期刊文献+
共找到43篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
用逆转录多聚酶链式反应从凡纳对虾中检出传染性皮下组织和造血器官坏死病毒 被引量:13
1
作者 刘荭 高隆英 +1 位作者 史秀杰 江育林 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期185-188,共4页
A reverse transcription polymerase chain reaction (RT PCR) was used for detection of infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) from the gills and subcutaneous tissue of Penaeus vannamei (10-15cm ... A reverse transcription polymerase chain reaction (RT PCR) was used for detection of infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) from the gills and subcutaneous tissue of Penaeus vannamei (10-15cm in body size) without clinical signs. With primers 77012R and 77353F, a fragment of 356bp of IHHNV was amplified in RT PCR. The amplified product was sequenced and showed more than 98% homologue with the sequences of other IHHNV strains in Gene Bank. 展开更多
关键词 传染性 皮下组织 造血器官 坏死病毒 凡纳对虾 转录多聚 链式反应 高密度养殖 核酸抽取 pcr产物
在线阅读 下载PDF
籽粒苋copia类反转录转座子的初步研究 被引量:2
2
作者 江树业 孙梅 +2 位作者 何予卿 陈洪 陈启锋 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期218-222,共5页
本研究首次报道了籽粒苋中也存在 copia类反转录转座子 ,进一步验证了 copia类反转录转座子广泛存在于高等植物中 .采用 PCR方法分离鉴定了来自 4个种 2 7个基因型中的 5 3个 RT酶区序列 .序列分析表明 ,籽粒苋中的 copia类反转录转座... 本研究首次报道了籽粒苋中也存在 copia类反转录转座子 ,进一步验证了 copia类反转录转座子广泛存在于高等植物中 .采用 PCR方法分离鉴定了来自 4个种 2 7个基因型中的 5 3个 RT酶区序列 .序列分析表明 ,籽粒苋中的 copia类反转录转座子不但具有长度多样性、种间多样性、种内多样性 ,而且来自相同基因型的反转录转座子之间也存在高度异质性 .Southern杂交分析表明 ,籽粒苋中的 copia类反转录转座子以多拷贝形式存在 .Northern杂交分析表明 ,籽粒苋中的 copia类反转录转座子可能失去了转座活性 .本研究还对采用 PCR技术分离全长的 copia类反转录转座子进行了初步探讨 ,认为该方法可行 ,具有快速、经济等优点 。 展开更多
关键词 籽粒苋 copia类转录转座子 rt 异质粒 pcr
在线阅读 下载PDF
RT-PCR检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体和细胞角质蛋白-19mRNA的表达 被引量:2
3
作者 李锋 任军 +6 位作者 贾军 尤向辉 汪海丹 张燕军 郭晓彤 贠军 斯晓明 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第2期154-158,共5页
目的 探讨逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR )方法检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞标志的可能性及意义。方法 以转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,分别对40例乳腺癌患者和30例健康人静脉血进行EGFRm... 目的 探讨逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR )方法检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞标志的可能性及意义。方法 以转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,分别对40例乳腺癌患者和30例健康人静脉血进行EGFRmRNA检测,同时与目前研究较多的循环上皮细胞标志:细胞角质蛋白CK-19的mRNA做比较。结果 在30例健康人外周静脉血中没有发现EGFRmR NA的表达( 0% ),但有8例CK-19阳性( 26. 7% )。而40例乳腺癌患者检测出13例EGFRmRNA阳性(32. 5% ),与正常人相比P<0. 01,两组间存在显著性差异;CK-19的mRNA阳性例数为14 (35. 0% ),与正常人相比P>0. 05,两组间无统计学差异。通过免疫组化检测到25例( 62. 5% )的肿瘤组织中EGFR阳性,所有外周血中EGFRmRNA阳性的病例,相应的原发肿瘤病灶中EGFR蛋白均为阳性,组织中EGFR蛋白高表达的患者外周血EGFRmRNA检出率也高(P<0. 01)。26例初治患者中5例EGFRmRNA阳性(19. 2% ),14例复治患者中8例EGFRmRNA阳性(57. 1% ),两组相比P<0. 05,存在显著性差异。6例曾使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中1例EGFRmRNA阳性(16. 7% ), 8例未使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中7例EGFRmRNA阳性(87. 5% ),两组相比P<0. 05,存在显著性差异。 展开更多
关键词 乳腺癌 表皮生长因子受体(EGFR) 细胞角质蛋白-19(CK-19) 信使RNA(mRNA) 转录聚合链式反应(rt—pcr) 循环肿瘤细胞 微转移 紫杉醇
在线阅读 下载PDF
鸡大肝大脾病毒RT-PCR检测方法的建立及其检测 被引量:4
4
作者 马玉玲 杨德吉 陆承平 《中国病毒学》 CSCD 2005年第2期197-199,共3页
Based on the reported Big liver and spleen disease virus (BLSV) gene sequence, a pair of primers was designed and a 375bp product was amplified from the total RNA extracted from homogenates of BLSV-infected livers. ... Based on the reported Big liver and spleen disease virus (BLSV) gene sequence, a pair of primers was designed and a 375bp product was amplified from the total RNA extracted from homogenates of BLSV-infected livers. Twenty liver samples were randomly collected from two commercial broiler breeder flocks in Nanjing.One of ten liver samples was positive reaction in RT-PCR in one flock but not in another. The RT-PCR detection for cDNA from BLSV was specific with the sensitivity of 4.16×10-3μg/μL. Phylogentic tree analysis suggested that the 338bp sequence of the isolated strain (BLSV-NJ2002) shared 97.3% and 83.6% nt hemologue indentities with that of Australia strain and avian HEV respectively. 展开更多
关键词 鸡大肝大脾病毒(BLSV) 转录多聚链式反应(rt—pcr) 检测
在线阅读 下载PDF
巢式RT-PCR扩增MMP-7诊断大肠癌淋巴结的微转移
5
作者 龚丽明 程若川 +2 位作者 林世杰 王忠明 李鸿钧 《昆明医学院学报》 2005年第2期112-116,共5页
目的:建立巢式逆转录聚合酶链式反应(nestedreversetranscriptase-polymerasechainreaction,nestedRT-PCR)扩增MMP-7mRNA,检测大肠癌淋巴结微转移.方法:据MMP-7基因序列设计两对引物,建立巢式RT-PCR扩增体系,检测MMP-7mRNA在30例行根治... 目的:建立巢式逆转录聚合酶链式反应(nestedreversetranscriptase-polymerasechainreaction,nestedRT-PCR)扩增MMP-7mRNA,检测大肠癌淋巴结微转移.方法:据MMP-7基因序列设计两对引物,建立巢式RT-PCR扩增体系,检测MMP-7mRNA在30例行根治性手术大肠癌患者187个淋巴结中及10例良性肠道疾病患者25个淋巴结中的表达,并与传统组织学检查相比较.结果:大肠癌患者30例187个淋巴结中97个MMP-7mRNA表达,阳性率51·87%(97/187),病理学检查仅57个淋巴结有肿瘤转移;10例良性肠道疾病25个淋巴结扩增结果阴性.结论:巢式逆转录聚合酶链式反应检测淋巴结MMP-7mRNA的表达是诊断大肠癌微细胞转移灵敏的指标,其结果较常规病理组织学检查敏感,可对精确大肠癌的临床分期、判断患者预后及治疗提供一定理论依据. 展开更多
关键词 MMP-7 pcr扩增 转录聚合链式反应 巢式 诊断 rt 病理组织学检查 大肠癌患者 nested 淋巴结微转移 mRNA表达 chain 7mRNA 根治性手术 病理学检查 序列设计 疾病患者 肿瘤转移 细胞转移 肠道疾病 临床分期 检测 阳性率
在线阅读 下载PDF
2种RT-PCR技术检测肠道病毒RNA的对比研究 被引量:1
6
作者 秦璞 陈崇波 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期94-95,共2页
目的 比较 2种逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)技术检测脑脊液中肠道病毒 (EV)RNA。方法 设计与肠道病毒基因组保守的 5′非编码区同源的引物。方法A :采用AMV逆转录酶和TaqDNA聚合酶 ,逆转录合成cDNA与PCR在不同缓冲体系中分别完成 ;方... 目的 比较 2种逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)技术检测脑脊液中肠道病毒 (EV)RNA。方法 设计与肠道病毒基因组保守的 5′非编码区同源的引物。方法A :采用AMV逆转录酶和TaqDNA聚合酶 ,逆转录合成cDNA与PCR在不同缓冲体系中分别完成 ;方法B :AMV逆转录酶和TflDNA聚合酶同时加入 ,逆转录与PCR在同一缓冲体系中进行 ,逆转录后不打开反应管。结果 通过检测不同稀释度的PV1、CVB3和CVB4病毒及无菌性脑膜炎病人CSF中EVRNA ,证明 2种方法有相同的敏感性 ,而方法B在逆转录后不需打开反应管 ,降低了污染的危险 ,更便于自动化操作。结论  2种RT PCR技术均是检测EV感染的有效方法 。 展开更多
关键词 rt—pcr技术 检测 肠道病毒 RNA 对比研究 转录多聚反应 脑脊液 肠道病毒
在线阅读 下载PDF
甘蔗黄叶综合症的RT-PCR检测初报 被引量:12
7
作者 王伯辉 朱秋珍 +4 位作者 莫磊兴 王维赞 邓展云 黄冬发 王中康 《甘蔗(福建)》 2003年第4期1-3,共3页
对2002年12月采自南宁的4个田间症状程度不同的样品作RT-PCR检测,结果表明,A1(粤糖93/159)、A2(粤糖93/159)、B1(CP88/1508)3个样品为阳性,确认田间发生的是甘蔗黄叶综合症(YLS),是我国甘蔗新病害。建议尽快对病害加以控制,并加强甘蔗... 对2002年12月采自南宁的4个田间症状程度不同的样品作RT-PCR检测,结果表明,A1(粤糖93/159)、A2(粤糖93/159)、B1(CP88/1508)3个样品为阳性,确认田间发生的是甘蔗黄叶综合症(YLS),是我国甘蔗新病害。建议尽快对病害加以控制,并加强甘蔗引用检疫工作。 展开更多
关键词 甘蔗黄叶综合症 rt-pcr 广西 转录多聚链式反应
在线阅读 下载PDF
头颈部丝氨酸蛋白酶抑制剂基因、血管内皮生长因子在口腔疣状癌中的表达及意义 被引量:1
8
作者 张雷 唐瞻贵 +2 位作者 周正国 仝向娟 李晓玲 《口腔医学》 CAS 2006年第2期97-99,共3页
目的研究头颈部丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(Headpin)、血管内皮生长因子(VEGF)在口腔疣状癌中的表达及其相关性。方法应用反转录(RT-PCR)方法分别对6例口腔疣状癌和18例口腔鳞癌的癌组织、癌旁组织及相应正常组织标本行Headpin和VEGF mRNA... 目的研究头颈部丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(Headpin)、血管内皮生长因子(VEGF)在口腔疣状癌中的表达及其相关性。方法应用反转录(RT-PCR)方法分别对6例口腔疣状癌和18例口腔鳞癌的癌组织、癌旁组织及相应正常组织标本行Headpin和VEGF mRNA含量测定。结果Headpin mRNA在口腔疣状癌的癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达逐渐增加(P<0.01),但癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常组织之间差异无显著性(P>0.05);Headpin mRNA在口腔鳞癌的癌组织、癌旁组织和正常组织三者中表达逐渐增加(P<0.01),且癌组织与正常组织、癌旁组织与正常组织之间差异有显著性(P<0.05);疣状癌和鳞癌中Headpin基因表达水平差异无显著性(P>0.05);疣状癌中Headpin和VEGF mRNA表达呈负相关(P<0.05)。结论Headpin基因在口腔疣状癌的发生发展过程中可能起重要的抑癌作用;Headpin可能通过下调VEGF发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 口腔疣状癌 头颈部丝氨酸蛋白抑制剂 血管内皮生长因子 转录多聚链式反应
在线阅读 下载PDF
下丘脑GnRH-I mRNA在绍兴鸭松果腺中的表达 被引量:4
9
作者 倪迎冬 周玉传 +2 位作者 卢立志 陈杰 赵茹茜 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期135-137,共3页
用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法检测 30至 15 0日龄绍兴鸭松果腺内GnRH ImRNA含量的变化。结果表明 ,绍兴鸭松果腺内存在GnRH ImRNA的表达且其核苷酸序列与绍兴鸭下丘脑内GnRH ImRNA仅有一个核苷酸差异 ,且不影响氨基酸的编码序... 用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法检测 30至 15 0日龄绍兴鸭松果腺内GnRH ImRNA含量的变化。结果表明 ,绍兴鸭松果腺内存在GnRH ImRNA的表达且其核苷酸序列与绍兴鸭下丘脑内GnRH ImRNA仅有一个核苷酸差异 ,且不影响氨基酸的编码序列 ,但 30至 15 0日龄松果腺内GnRH ImRNA含量未出现显著性差异 (P >0 0 5 )。 展开更多
关键词 绍兴鸭 转录多聚链式反应(rt—pcr) 促性腺激素释放激素Ⅰ(GnRH-Ⅰ) 松果腺 下丘脑
在线阅读 下载PDF
出雏至性成熟绍鸭卵巢FSH-R与LH-R mRNA表达的变化 被引量:19
10
作者 倪迎冬 赵茹茜 +3 位作者 王亚菊 周玉传 傅启高 陈杰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期64-67,共4页
用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法检测绍鸭出雏至 90日龄卵巢卵泡刺激素受体 (FSH R)和黄体生成素受体 (LH R)mRNA含量的变化。结果表明 ,卵巢FSH RmRNA水平在 30和 6 0日龄较高 ,且 30日龄时极显著高于 1和 90日龄 (P <0 0 1) ... 用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法检测绍鸭出雏至 90日龄卵巢卵泡刺激素受体 (FSH R)和黄体生成素受体 (LH R)mRNA含量的变化。结果表明 ,卵巢FSH RmRNA水平在 30和 6 0日龄较高 ,且 30日龄时极显著高于 1和 90日龄 (P <0 0 1) ,与该阶段较高的卵巢相对生长速度相对应 ;而卵巢LH RmRNA水平随日龄逐渐升高 ,30、 6 0和 90日龄极显著高于 1日龄 (P <0 0 1) ,90日龄显著高于 30和 6 0日龄 (P <0 0 5 )。提示 :卵巢在早期发育阶段 ,尤其是快速增重期 ,对FSH的反应性较高 ;而接近性成熟时 ,可能由于卵泡发育的关系而对LH的反应性升高。 展开更多
关键词 绍鸭 转录多聚链式反应(rt-pcr) 卵泡刺激素受体(FSH-R) 黄体生成素受体(LH-R) 卵巢
在线阅读 下载PDF
半胱胺对仔猪血清促生长类激素水平及组织中GHR基因表达的影响 被引量:10
11
作者 王希春 徐雪松 +4 位作者 李莹 刘智 刘莉 陈亮 吴金节 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期71-76,共6页
为研究半胱胺对仔猪血清促生长类激素水平及不同组织中生长激素受体(GHR)表达的影响,选取临床检查健康的90头新生"杜×长×大"三元杂交仔猪,平均体重为(4.56±0.18)kg,随机分成3组,每组30头。在14日龄,分别给对... 为研究半胱胺对仔猪血清促生长类激素水平及不同组织中生长激素受体(GHR)表达的影响,选取临床检查健康的90头新生"杜×长×大"三元杂交仔猪,平均体重为(4.56±0.18)kg,随机分成3组,每组30头。在14日龄,分别给对照组、试验Ⅰ组、Ⅱ组仔猪饲喂基础日粮、基础日粮+120 mg/kg半胱胺及基础日粮+200 mg/kg半胱胺。试验期31 d。在14、24、32和45日龄,从每组分别选取10头仔猪经前腔静脉采血,测定血清GH、SS、T3、T4和IGF-Ⅰ水平。在45日龄时,每组选6头仔猪,屠宰取样,采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析组织中GHR mRNA的相对丰度。结果表明,半胱胺可以显著提高血清中GH、T3、T4、IGF-Ⅰ水平,降低血清SS含量,增加肝脏、胸腺及脾脏组织GHR mRNA表达量。日粮中添加适量半胱胺能有效地提高仔猪血清促生长类激素水平及组织中生长激素受体的表达,缓解断奶应激。 展开更多
关键词 半胱胺 仔猪 生长激素 生长激素受体 转录多聚链式反应
在线阅读 下载PDF
长短日照下绍鸭性成熟时间,下丘脑GnRH-I、POMC和NPY mRNA表达的差异 被引量:15
12
作者 倪迎冬 周玉传 +3 位作者 王亚菊 卢立志 陈杰 赵茹茜 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期539-544,共6页
利用长日照和短日照环境调控绍鸭的性成熟时间,并采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法, 检测两种日照组(n=6)鸭性成熟过程中下丘脑促性腺激素释放激素-Ⅰ(GnRH-Ⅰ)、阿片促黑激素皮质素 原(POMC)和神经肽Y(NPY)mRNA表达的发育性变化... 利用长日照和短日照环境调控绍鸭的性成熟时间,并采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法, 检测两种日照组(n=6)鸭性成熟过程中下丘脑促性腺激素释放激素-Ⅰ(GnRH-Ⅰ)、阿片促黑激素皮质素 原(POMC)和神经肽Y(NPY)mRNA表达的发育性变化及日龄间差异。结果表明,长日照组性成熟时间较短 日照组提前30d。RT-PCR结果显示,两组鸭下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA的发育性表达模式相似,从出雏至性成熟 过程中,其表达水平呈逐渐增加趋势;长日照组下丘脑GnRH-Ⅰ mRNA表达丰度均高于同日龄短日照组,并于 120日龄时其差异达显著水平。两组POMC mRNA的表达丰度呈现先增加后降低趋势,于性成熟前后显著下降; 日照长度对其基因表达具有显著影响。两组NPY mRNA表达水平分别于60和90日龄时显著升高,于性成熟时 显著下降,但光照对其基因表达无显著影响。下丘脑GnRH-Ⅰ基因表达的显著上调可能是禽类性成熟启动的关 键因素,也是长日照条件下绍鸭性早熟的主要原因;GnRH-Ⅰ表达的上调与下丘脑POMC和NPY mRNA表达变 化有关。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素-Ⅰ 阿片促黑激素皮质素原 神经肽Y 性成熟 光照 转录多聚链式反应 绍鸭
在线阅读 下载PDF
人牙胚釉原蛋白成熟肽基因的克隆 被引量:5
13
作者 程岚 雷建强 +2 位作者 朱祺泉 王洪海 束蓉 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2004年第2期126-129,共4页
目的:克隆人釉原蛋白成熟肽编码区基因片断,并构建含有该基因的重组表达质粒。方法:从引产胎儿牙胚组织中抽提总RNA,以Oligo(dt)为引物,逆转录合成牙胚cDNA利用PCR,从cDNA中扩增出人釉原蛋白成熟肽编码序列(约540bp),所得目的基因片断... 目的:克隆人釉原蛋白成熟肽编码区基因片断,并构建含有该基因的重组表达质粒。方法:从引产胎儿牙胚组织中抽提总RNA,以Oligo(dt)为引物,逆转录合成牙胚cDNA利用PCR,从cDNA中扩增出人釉原蛋白成熟肽编码序列(约540bp),所得目的基因片断插入表达载体质粒PQE30,转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,抽提重组质粒DNA,通过PCR、酶切和核苷酸序列分析,鉴定阳性克隆。结果:样品质粒测序证实,质粒PQE30中插入的基因片段与人釉原蛋白成熟肽基因序列完全相同。结论:从人胚胎的牙胚组织中克隆到釉原蛋白成熟肽编码序列,成功构建含有人釉原蛋白成熟肽基因的重组表达质粒。 展开更多
关键词 釉原蛋白 转录多聚链式反应 重组质粒 pcr 牙胚组织 基因克隆 成熟肽基因
在线阅读 下载PDF
两种试剂检测抗-HCV在丙型肝炎诊断中的意义 被引量:17
14
作者 姚仁南 陈复兴 +3 位作者 黄晓静 赵勤 张赞 江学成 《临床输血与检验》 CAS 2009年第1期21-22,共2页
目的提高丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检出率和检测结果的准确率。方法应用两个厂家抗-HCV ELISA试剂(试剂1、2)检测本院2006年1~12月间2516份输血、手术前住院患者血清标本。再将试剂1、2均阳性的血清标本28份、仅试剂1阳性的15份和仅试... 目的提高丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检出率和检测结果的准确率。方法应用两个厂家抗-HCV ELISA试剂(试剂1、2)检测本院2006年1~12月间2516份输血、手术前住院患者血清标本。再将试剂1、2均阳性的血清标本28份、仅试剂1阳性的15份和仅试剂2阳性的17份血清标本进行HCV RNA RT-PCR荧光定量检测。结果试剂1、2抗-HCV均阳性28份标本的RT-PCR结果均阳性,仅试剂1抗-HCV阳性的15份标本中2份阳性,试剂2抗-HCV阳性的17份标本中3份阳性;仅试剂1或2抗-HCV阳性的32份血清标本中,HCV RNA RT-PCR检测阳性率为15.63%。结论采用双试剂检测能提高抗-HCV的检出率和结果的准确率。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 联免疫吸附试验 转录-多聚链式反应(rt—pcr)
在线阅读 下载PDF
两种主要甜樱桃病毒RT-PCR检测方法的改进 被引量:6
15
作者 宗晓娟 王文文 +3 位作者 陈立伟 王甲威 严雪瑞 刘庆忠 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期285-286,共2页
李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot vi-rus,PNRSV)和李矮缩病毒(Prune dwarf virus,PDV)是较为常见且危害严重的两种植物病毒,1992年被我国列为进境检疫危险性有害生物,主要危害李属和蔷薇属植物。反转录-聚合酶链式反应... 李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot vi-rus,PNRSV)和李矮缩病毒(Prune dwarf virus,PDV)是较为常见且危害严重的两种植物病毒,1992年被我国列为进境检疫危险性有害生物,主要危害李属和蔷薇属植物。反转录-聚合酶链式反应检测法(RT-PCR)因操作简便且灵敏度高而备受青睐。 展开更多
关键词 环斑病毒 pcr检测方法 转录-聚合链式反应 甜樱桃 危险性有害生物 virus 蔷薇属植物 植物病毒
原文传递
棉铃虫细胞色素P450 cDNA片段的克隆与序列分析 被引量:5
16
作者 艾颖 邱星辉 +2 位作者 张粼粼 李梅 何凤琴 《昆虫知识》 CSCD 北大核心 2004年第3期227-231,共5页
以 5龄实验室敏感品系棉铃虫Helicoverpaarmigera的总RNA为模板 ,采用简并性引物 ,利用反转录 -多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增出了 2个新的长度分别为 2 3 7bp和 2 40bp的cDNA片段。序列分析表明 ,2 3 7bp的cDNA片段与棉铃虫P45 0CYP4家... 以 5龄实验室敏感品系棉铃虫Helicoverpaarmigera的总RNA为模板 ,采用简并性引物 ,利用反转录 -多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增出了 2个新的长度分别为 2 3 7bp和 2 40bp的cDNA片段。序列分析表明 ,2 3 7bp的cDNA片段与棉铃虫P45 0CYP4家族有较高的相似性 ,最高达 73 %;而 2 40bp的cDNA片段与CYP6家族有较高的相似性 ,最高达 49%。 展开更多
关键词 棉铃虫 细胞色素P450 CDNA片段 克隆 序列分析 转录-多聚链式反应
在线阅读 下载PDF
2个甜菜夜蛾信息素结合蛋白cDNA片段的克隆和序列分析 被引量:6
17
作者 修伟明 董双林 +1 位作者 苗慧 穆兰芳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1501-1504,共4页
通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和S... 通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和SexigPBP2,其分别由92个氨基酸残基和94个氨基酸残基组成。通过在GenBank中进行序列的同源性比较,表明这2个序列与已知几种昆虫的PBP氨基酸序列具较高同源性。 展开更多
关键词 结合蛋白 甜菜夜蛾 CDNA片段 信息素 序列分析 多聚链式反应 GenBank 氨基酸序列 氨基酸残基 克隆 同源性比较 设计合成 夜蛾科 简并性 转录 PBP 昆虫 雄虫
在线阅读 下载PDF
饲粮添加锌对蛋鸡金属硫蛋白基因表达的影响 被引量:2
18
作者 李发弟 张军霞 +4 位作者 倪迎冬 赵茹茜 郝正里 郎侠 刘建斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期305-308,共4页
选用66只18周龄商品代伊莎蛋鸡,随机分为3组,每组22只。对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组在基础饲粮中分别添加60和180 mg/kg锌(以ZnSO4.H2O形式),10周后屠宰采样。采用相对定量反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测不同锌添加水平对蛋... 选用66只18周龄商品代伊莎蛋鸡,随机分为3组,每组22只。对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组在基础饲粮中分别添加60和180 mg/kg锌(以ZnSO4.H2O形式),10周后屠宰采样。采用相对定量反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测不同锌添加水平对蛋鸡肝脏和肾脏中金属硫蛋白(Metallothionein,MT)mRNA表达水平的影响。结果表明:试验1组蛋鸡肝脏中MT mRNA表达丰度显著高于试验2组和对照组(P<0.05),而试验2组与对照组之间无明显差异(P>0.05)。试验1组蛋鸡肾脏MT mRNA表达丰度显著高于试验2组(P<0.05),而试验1、2组与对照组之间均无显著性差异(P>0.05)。在饲粮中添加低水平锌可显著上调蛋鸡肝脏和肾脏中MTmRNA的表达。 展开更多
关键词 伊莎蛋鸡 金属硫蛋白 转录多聚链式反应 肝脏 肾脏
在线阅读 下载PDF
加工番茄PG基因片段的cDNA克隆及表达载体构建 被引量:3
19
作者 许小勇 张丽华 +2 位作者 吴正景 关志华 程智慧 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期158-162,共5页
从加工番茄红熟果实中提取总RNA,根据已发表的多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因的序列设计合成一对特异引物,经过反转录PCR,扩增出一条697bp的目的片段。通过TA克隆,把它连接到pMD18-T vector上,测序鉴定其正确性。扩增片段经Sal I和Sma I双酶... 从加工番茄红熟果实中提取总RNA,根据已发表的多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因的序列设计合成一对特异引物,经过反转录PCR,扩增出一条697bp的目的片段。通过TA克隆,把它连接到pMD18-T vector上,测序鉴定其正确性。扩增片段经Sal I和Sma I双酶切插入到表达载体pBinAR CaMV 35S启动子和OCS终止子之间,用M13测序引物和目的片段引物进行PCR扩增鉴定,构建成含有PG基因片段的反义表达载体pBinAR-aPG,为进一步对加工番茄的遗传转化奠定了基础。 展开更多
关键词 加工番茄 多聚半乳糖醛酸 转录pcr 克隆 义表达载体
在线阅读 下载PDF
孵出至产蛋前绍兴鸭下丘脑GnRH-Ⅰ与POMC mRNA表达的变化 被引量:3
20
作者 倪迎冬 周玉传 +2 位作者 卢立志 陈杰 赵茹茜 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期85-88,共4页
采用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法 ,检测绍兴蛋鸭出雏后至性成熟期 (12 0日龄 )下丘脑促性腺激素释放激素 (GnRH Ⅰ )和阿片促黑激素皮质素原 (POMC)mRNA的变化。结果表明 :从 1日龄到 12 0日龄 ,下丘脑GnRH ⅠmRNA水平逐渐升高 ,... 采用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法 ,检测绍兴蛋鸭出雏后至性成熟期 (12 0日龄 )下丘脑促性腺激素释放激素 (GnRH Ⅰ )和阿片促黑激素皮质素原 (POMC)mRNA的变化。结果表明 :从 1日龄到 12 0日龄 ,下丘脑GnRH ⅠmRNA水平逐渐升高 ,1日龄水平最低 ,90日龄时显著高于 1日龄 (P <0 0 5 ) ,12 0日龄时极显著高于 1和 30日龄 (P <0 0 1) ,显著高于 6 0日龄 (P <0 0 5 )。下丘脑POMCmRNA含量呈先升后降趋势 ,6 0日龄时表达量最高 ,其水平极显著高于 1,30和 12 0日龄 (P <0 0 1) ,显著高于 90日龄时水平 (P <0 0 5 )。提示POMC基因表达的下调与GnRH Ⅰ基因表达的上调之间可能存在联系 ,两者的协同作用可能是青春期启动的关键因素。 展开更多
关键词 绍兴鸭 转录多聚链式反应 促性腺激素释放激素 阿片促黑激素皮质素原 性成熟
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部