目的探讨敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱(Human Protein Atlas)数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例...目的探讨敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱(Human Protein Atlas)数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例,采用免疫组织化学法检测YTHDF2的蛋白表达差异;利用敲低YTHDF2的短发夹RNA(shRNA)及空载质粒包装慢病毒,并感染至宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞,实时荧光定量PCR及Western blot法检测YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果检测数据库发现YTHDF2在宫颈癌中表达越高生存时间越短,与正常宫颈组织相比,YTHDF2在宫颈癌组织高表达。敲低YTHDF2后,抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞阻滞于S期。结论YTHDF2在宫颈癌组织中高表达,敲低后抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡。展开更多
Poly(c)-结合蛋白[Poly(c)-binding proteins,PCBPs]是RNA结合蛋白的重要分支,包含与核不均一蛋白hnRNP K同源的KH(the K homology domain)结构域,该结构域可识别并结合RNA。以PCBP1为例,它的KH结构域内,KH1与KH2之间的连接区均存在相...Poly(c)-结合蛋白[Poly(c)-binding proteins,PCBPs]是RNA结合蛋白的重要分支,包含与核不均一蛋白hnRNP K同源的KH(the K homology domain)结构域,该结构域可识别并结合RNA。以PCBP1为例,它的KH结构域内,KH1与KH2之间的连接区均存在相对集中的纯化选择位点。PCBP能够在转录水平调控多种基因的表达并调控mRNA的稳定性,如对遗传性乳腺卵巢癌易感基因brca1(breast cancer 1,early onset)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p21等的调控。近年来,PCBP作为铁的分子伴侣,与铁蛋白(Ferritin)、二价金属转运因子(DMT1)、铁转运蛋白(Ferroportin)、脱氧辅蛋白羟化酶(Deoxyhypusine hydroxylase,DOHH)相互作用,参与细胞内铁代谢成为研究热点。对PCBP调节多个基因转录、mRNA稳定性及在铁代谢中的最新研究进展进行综述。展开更多
文摘目的探讨敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱(Human Protein Atlas)数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例,采用免疫组织化学法检测YTHDF2的蛋白表达差异;利用敲低YTHDF2的短发夹RNA(shRNA)及空载质粒包装慢病毒,并感染至宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞,实时荧光定量PCR及Western blot法检测YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果检测数据库发现YTHDF2在宫颈癌中表达越高生存时间越短,与正常宫颈组织相比,YTHDF2在宫颈癌组织高表达。敲低YTHDF2后,抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞阻滞于S期。结论YTHDF2在宫颈癌组织中高表达,敲低后抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡。
基金The Liaoning Natural Science Foundation(20170520198,20170520043)Project Supported by the State Key Laboratory ofMagnetic Resonance and Atomic and Molecular Physics(T151601)
文摘Poly(c)-结合蛋白[Poly(c)-binding proteins,PCBPs]是RNA结合蛋白的重要分支,包含与核不均一蛋白hnRNP K同源的KH(the K homology domain)结构域,该结构域可识别并结合RNA。以PCBP1为例,它的KH结构域内,KH1与KH2之间的连接区均存在相对集中的纯化选择位点。PCBP能够在转录水平调控多种基因的表达并调控mRNA的稳定性,如对遗传性乳腺卵巢癌易感基因brca1(breast cancer 1,early onset)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p21等的调控。近年来,PCBP作为铁的分子伴侣,与铁蛋白(Ferritin)、二价金属转运因子(DMT1)、铁转运蛋白(Ferroportin)、脱氧辅蛋白羟化酶(Deoxyhypusine hydroxylase,DOHH)相互作用,参与细胞内铁代谢成为研究热点。对PCBP调节多个基因转录、mRNA稳定性及在铁代谢中的最新研究进展进行综述。
