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单克隆抗体纯化过程中内毒素去除方法分析 被引量：2
1
作者 李彦英 王珙 +6 位作者 李凌瑞 周振海 李娜 毛赟赟 李凯 王笑非 董晓杰 《生物技术通讯》 CAS 2013年第1期94-97,142,共5页
目的：分析单克隆抗体纯化过程中，去除内毒素的不同方法的应用效果，并探讨它们应用于中试规模的可行性。方法与结果：比较了多聚赖氨酸型的内毒素去除填料、20nm膜过滤、将单抗附着在蛋白A柱上后使用精氨酸和组氨酸溶液冲洗等3种方法... 目的：分析单克隆抗体纯化过程中，去除内毒素的不同方法的应用效果，并探讨它们应用于中试规模的可行性。方法与结果：比较了多聚赖氨酸型的内毒素去除填料、20nm膜过滤、将单抗附着在蛋白A柱上后使用精氨酸和组氨酸溶液冲洗等3种方法的内毒素去除效果，发现3种方法都可以将内毒素水平大幅降低，可分别将内毒素去除70％、88％和97％。因为单抗分子等电点较高，所获得的最低内毒素含量为0．2～0-3EU／mg。结论：3种方法均具有一定的工艺放大潜力，进一步提高内毒素去除效果将需要综合使用不同机理的去除技术。 展开更多
关键词 内毒素去除 单克隆抗体纯化 组氨酸 精氨酸
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去除同种异体骨中内毒素的方法及效果
2
作者 侯立存 胡凯 邵怡然 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第28期5985-5993,共9页
背景:天然生物材料(如同种异体材料)生产过程中极易受到细菌污染,其中革兰阴性菌释放出的细菌内毒素可以引起人体发热、凝血、休克,严重的会导致死亡。如何去除同种异体材料中的内毒素,同时又能保证材料的天然结构和生物活性,目前尚未... 背景:天然生物材料(如同种异体材料)生产过程中极易受到细菌污染,其中革兰阴性菌释放出的细菌内毒素可以引起人体发热、凝血、休克,严重的会导致死亡。如何去除同种异体材料中的内毒素,同时又能保证材料的天然结构和生物活性,目前尚未有相关报道。目的:探究去除同种异体材料等天然生物材料中内毒素的方法及效果,并对H_(2)O_(2)残留进行控制。方法:采用H_(2)O_(2)溶液协同超声处理方法去除同种异体骨材料的内毒素,研究超声条件及H_(2)O_(2)浓度对内毒素去除效果的影响程度,其中H_(2)O_(2)浓度分别设定为1%,2%,3%,4%,5%,超声功率分别设定为80,120,140,160,200 W,超声时间分别设定为20,30,40,50,60 min,超声水浴温度分别设定为30,35,40,45,50℃,通过内毒素含量检测选择最优的组合条件处理同种异体骨材料,进行后续实验。对去除内毒素后同种异体骨材料的微观结构、H_(2)O_(2)残留及细胞毒性进行检测,同时探讨不同浓度H_(2)O_(2)残留对L929小鼠成纤维细胞存活率的影响。结果与结论:①从内毒素去除效果来看,实验条件为H_(2)O_(2)浓度4%、超声功率200 W、超声时间50 min、超声水浴温度50℃时,为去除同种异体骨材料中内毒素的最佳条件,选择该最优组合去除同种异体骨材料的内毒素;②去除内毒素处理后同种异体骨材料在60℃水浴、换6次液后H_(2)O_(2)残留量小于47.551 mg/kg,对L929小鼠成纤维细胞活性无影响;③光学显微镜及扫描电镜观察显示,采用H_(2)O_(2)溶液协同超声处理对同种异体骨材料的结构无影响;④结果表明,H_(2)O_(2)溶液协同超声处理方式具有高效快速去除内毒素的特点,可保证同种异体骨材料的安全性。 展开更多
关键词 同种异体材料 内毒素去除 超声 过氧化氢 联合处理 工程化骨材料
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去除内毒素的柱亲和介质与膜亲和介质的制备和特征 被引量：7
3
作者 商振华 周冬梅 +3 位作者 郭为 于亿年 周良模 周康 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第9期1010-1015,共6页
以琼脂糖和尼龙６６微孔滤膜为原料，发展了两种用于去除内毒素的不同类型的亲和介质。在对原料进行化学改性后，键合了含六个碳原子的间隔臂和组氨酸亲和配基。它们对内毒素的亲和容量分别为 ２．０ ｍｇ／ｇ和 ０．２ ｍｇ／ｇ，内毒... 以琼脂糖和尼龙６６微孔滤膜为原料，发展了两种用于去除内毒素的不同类型的亲和介质。在对原料进行化学改性后，键合了含六个碳原子的间隔臂和组氨酸亲和配基。它们对内毒素的亲和容量分别为 ２．０ ｍｇ／ｇ和 ０．２ ｍｇ／ｇ，内毒素和介质之间的表观解离常数分别为８．１×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ和３．０×１０－８ｍｏｌ／Ｌ。在所选择的最佳作用条件下，可成功地应用于去除医用水，氨基酸注射液，牛血清白蛋白，溶菌酶等生物医药制剂中的内毒素。 展开更多
关键词 琼脂糖 尼龙66膜 亲和介质 内毒素去除 生物制剂
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膜吸附剂去除内毒素的传质研究 被引量：7
4
作者 陈兆安 邓麦村 +3 位作者 叶震 陈勇 贺高红 吴鸣 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第z1期199-201,共3页
以二乙酸纤维素酯(CA)/聚乙烯基亚胺(PEI)共混制备微孔滤膜,利用PEI对内毒素的亲和作用吸附水溶液中的内毒素,实验考察了内毒素的不同分散形态(单分子、缔合胶束及聚集体)对质量传递和去除效果的影响.实验表明,在多分散体系中,膜吸附剂... 以二乙酸纤维素酯(CA)/聚乙烯基亚胺(PEI)共混制备微孔滤膜,利用PEI对内毒素的亲和作用吸附水溶液中的内毒素,实验考察了内毒素的不同分散形态(单分子、缔合胶束及聚集体)对质量传递和去除效果的影响.实验表明,在多分散体系中,膜吸附剂以不同的机理去除内毒素. 展开更多
关键词 聚乙烯基亚胺 微波 内毒素去除 膜吸附剂
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阴离子交换法去除类人胶原蛋白中的内毒素 被引量：7
5
作者 朱晓丽 范代娣 马戎 《化学工程》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期67-71,共5页
采用响应面法优化阴离子交换层析去除重组类人胶原蛋白(HLC)溶液中内毒素的工艺。利用单因素试验考察HLC质量浓度、NaCl浓度和pH值对内毒素去除率的影响,以内毒素去除率和HLC回收率为指标,对三因素进行中心复合设计,并经响应面法优化,... 采用响应面法优化阴离子交换层析去除重组类人胶原蛋白(HLC)溶液中内毒素的工艺。利用单因素试验考察HLC质量浓度、NaCl浓度和pH值对内毒素去除率的影响,以内毒素去除率和HLC回收率为指标,对三因素进行中心复合设计,并经响应面法优化,分析得到二次多项式回归方程的预测模型。去除内毒素的最佳工艺条件为:HLC质量浓度0.95 mg/mL,pH值7.6,NaCl浓度50 mmol/L。在该条件下,内毒素的去除率及HLC回收率分别可达到97.92%和98.01%。 展开更多
关键词 阴离子交换层析 内毒素去除率 类人胶原蛋白回收率 响应面法
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重组蛋白产业化中内毒素的去除、检测及限值 被引量：1
6
作者 刘书岩 田文华 +3 位作者 李玲 张蕻 王建 于玉凤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4006-4018,共13页
随着合成生物技术的发展,重组蛋白将在医疗领域发挥重要作用。重组蛋白规模化生产是其在各领域普及、发展的基础。规模化生产过程中需要对内毒素进行去除与检测,将其在终产品中的含量降到安全水平。针对不同重组蛋白产品制定严格的内毒... 随着合成生物技术的发展,重组蛋白将在医疗领域发挥重要作用。重组蛋白规模化生产是其在各领域普及、发展的基础。规模化生产过程中需要对内毒素进行去除与检测,将其在终产品中的含量降到安全水平。针对不同重组蛋白产品制定严格的内毒素限值要求是安全性评价的重要一环。本文综述了内毒素的致病性,讨论了重组蛋白生产过程中内毒素的去除及测定方法,介绍了生物制品、医疗器械、人用重组DNA制品等行业对内毒素检测限值的要求,重点介绍了重组蛋白注射产品的内毒素限值要求,明确无论重组蛋白表达宿主是否为细菌,均需对注射用重组蛋白的终产品进行内毒素检测,并需符合相关行业标准要求。本文将为重组蛋白规模化生产过程中内毒素的相关研究提供参考。 展开更多
关键词 重组蛋白 内毒素致病性 内毒素去除 内毒素检测 内毒素限值
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