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番茄红素干预食管癌细胞系Eca9706的实验研究 被引量：1
1
作者 陈晓 张亚楼 +4 位作者 张月明 温浩 王颢 阿孜古丽 陈启龙 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2003年第8期765-767,共3页
目的 :研究番茄红素体外对食管癌细胞 Eca970 6的作用及可能机制。方法 :番茄红素 1 0 - 3mol/L、1 0 - 4mol/L、1 0 - 5mol/L、1 0 - 6 mol/L、1 0 - 7mol/L 5个浓度组干预食管癌细胞2 4 h,观察细胞存活量及蛋白含量 ,并用免疫组织化... 目的 :研究番茄红素体外对食管癌细胞 Eca970 6的作用及可能机制。方法 :番茄红素 1 0 - 3mol/L、1 0 - 4mol/L、1 0 - 5mol/L、1 0 - 6 mol/L、1 0 - 7mol/L 5个浓度组干预食管癌细胞2 4 h,观察细胞存活量及蛋白含量 ,并用免疫组织化学的方法观察 bcl- 2蛋白在干预前后的表达。结果 :番茄红素 1 0 - 3mol/L时 ,有促进肿瘤生长趋势 ,1 0 - 4mol/L、1 0 - 5mol/L、1 0 - 6 mol/L有抑制细胞肿瘤生长作用 ,而且 1 0 - 4mol/L效果最好 ,1 0 - 7mol/L对抑制肿瘤生长效果不明显 ,仅有轻度抑制作用 ( P>0 .0 5 )。而蛋白含量仅有 1 0 - 6 mol/L、1 0 - 7mol/L有轻度抑制作用但无统计学意义 ( P>0 .0 5 )。免疫组织化学结果显示 ,bcl- 2表达于此细胞系。干预后未见bcl- 2表达。结论 :番茄红素对食管癌细胞系 ( Eca970 6)有抑制生长作用 ,有剂量反应关系 ,此作用与抑制 bcl- 2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 食管癌 番茄红素 干预 细胞系 eca9706 实验研究
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三氧化二砷对食管癌细胞系EC9706作用的研究 被引量：1
2
作者 栗敏 马洪宇 +2 位作者 赵培荣 樊青霞 王留兴 《肿瘤基础与临床》 2006年第1期10-12,共3页
目的探讨不同浓度三氧化二砷(As2O3)对食管癌细胞系EC9706的生长抑制作用及其机理。方法不同浓度三氧化二砷作用于细胞EC9706,采用MTT法检测细胞生长,倒置显微镜观察细胞形态,并通过DNA梯状电泳和流式细胞仪检测凋亡。结果三氧化二砷剂... 目的探讨不同浓度三氧化二砷(As2O3)对食管癌细胞系EC9706的生长抑制作用及其机理。方法不同浓度三氧化二砷作用于细胞EC9706,采用MTT法检测细胞生长,倒置显微镜观察细胞形态,并通过DNA梯状电泳和流式细胞仪检测凋亡。结果三氧化二砷剂量依赖性抑制细胞生长;观察到典型的细胞凋亡形态学特征性改变;琼脂糖电泳呈现凋亡DNA梯状条带;流式细胞仪分析,细胞株EC9706存在明显的G0/G1期阻滞。结论As2O3具有抑制食管癌细胞株EC9706生长作用,其机理是诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 食管癌细胞ec9706 三氧化二砷 细胞凋亡
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丙泊酚通过MAPK/ERK途径抑制食管癌细胞系EC9706中VEGF的表达 被引量：7
3
作者 杨国庆 刘德军 《医学研究杂志》 2017年第12期90-94,共5页
目的探究丙泊酚对食管癌细胞系EC9706中血管内皮生长因子VEGF表达情况的影响及相关分子机制。方法通过蛋白免疫印迹检测人食管癌细胞系EC9706与正常食管上皮细胞系HEEC中VEGF表达情况。分别用不同浓度的丙泊酚(0、2、6、10μg/L)培养EC9... 目的探究丙泊酚对食管癌细胞系EC9706中血管内皮生长因子VEGF表达情况的影响及相关分子机制。方法通过蛋白免疫印迹检测人食管癌细胞系EC9706与正常食管上皮细胞系HEEC中VEGF表达情况。分别用不同浓度的丙泊酚(0、2、6、10μg/L)培养EC9706,孵育后,对各组EC9706细胞株行MTT、流式细胞术、细胞侵袭实验、细胞划痕修复试验,观察各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力;使用q RT-PCR和蛋白免疫印迹分别检测各组细胞内VEGF、p38(MAPK)和p44/42(ERK1/2)的表达和磷酸化水平。结果 EC9706细胞中VEGF表达显著强于HEEC细胞。丙泊酚干预后,丙泊酚组细胞增殖、迁移和侵袭显著低于Ctrl组;而丙泊酚组细胞凋亡率显著高于Ctrl组。q RT-PCR和蛋白免疫印迹结果显示,丙泊酚组瘤细胞内VEGF m RNA和蛋白表达水平显著降低;丙泊酚抑制p38(MAPK)和p44/42(ERK1/2)的表达和磷酸化水平。上述这些影响都存在剂量依赖性。结论丙泊酚抑制人食管癌细胞系EC9706的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。其潜在的机制是通过抑制MAPK/ERK信号通路,进而抑制VEGF的表达。 展开更多
关键词 丙泊酚 食管癌细胞系ec9706 MAPK/ERK途径 VEGF
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利用pTet-Off系统研究NAIF1对食管癌细胞系EC9706生物学行为的影响
4
作者 罗清 钟佳玲 +4 位作者 赵玫 马怡茗 刘健 王佳 黄常志 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期162-165,共4页
目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克... 目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克隆采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测细胞周期、Transwell小室法检测细胞迁移和检测细胞黏附能力的改变。结果:经筛选并鉴定获得了稳定的可诱导表达TF93-pTRE2-NAIF1克隆。NAIF1在体外可以抑制EC9706细胞增殖、导致G0/G1期细胞阻滞、抑制其迁移和黏附能力。结论:NAIF1能抑制食管癌细胞系EC9706的恶性生物学行为,为食管癌的基因治疗提供了可能的新靶点。 展开更多
关键词 NAIF1 食管癌 ec9706 pTet-Off可诱导表达系统
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健脾和胃法对食管癌细胞株EC9706移植瘤生长的抑制作用 被引量：17
5
作者 吴耀松 金华彬 +5 位作者 陈玉龙 尹素改 任闪闪 王朋辉 尚艺婉 李晨旭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第8期1836-1839,共4页
目的:通过观察健脾和胃法及其代表方六君子汤对裸鼠移植瘤的生长和组织中STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法:用EC9706细胞皮下注射裸鼠制备移植瘤模型,实验分为:正常空白组(C组)、模型组(M组)、六君... 目的:通过观察健脾和胃法及其代表方六君子汤对裸鼠移植瘤的生长和组织中STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法:用EC9706细胞皮下注射裸鼠制备移植瘤模型,实验分为:正常空白组(C组)、模型组(M组)、六君子汤组(L组)、抑制剂组(S组)、六君子汤加抑制剂组(L+S组),C、M组为空白对照组,灌服生理盐水和腹腔注射生理盐水;L组灌服六君子汤和腹腔注射生理盐水;S组灌服生理盐水和腹腔注射Stattic工作液;L+S组灌服六君子汤水煎液和腹腔注射Stattic工作液。4周后摘除眼球取血和移植瘤,ELISA检测血清中IL-6、VEGF含量;免疫组化检测移植瘤组织中CD34和VEGF表达;Western blot检测移植瘤组织细胞中JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果:与模型组比较,六君子汤组肿瘤体积较小(P<0.05);各组移植瘤重量及组织中CD34表达均下降(P<0.05);血清中抑制剂组IL-6含量明显降低(P<0.05),其它各组没有明显差异;仅六君子汤组和抑制剂组中JAK2和STAT3表达下降(P<0.05),抑制剂组中p-STAT3明显降低(P<0.05),其它各组无明显差异。与抑制剂组比较,六君子汤组中CD34表达略高于抑制剂组(P<0.05),其它各组无明显差异;STAT3蛋白表达中六君子汤组表达降低(P<0.05),而联合抑制剂组则明显升高(P<0.05);p-STAT3表达中,六君子汤组和及其联合制剂组均明显升高(P<0.05)。与六君子汤组比较,除STAT3表达在联合抑制剂组表达有所增高(P<0.05)外,其它各组无明显差异。结论:健脾和胃法及其代表六君子汤可以抑制食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,可能与下调移植瘤中CD34、JAK2、STAT3的表达有关。 展开更多
关键词 健脾和胃法 六君子汤 食管癌 ec9706细胞株 移植瘤
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通幽汤及拆方对食管癌EC9706细胞PI3K/AKT信号通路影响的研究 被引量：14
6
作者 贾永森 吕翠田 +2 位作者 吴范武 杨雨旸 赵舒 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1306-1308,共3页
目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞... 目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞抑制率,确定最佳药物浓度和作用时间;western blot法观察PI3K/AKT信号通路各蛋白表达变化情况。结果:通幽汤及活血行气拆方可显著抑制EC9706细胞增殖,48h作用最强,通幽汤全方IC50=1523μg.mL-1,活血行气拆方IC50=1001μg.mL-1;可抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,作用强弱依次为:活血行气拆方>通幽汤全方>滋阴养血拆方。结论:通幽汤抑制食管癌细胞增殖主要为活血行气类药物,根据"以方测证"理论,瘀血内结证与PI3K/AKT信号通路表达增强有关。 展开更多
关键词 通幽汤 拆方 食管癌 ec9706细胞 PI3K/AKT 方证
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藤梨根提取物与奥沙利铂在诱导人食管癌细胞Ec9706细胞凋亡中的协同作用 被引量：9
7
作者 党辉 关徐涛 +3 位作者 宋锐 王冰 王涛 高萍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期286-289,共4页
目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微... 目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微镜在镜下观察食管癌细胞株的形态变化;并且对细胞的凋亡率和细胞周期使用流式技术进行检测,且对食管癌细胞Ec9706株应用免疫细胞化学技术检测中细胞株内Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平。结果:藤梨根提取物单用、奥沙利铂单用、以及联合应用均可对食管癌细胞Ec9706的增殖起到抑制作用。通过显微镜下观察食管癌细胞株发现Ec9706细胞的形态发生了改变,并且凋亡比率也显著增加;且藤梨根提取物与L-OHP连用后能起到协同增效的作用。而应用藤梨根提取物后食管癌细胞Ec9706中Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平均受到了抑制。连用L-OHP后两种蛋白的阳性率表达均进一步降低。结论:藤梨根正丁醇提取物能显著抑制人食管癌细胞Ec9706细胞的增殖并且与L-OHP联用可有协同增效的作用,抑制作用明显增强,可能机制与Bcl-2和Survivin蛋白的下调有关。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 奥沙利铂 食管癌细胞ec9706细胞 BCL-2
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肝素酶特异性RNAi对人食管癌EC9706细胞肝素酶基因表达的影响 被引量：5
8
作者 李文才 孙淼淼 +6 位作者 张红 曹学全 娄欣 高冬玲 张岚 宋一民 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期9-11,共3页
目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响。方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的siRNA经LipofectamineTM200... 目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响。方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的siRNA经LipofectamineTM2000脂质体介导转染EC9706细胞72h,同时设无关序列组及不转染组。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中Hpa基因的表达。结果:siRNA可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达,以15μmol/L的siRNA作用效应最强,但不同浓度siRNA两两相比,差异均无统计学意义(P>0.05),不同浓度siRNA对Hpa基因表达的抑制效应均显著强于无关序列组及不转染组(P<0.05)。结论:RNAi技术可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达。 展开更多
关键词 肝素酶 食管肿瘤 癌细胞 RNAI ec9706细胞系
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基于藤梨根提取物调控miR-21干预食管癌细胞Ec9706cDDP的研究 被引量：8
9
作者 王冰 关徐涛 +1 位作者 王涛 臧文巧 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1512-1514,共3页
目的运用现代技术观察藤梨根提取物能否降低耐药细胞株miR-21基因的表达水平逆转食管癌细胞的多药耐药。方法用MTT法检测藤梨根提取物(RAE)无明显细胞毒剂量,并用无细胞毒性的剂量进行逆转耐药试验;将加RAE与不加RAE所得两组数据进行线... 目的运用现代技术观察藤梨根提取物能否降低耐药细胞株miR-21基因的表达水平逆转食管癌细胞的多药耐药。方法用MTT法检测藤梨根提取物(RAE)无明显细胞毒剂量,并用无细胞毒性的剂量进行逆转耐药试验;将加RAE与不加RAE所得两组数据进行线性回归的统计方法分别计算出各组的抑制一半时抑制剂的浓度也就是IC50,计算逆转倍数=对照组IC50/实验组IC50。结果对照组的90%miR-21基因呈高水平表达,只有10%呈低水平表达;实验组的10个样本中有20%miR-21基因呈高水平表达,其余80%呈低水平表达。应用统计学系统分析后显示miR-21基因在实验组和对照组的表达程度上有显著性差异(P<0.05)。结论当剂量浓度为10μg/ml时,使用藤梨根提取物对其作用48h以后,实验用细胞对顺铂的耐药达到了部分逆转,其倍数为1.68。且实验的基因测定显示:目的基因miR-21的表达的水平下调,可能是其实现逆转的分子基础。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 食管癌 ec9706c DDP细胞 MIR-21
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六君子汤对食管癌细胞株EC9706致血管生成的影响 被引量：8
10
作者 周凌 尹素改 +2 位作者 吴耀松 王慧慧 陈玉龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1165-1169,共5页
目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的... 目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的观察。ELISA法检测EC9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清中VEGF和IL-6含有量。结果六君子汤醇提物可明显抑制EC9706细胞增殖,具一定剂量依赖性,其IC50值为505.28μg/m L。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞条件培养基所致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞和内皮细胞IL-6及内皮细胞VEGF分泌。结论六君子汤醇提物可能通过干预EC9706细胞信号通路从而抑制血管生成的效应。 展开更多
关键词 六君子汤 食管癌细胞株ec9706 人脐静脉内皮细胞 鸡胚绒毛尿囊膜 血管生成 VEGF IL-6
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CEA siRNA载体的构建和转染人食管癌EC9706细胞的沉默作用 被引量：6
11
作者 郑红 赵国强 +3 位作者 杨洪艳 刘康栋 冯龙 董子明 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第23期2116-2118,共3页
目的:应用RNA干扰技术,构建针对CEA的siRNA载体,抑制人食管癌EC9706细胞CEA基因的表达.方法:依据设计siRNA的原则,针对人CEA的mRNA序列,设计并合成编码siRNA的两对寡核苷酸序列,经退火成互补双链,克隆入载体pRNAT-U6.2中构建重组体pRNAT... 目的:应用RNA干扰技术,构建针对CEA的siRNA载体,抑制人食管癌EC9706细胞CEA基因的表达.方法:依据设计siRNA的原则,针对人CEA的mRNA序列,设计并合成编码siRNA的两对寡核苷酸序列,经退火成互补双链,克隆入载体pRNAT-U6.2中构建重组体pRNAT-U6.2-CEA,筛选、鉴定.然后转染重组体至人食管癌EC9706细胞中,经G418筛选,获得阳性克隆,并以空质粒转染和未进行转染的EC9706作对照,运用PCR和Western Blot检测CEA的表达.结果:测序鉴定证实目的寡核苷酸片断已被克隆到pRNAT-U6.2载体中,pRNAT-U6.2-CEA转染人食管癌EC9706细胞后,CEA基因表达在mRNA和蛋白质水平都受到显著抑制.结论:成功构建了针对人食管癌EC9706细胞的siRNA载体,可有效抑制CEA的表达,为进一步从分子水平探讨CEA的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 ec9706细胞系 小干扰RNA 癌胚抗原
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启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的影响 被引量：12
12
作者 吕翠田 司富春 陈玉龙 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期1455-1458,I0001,共5页
目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过... 目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过MTT染色观察细胞增殖变化,通过Western blot法检测Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路蛋白表达。结果:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤的IC50值分别是1462、1232、2875μg/m L,均可促进Caspase-3蛋白表达而诱导细胞凋亡,而Cyt.C蛋白表达较弱;启膈散和沙参麦冬汤对FADD、Fas、TNFR1和DR5蛋白表达有不同程度地影响。结论:三方可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡,其中启膈散主要通过非依赖FADD死亡受体途径,沙参麦冬汤主要通过依赖FADD死亡受体途径,通幽汤可能通过其他凋亡蛋白参与的上游信号途径而激活Caspase-3致细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管癌 ec9706细胞 细胞凋亡信号转导 启膈散 沙参麦冬汤 通幽汤
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肝素酶反义寡核苷酸转染的人食管癌EC9706细胞中肝素酶mRNA的表达 被引量：3
13
作者 陈奎生 张岚 +4 位作者 唐琳 张云汉 高冬玲 阎亮 张蕾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期181-183,共3页
目的:探讨肝素酶反义寡核苷营酸对肝毒酶mRNA表达的影响。方法:食管癌EC9706细胞分6组培养,5组分别用设计合成的4条封闭肝素酶不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染。... 目的:探讨肝素酶反义寡核苷营酸对肝毒酶mRNA表达的影响。方法:食管癌EC9706细胞分6组培养,5组分别用设计合成的4条封闭肝素酶不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中肝素酶mR-NA表达情况。结果:4条肝素酶反义寡核苷酸转染的EC9706细胞中肝素酶mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),但均显著低于无关寡核苷酸组(P<0.05)。结论:肝素酶反义寡核苷酸序列可抑制食管癌EC9706细胞中肝素酶mRNA表达。 展开更多
关键词 肝素酶 食管肿瘤 癌 ec9706细胞系 反义寡核苷酸
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siRNA沉默TPX2基因对食管癌细胞EC9706的增殖和TPX2基因表达的影响 被引量：5
14
作者 刘红春 刘玉含 +1 位作者 赵培荣 李晟磊 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第28期2927-2930,共4页
目的:研究TPX2基因特异性小干扰RNA(small RNA interference,siRNA)对食管鳞癌EC9706细胞基因表达的抑制作用及对食管癌细胞生长的影响.方法:以食管鳞癌EC9706细胞为研究对象,利用Lipofectamine2000介导TPX2 siRNA分组转染EC9706细胞24,... 目的:研究TPX2基因特异性小干扰RNA(small RNA interference,siRNA)对食管鳞癌EC9706细胞基因表达的抑制作用及对食管癌细胞生长的影响.方法:以食管鳞癌EC9706细胞为研究对象,利用Lipofectamine2000介导TPX2 siRNA分组转染EC9706细胞24,48,72,96h(实验组),并设立阴性对照组和空白对照组.RT-PCR检测siRNA转染前后TPX2 mRNA的表达水平的变化;Western blot检测转染前后EC9706细胞中TPX2蛋白表达水平的变化;MTT法检测瞬时转染TPX2 siRNA对EC9706细胞增殖的影响.结果:导入有效siRNA后,PT-PCR及Western blot结果显示,TPX2 siRNA可使EC9706细胞中TPX2 mRNA水平及蛋白表达水平下降,至72h时表达量最低,与空白对照组相比分别为0.31±0.08和0.39±0.12,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验显示细胞的生长增殖受到明显抑制,与对照组相比抑制率可达35.4%(P<0.05).结论:siRNA可以有效抑制EC9706细胞中TPX2的表达,并降低EC9706细胞的增殖能力. 展开更多
关键词 TPX2基因 小干扰RNA 食管癌 ec9706
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大蒜素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用 被引量：4
15
作者 陈兰英 宋巍 +4 位作者 杨海波 于淮滨 刘亚军 支双成 杨峰 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2013年第3期201-204,共4页
目的:研究大蒜素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用。方法:0、18g/mL大蒜素处理人食管癌EC9706细胞,应用细胞计数、流式细胞仪、Hoechst33258染色、HE染色和电镜观察经大蒜素诱导处理后EC9706细胞的凋亡情况。结果:与对照组比较,经18... 目的:研究大蒜素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用。方法:0、18g/mL大蒜素处理人食管癌EC9706细胞,应用细胞计数、流式细胞仪、Hoechst33258染色、HE染色和电镜观察经大蒜素诱导处理后EC9706细胞的凋亡情况。结果:与对照组比较,经18μg/mL大蒜素诱导处理7d后,EC9706细胞的增殖活动受到明显抑制,细胞生长抑制率达75.89%(P<0.05);细胞周期检测出现亚二倍体(亚G1期)细胞峰值,细胞凋亡率达23.8%(P<0.05),并发生G2/M期阻滞;经Hoechst33258染色出现细胞核浓染及致密的固缩形态和颗粒状荧光;光镜和电镜观察结果均显示,大蒜素处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,出现染色质凝聚、边集化等显著的凋亡特征。结论:大蒜素对人食管癌EC9706细胞具有凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 大蒜素 人食管癌 ec9706细胞 诱导作用
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Bcl-XL 反义寡核苷酸对食管癌 EC9706细胞和裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用 被引量：3
16
作者 张岚 高冬玲 +1 位作者 温洪涛 张蕾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期146-149,共4页
目的:探讨Bcl-XL反义寡核苷酸(Bcl-XL ASODN)对食管癌EC9706细胞和人食管癌裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用。方法:将合成的Bcl-XL ASODN通过阳离子脂质体介导转染EC9706细胞后,以吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL技术检测ASODN组、细胞... 目的:探讨Bcl-XL反义寡核苷酸(Bcl-XL ASODN)对食管癌EC9706细胞和人食管癌裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用。方法:将合成的Bcl-XL ASODN通过阳离子脂质体介导转染EC9706细胞后,以吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL技术检测ASODN组、细胞对照组、空白对照组和N-ODN组的凋亡率;用TUNEL技术检测ASODN组、N-ODN组和细胞对照组裸鼠移植瘤组织的细胞凋亡率。结果:吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL检测结果显示,ASODN组、N-ODN组、空白对照组和细胞对照组的凋亡率比较,差异均有统计学意义(F=26.853、38.537、28.541,P均<0.001);且ASODN组的凋亡率均高于细胞对照组、空白对照组和N-ODN组(P均<0.05);TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡率结果显示,细胞对照组、N-ODN组及ASODN组的凋亡率比较,差异有统计学意义(F=56.375,P<0.001);且ASODN组高于细胞对照组及N-ODN组(P均<0.05)。结论:Bcl-XL ASODN对食管癌EC9706细胞及食管癌裸鼠移植瘤组织均有诱凋亡作用。 展开更多
关键词 食管癌 凋亡 Bcl—XL 反义寡核苷酸 ec9706细胞 裸鼠
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顺铂增强食管癌相关基因2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 被引量：5
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作者 宋海岩 邓晓慧 孙春莉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期290-293,共4页
目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoe... 目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法检测二者对EC9706细胞凋亡的影响;Westernblotting检测二者对EC9706细胞中p53蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,ECRG2蛋白可抑制EC9706细胞增殖,ECRG2蛋白和DDP联用后抑制细胞增殖作用增强,且在一定浓度范围内呈时间、剂量依赖关系。Hoechst33258染色显示,ECRG2蛋白和DDP联合作用24 h后EC9706细胞凋亡数目多于单用ECRG2蛋白。Western blot-ting结果提示ECRG2蛋白和DDP联合用药较单用ECRG2蛋白明显上调p53蛋白的表达。结论:DDP可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,其增强诱导EC9706细胞凋亡的机制可能与上调p53蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 食管癌相关基因2 顺铂 细胞增殖 细胞凋亡 ec9706细胞
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热休克蛋白70在人食管癌EC9706细胞凋亡过程中的表达与定位变化 被引量：3
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作者 刘凡 陈兰英 +2 位作者 黄建 刘用金 石松林 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期490-499,共10页
目的探讨姜黄素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用,热休克蛋白70(HSP70)在肿瘤细胞凋亡过程中在核基质上的变化及其与凋亡调控相关蛋白的关系。方法用细胞计数和流式细胞仪检测姜黄素对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用,以光学显微... 目的探讨姜黄素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用,热休克蛋白70(HSP70)在肿瘤细胞凋亡过程中在核基质上的变化及其与凋亡调控相关蛋白的关系。方法用细胞计数和流式细胞仪检测姜黄素对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用,以光学显微镜和透射电镜观察姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡前后的细胞结构变化,琼脂糖凝胶电泳观察人食管癌EC9706细胞凋亡前后的DNA结构变化。双向凝胶电泳和质谱鉴定分析HSP70在核基质中的存在与变化;并以Western blotting进行确证;激光扫描共焦显微镜观察HSP70在EC9706细胞凋亡过程中的定位及其与Bax、Bcl-2等基因产物的共定位关系。结果姜黄素能显著抑制人食管癌EC9706细胞增殖并诱导人食管癌EC9706细胞凋亡,双向凝胶电泳、质谱鉴定和结果发现并证实,HSP70在姜黄素处理前后的EC9706细胞核基质蛋白中的存在及其表达下调变化。激光扫描共焦显微镜观察结果显示,HSP70在EC9706细胞凋亡过程中与Bax、Bcl-2等基因产物具有共定位关系,且其共定位区域发生了变化。结论姜黄素对人食管癌EC9706细胞具有显著的凋亡诱导作用;HSP70作为一种新发现的核基质蛋白,在姜黄素诱导人食管癌EC9706凋亡过程中的表达与分布发生了显著变化。HSP70与凋亡相关基因的关系对EC9706细胞凋亡具有重要影响。 展开更多
关键词 姜黄素 热休克蛋白70 ec9706细胞 食管癌 流式细胞术 琼脂糖凝胶电泳 人
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DNA聚合酶β过表达对食管癌EC9706细胞的影响 被引量：2
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作者 赵军 路静 +6 位作者 宋谦 崔自由 赵国强 黄幼田 杨洪艳 赵继敏 董子明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第12期1377-1381,共5页
目的:观察过表达的DNA聚合酶β对食管癌EC9706细胞系的影响.方法:运用PCR方法,从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出野生型和突变型的DNA聚合酶β基因,作为目的片段,定向克隆至pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体,获得野生型和突变型的重组真核... 目的:观察过表达的DNA聚合酶β对食管癌EC9706细胞系的影响.方法:运用PCR方法,从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出野生型和突变型的DNA聚合酶β基因,作为目的片段,定向克隆至pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体,获得野生型和突变型的重组真核表达载体pEGFP—C3-polβ.分别将野生型和突变型的pEGFP—C3-polβ转染EC9706细胞,荧光显微镜观察其定位,绘制生长曲线,测定细胞周期.结果:DNA序列分析证实了重组载体中的DNA聚合酶β序列正确,荧光显微镜结果显示野生型的DNA聚合酶β表达以细胞核为主,突变型的DNA聚合酶β则表达在整个细胞中,明显与野生型的DNA聚合酶β的核定位不同.而且,野生型的细胞生长较对照组缓慢(P<0.05),野生型的还能抑制EC9706细胞的生长和使S期细胞减少(22.11±0.12vs44.86±0.03,P<0.05),而突变型的则不能促进EC9706细胞的生长,S期细胞增殖不明显(P>0.05).结论:过表达的野生型食管癌DNA聚合酶β可以降低EC9706细胞的增殖. 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 食管癌 ec9706细胞 野生型 突变
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IL-21增强CIK细胞对食管癌EC9706细胞的杀伤作用及其可能的机制 被引量：3
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作者 肖鹏 冯睿婷 +1 位作者 梅家转 赵继智 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1266-1270,共5页
目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法... 目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法检测2种培养CIK细胞杀伤食管癌EC9706的活性,ELISA法检测2种CIK细胞培养上清液IFN-γ浓度。结果:常规培养和加IL-21培养的2种CIK细胞增殖数量无明显差异。加IL-21培养的CIK细胞CD3^+CD56^+细胞比例、CD3^+细胞内颗粒酶B和穿孔素表达率均显著高于常规培养CIK细胞[(26.95±3.53)%vs(16.18±1.04)%,(33.29±2.30)%vs(23.58±2.28)%和(59.70±1.91)%vs(45.96±2.67)%,均P<0.05)。效靶比20∶1和30∶1时,加IL-21培养的CIK细胞杀伤EC9706细胞的活性均显著高于常规培养的CIK细胞[20∶1时:(43.66±1.99)%vs(34.59±1.75)%;30∶1时:(57.52±2.15)%vs(42.23±1.87)%,均P<0.05]。加IL-21培养CIK细胞的上清液FN-γ的浓度明显高于常规培养CIK细胞的上清液[(142.7±13.4)vs(42.6±3.3)ng/L,P<0.05]。结论:IL-21增加CD3+CD56+细胞比例和颗粒酶B及穿孔素的表达,提高CIK细胞分泌IFN-γ,从而增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 食管癌 细胞因子诱导的杀伤细胞 白介素-21 穿孔素 颗粒酶B ec9706细胞
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