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冻干组织工程骨与组织工程骨成骨活性比较研究 被引量:3
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作者 侯天勇 罗飞 +2 位作者 刘杰 边巴罗布 许建中 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期779-784,共6页
目的目前组织工程骨(tissue engineered bone,TEB)缺乏有效可行的储存、运输方法。评估TEB经过冻干处理后其成骨活性变化及其异位成骨能力,探索新的TEB储存和运输策略。方法取志愿者捐献的骨髓和骨组织分别培养hBMSCs和制备脱钙骨基质(d... 目的目前组织工程骨(tissue engineered bone,TEB)缺乏有效可行的储存、运输方法。评估TEB经过冻干处理后其成骨活性变化及其异位成骨能力,探索新的TEB储存和运输策略。方法取志愿者捐献的骨髓和骨组织分别培养hBMSCs和制备脱钙骨基质(decalcifi ed bone matrix,DBM),取第3代hBMSCs与DBM复合构建TEB,分别于体外孵育3、5、7、9、12、15d经过低温干燥后得到冻干组织工程骨(freeze-dried tissue engineered bone,FTEB),并将体外培养不同时间点的TEB和FTEB行扫描电镜观察。Western blot法检测TEB和FTEB内成骨相关蛋白BMP-2、TGF-β1、IGF-1的变化。将FTEB、TEB和DBM分别移植于30只6周龄BALB/C裸鼠皮下进行异位成骨实验(n=10),并行X线片评分、CT值检测以及HE染色观察。结果扫描电镜观察示,TEB中种子细胞保持正常形态,随着培养时间的延长分泌细胞外基质逐渐增加;FTEB内的种子细胞脱水皱缩而亡,细胞外基质位于疏松的DBM支架材料中。Western blot检测示,TEB和FTEB内BMP-2、TGF-β1和IGF-1表达均为阳性,除体外培养15d TEB和FTEB的TGF-β1蛋白积分吸光度(IA)比值比较差异有统计学意义(P<0.05)外,其余各时间点各蛋白含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。移植术后4周各种移植物未见明显钙化;术后8、12周,TEB和FTEB移植裸鼠皮下可以实现较好的异位成骨。通过X线片评分、CT值比较移植物钙化程度,TEB和FTEB差异无统计学意义(P>0.05),而DBM未见明显钙化。HE染色示TEB和FTEB出现钙化,DBM降解吸收。结论 FTEB与TEB具有相似的成骨活性,为TEB的储存和运输提供了一种新的策略和方法 。 展开更多
关键词 冻干组织工程骨 异位成 BMSCS 脱钙基质 裸鼠
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同种异体骨体外人外周血淋巴细胞活性与增殖效应评价 被引量:1
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作者 邵安良 穆钰峰 +2 位作者 陈丽媛 陈亮 徐丽明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1505-1510,共6页
目的:采用CFSE法与CCK-8法评价同种异体骨对人外周血淋巴细胞的活性与增殖效应。方法:通过人新鲜外周血淋巴细胞与供试品(脱钙骨基质与冻干型组织工程骨)浸提液共培养后,采用CCK-8法检测淋巴细胞的活性水平。通过CFSE标记的人新鲜外周... 目的:采用CFSE法与CCK-8法评价同种异体骨对人外周血淋巴细胞的活性与增殖效应。方法:通过人新鲜外周血淋巴细胞与供试品(脱钙骨基质与冻干型组织工程骨)浸提液共培养后,采用CCK-8法检测淋巴细胞的活性水平。通过CFSE标记的人新鲜外周血淋巴细胞与供试品浸提液共培养后,采用流式细胞术检测淋巴细胞增殖能力。结果:CCK-8法试验结果表明,脱钙骨基质组的吸光度值与培养液对照组相比无显著性差异,而冻干型组织工程骨组的吸光度值与培养液对照组相比显著增高(P<0.05),表明冻干型组织工程骨提高了淋巴细胞的活性。CFSE法试验结果表明,与培养液对照组相比,冻干型组织工程骨组的淋巴细胞增殖相关指标(Dil、PF、EI、RI)以及淋巴细胞亚群增殖指标Dil均无显著性差异(P>0.05),表明冻干型组织工程骨未对人外周血淋巴细胞的增殖产生显著性影响。结论:与培养液对照组相比,冻干型组织工程骨提高了人外周血淋巴细胞的活性,但是未对人外周血淋巴细胞的增殖产生显著影响。CCK-8法主要反映的是细胞活性,而CFSE法可以更客观地反映细胞有无增殖。 展开更多
关键词 脱钙基质 冻干组织工程 人外周血淋巴细胞 细胞活性 细胞增殖 CCK-8法 CFSE法
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