灯盏花乙素调控PERK-Nrf2/ATF4-CHOP通路拮抗AAPH诱导的人主动脉内皮细胞损伤

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作者 赵芮琪 鲍柳池 +1 位作者 单诗淇 金越 《中国动脉硬化杂志》 2025年第3期227-234,共8页

[目的]探讨灯盏花乙素(Scu)调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/激活转录因子4(ATF4)-C/EBP同源蛋白(CHOP)通路拮抗2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(AAPH)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的具体机制。[方法]... [目的]探讨灯盏花乙素(Scu)调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/激活转录因子4(ATF4)-C/EBP同源蛋白(CHOP)通路拮抗2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(AAPH)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的具体机制。[方法]用Scu对HAEC进行预保护,再用AAPH诱导HAEC损伤,探究Scu对HAEC损伤的具体分子机制。将细胞分为对照组、AAPH组、AAPH+Scu低、中、高剂量组,测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽-硫转移酶(GSH-ST)的含量,荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率,RT-qPCR检测细胞中PERK、真核起始因子2α(eIF2α)mRNA的表达,Western blot测定细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、p-PERK、PERK、eIF2α、p-eIF2α、ATF4、CHOP、Nrf2、Bcl-2、Caspase-3及Caspase-12蛋白的表达。为了进一步探究Scu拮抗HAEC损伤的分子机制,采用基因沉默技术抑制HAEC中PERK的表达。将细胞分为五组,分别为对照组、AAPH+si-con组、AAPH+Scu+si-con组、AAPH+si-PERK组、AAPH+si-PERK+Scu组,采用RT-qPCR检测si-PERK干扰后细胞中PERK、eIF2αmRNA的表达,Western blot测定si-PERK干扰后细胞中PERK、p-eIF2α、eIF2α、ATF4、CHOP、Nrf2、Bcl-2、p53正向调节因子(PUMA)、Caspase-3及Caspase-12蛋白的表达。[结果]Scu干预后细胞内ROS含量及细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。Scu可下调PERK、eIF2αmRNA的表达,并下调GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、PUMA、Caspase-3、Caspase-12以及上调Nrf2、Bcl-2蛋白的表达(P<0.01)。用si-PERK干扰后,细胞中PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、Nrf2、Bcl-2、PUMA、Caspase-3、Caspase-12蛋白的表达以及PERK和eIF2αmRNA的表达与未干扰前有显著差异(P<0.01),证明Scu发挥抗内质网应激及细胞凋亡与其调控PERK-Nrf2/ATF4-CHOP通路密切相关。[结论]Scu通过调控PERK-Nrf2/ATF4-CHOP通路抗内质网应激及细胞凋亡,从而有效减轻AAPH诱导的HAEC损伤。 展开更多

关键词 灯盏花乙素 PERK-Nrf2/ATF4-CHOP通路 人主动脉内皮细胞 细胞损伤 2 2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐

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3种中药成分对氧化型低密度脂蛋白诱导人主动脉内皮细胞损伤的影响

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作者 楼彩霞 王弋 +2 位作者 代路路 龙淑娴 黄小琼 《中国药业》 CAS 2024年第4期39-42,共4页

目的探讨3种中药成分(姜黄素、连翘苷、白藜芦醇)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的影响。方法实验设空白对照组(等体积基础培养液),溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜(DMSO)的基础培养液],Ox-LDL组(20μg/m... 目的探讨3种中药成分(姜黄素、连翘苷、白藜芦醇)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的影响。方法实验设空白对照组(等体积基础培养液),溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜(DMSO)的基础培养液],Ox-LDL组(20μg/mL Ox-LDL),姜黄素①②③④组(20μg/mL Ox-LDL+2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素),连翘苷①②③④组(20μg/mL Ox-LDL+10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷),白藜芦醇①②③组(20μg/mL Ox-LDL+20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇),采用四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平。结果与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷④组细胞增殖率均显著降低(P<0.01或P<0.05);姜黄素③组、连翘苷②③④组、白藜芦醇各剂量组细胞LC3 mRNA表达水平均显著升高,COX-2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论姜黄素、连翘苷和白藜芦醇可抑制Ox-LDL诱导下HAEC的增殖,可激发受损细胞自噬,抑制炎性因子COX-2表达。 展开更多

关键词 姜黄素 连翘苷 白藜芦醇 氧化型低密度脂蛋白 人主动脉内皮细胞 细胞自噬 炎性反应

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通心络对高糖高脂诱导人主动脉内皮细胞损伤的保护作用

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作者 位庚 石梦莹 +2 位作者 郑文丽 赵玉莎 刘赞朝 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期85-88,共4页

目的探讨高糖高脂对人主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及通心络的干预作用。方法经随机方式,将HAECs分为以下5组:通心络高、中、低浓度组,高糖高脂组和空白对照组。检测各组细胞生存活性、细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量、三磷酸腺苷(ATP)... 目的探讨高糖高脂对人主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及通心络的干预作用。方法经随机方式,将HAECs分为以下5组:通心络高、中、低浓度组,高糖高脂组和空白对照组。检测各组细胞生存活性、细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量、三磷酸腺苷(ATP)含量、线粒体膜电位(MMP)、细胞内活性氧簇(ROS)水平和细胞色素(Cyt)-C蛋白表达。结果与空白对照组比较,高糖高脂组MMP、ATP水平与细胞生存活性明显下降,细胞中ROS含量、细胞上清液LDH漏出量与Cyt-C蛋白表达皆明显上升(P<0.05,P<0.01);与高糖高脂组相比,通心络干预后细胞生存活性、ATP含量和MMP明显升高,细胞上清液LDH漏出量、细胞内ROS水平和Cyt-C蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论对于高糖高脂损伤的HAECs,通心络具有保护作用,相关保护机制可能和保护线粒体功能相关。 展开更多

关键词 人主动脉内皮细胞 高糖高脂 线粒体功能 活性氧簇 通心络

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PM2.5诱导NLRP3炎症小体活化对人主动脉内皮细胞的影响

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作者 南凯 张俊芳 +4 位作者 梁爽 张辉 李海涛 王芳 姚春霞 《河北医药》 CAS 2024年第15期2266-2270,共5页

目的 探讨PM2.5诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的分子机制。方法 收集大气PM2.5染毒HAECs 24 h,采用MTT法检测细胞存活率,酶联免疫吸附实验检测(ELISA)白介素-1β(IL-1β)和IL-18的含量,硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)含量,比色法检测... 目的 探讨PM2.5诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的分子机制。方法 收集大气PM2.5染毒HAECs 24 h,采用MTT法检测细胞存活率,酶联免疫吸附实验检测(ELISA)白介素-1β(IL-1β)和IL-18的含量,硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)含量,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,Western blot和Q-PCR法检测NLRP3、caspase-1、IL-1β、Bax和Bcl-2的表达,流式细胞术和DAPI染色检测细胞凋亡,活性氧(ROS)和线粒体ROS(mtROS)试剂盒检测ROS和mtROS水平,使用NLRP3 siRNA及ROS和mtROS特异性抑制剂(NAC和Mito-TEMPO)后,观察上述结果的变化。结果 PM2.5可引起HAECs细胞分泌IL-1β和IL-18增加,释放MDA和LDH增多,促进细胞凋亡,并呈现剂量依赖关系;PM2.5可诱导HAECs细胞caspase-1和IL-1β表达增加,还可使HAECs细胞的ROS和mtROS水平显著升高;使用NLRP3 siRNA以及ROS和mtROS的抑制剂可明显抑制上述效应。结论 PM2.5通过诱导HAECs细胞氧化应激而活化NLRP3炎症小体,进一步引起细胞炎性反应和凋亡。 展开更多

关键词 PM2.5 NLRP3炎症小体 人主动脉内皮细胞 氧化应激 细胞凋亡

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人主动脉内皮细胞表达ICAM-1影响的研究 被引量：4

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作者 刘斌 程岚 +4 位作者 刘大力 汪嘉 张秀丽 束蓉 梁景平 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第10期568-572,共5页

目的:分别观察牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)脂多糖(LPS)和大肠杆菌(E.coli)LPS对人主动脉内皮细胞(HAECs)在转录和翻译水平表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的影响。方法:在体外分别以P.gingivalisLPS和E.coliLPS刺激HAECs,实时荧光定量PC... 目的:分别观察牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)脂多糖(LPS)和大肠杆菌(E.coli)LPS对人主动脉内皮细胞(HAECs)在转录和翻译水平表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的影响。方法:在体外分别以P.gingivalisLPS和E.coliLPS刺激HAECs,实时荧光定量PCR技术检测ICAM-1基因表达,蛋白质印迹技术检测ICAM-1膜蛋白表达。采用SPSS18.0软件包中ANOVA对数据进行分析。结果:P.gingivalisLPS作用6 h后开始诱导ICAM-1 mRNA表达,14 h达到高峰,22 h仍有高表达,各时间点与未刺激组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);而E.coliLPS作用2 h后即开始诱导ICAM-1 mRNA表达,14 h达到高峰,22 h仍有高表达,各时间点与未刺激组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。两种LPS均能在蛋白水平上调ICAM-1的表达,这种上调作用呈浓度和时间依赖,且P.gingivalisLPS的作用较之E.coliLPS要缓和。结论:P.gingivalisLPS能够在转录和翻译水平上调HAECs表达ICAM-1,提示P.gingivalisLPS在动脉粥样硬化(AS)的发生发展过程中可能发挥了重要作用。E.coliLPS可能与急性炎症性疾病有关而与AS无关。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 人主动脉内皮细胞 细胞间粘附分子-1

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内质网应激蛋白CHOP-10在缺血缺氧诱导人主动脉内皮细胞损伤中的作用 被引量：5

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作者 滕林 杨伟 +6 位作者 周飞 姜玉蓉 彭家琴 曹春雨 李松 丁家望 杨俊 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期245-250,共6页

目的探讨人主动脉内皮细胞(HAEC)在缺血缺氧刺激下内质网应激(ERS)标志蛋白C/EBP同源蛋白10(CHOP-10)的表达变化及意义,并观察阿托伐他汀对上述过程的影响。方法将传代培养的HAEC分为正常对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧+CHOP-10基因沉默... 目的探讨人主动脉内皮细胞(HAEC)在缺血缺氧刺激下内质网应激(ERS)标志蛋白C/EBP同源蛋白10(CHOP-10)的表达变化及意义,并观察阿托伐他汀对上述过程的影响。方法将传代培养的HAEC分为正常对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组以及缺血缺氧+阿托伐他汀组(0.l mol/L、1.0 mol/L、10.0mol/L),缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组采用CHOP-10 shRNA下调CHOP-10的基因表达;24 h后采用RT-PCR法检测细胞中CHOP-10的基因表达,Western blot法检测CHOP-10、Caspase-3和Caspase-8的蛋白水平;采用ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;采用CCK8法测定细胞增殖活力。结果与正常对照组相比,HAEC在缺血缺氧损伤时CHOP-10表达明显升高(P<0.01),细胞分泌炎性因子IL-6及TNF-α增加(P<0.01),凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达增加(P<0.01),细胞增殖活力明显下降(P<0.01)。阿托伐他汀能呈浓度依赖性地抑制HAEC CHOP-10表达,而缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组或缺血缺氧+阿托伐他汀组,炎性介质IL-6、TNF-α的分泌也相应减少,细胞凋亡下降,增殖活力明显增加(P<0.01)。结论缺血缺氧损伤可引起血管内皮细胞发生ERS及炎症反应,导致细胞增殖活力下降,凋亡增加,CHOP-10基因沉默或应用阿托伐他汀干预可减轻缺血缺氧时ERS及炎症反应而对血管内皮细胞产生保护作用。 展开更多

关键词 C/EBP同源蛋白10 人主动脉内皮细胞 内质网应激 动脉粥样硬化

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光果甘草定对ox-LDL损伤性人主动脉内皮细胞保护的机制研究 被引量：3

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作者 谭春江 吴岩斌 +1 位作者 林如辉 陈文列 《中医药学报》 CAS 2014年第2期16-19,共4页

目的:探讨光果甘草定(Glabridin,GD)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤性的细胞中自噬(autophagy)的影响。方法:采用体外培养人主动脉内皮细胞(HAVEC),经不同浓度GD预处理或不预处理,再行ox-LDL干预作对比。MTT法检测细胞活性、透射电... 目的:探讨光果甘草定(Glabridin,GD)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤性的细胞中自噬(autophagy)的影响。方法:采用体外培养人主动脉内皮细胞(HAVEC),经不同浓度GD预处理或不预处理,再行ox-LDL干预作对比。MTT法检测细胞活性、透射电镜观察细胞中自噬小体,免疫印迹检自噬相关蛋白Beclin1和LC3在不同组别中的表达。结果:随ox-LDL浓度的增加,细胞活性,细胞中自噬小体和Beclin1和LC3的表达比空白对照组明显增加(P<0.05)。经GD预处理的HAVEC,细胞活性,自噬小体和Beclin1和LC3的表达比未经GD预处理细胞组明显降低(P<0.05)。结论:ox-LDL能浓度依赖性地诱导HAVEC自噬性死亡,GD通过部分抑制自噬相关因子,保护血管内皮细胞。 展开更多

关键词 光果甘草定 人主动脉内皮细胞 自噬ox-LDL损伤

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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人主动脉内皮细胞IL-10和MCP-1表达的影响 被引量：1

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作者 吴贇 陈凌 +1 位作者 汪义永 魏斌 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第22期6414-6416,共3页

目的探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)对人主动脉内皮细胞白细胞介素(IL)-10和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1表达的影响。方法用不同浓度(0、10、100、150 ng/ml)的牙龈卟啉单胞菌脂多糖分别作用于人主动脉内皮细胞。酶联免疫吸附法、聚合酶链... 目的探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)对人主动脉内皮细胞白细胞介素(IL)-10和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1表达的影响。方法用不同浓度(0、10、100、150 ng/ml)的牙龈卟啉单胞菌脂多糖分别作用于人主动脉内皮细胞。酶联免疫吸附法、聚合酶链反应检测IL-10和MCP-1的表达。结果在一定浓度范围内,牙龈卟啉单胞菌LPS呈剂量依赖性促进人主动脉内皮细胞(HAECs)MCP-1的表达,同时减低IL-10的表达水平。结论牙龈卟啉单胞菌LPS可诱导人主动脉内皮细胞IL-10和MCP-1表达紊乱,从而促进动脉粥样硬化的发生。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 动脉粥样硬化 人主动脉内皮细胞

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胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞炎症因子表达影响的研究 被引量：1

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作者 吕青山 李峰 +1 位作者 曹琳 徐瑜 《海南医学院学报》 CAS 2013年第7期919-923,共5页

目的:观察胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞数种炎症因子表达的影响。方法:用胞壁酰二肽(MDP)按要求对人主动脉内皮细胞(HAECs)进行处理,运用实时定量RT-PCR以及RT-PCR测定IL-1β,IL-8,MCP-1,IFN-α与IFN-β基因的表达。用Western blot与RT... 目的:观察胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞数种炎症因子表达的影响。方法:用胞壁酰二肽(MDP)按要求对人主动脉内皮细胞(HAECs)进行处理,运用实时定量RT-PCR以及RT-PCR测定IL-1β,IL-8,MCP-1,IFN-α与IFN-β基因的表达。用Western blot与RT-PCR方法研究MDP影响IFN-α,IFN-β表达的机制。结果:经MDP处理后,HAECs细胞中炎症因子IFN-α,IFN-β,IL-1β,IL-8和MCP-1的表达上调。结论:MDP可以通过上调HAECs细胞炎症因子的表达。 展开更多

关键词 胞壁酰二肽 人主动脉内皮细胞 炎症因子

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AGEs对人主动脉内皮细胞线粒体融合蛋白表达的影响 被引量：1

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作者 章顺荣 高越 封菲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1688-1693,共6页

目的:明确晚期糖基化终产物(AGEs)是否可引起内皮细胞线粒体融合蛋白Mfn1和Mfn2表达水平的变化。方法:AGEs用糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)代替。将购买的原代人主动脉内皮细胞株进行体外扩增、传代、分组,进行AGEs干预,分为对照组,不同... 目的:明确晚期糖基化终产物(AGEs)是否可引起内皮细胞线粒体融合蛋白Mfn1和Mfn2表达水平的变化。方法:AGEs用糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)代替。将购买的原代人主动脉内皮细胞株进行体外扩增、传代、分组,进行AGEs干预,分为对照组,不同浓度梯度的AGEs干预组(50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L)和干预不同时间组(分别是100 mg/L的AGEs干预人主动脉内皮细胞6 h、12 h、24 h和48 h)。采用实时荧光定量PCR方法对AGEs干预后的人主动脉内皮细胞Mfn1和Mfn2的mRNA表达水平进行检测;采用Western blot法对AGEs干预后的人主动脉内皮细胞Mfn1和Mfn2的蛋白表达水平进行检测。结果:不同浓度AGEs干预人主动脉内皮细胞24 h可引起Mfn1和Mfn2的mRNA和蛋白表达水平显著降低;100 mg/L AGEs干预人主动脉内皮细胞6 h,Mfn1和Mfn2的mRNA和蛋白表达水平与对照组相比无显著变化,而干预12 h、24 h和48 h均引起人主动脉内皮细胞Mfn1和Mfn2的mRNA和蛋白表达水平显著降低。结论:AGEs干预体外培养的人主动脉内皮细胞12 h后其线粒体融合蛋白Mfn1和Mfn2的表达水平降低,提示AGEs可能引起内皮细胞线粒体动力学的改变,并可能通过这一途径引起内皮细胞线粒体功能异常,而导致内皮细胞的功能异常。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物 人主动脉内皮细胞 线粒体动力学 线粒体融合蛋白

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NLRP3炎症体参与末端糖基化产物诱导的人主动脉内皮细胞损伤 被引量：1

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作者 张勇 李晓晴 石爽 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第12期1209-1212,共4页

目的观察NLRP3炎症体在末端糖基化产物(AGEs)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞损伤中的作用。方法制备AGEs并以不同浓度AGEs处理体外培养的HAECs,再以抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)处理细胞。MTT法评估细胞活性;流式细胞术测定细... 目的观察NLRP3炎症体在末端糖基化产物(AGEs)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞损伤中的作用。方法制备AGEs并以不同浓度AGEs处理体外培养的HAECs,再以抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)处理细胞。MTT法评估细胞活性;流式细胞术测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平;ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β水平;免疫印记法检测HAECs中NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达水平。结果与正常对照相比,经不同浓度AGEs处理后的HAECs细胞活力显著下降(P<0.05);细胞内ROS生成水平显著增加(P<0.05);细胞内NLRP3、ASC、caspase-1 p20以及IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05);细胞培养上清液内IL-1β水平显著升高(P<0.05)。上述变化均具有AGEs浓度依赖性(P<0.05)。抗氧化剂NAC处理能够显著改善AGEs对细胞活力的抑制(P<0.05),抑制ROS产生(P<0.05),下调NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达(P<0.05),并减少培养上清液内IL-1β水平(P<0.05)。结论 AGEs可能通过诱导HAECs内ROS产生激活NLRP3炎症体导致细胞损伤。 展开更多

关键词 末端糖基化产物 NLRP3炎症体 活性氧簇 人主动脉内皮细胞

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黄芪甲苷促进缺氧损伤后人主动脉内皮细胞血管新生的研究 被引量：20

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作者 卢飞艳 丁燕子 +3 位作者 陈相健 卞智萍 吴恒芳 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1124-1129,共6页

目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧损伤后人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)的保护作用及对血管生成的影响及可能机制。方法:体外培养HAECs,8%O2制备缺氧模型,实验分为对照组、缺氧组、AS-Ⅳ治疗组... 目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧损伤后人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)的保护作用及对血管生成的影响及可能机制。方法:体外培养HAECs,8%O2制备缺氧模型,实验分为对照组、缺氧组、AS-Ⅳ治疗组,50μg/mL)。观察AS-IV对缺氧损伤后HAECs的保护作用及对细胞迁移能力、增殖活性和体外成环的影响以及自噬在血管生成过程中的作用。结果:缺氧损伤后与对照组比较,HAECs细胞上清释放的损伤标志物乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)浓度增加[(25.33±1.70)U/L vs.(5.33±1.25)U/L],细胞活力降低[(81.12±0.72)%vs.(100±3.07)%],细胞迁移能力降低,增殖能力降低,体外成环数下降[(30.91±3.78)个vs.(62.10±7.56)个],自噬相关蛋白Beclin及LC3-Ⅱ表达下调(P<0.05)。加入AS-Ⅳ治疗后,与缺氧组比较,细胞上清LDH释放量减少[(18.33±1.25)U/L],细胞活力提高[(85.71±2.48)%],细胞迁移能力增强、增殖活性增加,基质胶体外成环数增加[(48.64±4.80)个],自噬相关蛋白Beclin及LC3-Ⅱ表达上调(P<0.05)。结论:AS-Ⅳ可减轻缺氧对HAECs的损伤,可能通过激活自噬通路促进HAECs血管新生。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 缺氧 血管新生

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小檗碱活化AMPK-eNOS减轻油酸所致人主动脉内皮细胞损伤 被引量：6

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作者 周慧 刘敬 +8 位作者 侯文锋 王尧清 张文彦 许波 马成俊 李忌 孟庆国 孙喜灵 王振华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期213-219,共7页

目的:考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法:以体外培养人主动脉内皮细胞系(human aorta endothelial cells,HAEC)为受试对象;分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine mo... 目的:考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法:以体外培养人主动脉内皮细胞系(human aorta endothelial cells,HAEC)为受试对象;分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)激活剂(AICAR)或抑制剂(Compound C)处理HAEC;采用油红O染色法观察细胞内脂滴合成;采用比色法检测细胞内甘油三酯、总胆固醇含量,硝酸还原酶法检测NO的水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐探针检测细胞内总活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western Blotting检测细胞总AMPK、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及其磷酸化(p-AMPK、p-eNOS)水平。结果:油酸可浓度依赖性地抑制细胞增殖,小檗碱组各项指标较正常对照组无显著性差异,油酸联合小檗碱组的细胞活性较油酸组明显好转(P<0.01)。与正常对照组比较,油酸组的脂质浸润程度明显,油酸在不同浓度下使内皮细胞的脂质含量呈剂量依赖性增加,加入小檗碱可明显减少这种脂质堆积。油酸组的NO水平较正常对照组明显减少,小檗碱能显著抑制油酸所致的内皮NO水平的减少,并且减少由于油酸所致的ROS水平的升高;油酸抑制了AMPK的活化,使p-AMPK和p-eNOS的蛋白水平明显降低(P<0.01);小檗碱可明显逆转油酸所致AMPK和eNOS磷酸化水平下降,Compound C可拮抗其作用。结论:小檗碱可减轻油酸所致血管内皮细胞损伤,或与其活化AMPK/eNOS信号相关。 展开更多

关键词 小檗碱 油酸 单磷酸腺苷活化蛋白激酶 内皮型一氧化氮合酶 人主动脉内皮细胞

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黄芪甲苷改善过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激损伤的研究 被引量：11

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作者 陈宇琼 孙东岳 +3 位作者 吴恒芳 卞智萍 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期949-954,共6页

目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_... 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_2O_2损伤组细胞经H_2O_2(400μmol/L)持续损伤36 h,AS-Ⅳ治疗组细胞经H_2O_2损伤12 h后加入含50μg/m L AS-Ⅳ的培养基继续干预处理24 h。观察AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤及线粒体功能损伤的修复作用。结果:H_2O_2损伤后HAECs丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶活性及线粒体活性氧(ROS)水平显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及线粒体膜电位显著降低;H_2O_2损伤的HAECs经AS-IV治疗后,HAECs的MDA含量、NADPH氧化酶活性及线粒体ROS含量明显降低,SOD和Mn-SOD活性及线粒体膜电位显著增高。结论:AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤具有保护作用,提高线粒体的抗氧化功能是其可能的机制之一。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 线粒体 过氧化氢

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荷叶碱通过上调SDF-1/CXCR4信号通路促进人主动脉内皮细胞增殖 被引量：5

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作者 陈云宪 唐良秋 +3 位作者 梁家荣 张社兵 陈宝峰 陈锦峰 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第11期981-985,共5页

目的探讨荷叶碱是否通过调控基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子受体4(CXCR4)信号通路影响动脉内皮细胞增殖。方法分别使用不同质量浓度(0 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)的荷叶碱培养人主动脉内皮细胞(HAEC)24 h,通过RT-Q... 目的探讨荷叶碱是否通过调控基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子受体4(CXCR4)信号通路影响动脉内皮细胞增殖。方法分别使用不同质量浓度(0 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)的荷叶碱培养人主动脉内皮细胞(HAEC)24 h,通过RT-QPCR和Western blot技术分别检测各组细胞中SDF-1和CXCR4 mRNA及其蛋白的表达情况。采用体外内皮细胞小管形成实验观察不同质量浓度荷叶碱对HAEC增殖能力的影响。结果SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA在荷叶碱组HAEC中表达升高,在50 mg/L荷叶碱组中表达最显著。荷叶碱组HAEC体外小管形成能力与荷叶碱呈浓度依赖性增强,在50 mg/L荷叶碱组中最明显。结论荷叶碱可能通过上调SDF-1/CXCR4信号通路的表达促进血管内皮细胞增殖。 展开更多

关键词 荷叶碱 基质细胞衍生因子1 趋化因子受体4 人主动脉内皮细胞 血管再生

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心水通胶囊水提物对缺氧损伤性人主动脉内皮细胞LDH、MDA和SOD的影响 被引量：6

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作者 萧璐 谭春江 吴岩斌 《中医药学报》 CAS 2013年第6期47-50,共4页

目的：研究心水通胶囊水提物的细胞毒理学作用。方法：水煎煮法提取心水通胶囊中水溶性成分，不同浓度干预缺氧诱导的人主动脉内皮细胞，并与相同浓度梯度呋塞米组对照。采用MTF比色法、酶学方法以及病理形态学等方法，分别检测细胞活... 目的：研究心水通胶囊水提物的细胞毒理学作用。方法：水煎煮法提取心水通胶囊中水溶性成分，不同浓度干预缺氧诱导的人主动脉内皮细胞，并与相同浓度梯度呋塞米组对照。采用MTF比色法、酶学方法以及病理形态学等方法，分别检测细胞活性、培养液中LDH、MDA和SOD含量以及细胞病理形态变化。结果：在0．5-1．5mg／mL浓度之间，心水通胶囊组比缺氧模型组细胞存活率增明显增高（P〈0．05）。在该浓度区间，细胞培养液中LDH和MDA活力降低，而SOD的活力增强，且该作用呈药物浓度依赖性；心水通胶囊组细胞形态正常，贴壁生长良好，未见明显细胞毒性作用。呋塞米组LDH和MDA活力随浓度而增高，而SOD活力和细胞活率降低，细胞毒性也增加。结论：心水通胶囊对缺氧诱导的细胞损伤具有一定保护作用，细胞毒性小。 展开更多

关键词 心水通胶囊 缺氧性损伤 人主动脉内皮细胞 细胞毒理学

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姜黄素减轻氧化型低密度脂蛋白诱导的人主动脉内皮细胞损伤 被引量：5

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作者 胡勇 苏晓红 +3 位作者 朱火兰 张凌霄 刘飞 刘仲伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1359-1364,共6页

目的:观察姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的作用及分子机制。方法:以不同浓度姜黄素预处理体外培养的HAECs,再以ox-LDL对细胞进行干预。MTT法和Ed U法评估细胞增殖能力;ELISA法对培养液中白细胞... 目的:观察姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的作用及分子机制。方法:以不同浓度姜黄素预处理体外培养的HAECs,再以ox-LDL对细胞进行干预。MTT法和Ed U法评估细胞增殖能力;ELISA法对培养液中白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGFβ1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)以及分泌型晚期糖基化终产物受体(sRAGE)浓度进行检测;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)评估过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的结合活性;Western blot法检测HAECs中磷酸化PPARγ、血红素氧合酶-1(HO-1)、HMGB1、IL-6、TGFβ1和RAGE的表达水平。结果:ox-LDL处理的HAECs细胞活力和增殖能力下降,细胞内PPARγ/HO-1信号被抑制,其下游HMGB1/RAGE炎症通路被激活,细胞分泌的IL-6、TGFβ1、HMGB1以及sRAGE浓度显著增加。不同浓度姜黄素预处理可激活ox-LDL诱导的HAECs内PPARγ/HO-1信号通路,从而抑制下游HMGB1/RAGE炎症通路,降低IL-6、TGFβ1、HMGB1以及sRAGE炎症因子水平。结论:ox-LDL能够通过抑制PPARγ/HO-1而激活HMGB1/RAGE炎症通路造成HAECs损伤。姜黄素则能够通过活化PPARγ/HO-1通路抑制炎症反应,减轻ox-LDL对HAECs的损伤。 展开更多

关键词 姜黄素 人主动脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ

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miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响 被引量：4

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作者 莫倩 李丹 凌文华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1187-1191,共5页

目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:... 目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:转染48 h后,miR-18a mimics组miR-18a表达为对照组的608倍(P<0.05);miR-18a inhibitor组miR-18a表达降低至对照组的31%(P<0.05)。与对照组相比,miR-18a mimics转染后迁移至Transwell小室下层的内皮细胞数目和毛细血管管腔形成数目分别减少60%和52%(P<0.01);而miR-18a inhibitor转染后分别增加100%(P<0.05)和84%(P<0.01),细胞黏附能力增加43%(P<0.05)。结论:miR-18a的表达水平与人主动脉内皮细胞的血管生成能力相关,可能成为血管性疾病治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 miR-18a 人主动脉内皮细胞 血管生成

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阿托伐他汀对脂多糖诱导人主动脉内皮细胞细胞间黏附分子-1表达的影响 被引量：3

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作者 嵇云鹏 张彦燕 +4 位作者 杨红 石廷雨 徐旖旎 陶玲 沈祥春 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第8期882-886,共5页

目的:观察阿托伐他汀(Atv.)对脂多糖(LPS)诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其分子机制。方法:用1 mg/L LPS复制HAECs损伤模型,通过MTT和乳酸脱氢酶(LDH)外漏率实验观察5μmol/L Atv.对LPS诱导HAEC... 目的:观察阿托伐他汀(Atv.)对脂多糖(LPS)诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其分子机制。方法:用1 mg/L LPS复制HAECs损伤模型,通过MTT和乳酸脱氢酶(LDH)外漏率实验观察5μmol/L Atv.对LPS诱导HAECs损伤的保护作用,采用RT-PCR法检测Atv.对ICAM-1 mRNA表达的影响,Western blot检测Atv.对ICAM-1、IκBα及NF-κB蛋白表达水平的影响。结果:与LPS组比较,Atv.能有效抑制LPS诱导的HAECs损伤,细胞活力增加(P<0.01),LDH外漏率减少(P<0.01),Atv.可抑制LPS诱导的ICAM-1 mRNA(P<0.05)和蛋白表达上调(P<0.01),还可抑制LPS诱导的IκBα蛋白表达水平的降低和phospho-NF-κB p65蛋白表达水平的升高(P<0.01)。结论:阿托伐他汀对LPS诱导HAECs损伤具有保护作用,并有效抑制ICAM-1的表达,该作用与抑制IκBα降解及NF-κB p65磷酸化有关。 展开更多

关键词 阿托伐他汀 人主动脉内皮细胞 细胞间黏附分子-1 核因子-KB

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敲低前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制人主动脉内皮细胞的内皮间质转化 被引量：2

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作者 靳天慧 陈亮 +4 位作者 刘叶红 盛瑛 周雨婷 宣诗怡 宗刚军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1079-1084,共6页

目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml... 目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml L-抗坏血酸诱导HAEC建立EndoMT模型。采用PCSK9的特异性小干扰RNA(si-PCSK9)转染HAEC,实时荧光定量PCR与Western blot法检测HAEC的PCSK9的mRNA和蛋白表达。将HAEC随机分为空白组、EndoMT组、转染阴性对照小干扰RNA的EndoMT组、转染si-PCSK9的EndoMT组。实时荧光定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的mRNA水平,Western blot法检测α-SMA、VE-cadherin的蛋白水平,免疫荧光染色法检测α-SMA的表达。结果30 mmol/Lβ甘油磷酸诱导EndoMT效果最佳,发生EndoMT时,PCSK9的mRNA及蛋白表达上调。而PCSK9敲减后,α-SMA、FSP1的表达下调,VE-cadherin的表达上调。结论敲低PCSK9可抑制HAEC的EndoMT。 展开更多

关键词 内皮间质转化(EndoMT) 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9) 人主动脉内皮细胞(HAEC)

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