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人源化抗体制备及其应用研究进展 被引量：7
1
作者 王业荣 童德文 +2 位作者 李立 刘文明 王业炳 《生物技术通讯》 CAS 2007年第4期683-687,共5页
伴随着一系列重大生物技术(如PCR技术、抗体库技术、转基因动物技术等)的发展,抗体技术从最初的嵌合抗体、改型抗体逐渐发展为今天的人源化抗体。人源化抗体在治疗肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等方面已经显示出独特的优势和良好的应... 伴随着一系列重大生物技术(如PCR技术、抗体库技术、转基因动物技术等)的发展,抗体技术从最初的嵌合抗体、改型抗体逐渐发展为今天的人源化抗体。人源化抗体在治疗肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等方面已经显示出独特的优势和良好的应用前景。介绍了人源化抗体的构建及其表达系统,并对其临床应用进行了展望。 展开更多
关键词 嵌合抗体 人源化抗体 噬菌体展示技术 转基因技术
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抗CD3人源化抗体恒定区突变体的制备及其生物学活性 被引量：1
2
作者 李博华 王皓 +7 位作者 杨扬 陆斌 王华菁 张大鹏 钱卫珠 季军捷 李晓东 郭亚军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期28-33,共6页
为了降低抗CD3人源化抗体hu12F6对T细胞的激活作用以克服首剂效应 ,构建了恒定区特定位点突变的hu12F6重链表达载体 ,将其与hu12F6的轻链表达载体共转染CHO细胞 .ELISA和RT PCR证实 ,恒定区特定位点突变的人源化抗体hu12F6m在CHO细胞中... 为了降低抗CD3人源化抗体hu12F6对T细胞的激活作用以克服首剂效应 ,构建了恒定区特定位点突变的hu12F6重链表达载体 ,将其与hu12F6的轻链表达载体共转染CHO细胞 .ELISA和RT PCR证实 ,恒定区特定位点突变的人源化抗体hu12F6m在CHO细胞中获得了表达 .竞争抑制实验证实hu12F6m具有与原鼠源抗体及hu12F6相似的特异性和亲和力 .增殖实验表明hu12F6m对T细胞的刺激作用明显弱于hu12F6 .实验结果为深入探讨hu12F6m的生物学特性奠定了基础 . 展开更多
关键词 CD3 人源化抗体 定点突变 首剂效应 恒定区
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CHO细胞表达的抗炭疽保护性抗原人源化抗体的纯化及质量控制分析 被引量：2
3
作者 张金龙 李冰 +7 位作者 任军 宋晓红 张章 侯利华 于长明 付玲 杨秀旭 李建民 《生物技术通讯》 CAS 2014年第6期817-820,共4页
目的:建立CHO细胞表达的抗炭疽保护性抗原人源化单抗纯化工艺和质量控制方法。方法:收获50 L生物反应器中无血清悬浮培养的CHO工程细胞培养液,通过高速离心去除细胞及碎片后超滤浓缩上清液,经亲和层析、SPFF阳离子交换层析后,将所得目... 目的:建立CHO细胞表达的抗炭疽保护性抗原人源化单抗纯化工艺和质量控制方法。方法:收获50 L生物反应器中无血清悬浮培养的CHO工程细胞培养液,通过高速离心去除细胞及碎片后超滤浓缩上清液,经亲和层析、SPFF阳离子交换层析后,将所得目的蛋白质经G25凝胶柱更换缓冲液以完成纯化;对纯化的产品进行单抗鉴别(Western印迹)、相对分子质量(SDS-PAGE和MOLDI-TOF)、纯度(SEC-HPLC)、生物学活性(毒素中和试验)、产品相关杂质(SEC-HPLC检测聚集体、降解产物)、工艺相关杂质(ELISA分析残余宿主蛋白、残余蛋白A)、安全性(凝胶法检测内毒素、薄膜过滤法考察无菌)分析。结果:样品回收率达61.7%;单抗鉴别实验阳性;MOLDI-TOF测定完整分子的相对分子质量为147 995,与预期相符;单体比例为99.25%,二聚体比例为0.75%;EC50值为0.1516μg/m L。残余宿主蛋白、残余蛋白A、内毒素、无菌检查结果符合药典要求。结论:初步建立了纯化工艺和质量控制方法,为抗炭疽人源化单抗药物的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 炭疽 保护性抗原 人源化抗体 纯化 质量控制
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人源化抗体研制策略分析及应用研究 被引量：10
4
作者 葛彦 张学光 《国外医学（免疫学分册）》 2004年第5期271-274,共4页
鼠源性单克隆抗体由于可引起免疫反应而逐渐被人源化抗体所替代 ,人源化抗体开辟了抗体治疗临床应用的新时代。本文介绍并比较分析了几种制备人源化抗体的策略和抗体表达系统 ,并对其临床应用进行了展望。
关键词 嵌合抗体 人源化抗体 全人单克隆抗体 噬菌体表面展示技术
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人源化抗体用于病毒性疾病治疗的研究进展 被引量：3
5
作者 康晓平 祝庆余 《国外医学（病毒学分册）》 2004年第5期158-160,F003,共4页
抗体对于病毒感染的被动免疫治疗具有重要作用 ,目前人源化抗体研究技术的发展已使抗体的临床应用成为可能 ,针对很多强致病力病毒 ,已有很多治疗性人源单抗研究的报道 ,并显示出良好的应用前景。
关键词 治疗性 人源化抗体 临床应用 病毒性疾病 研究进展 被动免疫 病毒感染 研究技术 致病力
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人源化抗体转基因动物的研究进展与趋势 被引量：3
6
作者 葛良鹏 邹贤刚 刘作华 《生物产业技术》 2016年第6期52-56,共5页
人源化抗体转基因动物是人源化抗体药物开发的战略核心资源,能为抗体序列发现提供源头创新保障,并为突发性生物安全事件提供应急预案。文章对人源化抗体转基因动物的发展历程进行综述回顾,重点介绍目前世界上常用的人源化抗体转基因动... 人源化抗体转基因动物是人源化抗体药物开发的战略核心资源,能为抗体序列发现提供源头创新保障,并为突发性生物安全事件提供应急预案。文章对人源化抗体转基因动物的发展历程进行综述回顾,重点介绍目前世界上常用的人源化抗体转基因动物品系,并对其应用情况和发展趋势进行分析展望。 展开更多
关键词 人源化抗体 转基因动物 抗体基因 抗体药物 单链抗体 细胞发育 人免疫球蛋白 全人源抗体 免疫球蛋白基因 亲和力成熟
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人源化抗体的研究进展
7
作者 吴荔芬 《齐齐哈尔医学院学报》 2008年第13期1607-1608,共2页
本文就人源化抗体的构建、人源化抗体药物的临床应用、存在的问题及解决途径等方面内容进行了综述。
关键词 人源化抗体 构建 临床应用
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浅论人源化抗体的制备技术
8
作者 徐舒 《江苏教育学院学报（自然科学版）》 2010年第4期34-39,共6页
抗体对免疫治疗具有重要作用.人源化抗体是指抗体的可变区部分由人类可变区基因所编码的抗体,代替鼠源抗体,避免用于人体时所造成的HAMA反应或其他并发症.用基因重组方法制备人源化抗体的技术为抗体药物的未来奠定了坚实的基础.其中,大... 抗体对免疫治疗具有重要作用.人源化抗体是指抗体的可变区部分由人类可变区基因所编码的抗体,代替鼠源抗体,避免用于人体时所造成的HAMA反应或其他并发症.用基因重组方法制备人源化抗体的技术为抗体药物的未来奠定了坚实的基础.其中,大容量噬菌体抗体库技术的不断改进使得快速高通量的不经免疫即可获得各种特异性抗体成为可能,为抗体药物的重新兴起带来了新的希望. 展开更多
关键词 抗体 人源化抗体 噬菌体抗体库 大容量抗体库
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用于治疗的人源化抗体
9
作者 傅俐 《生物技术》 CAS CSCD 1992年第1期45-46,共2页
抗体治疗癌症、自身免疫紊乱、病毒和细菌感染是具有很大的可能性.抗体可以中和微生物及其毒素,破坏癌细胞以及调节其免疫体系.鼠单抗是比较容易生产,但是对于应用治疗,受到严重的限制,因为它在患者体内所产生免疫原性.人的单抗可以有... 抗体治疗癌症、自身免疫紊乱、病毒和细菌感染是具有很大的可能性.抗体可以中和微生物及其毒素,破坏癌细胞以及调节其免疫体系.鼠单抗是比较容易生产,但是对于应用治疗,受到严重的限制,因为它在患者体内所产生免疫原性.人的单抗可以有较好地治疗功能,但且很难生产. 展开更多
关键词 人源化抗体 抗体
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抗MG－3人源化抗体14F7
10
《中国医药技术经济与管理》 2013年第4期88-88,共1页
本项目研制一种安全有效并能使更多的乳腺癌患者受惠的抗Neu5Gc人源化抗体14F7。人源化抗体Herceptin对乳腺癌治疗起到了很好的效果，是目前用于乳腺癌治疗的唯一抗体类药物，属“重磅炸弹”级药物，2009年和2010年全球销售额分别达到4... 本项目研制一种安全有效并能使更多的乳腺癌患者受惠的抗Neu5Gc人源化抗体14F7。人源化抗体Herceptin对乳腺癌治疗起到了很好的效果，是目前用于乳腺癌治疗的唯一抗体类药物，属“重磅炸弹”级药物，2009年和2010年全球销售额分别达到48亿和52亿美元。与Herceptin相比，该项日研发的产品可以使更多的乳腺癌患者受益，受众面更广，若国内10万乳腺癌患者每年的用药费用按5万元计算，其年市场规模可达50亿人民币。相比较Herceptin，全球的市场规模也非常可观。 展开更多
关键词 人源化抗体 HERCEPTIN 乳腺癌患者 抗体类药物 市场规模 2009年 用药费用 销售额
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抗MG-3人源化抗体14F7
11
《中国医药技术经济与管理》 2013年第5期74-74,共1页
【适应症】乳腺癌 【项目阶段】临床前研究 【知识产权】已申请国家专利【合作方式】面议【项目简介】本项目研制一种安全有效并能使更多的乳腺癌患者受惠的抗Neu5Gc人源化抗体14F7。人源化抗体Herceptin对乳腺癌治疗起到了很好的效果，
关键词 人源化抗体 HERCEPTIN 乳腺癌患者 合作方式 国家专利 知识产权 适应症 临床前
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抗MG-3人源化抗体14F7
12
《中国医药技术经济与管理》 2012年第6期64-64,共1页
【适应症】乳腺癌【项目阶段】临床前研究【知识产权】已申请国家专利【合作方式】面议【项目简介】本项目研制一种安全有效并能使更多的乳腺癌患者受惠的Neu5Gc人源化抗体14F7。人源化抗体Herceptin对乳腺癌治疗得到了很好的效果，是... 【适应症】乳腺癌【项目阶段】临床前研究【知识产权】已申请国家专利【合作方式】面议【项目简介】本项目研制一种安全有效并能使更多的乳腺癌患者受惠的Neu5Gc人源化抗体14F7。人源化抗体Herceptin对乳腺癌治疗得到了很好的效果，是目前用于乳腺癌治疗的唯一抗体类药物，属“重磅炸弹”级药物，2009年和2010年全球销售额分剐达到48亿和52亿美元。与Herceptin相比，该项目研发的产品可以使更多的乳腺癌患者受益，受众面更广，若国内10万乳腺癌患者每年的用药费用按5万元计算，其年市场规模可达50亿人民币。相比较Herceptin，全球的市场规模也非常可观。 展开更多
关键词 人源化抗体 HERCEPTIN 乳腺癌患者 抗体类药物 市场规模 2009年 合作方式 国家专利
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抗MG-3人源化抗体14F7
13
《中国医药技术经济与管理》 2013年第1期76-76,共1页
【适应症】乳腺癌 【项目阶段】临床前研究 【知识产权】已申请国家专利
关键词 人源化抗体 国家专利 知识产权 乳腺癌 适应症 临床前
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我国自主培育出人源化抗体小鼠
14
作者 李琦(校对) 张艳欣(校对) 《今日科苑》 2018年第11期2-2,共1页
科技日报记者从在重庆市荣昌区举行的第八届中国畜牧科技论坛上获悉,由重庆市畜科院研发的人源化抗体小鼠已经进入药物开发应用阶段,这是我国唯一具有自主知识产权的人源化抗体小鼠。据重庆市畜牧科学院生物工程研究所所长葛良鹏博士介... 科技日报记者从在重庆市荣昌区举行的第八届中国畜牧科技论坛上获悉,由重庆市畜科院研发的人源化抗体小鼠已经进入药物开发应用阶段,这是我国唯一具有自主知识产权的人源化抗体小鼠。据重庆市畜牧科学院生物工程研究所所长葛良鹏博士介绍,他们已经自主培育出全人源化抗体小鼠品系和全人源化单域抗体小鼠品系,申请国内外发明专利10项,目前已经在和一些药企合作进行药物开发。 展开更多
关键词 人源化抗体 小鼠品系 培育 生物工程研究所 畜牧科技 自主知识产权 药物开发 重庆市
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靶向于TNF-α和RANKL的人源化抗体对DBA/1小鼠单关节炎的保护作用 被引量：2
15
作者 娄苇苇 杜晓楠 +3 位作者 袁慧慧 窦云鹏 赵文明 李慎涛 《微生物学免疫学进展》 2017年第2期8-16,共9页
目的制备同时拮抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和核因子κB受体活化因子配体(re-ceptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的人源化单克隆抗体(h8G12),通过单关节炎小鼠模型,评估h8G12在抑制TNF-α引起的炎症反应... 目的制备同时拮抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和核因子κB受体活化因子配体(re-ceptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的人源化单克隆抗体(h8G12),通过单关节炎小鼠模型,评估h8G12在抑制TNF-α引起的炎症反应和拮抗RANKL引起的骨破坏中的保护作用。方法培养稳定表达h8G12的CHO细胞株,观察细胞生长状态,用间接ELISA检测细胞培养上清中h8G12的表达水平。纯化的h8G12经SDS-PAGE、West-ern blot分析及鉴定,用间接ELISA观察其亲和力。通过向DBA/1小鼠膝关节腔注射人TNF-α重组蛋白和人RANKL重组蛋白,建立单关节炎小鼠模型。用组织学评估观察不同给药方案[阴性对照组、阳性对照组、阿达木单抗(adalimumab,ADA)组和h8G12组]对小鼠单关节炎引起的炎症浸润、软骨侵蚀、膝关节腔内破骨细胞分化的保护作用。结果 CHO细胞株培养96 h时细胞生长状态良好,可稳定分泌h8G12;纯化的h8G12纯度可达90%,Western blot可见特异性条带,且可与rh TNF-α和rh RANKL结合。在单关节炎小鼠模型中,苏木精-伊红染色显示,h8G12组关节腔、周围软组织及骨髓腔内炎性细胞浸润明显少于阳性对照组,炎症评分降低了50%,治疗效果与ADA相似。甲苯胺蓝染色显示,h8G12组病理评分出现显著下降,h8G12治疗后小鼠关节结构相对完好,关节软骨厚度接近正常水平。抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,h8G12组关节腔内破骨细胞明显减少。结论 h8G12可有效抑制TNF-α引起的炎症反应和拮抗RANKL引起的骨破坏,为类风湿关节炎的治疗提供了新方法。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 肿瘤坏死因子Α 核因子ΚB受体活化因子配体 人源化单克隆抗体(h8G12)
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人源化抗体中和2009年甲型H1N1流感病毒的研究
16
作者 Shembekar N 董晓云 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期172-172,共1页
2009年甲型H1N1流感病毒(猪源流感病毒)流行在全世界引起较高的发病率和死亡率。除疫苗和抗病毒药物治疗外,使用流感病毒中和性单克隆抗体(MAb)来治疗也是一种可行的选择。前期的研究分离了具有高亲和力的抗2009年甲型H1N1流感病毒的鼠... 2009年甲型H1N1流感病毒(猪源流感病毒)流行在全世界引起较高的发病率和死亡率。除疫苗和抗病毒药物治疗外,使用流感病毒中和性单克隆抗体(MAb)来治疗也是一种可行的选择。前期的研究分离了具有高亲和力的抗2009年甲型H1N1流感病毒的鼠单克隆抗体MA2077,本试验研究了MA2077的人源化及其在哺乳动物细胞中的表达。MA2077的6个互补决定区(CDR)被移植到人类种系可变区,同时在重链和轻链的框架中分别有6和8个回复突变,与微调区和链间包装残基一起促进CDR优势构象及抗原结合。表达于CHO-K1细胞的全长人源化抗体2077Hu2,对血凝素蛋白(KD=0.75nm±0.32nm)表现出较高的亲和力,与H1N1流感病毒(IC50=0.17μg/mL)有强效的中和活性,与MA2077(0.08μg/mL)相比IC50略高。此外,2077Hu2还保留了针对HA流感"Sa"的特异性抗原表位。据悉,这是对甲型H1N1流感病毒的人源化中和抗体的首次报告。 展开更多
关键词 2009年甲型H1N1流感 抗体人源化 CDR移植 表位作图 中和性单克隆抗体
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抗人CD40单克隆抗体的筛选及其人源化抗体的抗肿瘤活性评价
17
作者 赵丽丽 张晓丽 +2 位作者 赵文鹏 朱中松 刘忠 《中国医药工业杂志》 EI CAS CSCD 2024年第1期58-65,共8页
CD40激动型抗体在治疗恶性肿瘤方面具有巨大的潜力,但其疗效和安全性仍有欠缺。该研究通过杂交瘤技术筛选到2株高结合力、高亲和力的激动型抗CD40单克隆抗体(31A2-2、42D11-8),对其进行人源化改造,并采用NPG小鼠移植瘤模型研究其药效。... CD40激动型抗体在治疗恶性肿瘤方面具有巨大的潜力,但其疗效和安全性仍有欠缺。该研究通过杂交瘤技术筛选到2株高结合力、高亲和力的激动型抗CD40单克隆抗体(31A2-2、42D11-8),对其进行人源化改造,并采用NPG小鼠移植瘤模型研究其药效。结果显示,改造后的抗体经测定仍具有较高的结合力和亲和力,在树突状细胞激活试验中显示出较强的激活能力,可刺激树突状细胞激活并释放IL-12。2株抗体在NPG小鼠体内均具有显著的抗肿瘤效果,肿瘤生长抑制率分别达到86.83%、87.95%。该研究为CD40激动型药物的开发提供了数据支持。 展开更多
关键词 CD40单克隆抗体 杂交瘤技术 人源化抗体 抗肿瘤活性
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抗periostin人源化单克隆抗体的制备及鉴定
18
作者 李雪娇 赵航 +6 位作者 张朔 康慧颖 周艳楠 贾爽 路旭 赵洪礼 海洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2628-2633,共6页
目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚... 目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚克隆到表达载体PATX-GS2,稳定转染CHO细胞,经MSX加压筛选、有限稀释获得单克隆细胞株。结果:经RT-PCR扩增V_(H)和V_(L)基因,确定轻重链可变区序列,通过CDR移植方法,成功对鼠源单抗进行人源化改造,并构建了真核质粒载体,经转染至CHO细胞表达,成功获得人源化抗periostin抗体,ELISA和Western blot结果证明,制备的人源化抗体具有良好的活性和亲和力。结论:本研究成功制备了抗periostin人源化单克隆抗体,且该人源化抗体可以与体内periostin蛋白特异性结合,具有生物学活性,为精准治疗视网膜纤维化病变、组织器官纤维化病变及恶性肿瘤提供了科学数据。 展开更多
关键词 PERIOSTIN 人源化单克隆抗体 视网膜纤维化
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A型流感病毒通用型人源化抗体的构建及初步鉴定 被引量：5
19
作者 王铁成 任志广 +19 位作者 桑晓宇 于志君 张坤 高晓龙 孙伟洋 李元果 郑学星 高玉竹 耿海东 徐钰 解林红 吴长江 张晓田 孙贺廷 初冬 赵永坤 杨松涛 王化磊 高玉伟 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第6期481-485,560,共6页
目的制备A型流感病毒通用型人源化抗体并进行鉴定。方法通过文献检索、蛋白质序列数据库(Swissprot)、蛋白质结构数据库(PBD)等获得抗流感抗体的序列信息,经计算机分析软件InsightⅡ分析抗体结构,采用分子模拟、分子对接等方法分析抗体... 目的制备A型流感病毒通用型人源化抗体并进行鉴定。方法通过文献检索、蛋白质序列数据库(Swissprot)、蛋白质结构数据库(PBD)等获得抗流感抗体的序列信息,经计算机分析软件InsightⅡ分析抗体结构,采用分子模拟、分子对接等方法分析抗体的轻、重链可变区基因结构,用昆虫细胞偏嗜密码子优化氨基酸序列,合成抗流感病毒抗体轻、重链可变区基因;对合成氨基酸序列中的轻、重链可变区基因作酶切鉴定,将轻链可变区基因与杆状病毒表达载体PAC-κ-CH3连接,构建PAC-κ-L-CH3,酶切合成的重链可变区基因与PAC-κ-L-CH3连接,构建PAC-κ-L-H-CH3重组表达载体,鉴定正确后,同杆状病毒DNA共转染至昆虫细胞(sf9)中,于27℃用无血清培养基培养,收集上清,应用各亚型流感病毒株灭活后进行血凝抑制试验和ELISA试验,检测制备的抗体对流感病毒的通用性;通过荧光抗体试验检测抗体在细胞中的表达。结果重组杆状病毒表达载体转染sf细胞后,传代上清中检测到抗体;血凝抑制试效价为1︰2;ELISA结果显示有3株制备的抗体对3种流感病毒呈阳性反应,1株对实验用的流感病毒株没有反应;转染后传代细胞的荧光抗体鉴定结果显示有阳性抗体表达。结论成功采用计算机筛选合成抗流感病毒抗体基因,初步获得A型流感病毒通用型抗体。 展开更多
关键词 人源化抗体 流感病毒 可变区 PAC—rcH3
原文传递
人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体的体外分子进化 被引量：5
20
作者 刘志刚 俞炜源 林建波 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期90-93,共4页
以人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体的 5株CDR3突变体为基础 ,利用致错PCR和DNA重排方法对其进行了突变和重排 ,然后克隆重组装的突变单链抗体至载体pHB 1HSCFV而构建了库容为 10 5的抗体库 ,利用噬菌体表面呈现技术对构建的人源化抗体突... 以人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体的 5株CDR3突变体为基础 ,利用致错PCR和DNA重排方法对其进行了突变和重排 ,然后克隆重组装的突变单链抗体至载体pHB 1HSCFV而构建了库容为 10 5的抗体库 ,利用噬菌体表面呈现技术对构建的人源化抗体突变库进行了富集 ,并利用单链抗体 -碱性磷酸酶系统进行了阳性克隆的筛选和鉴定。随后以鉴定的 5株阳性克隆为基础进行了第二轮的致错PCR、DNA重排、抗体库的构建和富集 ,并筛选到 4株亲和力较亲本鼠抗体All更好的人源化抗体 ,该研究为研制低免疫原性的导向溶栓制剂奠定基础。 展开更多
关键词 单链抗体 致错PCR DNA重排 鼠 人源化抗体 分子进化
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