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miR-146b对人单核细胞株THP-1细胞COX2表达的影响及可能机制 被引量:1
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作者 杨铭 陆林 吴方 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第9期890-894,共5页
目的探讨微小RNA-146b(miR-146b)对人单核细胞株(THP-1)细胞p38分裂素原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响。方法血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激THP-1建立细胞模型,慢病毒感染pre-miR-146b-3p或anti-miR-146b-3p进入THP-1细胞中,检测p38MAPK与... 目的探讨微小RNA-146b(miR-146b)对人单核细胞株(THP-1)细胞p38分裂素原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响。方法血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激THP-1建立细胞模型,慢病毒感染pre-miR-146b-3p或anti-miR-146b-3p进入THP-1细胞中,检测p38MAPK与环氧化酶2(COX2)表达的变化。转入p38MAPK siRNA,检测p38MAPK与COX2表达的变化。结果 AngⅡ刺激THP-1细胞p38MAPK与COX2表达升高,pre-miR-146b-3p可以放大这种增高效应,当转染p38MAPK siRNA后,能逆转pre-miR-146b-3p升高COX2的趋势(P<0.01)。结论在AngⅡ刺激的THP-1细胞中,miR-146b可能通过p38MAPK调控COX2表达水平,在心血管疾病的诊治中发挥重要作用。 展开更多
关键词 miR-146b 单核细胞株1 p38分裂素原活化蛋白激酶 环氧化酶2 慢病毒
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同型半胱氨酸对培养的人单核细胞株THP-1表达巨噬细胞炎性蛋白-1α的影响
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作者 邢玮 邓仲端 +1 位作者 张韵凤 倪娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期27-31,共5页
目的 :探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP -1细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA和蛋白的影响。方法 :在体外培养的THP -1单核细胞培养基中加入终浓度为 0 .0 5mmol/L、0 .1mmol/L和 0 .2mmol/L的同型半胱氨酸 ,孵育 8h ;或加入终浓度 ... 目的 :探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP -1细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA和蛋白的影响。方法 :在体外培养的THP -1单核细胞培养基中加入终浓度为 0 .0 5mmol/L、0 .1mmol/L和 0 .2mmol/L的同型半胱氨酸 ,孵育 8h ;或加入终浓度 0 .1mmol/L的同型半胱氨酸 ,分别孵育 4、8、16h。用逆转录聚合酶链反应检测THP -1单核细胞巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA ,并测序 ;用免疫细胞化学法检测巨噬细胞炎性蛋白 -1α蛋白的表达。结果 :对照组THP -1单核细胞表达较低水平的巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA ,加同型半胱氨酸后巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA表达随浓度增加而增强 ;在浓度为 0 .1mmol/L时 ,巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA表达于 4h开始升高 ,8h后逐渐降低。反应产物真实性经测序反应证实。免疫细胞化学图像分析结果显示 ,各组细胞平均吸光度值随浓度和时间递增而增加 (P <0 .0 1)。结论 :同型半胱氨酸能诱导THP -1单核细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA和蛋白。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 巨噬细胞炎性蛋白质-1α 单核细胞 逆转录聚合酶链反应 动脉粥样硬化 thp-1 发病机制
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肺炎克雷伯菌生物膜对单核细胞株THP-1 TLR2受体表达的影响 被引量:4
3
作者 王云英 陈维贤 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期493-496,共4页
目的研究肺炎克雷伯菌生物膜对单核细胞株THP-1 TLR2受体表达的影响,探索细菌生物膜逃脱宿主免疫防御的机制。方法以体外建立肺炎克雷伯菌生物膜的合成分泌物处理单核细胞株THP-1作为实验组,以等量浮游细菌的合成分泌物处理单核细胞株TH... 目的研究肺炎克雷伯菌生物膜对单核细胞株THP-1 TLR2受体表达的影响,探索细菌生物膜逃脱宿主免疫防御的机制。方法以体外建立肺炎克雷伯菌生物膜的合成分泌物处理单核细胞株THP-1作为实验组,以等量浮游细菌的合成分泌物处理单核细胞株THP-1作为对照组。RT-PCR半定量分析THP-1 TLR2 mRNA的表达,流式细胞仪检测分析THP-1 TLR2蛋白的表达。结果实验组THP-1 TLR2 mRNA表达(0.453±0.06)明显低于对照组(4.872±0.36)(P<0.05);实验组TLR2蛋白表达率(8.42%±3.74%)明显低于对照组(12.35%±7.36%)(P<0.05)。结论细菌生物膜与浮游细菌不同的代谢产物能显著下调THP-1 TLR2的表达水平,影响固有免疫进而影响适应性免疫,可能是生物膜细菌逃脱机体免疫防御系统的又一机制。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌生物膜 单核细胞株thp-1 TLR2 宿主免疫防御
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乌索酸诱导人单核细胞白血病细胞株THP-1分化的研究 被引量:5
4
作者 张婷 沈晶 +2 位作者 任天年 刘昆梅 奚涛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期572-576,共5页
乌索酸是一种常见的五环三萜类化合物,本文考察了其对原单核白血病细胞株THP-1的分化诱导作用。乌索酸作用72h后,通过显微镜形态观察,部分THP-1细胞贴壁生长,形态具有向巨噬细胞分化的特征。结晶紫染色结果显示细胞贴壁程度呈剂量依赖... 乌索酸是一种常见的五环三萜类化合物,本文考察了其对原单核白血病细胞株THP-1的分化诱导作用。乌索酸作用72h后,通过显微镜形态观察,部分THP-1细胞贴壁生长,形态具有向巨噬细胞分化的特征。结晶紫染色结果显示细胞贴壁程度呈剂量依赖型增长。利用流式细胞分析技术分化标志物,发现CD11b和CD14阳性细胞百分比均有显著上调。Western blotting结果表明乌索酸能上调分化相关蛋白C/EBPα的p42亚基并且下调分化负调控因子c-myc的蛋白水平,且对二者的表达调控作用具有浓度和时间相关性。因此,乌索酸能够诱导THP-1细胞向单核/巨噬细胞方向分化。其作用机制可能是上调C/EBPα的p42亚基,进而下调c-myc,从而达到分化诱导作用。 展开更多
关键词 乌索酸 分化 白血病 单核细胞白血病细胞株thp-1
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CD40L单克隆抗体对HSP患儿PBMC及单核细胞株THP-1产生炎症因子的影响 被引量:1
5
作者 李秋 杨锡强 王利佳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期891-894,共4页
目的 观察CD4 0配体单克隆抗体 (CD4 0LMcAb)对HSP(亨诺 许兰紫癜 )患儿PBMC及单核细胞株THP 1产生炎症因子的影响。方法 采用细胞培养、流式细胞技术及ELISA法分别检测正常对照、过敏性紫癜患儿的PBMC及单核细胞株THP 1表达膜蛋白分... 目的 观察CD4 0配体单克隆抗体 (CD4 0LMcAb)对HSP(亨诺 许兰紫癜 )患儿PBMC及单核细胞株THP 1产生炎症因子的影响。方法 采用细胞培养、流式细胞技术及ELISA法分别检测正常对照、过敏性紫癜患儿的PBMC及单核细胞株THP 1表达膜蛋白分子CD4 0L、CD4 0的阳性率、产生炎症因子IL 1、TNF α、IL 6水平以及CD4 0LMcAb加入细胞培养体系后上述指标的变化。结果 与正常比较 ,HSP患儿的PBMC表达CD4 0L[(8.2 6± 4 .15 ) % ,对照 (0 .5 4± 0 .5 8) % ]显著增高、CD4 0表达无差异 ;PBMC培养上清中炎症因子IL 1[(10 0 0 .4± 5 74 .5 )pg ml,对照 (2 4 6 .8± 2 0 7.1)pg ml]、TNF α[(978.7± 2 0 5 .8)pg ml,对照 (45 2 .4± 2 4 8.5 )pg ml]的水平也显著高于对照 ,CD4 0LMcAb可使增高的IL 1[(16 4 .7± 12 7.9)pg ml]、TNF α[(6 74 .7± 2 6 9.2 )pg ml]降至正常水平。THP 1自发表达CD4 0 ,低浓度产生IL 1、TNF α。与正常比较 ,HSP患儿的PBMC培养上清诱导其表达CD4 0 ,产生IL 1,TNF α增高 ,CD4 0LMcAb同样具有抑制THP 1表达CD4 0、分泌IL 1、TNF α的作用。结论 CD4 0LMcAb能抑制炎症因子的产生。 展开更多
关键词 CD40L单克隆抗体 HSP 患儿 PBMC 单核细胞株 thp-1 炎症因子 过敏性紫癜
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荷叶生物碱对THP-1单核细胞源性巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响 被引量:4
6
作者 常冠楠 徐新 张社兵 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期611-615,共5页
目的观察荷叶生物碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人THP-1巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,探讨荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的可能机制。方法建立THP-1源性泡沫细胞模型后,采用不同剂量荷叶生物碱(0、25、50、10... 目的观察荷叶生物碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人THP-1巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,探讨荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的可能机制。方法建立THP-1源性泡沫细胞模型后,采用不同剂量荷叶生物碱(0、25、50、100 mg/L)分组共孵育24 h。油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况;分别用荧光定量PCR、Wesetern Blot检测细胞中SR-BⅠmRNA水平和蛋白水平。结果与空白对照组比较,ox-LDL对细胞内脂滴积聚呈浓度依赖性;且细胞SR-BⅠ的mRNA水平(分别为1.00±0.00、0.53±0.04、0.30±0.04和0.18±0.03)及蛋白表达(分别为1.00±0.00、0.62±0.10、0.39±0.08和0.22±0.05)呈浓度依赖性降低(P<0.01);加入荷叶生物碱干预后,细胞内脂滴随荷叶生物碱浓度的增加而减少,细胞SR-BⅠmRNA水平(分别为0.32±0.02、1.07±0.02、1.28±0.03和1.49±0.03)及蛋白表达(分别为0.28±0.03、1.06±0.02、1.32±0.03和1.41±0.02)浓度依赖性增加(P<0.01)。结论荷叶生物碱上调人THP-1单核细胞源性泡沫细胞SR-BⅠ的表达,促进细胞内胆固醇流出,可能是荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 荷叶生物碱 单核细胞株thp-1 氧化型低密度脂蛋白 B类Ⅰ型清道夫受体
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灵芝三萜对人血单核细胞白血病细胞株THP-1的作用 被引量:1
7
作者 赵哲 高清平 +1 位作者 鞠丹 赵俊 《临床荟萃》 CAS 2012年第15期1325-1328,共4页
目的探讨灵芝三萜对急性单核细胞白血病细胞株THP-1作用及其可能的机制。方法采用不同水平灵芝三萜作用于THP-1细胞48小时后,噻唑兰(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布;钙依赖磷脂结合蛋白异硫氰酸荧光素/... 目的探讨灵芝三萜对急性单核细胞白血病细胞株THP-1作用及其可能的机制。方法采用不同水平灵芝三萜作用于THP-1细胞48小时后,噻唑兰(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布;钙依赖磷脂结合蛋白异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双染法流式细胞仪检测凋亡率的变化。结果 MTT测定细胞增殖抑制率,与灵芝三萜0mg/L比较,灵芝三萜80、120、160、200mg/L抑制THP-1细胞增殖,抑制率逐渐升高(P<0.01),分别为(21.58±3.15)%、(54.36±4.49)%、(62.10±4.23)%和(70.20±4.21)%,呈剂量依赖性。Annexin V-FITC/PI双染显示,80、120、160、200mg/L的灵芝三萜作用THP-1细胞48小时后产生诱导凋亡作用,早期凋亡率分别为(18.6±4.30)%、(28.1±5.88)%、(40.46±6.39)%、(54.22±2.00)%,随着灵芝三萜浓度的增加有增加趋势(P<0.01)。FCM检测细胞周期,80、120、160、200mg/L的灵芝三萜作用THP-1细胞48小时后,G2/M期、S期细胞数明显减少,G0/G1期细胞数明显增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论灵芝三萜有抑制THP-1细胞增殖的作用,其可能的机制是阻止细胞周期在抑制G1期和诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 单核细胞 急性 灵芝 三萜类 thp-1细胞
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人单核细胞株巨细胞病毒编码miR-US25-1-3p过表达后蛋白质组学变化分析
8
作者 周万青 王成 +3 位作者 丁小宇 牛冬梅 沈瀚 张春妮 《临床检验杂志》 CAS 2023年第4期247-253,共7页
目的分析人单核细胞株(THP-1)过表达人巨细胞病毒(HCMV)编码miR-US25-1-3p后蛋白质表达谱变化及价值。方法采用脂质体将hcmv-miR-US25-1-3p模拟物转染THP-1细胞构建hcmv-miR-US25-1-3p过表达细胞株,RT-qPCR验证转染效果;采用串联质谱标... 目的分析人单核细胞株(THP-1)过表达人巨细胞病毒(HCMV)编码miR-US25-1-3p后蛋白质表达谱变化及价值。方法采用脂质体将hcmv-miR-US25-1-3p模拟物转染THP-1细胞构建hcmv-miR-US25-1-3p过表达细胞株,RT-qPCR验证转染效果;采用串联质谱标签标记联合液相色谱-串联质谱对hcmv-miR-US25-1-3p过表达后THP-1细胞蛋白质组学进行定量分析,生物信息学分析差异表达蛋白质生理病理功能;westernblot验证重要差异蛋白表达变化。结果与对照相比,THP-1细胞过表达hcmV-miR-US25-1-3p后65种蛋白质呈现差异表达,其中17种上调,48种下调。GO、COG和KEGG注释及功能预测结果显示,差异表达蛋白主要参与炎症反应信号通路、代谢过程、细胞及遗传信息功能,与肿瘤、病毒性心肌炎、非酒精性脂肪肝、原发性免疫缺陷病、类风湿关节炎、多种病原体感染、阿尔茨海默病、亨廷顿病等多种疾病相关。48种下调蛋白质中,文献调研和生物信息学分析发现,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)参与抗病毒及炎症反应,上述蛋白质下调表达经western blot验证。结论HCMV编码的hcmv-miR-US25-1-3p能够影响宿主蛋白表达谱,并可能通过抑制TRAIL和RANTES表达,促进病毒潜伏、免于宿主细胞杀伤。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 hcmv-miR-US25-1-3p 单核细胞株thp-1 miRNA 病毒潜伏
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金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分体外诱导单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞的研究 被引量:1
9
作者 强雅雯 马筱玲 周馨 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第12期1243-1247,共5页
目的目前关于金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分(LukS-PV)体外诱导人源单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞研究较少。文中主要探讨LukS-PV能否体外诱导人源THP-1巨噬细胞极化。方法佛波酯体外诱导THP-1为THP-1巨噬细胞,THP-1经佛波酯刺激48 h... 目的目前关于金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分(LukS-PV)体外诱导人源单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞研究较少。文中主要探讨LukS-PV能否体外诱导人源THP-1巨噬细胞极化。方法佛波酯体外诱导THP-1为THP-1巨噬细胞,THP-1经佛波酯刺激48 h、72 h后,流式检测细胞表面标志物CD11b、CD14。采用0.1、0.2、0.4μmol/L的LukS-PV作用THP-1巨噬细胞,分别为0.1μmol/LLukS-PV组、0.2μmol/LLukS-PV组和0.4μmol/LLukS-PV组,另采用佛波酯诱导THP-1巨噬细胞为对照组。流式细胞术检测各组24 h、48 h CD80、CD206的表达,qRT-PCR检测细胞IL-12、TNF-α、TGF-β的mRNA表达水平。结果0.1μmol/LLukS-PV组、0.2μmol/LLukS-PV组、0.4μmol/LLukS-PV组细胞表面CD80表达量较对照组明显增高(P<0.01),0.2μmol/L LukS-PV组表达量最高(P<0.01)。0.2μmol/L LukS-PV组24h IL-12、TNF-αmRNA表达水平(7.32±0.91、5.29±0.51)较对照组(0.71±0.11、0.73±0.14)明显升高(P<0.01),48 h时IL-12、TNF-αmRNA表达水平(11.16±0.78、6.70±0.68)较对照组亦明显升高(P<0.01)。0.2μmol/L LukS-PV组24h、48h细胞表面CD80的表达较对照组明显升高(P<0.000)。结论LukS-PV能够刺激人源THP-1巨噬细胞向M1极化。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分 巨噬细胞 单核白血病细胞株thp-1 流式细胞 体外诱导
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雷公藤内酯醇抗单核细胞白血病细胞株THP-1的实验研究 被引量:1
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作者 袁国林 徐珺 +1 位作者 田小龙 黄莹 《临床血液学杂志》 CAS 2009年第5期495-496,共2页
目的:探讨雷公藤内酯醇对人类单核细胞白血病细胞株THP-1增殖和凋亡的影响。方法:运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术(FCM)等检测雷公藤内酯醇对THP-1细胞株增殖和凋亡的影响。结果:雷公藤内酯醇能明显抑制THP-1细胞的增殖,呈时间... 目的:探讨雷公藤内酯醇对人类单核细胞白血病细胞株THP-1增殖和凋亡的影响。方法:运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术(FCM)等检测雷公藤内酯醇对THP-1细胞株增殖和凋亡的影响。结果:雷公藤内酯醇能明显抑制THP-1细胞的增殖,呈时间与剂量依赖性,作用48 h时其半数抑制浓度IC50为18 nmol/L,且经雷公藤内酯醇处理后THP-1细胞G1/S期所占的百分比较对照组上升(P<0.05)。雷公藤内酯醇作用后48 h的变化与THP-1细胞凋亡率具有相关性,r=0.97,P<0.05,而作用24 h,其无明显诱导凋亡的作用。结论:雷公藤内酯醇有明确的抗白血病细胞增殖的能力,干扰THP-1细胞周期,上调细胞G1/S期检测点,并具有促进细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 雷公藤 thp-1细胞株 细胞增殖 细胞凋亡
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蓝桉油对单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响 被引量:7
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作者 周建娅 唐法娣 +3 位作者 毛国根 邵杰 王砚 卞如濂 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2003年第4期315-318,326,共5页
目的 :探讨蓝桉油对人单核细胞 THP- 1细胞株核因子 - κB(NF- κB)核转位活化的影响。方法 :蓝桉油 (1、10、10 0 mg/L,30 min)预处理 THP- 1细胞 ,经脂多糖 (L PS,1mg/L,30 min)刺激后 ,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚... 目的 :探讨蓝桉油对人单核细胞 THP- 1细胞株核因子 - κB(NF- κB)核转位活化的影响。方法 :蓝桉油 (1、10、10 0 mg/L,30 min)预处理 THP- 1细胞 ,经脂多糖 (L PS,1mg/L,30 min)刺激后 ,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜 ,测定 THP- 1细胞 NF- κB p6 5亚基 (NF- κB/p6 5 )定位 ;Western- blot法分析细胞核内NF- κB/p6 5水平。结果 :免疫荧光分析显示 ,正常细胞 NF- κB/p6 5荧光标记主要分布于胞浆区 ,核区很少 ,L PS刺激后 NF- κB/p6 5荧光标记浓集于核区 ,胞浆区少见 ;但经蓝桉油 (10 0 mg/L)预处理后 ,LPS刺激的 THP- 1细胞NF- κB/p6 5荧光标记则主要位于胞浆区 ;Western- blot分析显示 ,在正常 THP- 1细胞核蛋白中有低水平的 NF- κB/p6 5表达 ,经 L PS刺激 ,核内 NF- κB/p6 5表达明显增高 ;蓝桉油预处理后 ,可以抑制 LPS诱导的核内 NF- κB/p6 5高水平表达 ,且呈剂量依赖关系。结论 :蓝桉油预处理阻止了 LPS诱导的 NF- κB/p6 5核转位 ,从而抑制了其活性功能的发挥。蓝桉油可抑制 LPS刺激引起的 NF- κB核转位活化。 展开更多
关键词 脂多糖类 核因子-ΚB 单核细胞 蓝桉油 显微镜检查 共焦 THP一1细胞株 WESTERN-BLOT法
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人参皂苷降低β淀粉样蛋白诱导THP-1单核细胞ERK的磷酸化和细胞因子含量 被引量:4
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作者 李玮 李林 +4 位作者 褚燕琦 艾厚喜 叶翠飞 童萼塘 孙圣刚 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第4期362-365,共4页
目的观察人参皂苷对β-淀粉样蛋白(-βamyloid,Aβ)1-40诱导的THP-1单核细胞系表达细胞因子和磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)的影响。方法用Western blotting方法测定磷酸化ERK的表达,放射免疫法测定细胞培养上清液中的细胞因子IL-1β、... 目的观察人参皂苷对β-淀粉样蛋白(-βamyloid,Aβ)1-40诱导的THP-1单核细胞系表达细胞因子和磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)的影响。方法用Western blotting方法测定磷酸化ERK的表达,放射免疫法测定细胞培养上清液中的细胞因子IL-1β、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度。结果Aβ刺激组磷酸化ERK和细胞因子IL-1β、IL-8和TNF-α的表达明显高于对照组。人参皂苷(50、100和150 mg/L可减少Aβ诱导THP-1细胞磷酸化ERK和细胞因子IL-1β、IL-8和TNF-α的表达。与模型组比较,人参皂苷治疗组Aβ1-40诱导的THP-1细胞磷酸化ERK和细胞因子(IL-1β、IL-8和TNF-α)的表达明显降低。结论人参皂苷可抑制Aβ诱导的ERK磷酸化,进一步减少细胞因子的产生。 展开更多
关键词 人参皂苷 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 磷酸化ERK thp-1单核细胞
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抑制mll-af9融合基因表达对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响 被引量:2
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作者 李蕾 张爱华 +4 位作者 刘凌波 闭兰 王利 赵亚杰 邹萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期254-257,共4页
本研究探讨siRNA(small interfering RNA)对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1的mll-af9融合基因的影响。选择THP-1细胞特有的mll-af9融合基因为靶基因,设计并合成siRNA片段。以人急性单核细胞白血病细胞系THP-1为靶细胞,应用脂质体转染... 本研究探讨siRNA(small interfering RNA)对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1的mll-af9融合基因的影响。选择THP-1细胞特有的mll-af9融合基因为靶基因,设计并合成siRNA片段。以人急性单核细胞白血病细胞系THP-1为靶细胞,应用脂质体转染方法,将siRNA导入细胞,通过流式细胞仪检测siRNA转染效率,用RT-PCR法比较转染前后mll-af9 mRNA表达水平的变化,以MTT法检测细胞增生抑制率,流式细胞术检测细胞周期的改变和细胞凋亡水平。结果表明:siRNA转染效率为(69.1±1.8)%,转染siRNA后THP-1细胞生长受到明显抑制,mll-af9融合基因表达量大幅度减少,细胞周期发生了明显的变化,主要表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,并使细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞凋亡水平增高,而对照组siRNA转染后则无上述改变。结论:利用siRNA靶向干扰mll-af9融合基因的表达可以有效抑制人急性单核细胞白血病细胞THP-1的增殖。 展开更多
关键词 siRNA mll—af9 急性单核细胞白血病 thp-1细胞
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CXCR7在急性单核细胞白血病中的表达及对THP-1细胞功能的影响 被引量:1
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作者 胡艳 李静 +5 位作者 王丽红 徐前飞 夏瑞祥 曾庆曙 刘晓颖 葛健 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1300-1306,共7页
目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR7在急性单核细胞白血病(AML-M5)中的表达,及其对急性单核细胞白血病细胞系THP-1增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法:应用流式细胞术、Western blot、RTPCR分别检测初诊AML-M5患者和正常... 目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR7在急性单核细胞白血病(AML-M5)中的表达,及其对急性单核细胞白血病细胞系THP-1增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法:应用流式细胞术、Western blot、RTPCR分别检测初诊AML-M5患者和正常人外周血单个核细胞(PBMNC)及THP-1细胞CXCR7蛋白和mRNA表达。CCK8法、Annexin V/PI标记法和Transwell法观察CXCR7对THP-1细胞体外增殖、凋亡和侵袭的作用。结果:在初诊AML-M5患者PBMNC幼稚细胞表面CXCR7表达高于正常对照(P<0.05),在THP-1细胞表面CXCR7也有高表达;THP-1细胞和AML-M5患者PBMNC中CXCR7蛋白和mRNA水平均明显高于正常对照(P<0.05);SDF-1α刺激可增高THP-1细胞增殖活性,但这种增殖活性可被CXCR7抗体抑制(P<0.01);CXCR7抗体不影响THP-1细胞凋亡(P>0.05);CXCR7抗体可明显抑制SDF-1α诱导的THP-1细胞侵袭能力(P<0.01)。结论:CXCR7在急性单核细胞白血病患者及THP-1细胞中均有高表达,并参与细胞增殖和侵袭,阻断CXCR7表达有可能降低急性单核细胞白血病的浸润风险。 展开更多
关键词 急性单核细胞白血病 CXCR7 thp-1细胞 细胞增殖 细胞侵袭
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单核巨噬细胞系THP-1对子宫内膜癌细胞系RL952增殖和侵袭能力的影响及其分子生物学机制 被引量:3
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作者 王位 葛静 +1 位作者 单莉莉 王军 《临床和实验医学杂志》 2017年第8期765-767,共3页
目的探讨单核巨噬细胞系THP-1对子宫内膜癌细胞系RL952增殖和侵袭能力的影响及其分子生物学机制。方法收集2015年3月至2016年5月的各类型子宫内膜病变病例180例,增殖期、分泌期、单纯增生期、复杂增生期、不典型增生和Ⅰ型子宫内膜癌病... 目的探讨单核巨噬细胞系THP-1对子宫内膜癌细胞系RL952增殖和侵袭能力的影响及其分子生物学机制。方法收集2015年3月至2016年5月的各类型子宫内膜病变病例180例,增殖期、分泌期、单纯增生期、复杂增生期、不典型增生和Ⅰ型子宫内膜癌病例各30例。采用免疫组织化学方法分析各类型子宫内膜病变中的巨噬细胞增殖、浸润程度。采用CCK方法检测分析单核巨噬细胞系THP-1对子宫内膜癌细胞系RL952增殖和侵袭能力的影响程度。采用Transwell法来检测分析宫内膜癌细胞系RL952对单核巨噬细胞系THP-1的招募能力。采用Western blot技术检测分析单核巨噬细胞系THP-1对子宫内膜癌细胞系RL952中的Cyclin D1和MMP-2的表达水平的影响情况。结果单核巨噬细胞系THP-1的增殖、浸润数目与子宫内膜癌细胞系RL952增殖和侵袭能力呈正相关性,差异具有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌细胞系RL952对单核巨噬细胞系THP-1具有招募作用。随着单核巨噬细胞系THP-1的增殖、浸润数目的增加,子宫内膜癌细胞系RL952中的Cyclin D1和MMP-2表达水平随着时间增加而相应上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论单核巨噬细胞系THP-1浸润为子宫内膜癌发生的机制之一。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 单核巨噬细胞thp-1 子宫内膜癌细胞系RL952 细胞增殖 侵袭
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sFlt-1对人单核细胞系THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用 被引量:1
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作者 熊肇军 朱灿胜 +2 位作者 梁莉 郑振达 李清 《新疆医科大学学报》 CAS 2012年第7期925-930,共6页
目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体1[sFlt-1(1-3)]对人单核细胞系THP-1细胞向血管内皮生长因子(VEGF)迁移的抑制作用。方法应用腺病毒包装系统构建携带人sFlt-1(1-3)/FLAG融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sFlt-1/FLAG)。应用酶联免疫吸... 目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体1[sFlt-1(1-3)]对人单核细胞系THP-1细胞向血管内皮生长因子(VEGF)迁移的抑制作用。方法应用腺病毒包装系统构建携带人sFlt-1(1-3)/FLAG融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sFlt-1/FLAG)。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫荧光分析所构建的重组腺病毒载体在L293细胞中的表达。通过Transwell实验观察sFlt-1(1-3)对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用。分别观察5种浓度(0、0.1、1、10和100ng/mL)的VEGF对THP-1的趋化作用。观察4种浓度(0.1、1、10和100ng/mL)的sFlt-1(1-3)/FLAG表达上清对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用。结果成功构建了Ad-sFlt-1/FLAG融合基因的重组腺病毒载体,通过ELISA和免疫荧光检测显示构建的腺病毒载体携带的sFlt-1(1-3)基因能够在L293细胞中得到表达。在感染重组腺病毒(Ad-sFlt-1/FLAG)的L929细胞培养上清可以检测到sFlt-1(1-3)/FLAG蛋白的表达,浓度为503.7ng/mL。VEGF终浓度为1、10和100ng/mL时,迁移的THP-1细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。sFlt1(1-3)/FLAG浓度为100ng/mL时THP-1细胞迁移数约为sFlt1(1-3)/FLAG浓度为0ng/mL时的25.7%。结论 VEGF对THP-1细胞具有趋化作用,sFlt-1(1-3)可以有效地抑制THP-1细胞向VEGF迁移。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 sFlt-1(1-3)基因 单核细胞thp-1 迁移
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急性单核细胞白血病细胞株SHI-1挥发性有机物的测定 被引量:2
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作者 王娟 夏海龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第10期1409-1413,共5页
目的检测急性单核细胞白血病细胞株SHI-1培养瓶顶空气体中挥发性有机物(VOCs),分析该细胞对其组分的影响,并筛选出白血病细胞株SHI-1代谢产物中具有特征性的VOCs,探讨VOCs在白血病患者缓解后随访或与其他肿瘤鉴别诊断中的价值。方法收... 目的检测急性单核细胞白血病细胞株SHI-1培养瓶顶空气体中挥发性有机物(VOCs),分析该细胞对其组分的影响,并筛选出白血病细胞株SHI-1代谢产物中具有特征性的VOCs,探讨VOCs在白血病患者缓解后随访或与其他肿瘤鉴别诊断中的价值。方法收集急性单核细胞白血病细胞株SHI-1、人巨噬细胞株和空白培养液培养瓶顶空气体中的VOCs,采用固相微萃取-气相色谱/质谱技术(SPMEGC/MS)对其进行检测,应用双边Mann-Whitney U检验分析两两之间的差异性,筛选出与SHI-1细胞有关的特征性VOCs。结果 SHI-1细胞培养瓶顶空气体中可检测出8种特征性挥发性有机物,分别为2,4-二甲基庚烷、苯、4-甲基辛烷、氯仿、3,7-二甲基十二烷、己醇、环己醇、十六烷,其中烷烃类、苯类物质可检测量较对照组中明显增高,醇类明显减少。结论 SHI-1细胞可引起培养瓶顶空气体中VOCs组分的改变,其中多种烷烃类物质、苯含量增多,醇类含量减少,提示上述物质有可能作为白血病细胞特征性标志物。 展开更多
关键词 急性单核细胞白血病细胞株SHI-1 肿瘤 VOCS 固相微萃取-气相色谱/质谱技术
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TNF-α,ox-LDL对人单核细胞株U937胆固醇酰基转移酶1表达的影响
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作者 成蓓 王毅 +3 位作者 何平 吴剑萍 狄鸣 王洪星 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期423-425,428,共4页
目的 观察肿瘤坏死因子 α (TNF α)和氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)对人单核细胞U937酰基辅酶A :胆固醇酰基转移酶 1(ACAT1)mRNA表达和蛋白质翻译的影响。方法 U937细胞培养到足够数量后 ,细胞计数传代分组 :①对照组 :加等量的培养... 目的 观察肿瘤坏死因子 α (TNF α)和氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)对人单核细胞U937酰基辅酶A :胆固醇酰基转移酶 1(ACAT1)mRNA表达和蛋白质翻译的影响。方法 U937细胞培养到足够数量后 ,细胞计数传代分组 :①对照组 :加等量的培养基 ;②TNF α组 :加入TNF α ,使其终浓度为 10ng/ml;③ox LDL组 :加入ox LDL ,终浓度为 10 0 μg/ml。应用RT PCR检测ACAT1mRNA表达 ,蛋白定量应用免疫印迹法。 结果 与对照组相比 ,TNF α组ACAT1mRNA表达显著增加 (0 5 73± 0 0 32vs0 990± 0 0 2 2 ,P <0 0 1) ,而ox LDL组ACAT1mRNA表达水平 (0 5 5 4± 0 0 2 6 )无显著变化。 3组之间ACAT1酶蛋白含量差异无显著性意义。结论 TNF α能促进A CAT1mRNA表达 ,但未见TNF α和ox 展开更多
关键词 TNF-Α OX-LDL 单核细胞株 U937胆固醇 酰基转移酶1 基因表达 肿瘤坏死因子-Α TNF-Α
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THP-1单核细胞不同转染方法的比较
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作者 葛晶 成蓓 +2 位作者 彭雯 李云桥 翟伟 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第38期6105-6109,共5页
背景:人单核细胞系THP-1细胞是典型的悬浮细胞系,其转染并瞬时表达外源蛋白比一般贴壁细胞相对困难。其中DEAE-葡聚糖介导的细胞转染方法虽然建立较早,但在国内应用很少。目的:采用不同质粒转染方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒(pE... 背景:人单核细胞系THP-1细胞是典型的悬浮细胞系,其转染并瞬时表达外源蛋白比一般贴壁细胞相对困难。其中DEAE-葡聚糖介导的细胞转染方法虽然建立较早,但在国内应用很少。目的:采用不同质粒转染方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒(pEGFP-N1)转染人THP-1单核细胞,以获得较高转染效率的方法。方法:分别采用DEAE-葡聚糖、Lipofectamine 2000、FuGENE 6、梭华-Sofast转染试剂不同方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒进行转染,测定不同方法的转染效率、及其对细胞活力的影响。结果与结论:荧光显微镜下观察及流式细胞仪检测结果均显示DEAE-Dextran介导的转染效率最高,Lipfectamine 2000脂质体次之,FuGENE 6和梭华-Sofast则明显低于前二者。将质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒体外成功转染人THP-1单核细胞中,通过优化转染方法提高转染效率、降低对细胞活力的影响。 展开更多
关键词 单核细胞 转染 质粒 组织构建 组织工程 转染效率 thp-1单核细胞 DEAE-葡聚糖 脂质体 国家自然科学基金
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热休克处理上调THP-1巨噬细胞单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素8的表达
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作者 王双 李方 唐雅玲 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期604-604,共1页
关键词 热休克 thp-1巨噬细胞 单核细胞趋化蛋白1 细胞介素8
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