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双抗夹心ELISA法检测血浆HSP70的建立及初步应用 被引量：5
1
作者 何启强 杨进波 +1 位作者 肖成峰 邬堂春 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2004年第1期27-30,共4页
[目的]建立双抗体夹心法检测血浆中热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)水平。[方法]制备兔抗HSP70抗体 ,建立双抗体夹心法标准曲线 ,鉴定其最小检出限、精确度、回收率 ,并初步应用于检测40例男性健康成人血浆样本的HSP70水平。[结... [目的]建立双抗体夹心法检测血浆中热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)水平。[方法]制备兔抗HSP70抗体 ,建立双抗体夹心法标准曲线 ,鉴定其最小检出限、精确度、回收率 ,并初步应用于检测40例男性健康成人血浆样本的HSP70水平。[结果]双抗夹心ELISA法检测HSP70的最小检出限为10ng/ml,标准曲线在10～100ng/ml范围内线性良好。3份同批血清标本分别重复8次测定 ,平均批内变异系数为7.6 % ;3份不同批血清分别重复6次测定 ,平均批间变异系数为12.7 %。血清中加入已知量的标准抗原 ,测得回收率为85.5 %。对40例男性健康成人(20.0±0.9)岁血浆样本检测 ,其HSP70浓度均值为 (151.0±13.8)ng/ml。[结论]本方法检测HSP70的可测范围广 ,灵敏度和精密度较高变异系数较小 ,表明其灵敏、特异。 展开更多
关键词 双抗夹心elisa法 血浆 HSP70 多克隆抗体 标准曲线
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应用双抗夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原—创伤弧菌的研究 被引量：21
2
作者 王崇明 杨冰 +1 位作者 宋晓玲 黄偼 《海洋水产研究》 CSCD 1999年第1期30-34,共5页
以皱纹盘鲍脓足病致病病原－ － 创伤弧菌为抗原，制备兔抗血清，抗体纯化后以辣根过氧化物酶标记，建立检测创伤弧菌的双抗夹心ＥＬＩＳＡ 检测法。结果表明，双抗夹心ＥＬＩＳＡ 法有较高的灵敏度，可检出含菌１０４ 个／ｍｌ 的菌悬... 以皱纹盘鲍脓足病致病病原－ － 创伤弧菌为抗原，制备兔抗血清，抗体纯化后以辣根过氧化物酶标记，建立检测创伤弧菌的双抗夹心ＥＬＩＳＡ 检测法。结果表明，双抗夹心ＥＬＩＳＡ 法有较高的灵敏度，可检出含菌１０４ 个／ｍｌ 的菌悬液。与创伤弧菌对照菌株有明显的阳性反应不与副溶血弧菌、溶藻胶弧菌、河流弧菌等８ 株对照菌株产生影响检测结果的交叉反应。应用该法检测３０ 份病鲍样品，阳性检出率为６６ ．７ ％ 。 展开更多
关键词 双抗夹心elisa 创伤弧菌 皱纹盘鲍 鲍鱼 病原
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检测BDV抗原的双抗夹心ELISA法的建立 被引量：6
3
作者 黄艺婧 刘赛 +3 位作者 徐平 刘海军 李薇 邓旎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期430-433,共4页
目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)抗原的双抗体夹心ELISA法,为简单、快速的临床应用奠定基础。方法根据双抗夹心ELISA法基本步骤,分别对BDV p24小鼠单克隆抗体、BDV p24兔多克隆抗体和酶标抗体作多梯度稀释,以确定最佳实验条件,并对其精... 目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)抗原的双抗体夹心ELISA法,为简单、快速的临床应用奠定基础。方法根据双抗夹心ELISA法基本步骤,分别对BDV p24小鼠单克隆抗体、BDV p24兔多克隆抗体和酶标抗体作多梯度稀释,以确定最佳实验条件,并对其精密度、灵敏度、稳定性、准确性进行初步评价,同期收集病毒性脑炎(VE)患者脑脊液(CSF)44例和神经系统非炎性疾病患者CSF 44例,通过建立的双抗夹心ELISA法检测临床样本中是否存在BDV抗原。结果 BDV p24小鼠单克隆抗体的最佳稀释度为1∶160,BDV p24兔多克隆抗体的最佳稀释度为1∶2 500,酶标抗体的最佳稀释度为1∶5 000,该法的检测灵敏度为170 ng/ml,精密度批内变异<10%,批间变异<15%,同时具有良好的稳定性与准确性。另外用该法检测临床标本其中实验组有3例患者检出BDV抗原阳性,阴性对照组均未检出阳性病例。结论成功建立检测BDV抗原的双抗体夹心ELISA法。 展开更多
关键词 双抗夹心elisa 博尔纳病病毒 抗原
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双抗夹心ELISA法定量检测食品中大肠杆菌O157:H7初探 被引量：9
4
作者 宋宏新 马冬 +1 位作者 薛海燕 李红心 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期528-530,共3页
以鸡抗O157:H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)为捕获抗体,酶标抗体(HRP-IgY)为检测抗体建立双抗夹心ELISA法检测食品中大肠杆菌O157:H7的方法,确定了抗原浓度对数与OD450值的高度线性相关性,根据检测OD450值可从拟合回归曲线确定样品中的... 以鸡抗O157:H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)为捕获抗体,酶标抗体(HRP-IgY)为检测抗体建立双抗夹心ELISA法检测食品中大肠杆菌O157:H7的方法,确定了抗原浓度对数与OD450值的高度线性相关性,根据检测OD450值可从拟合回归曲线确定样品中的含菌量,含菌量≥104CFU/ml的食品样品可直接用双抗夹心法进行检测,含菌量≤104CFU/ml的食品样品可增菌14h后检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 食源性病原菌定量检测 双抗夹心elisa
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双抗夹心ELISA法检测双歧杆菌反应条件的优化 被引量：4
5
作者 庄翘楚 孟祥晨 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2008年第5期55-58,共4页
研究利用双抗夹心酶联免疫吸附法(Double-antibody Sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,Double-antibody Sand-wich ELISA)快速检测双歧杆菌(Bifidobacterium)的最佳反应条件。使用实验室自制的兔抗两歧双歧杆菌免疫血清和鼠... 研究利用双抗夹心酶联免疫吸附法(Double-antibody Sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,Double-antibody Sand-wich ELISA)快速检测双歧杆菌(Bifidobacterium)的最佳反应条件。使用实验室自制的兔抗两歧双歧杆菌免疫血清和鼠抗两歧双歧杆菌免疫血清,利用方阵法对两种血清抗体的反应浓度进行筛选,之后对包被液、封闭液、封闭时间及底物作用时间进行比较和选择,从而确定运用双夹心ELISA法快速检测双歧杆菌的最佳反应条件。最佳反应条件分别为:兔抗两歧双歧杆菌免疫血清和鼠抗两歧双歧杆菌免疫血清反应浓度分别为1︰1280,1︰320,包被液浓度0.05 mol/L(pH值为9.6)的Na2CO3-NaHCO3,封闭液为质量分数为5%的BSA-PBS,封闭30min,底物作用时间为30 min。优化了双抗夹心ELISA法检测双歧杆菌的反应条件,为双歧杆菌的血清学检测提供了参考。 展开更多
关键词 双歧杆菌 双抗夹心elisa 反应条件
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双抗夹心ELISA法检测弓形虫核苷三磷酸脱氢酶-Ⅱ型蛋白的研究
6
作者 胡昕 诸葛青云 +2 位作者 李亚飞 潘长旺 谭峰 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期343-347,共5页
目的建立双抗夹心ELISA法检测弓形虫核苷三磷酸脱氢酶-Ⅱ型(NTPase-Ⅱ)蛋白。方法用重组弓形虫NTPase-Ⅱ(rTgNTPase-Ⅱ)蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗夹心ELISA法。通过检测弓形虫速殖子全虫蛋白与rTgNT... 目的建立双抗夹心ELISA法检测弓形虫核苷三磷酸脱氢酶-Ⅱ型(NTPase-Ⅱ)蛋白。方法用重组弓形虫NTPase-Ⅱ(rTgNTPase-Ⅱ)蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗夹心ELISA法。通过检测弓形虫速殖子全虫蛋白与rTgNTPase-Ⅱ的浓度评价该方法的敏感性。通过对疟疾(7例)、日本血吸虫病(12例)、并殖吸虫病(14例)和脑囊尾蚴病(10例)患者血清进行交叉反应试验,评价该方法的特异性。结果获得2株稳定分泌抗rTgNTPase-Ⅱ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为MNT1和MNT2。蛋白质印迹分析(Westernblotting)显示,2株单克隆抗体均能特异性识别弓形虫rTgNTPase-Ⅱ蛋白和弓形虫速殖子全虫蛋白。以MNT1为包被抗体,MNT2为酶标抗体,建立的双抗夹心ELISA可检测出全虫蛋白的最低浓度为6μg/ml,检测出rTgNTPase-Ⅱ的最低浓度为1.5μg/ml。该方法的特异性为100%。结论以抗rTgNTPase-Ⅱ蛋白单克隆抗体MNT1与MNT2为基础建立的双抗夹心ELISA法具有较高的特异性。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 单克隆抗体 核苷三磷酸脱氢酶-Ⅱ型蛋白 双抗夹心elisa
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双抗夹心ELISA法快速检测人用狂犬病疫苗的效价 被引量：3
7
作者 苏文全 廖辉 +1 位作者 商一行 张景海 《药学服务与研究》 CAS CSCD 2008年第6期443-445,共3页
目的：用单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA法，快速检测人用狂犬病疫苗中的狂犬病毒糖蛋白G的含量，并探讨其替代NIH法的可行性。方法：将疫苗样品用NIH法检定，同时以国家标准品为参考疫苗，用双抗夹心ELISA法检测。结果：用双抗夹心ELIS... 目的：用单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA法，快速检测人用狂犬病疫苗中的狂犬病毒糖蛋白G的含量，并探讨其替代NIH法的可行性。方法：将疫苗样品用NIH法检定，同时以国家标准品为参考疫苗，用双抗夹心ELISA法检测。结果：用双抗夹心ELISA法测得的IgED50为2．60～2．78；用NIH法测得的IgED50为2．55～2．85。对两种检测方法进行F检验，两种检测方法的灵敏度有显著差异（F=5．76，P〈0．05）；用t检验法对这两种检测方法进行分析，表明两组测定值的差异无统计学意义（t=0．187，P〉0．05）。结论：双抗夹心ELISA法与NIH法测得的IgED50呈正相关性。与NIH法相比，双抗夹心ELISA法具有重复性好、成本低、快速等优点。用双抗夹心ELISA法取代NIH法测狂犬病疫苗效价是可行的。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 双抗夹心elisa NIH法
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双抗夹心ELISA法及荧光抗体法检测猪瘟抗原的应用与分析 被引量：12
8
作者 曹兴萍 张以芳 +2 位作者 何从忠 高自寿 饶梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期66-67,共2页
关键词 夹心elisa 猪瘟病毒 elisa法 检测法 荧光抗体法 应用 抗原 VIRUS
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用双抗夹心ELISA法快速检测灭活乙型脑炎疫苗的效价
9
作者 苏文全 谭煦 +1 位作者 刘海娇 杨栋 《药学服务与研究》 CAS CSCD 2010年第1期44-46,共3页
目的：用单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA法快速检测灭活乙型脑炎疫苗中的乙型脑炎病毒包膜蛋白（E）的含量,并探讨其替代蚀斑减少中和试验法的可行性。方法：将疫苗样品用蚀斑减少中和试验法测定,同时选定一批疫苗为参考疫苗,用双抗夹心... 目的：用单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA法快速检测灭活乙型脑炎疫苗中的乙型脑炎病毒包膜蛋白（E）的含量,并探讨其替代蚀斑减少中和试验法的可行性。方法：将疫苗样品用蚀斑减少中和试验法测定,同时选定一批疫苗为参考疫苗,用双抗夹心ELISA法检测。结果：用双抗夹心ELISA法测得的中和指数（TE）为1.595-1.655。用蚀斑减少中和试验法测得的中和指数（TP）为1.367-1.932。经F检测,两种检测方法的灵敏度有极显著差异（F=56.25,P〈0.01）,用t检验法对这两种检测方法进行统计分析,表明两组测定值的差异无统计学意义（t=0.079 3,P〉0.05）。结论：双抗夹心ELISA法与蚀斑减少中和试验法测得的中和指数（T）呈正相关性;与蚀斑减少中和试验法比,双抗夹心ELISA法具有重复性好、成本低、快速等优点。用双抗夹心ELISA法取代蚀斑减少中和试验法测灭活乙型脑炎疫苗效价是可行的。 展开更多
关键词 双抗夹心elisa 乙型脑炎疫苗 灭活 蚀斑减少中和试验法 效价
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一种快速精准检测各种乳品中牛乳铁蛋白含量的广适性ELISA方法
10
作者 张婧 朱孔迪 +3 位作者 刘传铭 刘长振 王鹏杰 黄家强 《中国乳业》 2025年第3期91-99,共9页
[目的]验证夹心法ELISA技术是否可成为包括风味发酵乳在内的各种乳制品中牛乳铁蛋白含量的精准检测方法。[方法]利用优化的夹心法ELISA检测试剂分别检测牛乳铁蛋白(LTF)标准品溶液、巴氏杀菌乳样本、加标巴氏杀菌乳样本、12种北京地区... [目的]验证夹心法ELISA技术是否可成为包括风味发酵乳在内的各种乳制品中牛乳铁蛋白含量的精准检测方法。[方法]利用优化的夹心法ELISA检测试剂分别检测牛乳铁蛋白(LTF)标准品溶液、巴氏杀菌乳样本、加标巴氏杀菌乳样本、12种北京地区市场常见的风味发酵乳、7种加标风味发酵乳、7种混合巴氏杀菌乳的风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量,计算加标回收率及CV值。用该检测试剂检测3种加标风味发酵乳中牛乳铁蛋白对72℃热处理的敏感度;并与牛乳铁蛋白国标检测(高效液相色谱法)方法对比检测生乳和巴氏灭菌乳。[结果]该检测试剂可检测牛乳铁蛋白(LTF)标准品溶液和巴氏杀菌乳样本中牛乳铁蛋白,且加标回收率91.7%~106.4%。经检测,12种风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量为无;7种加标风味发酵乳的加标回收率86.3%~109.1%,且检测CV值远低于12%;7种风味发酵乳与巴氏杀菌乳混合乳中牛乳铁蛋白含量与对照组比值在92.3%~110.5%,且大多数检测CV值远低于12%;3种加标风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量随72℃加热时间延长而降低,且下降曲线相似。与国家标准方法对比分析,夹心法ELISA方法检测生乳和巴氏杀菌乳乳铁蛋白含量的符合率分别为97.54%、111.2%,说明该检测方法的准确性达到国标标准。[结论]夹心法ELISA检测试剂可精准检测风味发酵乳中牛乳铁蛋白含量。 展开更多
关键词 牛乳铁蛋白 风味发酵乳 夹心法elisa
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双抗夹心ELISA方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌 被引量：18
11
作者 段霞 黄欣 +2 位作者 黄岭芳 魏华 赖卫华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第24期272-276,共5页
采用0.5%福尔马林灭活的单核细胞增生李斯特氏菌作为免疫原免疫日本大耳兔,获得抗单核细胞增生李斯特氏菌多克隆抗体,并以此多克隆抗体作为捕获抗体,以抗单核细胞增生李斯特氏菌InternalinA(InlA)单克隆抗体作为检测抗体,建立快速、特... 采用0.5%福尔马林灭活的单核细胞增生李斯特氏菌作为免疫原免疫日本大耳兔,获得抗单核细胞增生李斯特氏菌多克隆抗体,并以此多克隆抗体作为捕获抗体,以抗单核细胞增生李斯特氏菌InternalinA(InlA)单克隆抗体作为检测抗体,建立快速、特异的检测该菌的双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法对单核细胞增生李斯特氏菌纯培养液的最低检测量为1.7×105CFU/mL。在检测食品样品的实验中,食品样本对本方法干扰较小,运用选择性增菌液进行前增菌可提高该方法的准确性。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 多克隆抗体 单克隆抗体 双抗夹心elisa方法
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双抗夹心ELISA检测食品中大肠杆菌O157:H7方法研究 被引量：31
12
作者 葛萃萃 钟青萍 +1 位作者 张旺 欧阳鑫 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期171-175,共5页
研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320;以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体,效价达1:25600。以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆... 研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320;以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体,效价达1:25600。以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法检测大肠杆菌O157:H7,正交试验分析表明,捕获抗体于37℃包被2h、不封闭、抗原与捕获抗体于37℃结合2h、检测抗体浓度为0.25mg/ml、与抗原于37℃结合1h为最优反应条件。该方法对纯培养菌液检出限为105CFU/ml,具有良好的敏感性及特异性。染菌样品经在EC增菌液中选择性培养后进行双抗夹心ELISA检测,接种量为0.1～1CFU/g(ml)的样品在培养12h后可检出阳性反应,1～10CFU/g(ml)的样品在培养8h后可检出阳性反应。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7:双抗夹心elisa 检测
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双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p抗体 被引量：10
13
作者 王艳芳 曾磊 +6 位作者 陈学东 郝卫 杨梅 蔡建飘 王压娣 袁国勇 车小燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期439-443,共5页
目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心EL... 目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并检测100例健康人群对照血清、21例血培养确诊其他真菌感染病人血清和15例血培养确诊马尔尼菲青霉病人血清,联合本实验室前期建立的马尔尼菲青霉抗原检测方法评价其临床应用价值。结果成功建立一种检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,经健康人群对照及其他真菌感染病人血清评价特异度为100%(121/121),检测15例马尔尼菲青霉病人血清,Mp1p特异性抗体2例阳性,Mp1p特异性抗原12例阳性,Mp1p抗体与抗原联合检测可明显提高灵敏度,达到93.3%(14/15)。结论双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体具有高度的特异性,联合抗原检测可提高马尔尼菲青霉感染诊断率。 展开更多
关键词 马尔尼菲青霉 双抗原夹心elisa法 真菌 Mp1p 抗体检测
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禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立和标化 被引量：10
14
作者 陈晨 曹红 +5 位作者 金英杰 雷霆 庞平 刘海霞 宋铁彬 陈福勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期535-539,共5页
利用原核表达的禽白血病病毒(ALV)P27蛋白作为抗原制备的单抗作为包被抗体,以制的酶标兔抗P27作为酶标抗体,在国内首次建立了检测ALV抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对禽白血病P27抗原的最小检出量为5 ng/mL,通过统计学试验证明自制... 利用原核表达的禽白血病病毒(ALV)P27蛋白作为抗原制备的单抗作为包被抗体,以制的酶标兔抗P27作为酶标抗体,在国内首次建立了检测ALV抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对禽白血病P27抗原的最小检出量为5 ng/mL,通过统计学试验证明自制的诊断试剂具有良好的特异性和稳定性。与IDEXX试剂盒的平行实验确定自制诊断试剂S/P>0.17为阳性判定标准。应用此方法对北京附近鸡场对抽样检测687份蛋清样品,检测结果与IDEXX的禽白血病抗原检测试剂盒符合率达到100%。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 单抗 双抗体夹心法elisa
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禽流感(H9N2亚型)酶标抗体的制备及双抗夹心Dot-ELISA检测方法的建立 被引量：5
15
作者 张春杰 王大军 +3 位作者 吴庭才 李银聚 余祖华 程相朝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第10期101-103,111,共4页
采用AIV灭活油乳苗(H9N2)对AIV非免疫鸡进行接种并获取高免血清,取高免血清采用饱和硫酸铵沉淀法,经过Sephadex G25层析柱提纯后可获得纯度很好的IgG。将IgG应用过碘酸钠法标记辣根过氧化酶(HRP),制备禽流感酶标抗体(IgG-HRP),利用所提... 采用AIV灭活油乳苗(H9N2)对AIV非免疫鸡进行接种并获取高免血清,取高免血清采用饱和硫酸铵沉淀法,经过Sephadex G25层析柱提纯后可获得纯度很好的IgG。将IgG应用过碘酸钠法标记辣根过氧化酶(HRP),制备禽流感酶标抗体(IgG-HRP),利用所提取的AI-IgG和所制备的禽流感酶标抗体按照双抗夹心Dot-ELISA试验操作步骤,采用方阵法分别摸索包被抗原及酶标抗体的最佳浓度,以及各步反应时间等最佳反应条件,以建立一种优化的AIV双抗夹心Dot-ELISA检测法。结果表明,所制备的AI高免血清HI效价为10log2;AI酶标抗体克分子比值为2.45;优化的Dot-ELISA各条件为:包被AI-IgG最佳稀释倍数为1∶50;最佳封闭剂为1%牛血清白蛋白;AI酶标抗体最佳稀释倍数为1∶100;待检抗原与2种抗体的感作时间均为0.5h(37℃)。优化后的检测方法可在2.5h内诊断结果,制备好的包被膜在4℃下保存2个月不影响其效果。而且敏感性提高了3倍,与新城疫病毒液、传染性支气管炎及减蛋综合症病毒液无交叉反应。 展开更多
关键词 禽流感 酶标抗体 双抗夹心Dot—elisa
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检测乳粉中克罗诺杆菌属穆汀斯克罗诺杆菌的双抗夹心ELISA方法的研究 被引量：4
16
作者 石曼 生威 +5 位作者 杜欣军 王帅 杨丽 余桂春 郭柏雪 王硕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期335-337,共3页
获得了抗穆汀斯克罗诺杆菌的多克隆抗体,抗体只对穆汀斯克罗诺杆菌菌株有特异性识别,而对非穆汀斯克罗诺杆菌无交叉反应。利用所得到的抗体,建立了一种双抗夹心ELISA检测方法,该方法对纯培养穆汀斯克罗诺杆菌菌液检出限为105cfu/mL;经过... 获得了抗穆汀斯克罗诺杆菌的多克隆抗体,抗体只对穆汀斯克罗诺杆菌菌株有特异性识别,而对非穆汀斯克罗诺杆菌无交叉反应。利用所得到的抗体,建立了一种双抗夹心ELISA检测方法,该方法对纯培养穆汀斯克罗诺杆菌菌液检出限为105cfu/mL;经过17h增菌,全脂乳粉染菌样品中的穆汀斯克罗诺杆菌的检出限为0.1cfu/g。该方法为快速检测乳粉中穆汀斯克罗诺杆菌的污染奠定了基础。 展开更多
关键词 穆汀斯克罗诺杆菌 双抗夹心elisa 全脂乳粉 检测
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应用ELISA双抗体夹心法检测猪细小病毒抗原的研究 被引量：11
17
作者 姜永厚 孙宗禹 +1 位作者 刘文周 潘兴广 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1997年第4期1-3,共3页
研究建立了从胎猪脏器中检测猪细小病毒（ＰＰＶ）抗原的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法。试验方法的最佳工作条件为，抗体浓度１：４００，酶标抗体浓度１：５０。５４份胎猪样品阳性检出率为５９．３％，不同脏器的阳性检出率分别为，心３６... 研究建立了从胎猪脏器中检测猪细小病毒（ＰＰＶ）抗原的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法。试验方法的最佳工作条件为，抗体浓度１：４００，酶标抗体浓度１：５０。５４份胎猪样品阳性检出率为５９．３％，不同脏器的阳性检出率分别为，心３６．４％、肝脏７２．７％、脾脏５０％、肺脏６６．７％、肾脏６６．７％。 展开更多
关键词 猪细小病毒 elisa 双抗体夹心法
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戊型肝炎病毒抗体双抗原夹心法ELISA的建立与初步应用 被引量：8
18
作者 何志强 葛胜祥 +5 位作者 邱艳 彭耿 陈毅歆 何水珍 张军 夏宁邵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期18-21,共4页
目的　建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法　将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血... 目的　建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法　将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血清建立双抗原夹心ELISA ;用 4 0 0份义务献血员血清比较双抗原夹心ELISA与间接法IgG抗体ELISA的符合情况 ;用 3只HEV感染猴系列血清比较双抗原夹心ELISA试剂和Genelabs公司HEVIgG试剂 ;用双抗原夹心ELISA试剂检测新疆地区的部分牛、绵羊、山羊、猪血清和上海地区的部分鸡血清中的HEV抗体。结果　建立了检测HEV抗体的双抗原夹心ELISA方法 ,对 4 0 0份义务献血员血清的检测表明其与间接法IgG抗体ELISA试剂的符合情况良好 ,并且有更高的s/co比值 ;与Genelabs公司HEVIgG试剂的比较表明双抗原夹心ELISA试剂的检出更早 ,尤其是持续时间及强度明显优于Genelabs试剂 ;在所检测的各种动物中均发现了HEV抗体 ,其中猪抗体的阳性率最高 ,表明双抗原夹心ELISA试剂可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。结论　利用大肠杆菌表达的HEV重组抗原建立了双抗原夹心法ELISA ,并可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。 展开更多
关键词 戊型肝炎 抗体检测 双抗原夹心法elisa 重组抗原 HEV
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猪轮状病毒性腹泻的ELISA双抗夹心法检测及防治建议 被引量：7
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作者 王玲 蒲万霞 +4 位作者 孟小琴 邓海平 崔东安 焦硕 杨志强 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第5期1990-1990,2013,共2页
[目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,... [目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,且感染率较高。从所取218份样品中共检测出RV阳性50头份,阳性率为22.94%,其中,仔猪170头份,阳性率22.35%,中猪48头份,阳性率25.0%;笼养模式下猪的发病率最低,为17.43%,农户圈养方式下猪的发病率最高,达36.84%。[结论]流行病学调查结果显示,仔猪对RV的感染率高于中猪,采取笼养模式,并对仔猪进行RV防治可降低猪RV的发病率。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 流行病学 elisa双抗夹心法
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尿液水通道蛋白-2双抗体夹心ELISA测定法的建立 被引量：13
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作者 卢武生 许顶立 +2 位作者 殷晓燕 任昊 孟素荣 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期486-489,共4页
目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG。建... 目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG。建立检测充血性心力衰竭模型大鼠尿液AQP2的双抗体夹心ELISA法。结果双抗体夹心ELISA法成功建立,灵敏度为15.625 pmol/ml,批内及批间变异系数分别为4.65%和14.05%;用该法定量检测左冠状动脉结扎术后不同梗死面积充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2浓度,其结果与Western blotting半定量检测结果一致。结论双抗体夹心ELISA法可以较好地定量检测充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2蛋白浓度且较Western blotting更加简便易行,便于临床推广使用。 展开更多
关键词 尿液 水通道蛋白-2 双抗体夹心elisa 测定法 水孔蛋白类 充血性心力衰竭
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