度。利用NaOH溶液对芯片再生,可对多个不同浓度样品进行检测,采用相对响应单位(RU)记录数据。本传感芯片对大肠杆菌ATCC25922响应的线性范围为1.5×102 CFU/mL～1.5×107 CFU/mL,检测限为1.5×102 CFU/mL,相关系数r为0.981 5。这种方法简便快捷,有望成为一种在线检测治病菌的有力手段。 展开更多
关键词 SPR传感器 生物素-亲和素多级放大 大肠杆菌ATCC25922 快速检测
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亲和素-生物素间接偶联的压电DNA传感器研究 被引量：10
17
作者 高志贤 晁福寰 +4 位作者 王红勇 房彦军 宁保安 潘海峰 朱惠忠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期454-459,共6页
采用 33′ 二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术 ,用乙基 3 (3 二甲氨基 )碳二亚胺盐酸盐 (EDC)和N 羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS)偶联剂将亲和素固定于金电极上 ,联于生物素标记的探针 ,制备成压电DNA传感器的检测电极 ,和杂交液中的待检葡... 采用 33′ 二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术 ,用乙基 3 (3 二甲氨基 )碳二亚胺盐酸盐 (EDC)和N 羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS)偶联剂将亲和素固定于金电极上 ,联于生物素标记的探针 ,制备成压电DNA传感器的检测电极 ,和杂交液中的待检葡萄球菌肠毒素B的ssDNA进行杂交 ,通过频率信号检测DNA杂交的量 ,达到检测的目的 .采用不同长度的基因片段进行了研究 ,制作的传感器一致性、特异性都较好 ;杂交后的电极 ,电极再生后 。 展开更多
关键词 亲和素-生物素间接偶联 压电DNA传感器 分子自组装膜
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链霉菌ZG0429的分类鉴定与链霉亲和素的分离纯化研究 被引量：8
18
作者 张蕾 刘春琴 +2 位作者 高智慧 曹宇 白钢 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期7-10,共4页
从土壤中筛选得到1株高产链霉亲和素的放线菌ZG0429,根据形态观察、培养特征、生理生化鉴定以及16S rRNA序列分析,初步判定该菌株为链霉菌属中的淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。经发酵,ZG0429的链霉亲和素产量可达201.0mg/L。... 从土壤中筛选得到1株高产链霉亲和素的放线菌ZG0429,根据形态观察、培养特征、生理生化鉴定以及16S rRNA序列分析,初步判定该菌株为链霉菌属中的淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。经发酵,ZG0429的链霉亲和素产量可达201.0mg/L。进一步采用硫铵沉淀和凝胶过滤层析纯化,链霉亲和素的回收率为76.87%,纯度可以达到97.03%。该方法简单易行,成本低廉,可得到高产量、高纯度、高活性的目的蛋白,为链霉亲和素发酵产品的大规模纯化提供了依据。 展开更多
关键词 链霉亲和素 淡紫灰链霉菌 分类鉴定 分离纯化
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生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定二乙基磷酸酯类有机磷农药 被引量：12
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作者 王磊 张丽杰 +3 位作者 吕伟 韩世鹤 张付凯 潘家荣 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第3期346-350,共5页
基于生物素和亲和素之间发生特异性反应,形成多酶系统,建立了二乙基磷酸酯类有机磷农药的竞争酶联免疫分析技术和生物素-亲和素放大酶联免疫分析技术。在优化条件下,二乙基磷酸酯类有机磷农药浓度在1×10-1～1×104mg/L范围内... 基于生物素和亲和素之间发生特异性反应,形成多酶系统,建立了二乙基磷酸酯类有机磷农药的竞争酶联免疫分析技术和生物素-亲和素放大酶联免疫分析技术。在优化条件下,二乙基磷酸酯类有机磷农药浓度在1×10-1～1×104mg/L范围内与抑制率线性关系良好,其线性回归方程为y=0.1168x+0.6259(r=0.9889),半抑制浓度和检出限分别为34 mg/L和0.0248 mg/L,与间接竞争酶联免疫分析方法相比,在交叉反应率基本不变的情况下,检测灵敏度和检测范围都得到显著提高,实际样品的加标回收率为70.1%～117.8%,基本满足痕量物质分析的要求。 展开更多
关键词 农药 二乙基磷酸酯类有机磷 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法
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量子点标记链霉亲和素荧光免疫分析测定雌三醇 被引量：6
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作者 钱建瑞 赵艳伟 +2 位作者 梁艳 李立华 王术皓 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期104-107,共4页
以生物素化羊抗兔免疫球蛋白和量子点标记链霉亲和素为荧光探针，采用竞争免疫分析模式，建立了一种灵敏度高、选择性好的检测雌三醇的荧光免疫分析方法。对几种测量参数如温育时间和温度、缓冲溶液pH、试剂浓度等进行了优化；方法的线... 以生物素化羊抗兔免疫球蛋白和量子点标记链霉亲和素为荧光探针，采用竞争免疫分析模式，建立了一种灵敏度高、选择性好的检测雌三醇的荧光免疫分析方法。对几种测量参数如温育时间和温度、缓冲溶液pH、试剂浓度等进行了优化；方法的线性范围为0．01～1000ng/mL，检出限0．0029ng／mL，血清样品加标回收率在91％-117％之间。 展开更多
关键词 量子点 荧光免疫分析 雌三醇 生物素-亲和素系统
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