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酒糟源酶解产物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及酶解工艺优化
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作者 王瑛 林晓婕 +4 位作者 张甜甜 贾淑宁 梁璋成 林河通 何志刚 《福建农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期1412-1420,共9页
【目的】探究不同酒糟源蛋白的酶解产物对黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性抑制的影响,为酒糟源XOD抑制肽的研发提供理论基础和技术支持。【方法】以红曲糟(HDG)和酱香型白酒糟(BDG)为研究对象,碱性蛋白酶为水解酶,比较两者的蛋... 【目的】探究不同酒糟源蛋白的酶解产物对黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性抑制的影响,为酒糟源XOD抑制肽的研发提供理论基础和技术支持。【方法】以红曲糟(HDG)和酱香型白酒糟(BDG)为研究对象,碱性蛋白酶为水解酶,比较两者的蛋白质酶解率、酶解产物对XOD的抑制活性,以及体外模拟胃肠道消化耐受性,并选择较好的酒糟源进行酶解工艺优化。【结果】(1)HDG及BDG经碱性蛋白酶酶解后,其酶解产物均具有XOD抑制活性。其中以BDG原料的蛋白质酶解率更高,为(56.28±0.01)%,酶解产物对XOD抑制活性更强,对XOD的半抑制浓度(IC50)为(7.73±0.26)mg·mL^(−1),与HDG比较差异均达极显著水平(P<0.01)。(2)经胃肠消化后,2种酒糟源蛋白酶解产物的XOD抑制活性保持率均在31%以上,两者间差异不显著(P>0.05)。(3)以BDG为原料进行酶解,其优化工艺为碱性蛋白酶添加量6000 U·g^(−1)、温度50℃、pH 9.5、时间5 h,在此条件下蛋白酶解率为58.00%,酶解产物对XOD的半抑制浓度IC50为5.54 mg·mL^(−1)。【结论】酱香型白酒糟(BDG)酶解产物具有较好的XOD抑制活性。BDG是制备XOD抑制肽的良好蛋白来源。 展开更多
关键词 酒糟 酶解产物 酶解率 黄嘌呤氧化酶 半抑制浓度 工艺优化
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三种描述符对食源性血管紧张素转化酶抑制二肽定量构效关系研究
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作者 郭星晨 李华鑫 +4 位作者 张钰璇 马金璞 杨具田 李贞子 高丹丹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期290-297,I0011-I0014,共12页
为探究血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽结构与功能的关系,阐明食源性ACE抑制肽作用机理,该文收集最近报道的血管紧张素转化酶抑制二肽的氨基酸序列及其IC_(50)值,用Z-scales、VHSE和SVHEHS三种氨基酸描述符... 为探究血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽结构与功能的关系,阐明食源性ACE抑制肽作用机理,该文收集最近报道的血管紧张素转化酶抑制二肽的氨基酸序列及其IC_(50)值,用Z-scales、VHSE和SVHEHS三种氨基酸描述符对ACE抑制二肽的结构进行表征,以氨基酸的疏水性质、立体性质以及电性性质参数作为自变量,ACE抑制二肽的lg(IC_(50))作为因变量,建立ACE抑制二肽的定量构效模型。结果显示基于Z-scales描述符建立的二肽定量构效模型R^(2)为0.8477,Q^(2)为0.8284,模型预测二肽Phe-Phe有较高的ACE抑制活性,预测IC_(50)为1.0499μmol/L,实测IC_(50)为(1.0414±0.0041)μmol/L,预测值与实测值误差为0.0085μmol/L。基于VHSE描述符构建的模型R^(2)为0.8568,Q^(2)为0.8052,模型预测二肽Asp-Trp有较高的ACE抑制能力,预测IC_(50)为1.2160μmol/L,实测IC_(50)为(1.1100±0.0053)μmol/L,误差为0.1060μmol/L。基于SVHEHS描述符构建的定量构效模型R^(2)为0.8581,Q^(2)为0.7453μmol/L,模型预测二肽Ala-Trp有较高的ACE抑制活性,预测IC_(50)为1.0323μmol/L,实测IC_(50)为(1.1290±0.0082)μmol/L,误差为0.0967μmol/L。3种氨基酸描述符均能较为合适地对ACE抑制二肽进行定量构分析。通过模型分析发现ACE抑制肽C端氨基酸残基疏水特性和立体特征与其活性关系更为密切,其氨基酸残基的疏水特征和立体特征越强,ACE抑制肽的活性越强。通过3种ACE抑制二肽与ACE蛋白(2X8 J)进行分子对接发现,3种ACE抑制肽均可与ACE蛋白进行结合。表明通过偏最小二乘法对Z-scales、VHSE、SVHEHS三种描述符对ACE抑制二肽构建定量构效关系模型是可行的。这将对ACE抑制肽的检测、预测和筛选具有积极的意义。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶 定量构效 氨基酸描述符 偏最小二乘法 半抑制浓度
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氨氮胁迫对厌氧处理高浓度有机氮废水的影响
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作者 党澎泽 谈新伟 +4 位作者 李祥 袁砚 黄勇 李鹏飞 冯震 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期5453-5460,共8页
以实际制膜废水为例,探究了氨胁迫下高浓度有机氮废水甲烷化及微生物群落的动态响应,明确了氨抑制阈值,抑制形态,抑制机制和应对策略.结果表明,氨对AD处理高浓度有机氮废水的主要氨抑制形态为游离氨(FA),抑制阈值为(145±10)mg/L,... 以实际制膜废水为例,探究了氨胁迫下高浓度有机氮废水甲烷化及微生物群落的动态响应,明确了氨抑制阈值,抑制形态,抑制机制和应对策略.结果表明,氨对AD处理高浓度有机氮废水的主要氨抑制形态为游离氨(FA),抑制阈值为(145±10)mg/L,半抑制浓度为(244±10)mg/L.在AD处理高浓度有机氮废水时,乙酸营养型产甲烷菌Methanosaeta,甲基营养型产甲烷菌Methanomassiliicoccus和Methanomethylovorans是主要产甲烷微生物.Methanosaeta和Methanomethylovorans分别在氨氮高于300mg/L和900mg/L时活性下降,同时产氢产二氧化碳相关功能微生物在FA高于140mg/L时受到抑制,使含碳数大于1的小分子有机物在系统内累积,最终导致高FA条件下化学需氧量去除率降低和氨氮释放不完全.在受到高氨抑制后,可通过调控pH值的方式实现系统的恢复,但无法通过微生物驯化的方式缓解. 展开更多
关键词 N N-二甲基甲酰胺 厌氧甲烷发酵 半抑制浓度 游离氨 抑制阈值 控制策略
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氨氮对厌氧氨氧化过程的抑制规律及调控策略 被引量:8
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作者 袁砚 周正 +4 位作者 林兴 王凡 李祥 顾澄伟 朱亮 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 2017年第9期3309-3314,共6页
氨氮是厌氧氨氧菌主要基质之一,但常常因浓度过高而产生脱氮速率不稳定,甚至微生物活性抑制的现象.为了有效避免氨氮对厌氧氨氧化菌活性的抑制,从抑制物形态、主要影响因素和抑制规律探讨了氨氮对厌氧氨氧化菌活性的影响及调控.结果表明... 氨氮是厌氧氨氧菌主要基质之一,但常常因浓度过高而产生脱氮速率不稳定,甚至微生物活性抑制的现象.为了有效避免氨氮对厌氧氨氧化菌活性的抑制,从抑制物形态、主要影响因素和抑制规律探讨了氨氮对厌氧氨氧化菌活性的影响及调控.结果表明,温度、p H值变化对氨氮、游离氨的形态及浓度变化产生重要影响.在恒定进水氨氮浓度500mg/L的情况下,将抑制状态下的p H值从7.9下降到7.3,经过44h运行厌氧氨氧化菌活性获得恢复.在不同进水氨氮浓度下,FA对厌氧氨氧菌活性的半抑制浓度不一样.半抑制浓度与抑制时间存在一定的曲线关系(y=732.38x^(-0.89)).因此,恒定氨氮浓度的条件下,可以通过改变p H值避免FA对厌氧氨氧化菌活性的影响.在不同进水氨氮浓度下,除了考虑降低p H值,还可以通过缩短HRT来避免FA对厌氧氨氧化菌活性的影响. 展开更多
关键词 厌氧氨氧化 游离氨 半抑制浓度 控制策略
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超滤技术分离双低油菜ACE抑制肽及其性能研究 被引量:6
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作者 田万敏 马海乐 +3 位作者 骆琳 贾俊强 刘斌 何荣海 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第9期87-91,共5页
采用超滤技术对双低油菜酶解物中的ACE抑制肽进行了分离提纯研究,考核了分离参数对分离效果的影响,分析了不同分子质量段多肽HPLC肽谱的变化,研究了双低油菜高ACE抑制活性多肽的耐消化性、酸碱稳定性和耐热性。结果表明,超滤分离能明显... 采用超滤技术对双低油菜酶解物中的ACE抑制肽进行了分离提纯研究,考核了分离参数对分离效果的影响,分析了不同分子质量段多肽HPLC肽谱的变化,研究了双低油菜高ACE抑制活性多肽的耐消化性、酸碱稳定性和耐热性。结果表明,超滤分离能明显提高双低油菜ACE抑制肽的活性,截留分子质量为3 ku的超滤膜透过液IC50值下降了15%,活性多肽回收率超过58%,酶解物中有4个高活性的组分峰,小于3 ku分子质量段的ACE抑制肽有良好的耐热性、酸碱稳定性和耐消化性。 展开更多
关键词 双低油菜籽 ACE抑制 超滤 半抑制浓度 性能
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有机磷农药对乙酰胆碱酯酶的抑制作用及QSAR研究 被引量:7
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作者 颜冬云 蒋新 +2 位作者 余贵芬 卞永荣 邓建才 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期364-367,共4页
以碘化硫代乙酰胆碱为底物,二硫代二硝基苯甲酸为显色剂,采用分光光度法测定了21种有机磷农药对乙酰胆碱酯酶(AChE)的半抑制浓度(IC50).运用多元线性回归分析以及参数间的自相关分析建立有机磷农药对AChE抑制作用的QSAR模型.模型分析表... 以碘化硫代乙酰胆碱为底物,二硫代二硝基苯甲酸为显色剂,采用分光光度法测定了21种有机磷农药对乙酰胆碱酯酶(AChE)的半抑制浓度(IC50).运用多元线性回归分析以及参数间的自相关分析建立有机磷农药对AChE抑制作用的QSAR模型.模型分析表明,有机磷农药对AChE的抑制作用主要受特定方向上的原子极化率及原子的电拓扑状态的影响,是多因素综合作用的结果.模型可解释高达78%的数据变异和显著的预测能力(q2=0.653),表明有机磷农药对AChE的抑制作用可借助结构活性关系模型进行预测与评价. 展开更多
关键词 有机磷农药 乙酰胆碱酯酶(AChE) 半抑制浓度(IC50) 定量结构-活性相关(QSAR) 结构参数
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鲤鱼组织ATPase活性抑制和构效分析 被引量:6
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作者 徐镜波 景体淞 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第12期1920-1924,共5页
在离体实验条件下测定了20种硝基芳烃化合物对鲤鱼鳃和肾的ATPase活性的半抑制浓度cI50值.以辛醇-水分配系数lgP、一阶价分子连接性指数1XⅤ、指示变量I、分子分支指数1Ka、取代基常数总和∑σ-和分子最低空轨... 在离体实验条件下测定了20种硝基芳烃化合物对鲤鱼鳃和肾的ATPase活性的半抑制浓度cI50值.以辛醇-水分配系数lgP、一阶价分子连接性指数1XⅤ、指示变量I、分子分支指数1Ka、取代基常数总和∑σ-和分子最低空轨道能ELUMO为参数,依据20种硝基芳烃化合物对鲤鱼鳃和肾的ATPase活性的半抑制浓度-lgcI50值,进行构效分析,建立了20种硝基芳烃化合物的QSAR方程.结果表明,∑σ-、I、ELUMO3个参数与硝基芳烃对鲤鱼组织ATPase毒性密切相关,并预测和探讨了毒性作用机制. 展开更多
关键词 硝基芳烃 鲤鱼 ATPASE活性 半抑制浓度 毒性
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ACE抑制肽的制备及其结构对活性的影响 被引量:6
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作者 吴楠 双全 许伟瀚 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第11期54-58,共5页
血管紧张素转化酶(ACE)通过一系列的生理反应,从而起到升高血压的作用,在人体中过量ACE的产生会引起高血压,而生物活性物质ACE抑制肽能够抑制ACE的功能。文章主要综述了ACE抑制肽的主要制备方法及氨基酸序列特点与ACE抑制活性的关系,并... 血管紧张素转化酶(ACE)通过一系列的生理反应,从而起到升高血压的作用,在人体中过量ACE的产生会引起高血压,而生物活性物质ACE抑制肽能够抑制ACE的功能。文章主要综述了ACE抑制肽的主要制备方法及氨基酸序列特点与ACE抑制活性的关系,并阐述了脯氨酸对ACE抑制活性的影响,以及部分氨基酸的结构特点及功能,为今后ACE抑制肽的制备与应用提供参考依据。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶 抑制 脯氨酸 半抑制浓度
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6种商品化酶抑制-比色法农残速测试剂盒测定5种农药的比较研究 被引量:1
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作者 罗俊霞 刘雪平 +5 位作者 申战宾 张刚 张启成 马蕾 张威 赵建波 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期124-131,共8页
使用6种商品化酶抑制-比色法农残速测试剂盒在5个浓度水平下测定乐果等5种农药的抑制率,绘制抑制率对农药浓度的效应曲线图,用抑制率和农药浓度的对数进行线性拟合,求出决定系数、IC_(50)和IC_(10),根据IC_(10)以试剂盒对乐果等5种农药... 使用6种商品化酶抑制-比色法农残速测试剂盒在5个浓度水平下测定乐果等5种农药的抑制率,绘制抑制率对农药浓度的效应曲线图,用抑制率和农药浓度的对数进行线性拟合,求出决定系数、IC_(50)和IC_(10),根据IC_(10)以试剂盒对乐果等5种农药的敏感性进行比较研究。结果表明:6种试剂盒对乐果和甲基异柳磷均不敏感,对其他3种农药的敏感性也各不相同,就所测定的5种农药而言,试剂盒C较优。综合而言,为适应市场监管和试剂盒检测方便,建议生产商在生产试剂盒时,对所使用的酶和底物进行测定,必要时将几种不同来源、性质相近的酶按一定的比例进行混合,以使试剂盒敏感的农药更多,从而减少假阴性样品。 展开更多
关键词 检测试剂盒 农药 半抑制浓度 检出限 敏感性 线性范围
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6种市售酶抑制-比色法试剂盒测定有机磷农药的比较研究 被引量:12
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作者 罗俊霞 赵建波 +6 位作者 安冕 唐国林 辛焕发 张刚 王瑞 林惠纯 毛新亚 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第22期8474-8478,共5页
目的探讨6种市售农残速测试剂盒对倍硫磷氧乐果等5种有机磷类农药的敏感性。方法使用6种市售酶抑制-比色法农残速测试剂盒分别在5个浓度水平下测定了倍硫磷等5种农药的抑制率,绘制抑制率对农药浓度的折线图,同时用抑制率和农药浓度的常... 目的探讨6种市售农残速测试剂盒对倍硫磷氧乐果等5种有机磷类农药的敏感性。方法使用6种市售酶抑制-比色法农残速测试剂盒分别在5个浓度水平下测定了倍硫磷等5种农药的抑制率,绘制抑制率对农药浓度的折线图,同时用抑制率和农药浓度的常用对数进行线性拟合,分别计算出相关系数、半抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC50)和IC10,根据IC10比较各种试剂盒对每种农药的敏感性。结果6种试剂盒对倍硫磷均不敏感,6种试剂盒对其他4种农药的敏感性也各不相同,从所测定的5种农药来看,D试剂盒最优。结论建议国家标准和行业标准将判定阳性检出样品的标准降低。 展开更多
关键词 试剂盒 农药残留 抑制 敏感性 半抑制浓度 阳性样品
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6种酶抑制-比色法快速检测试剂盒对4种有机磷农药的敏感性 被引量:11
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作者 罗俊霞 赵建波 +6 位作者 张刚 尚航影 张威 马蕾 郭华婷 刘佳 张全智 《贵州农业科学》 CAS 2020年第9期116-122,共7页
为商品化酶抑制-比色法快速检测试剂盒的选择提供依据,采用6种商品化酶抑制-比色法快速检测试剂盒对甲胺磷、毒死蜱、甲基对硫磷、三唑磷进行5个浓度水平的检测比对试验,比较各试剂盒对4种农药的灵敏度。结果表明:6种试剂盒对4种农药的... 为商品化酶抑制-比色法快速检测试剂盒的选择提供依据,采用6种商品化酶抑制-比色法快速检测试剂盒对甲胺磷、毒死蜱、甲基对硫磷、三唑磷进行5个浓度水平的检测比对试验,比较各试剂盒对4种农药的灵敏度。结果表明:6种试剂盒对4种农药的灵敏度均不同,不同农药和试剂盒采用3 mL和2.5mL提取液测定结果存在一定差异。6种试剂盒测定甲胺磷、毒死蜱、甲基对硫磷、和三唑磷的半抑制浓度均大于3mg/kg,大于国家限量标准的规定(甲胺磷0.1mg/kg、毒死蜱1mg/kg、甲基对硫磷0.02mg/kg、三唑磷0.1mg/kg),建议在实际的检测工作中对抑制率≥10%的样品进行复检,同时上色谱质谱进行定性定量。 展开更多
关键词 抑制-比色法试剂盒 农药 半抑制浓度 检出限 敏感性 线性范围
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XL413通过抑制DNA复制诱导细胞凋亡来抑制结肠癌细胞增殖 被引量:1
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作者 李倩 胡蓉 袁平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期753-759,共7页
目的:探讨抑制细胞分裂周期蛋白7(cell division cycle 7,CDC7)的药物XL413对结直肠癌细胞的影响及其作用机制。方法:在多个结直肠癌细胞系中分别加入生理盐水和不同浓度的XL413处理72 h,用细胞活力检测试剂盒(cell counting Kit-8,CCK... 目的:探讨抑制细胞分裂周期蛋白7(cell division cycle 7,CDC7)的药物XL413对结直肠癌细胞的影响及其作用机制。方法:在多个结直肠癌细胞系中分别加入生理盐水和不同浓度的XL413处理72 h,用细胞活力检测试剂盒(cell counting Kit-8,CCK-8)检测细胞在450 nm处的吸光度值并计算细胞存活率和XL413的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;克隆形成实验检测细胞的再生能力;RNA-seq检测XL413对细胞转录组的影响;qRT-PCR法检测凋亡相关基因的mRNA表达量;Western blot检测DNA解旋微小染色体维持蛋白(minichromosome maintenance protein,MCM)复合体成员MCM2的磷酸化以及凋亡相关蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,XL413处理组结直肠癌细胞的增殖、迁移、集落形成能力均下降(P=0.0015);细胞早期和晚期凋亡比例增高(P=0.0006);在基因转录表达水平上,XL413处理组的细胞凋亡标志B细胞淋巴瘤基因(B-cell lymphoma-2,BCL2)/BCL2相关X基因(BCL2 associated X,BAX)的比值下降(P=0.0087);在蛋白水平上,XL413抑制DNA解旋相关蛋白MCM2的磷酸化,从而抑制细胞DNA复制,同时促进凋亡相关蛋白的表达增高。结论:XL413可以通过降低DNA解旋相关蛋白MCM2的磷酸化阻碍DNA的复制,诱导结直肠癌细胞凋亡。该研究为XL413未来用于结直肠癌治疗提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 XL413 结直肠癌细胞 半抑制浓度 DNA复制 凋亡
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赖氨酸结构类似物对6种食用菌的抑制作用(英文)
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作者 郑永标 林新坚 +1 位作者 谢宝贵 陈济琛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期22-25,共4页
观察了赖氨酸结构类似物S-(2-氨基乙基)-2’半胱氨酸(AEC)对杏鲍菇、金针菇单核菌丝、虎奶菇、榆黄蘑、姬松茸和白色茶树菇6种食用菌菌丝生长的影响。将这6种食用菌丝接种在基础培养基的固体斜面上,培养基中分别添加0,4.7,9.4,18.8,37.5... 观察了赖氨酸结构类似物S-(2-氨基乙基)-2’半胱氨酸(AEC)对杏鲍菇、金针菇单核菌丝、虎奶菇、榆黄蘑、姬松茸和白色茶树菇6种食用菌菌丝生长的影响。将这6种食用菌丝接种在基础培养基的固体斜面上,培养基中分别添加0,4.7,9.4,18.8,37.5,75,150,300,600和1 200 mg/L的AEC,第10天测定其菌丝生长速度。结果是AEC对杏鲍菇、金针菇单核菌丝、虎奶菇、榆黄蘑、姬松茸和白色茶树菇菌丝生长的半抑制浓度(IC50)分别为1158.8 mg/L,24.8 mg/L,21.7 mg/L,159.4 mg/L,361.8 mg/L和5 754.1 mg/L,且其差异显著。试验结果表明食用菌赖氨酸合成途径中关键酶对终产物的敏感性有明显的不同,可为食用菌的高赖氨酸品种选育奠定基础。 展开更多
关键词 赖氨酸结构类似物 食用菌 抑制作用 菌丝生长 半抑制浓度
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不同方法测定黄嘌呤对Bacillus fastidiosus胞外尿酸酶抑制效力的比较
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作者 赵利娜 赵运胜 +1 位作者 陶佳 廖飞 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期457-458,共2页
关键词 比较测定 抑制 黄嘌呤 尿酸酶 效力 半抑制浓度 反应速度 竞争性抑制 积分法 浓度
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四种Schiff碱药物对大肠杆菌代谢抑制的微量热法研究
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作者 黄在银 冯英 屈松生 《湖北民族学院学报(自然科学版)》 CAS 1998年第3期32-36,共5页
用微量热法测定了大肠杆菌在不同温度下及大肠杆菌在四种Schiff碱药物抑制下的生长热谱,获得了该细菌在不同温度下及抑制情况下的代谢速率常数;并根据化学反应分子碰撞理论计算了该细菌的生长活化能;根据活化络合物理论模型,得到了... 用微量热法测定了大肠杆菌在不同温度下及大肠杆菌在四种Schiff碱药物抑制下的生长热谱,获得了该细菌在不同温度下及抑制情况下的代谢速率常数;并根据化学反应分子碰撞理论计算了该细菌的生长活化能;根据活化络合物理论模型,得到了系列热力学参数,对细菌在受到抑制时的生长代谢进行了热力学分析。在一定温度下测定不同Schiff碱药物不同浓度对大肠杆菌的作用,发现不同化合物对大肠杆菌的作用效果不同,其效果为:Zn(Ⅱ)-SG>Cu(Ⅱ)-SG>Co(Ⅲ)-SG>SG,半抑制浓度依次增大。 展开更多
关键词 微量热法 Schiff碱药物 大肠杆菌 抗菌活性 半抑制浓度 代谢抑制 代谢速率
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基于多肽微阵列芯片的荧光和共振光散射法筛选凝血酶抑制剂 被引量:3
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作者 苏敏 李桃 +1 位作者 刘殿骏 王振新 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期199-206,共8页
研制了一种基于多肽微阵列芯片的荧光和共振光散射双通路检测方法,对血液样品中的凝血酶抑制剂进行检测。以生物素化的多肽微阵列芯片为反应平台,加入凝血酶水解多肽上的特异位点使其C末端的生物素解离,通过亲和素和生物素之间的特异性... 研制了一种基于多肽微阵列芯片的荧光和共振光散射双通路检测方法,对血液样品中的凝血酶抑制剂进行检测。以生物素化的多肽微阵列芯片为反应平台,加入凝血酶水解多肽上的特异位点使其C末端的生物素解离,通过亲和素和生物素之间的特异性结合,用荧光探针和30 nm金纳米粒子探针标记此反应过程。凝血酶抑制剂阻止凝血酶对底物多肽的水解反应,通过荧光和共振光散射信号强度的变化检测抑制剂的抑制能力。酶溶液和加标人血清中测定的半抑制浓度(IC50)值:阿加曲班<抗凝血酶Ⅲ<4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐,IC50差的绝对值随抑制剂特异性的减弱而增大。当抑制剂浓度为7.5μmol/L时,血浆中5种化合物的抑制能力:阿加曲班>抗凝血酶Ⅲ>胰蛋白酶抑制剂>N-(反式-环氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺>4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐。在血浆中考察了阿加曲班和抗凝血酶Ⅲ的可逆性。对比荧光法和共振光散射法在血液样品中的检测结果,用30 展开更多
关键词 多肽微阵列 金纳米粒子探针 共振光散射 半抑制浓度 凝血酶抑制
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马拉氧磷和异马拉硫磷对乙酰胆碱酯酶联合抑制作用 被引量:4
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作者 冯艳萍 张全 王萃 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期131-135,共5页
近些年关于手性有机磷农药对土壤、水生生物的对映体选择性研究备受关注,但有关各对映体间联合作用的报道甚少.现以马拉氧磷和异马拉硫磷为研究对象,采用双因子方差分析法研究马拉氧磷和异马拉硫磷对映体在不同比例混合下对乙酰胆碱脂... 近些年关于手性有机磷农药对土壤、水生生物的对映体选择性研究备受关注,但有关各对映体间联合作用的报道甚少.现以马拉氧磷和异马拉硫磷为研究对象,采用双因子方差分析法研究马拉氧磷和异马拉硫磷对映体在不同比例混合下对乙酰胆碱脂酶的联合作用.方差分析结果显示:马拉氧磷对映体PK1与PK2以及异马拉硫磷的对映体PK1与PK4之间联合作用显著(p<0.05),两者表现为拮抗作用;异马拉氧磷的对映体PK1与PK2,PK1与PK3之间联合作用不显著(p>0.05),因此它们之间表现为相加作用.先前研究者对有机磷农药对映体在生物机体的作用机理分别从作用靶位点、作用方式不同等方面进行了解释,但其联合作用机理还丞待研究. 展开更多
关键词 有机磷农药 乙酰胆碱酯酶 半抑制浓度 联合抑制
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L-缬氨酸对精氨酸酶Ⅰ抑制作用的分子动力学模拟 被引量:5
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作者 黄义玲 高雪峰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期928-931,共4页
利用分子动力学模拟与酶学实验相结合的方法,研究了L-缬氨酸(L-Val)对野生型和突变型精氨酸酶Ⅰ的酶促反应动力学的影响.精氨酸酶Ⅰ的活性口袋附近有一个较大的空穴C2,分子动力学模拟结果显示,突变Ile156Arg缩小了空穴C2的容积,而实验... 利用分子动力学模拟与酶学实验相结合的方法,研究了L-缬氨酸(L-Val)对野生型和突变型精氨酸酶Ⅰ的酶促反应动力学的影响.精氨酸酶Ⅰ的活性口袋附近有一个较大的空穴C2,分子动力学模拟结果显示,突变Ile156Arg缩小了空穴C2的容积,而实验结果表明,L-Val对突变型精氨酸酶Ⅰ抑制剂的半抑制浓度(IC_(50))由3.06 mmol/L升高到6.26 mmol/L,增加了1倍,因此精氨酸酶Ⅰ可能存在一个位于空穴C2的调节位点,并且L-Val可以结合于此干扰精氨酸酶Ⅰ的活性. 展开更多
关键词 精氨酸酶Ⅰ 分子动力学模拟 突变 半抑制浓度 调节位点 L-缬氨酸
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二乙酰二去水卫矛醇对5种肿瘤细胞的体外抑制作用 被引量:3
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作者 吴余燕 刘华钢 +2 位作者 徐佳佳 邓超澄 汤婷婷 《广西医学》 CAS 2017年第12期1891-1894,共4页
目的探讨二乙酰二去水卫矛醇(DADAG)对人鼻咽癌细胞HNE-1、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞Hep G2、SMCC-7721及胃癌细胞MGC-803的体外抑制作用。方法采用不同浓度DADAG干预处于对数生长期的HNE-1、A549、Hep G2、SMCC-7721、MGC-803细胞,其... 目的探讨二乙酰二去水卫矛醇(DADAG)对人鼻咽癌细胞HNE-1、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞Hep G2、SMCC-7721及胃癌细胞MGC-803的体外抑制作用。方法采用不同浓度DADAG干预处于对数生长期的HNE-1、A549、Hep G2、SMCC-7721、MGC-803细胞,其中A549、Hep G2、SMCC-7721细胞的药物干预浓度包括0μg/ml(空白组)、2.88μg/ml、5.75μg/ml、11.50μg/ml、23.00μg/ml、46.00μg/ml,MGC-803、HNE-1细胞的干预浓度包括0μg/ml(空白组)、11.50μg/ml、23.00μg/ml、46.00μg/ml、69.00μg/ml、92.00μg/ml。显微镜下观察经DADAG作用后的细胞形态,采用噻唑蓝比色法检测5种肿瘤细胞的增殖情况,计算5种细胞的增殖抑制率及DADAG对5种细胞的半抑制浓度(IC50)值。结果经DADAG作用后,5种细胞的形态发生不同程度改变。除11.50μg/ml DADAG作用下的MGC-803细胞外,不同浓度DADAG作用下各细胞的A值均低于空白组(P<0.05)。随着给药浓度的增加,5种肿瘤细胞抑制率也逐渐增加。各给药浓度下,5种细胞间的A值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。DADAG对SMCC-7721、MGC-803、HNE-1、A549、Hep G2的48 h-IC50值分别为145.39μg/ml、141.29μg/ml、49.36μg/ml、47.75μg/ml、28.52μg/ml。结论 DADAG在体外对上述5种癌细胞均有抑制生长作用;肝癌细胞SMMC-7721及胃癌细胞MGC-803对DADAG敏感性较其他细胞差。 展开更多
关键词 肺癌 肝癌 胃癌 鼻咽癌 肿瘤细胞 二乙酰二去水卫矛醇 细胞增殖 半抑制浓度
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灭多威对美国棉铃虫细胞的抑制作用研究 被引量:4
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作者 许名飞 张瑞 +2 位作者 万洪文 詹正坤 刘义 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期51-53,共3页
运用 LKB2 2 77生物活性检测仪在 2 8℃下测定了昆虫细胞 (美国棉铃虫 Hz)的离体基础代谢热值 (其值为 2 3.6p W/ cell) ,研究了不同浓度的灭多威农药对昆虫细胞代谢产热功率的影响 ,并对其影响进行了讨论 .同时测得了农药 (灭多威 )对... 运用 LKB2 2 77生物活性检测仪在 2 8℃下测定了昆虫细胞 (美国棉铃虫 Hz)的离体基础代谢热值 (其值为 2 3.6p W/ cell) ,研究了不同浓度的灭多威农药对昆虫细胞代谢产热功率的影响 ,并对其影响进行了讨论 .同时测得了农药 (灭多威 )对美国棉铃虫 Hz的半抑制量浓度 EC5 0 为1 96μg·m L- 1 。 展开更多
关键词 微量热法 美国 棉铃虫 灭金威 抑制 细胞代谢产热功率 抑制浓度
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