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利用噬菌体随机肽库对神经胶质瘤母系SWO-38进行全细胞筛选 被引量：6
1
作者 高双荣 钟雪云 +6 位作者 颜艳灵 钟振宇 秦艳芳 孙艳花 王冰 于莉娜 钟瑛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期946-948,共3页
目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用... 目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用噬菌体肽库可以简便。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 全细胞筛选 噬菌体 神经胶质瘤 肿瘤导向治疗
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一种稳定、易于操作的噬菌体随机肽库载体的构建 被引量：5
2
作者 万瑛 代佳平 +1 位作者 王燕 刘昕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期256-258,共3页
目的：拟将噬菌粒ｐＣＯＭＢ３改建为更为稳定、高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体。方法：对常用噬菌体抗体库呈现载体ｐＣＯＭＢ３序列进行点矩阵作图分析（Ｄｏｔ－Ｐｌｏｔ分析），切除其中重复区，纠正其多代培养后自删除特性... 目的：拟将噬菌粒ｐＣＯＭＢ３改建为更为稳定、高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体。方法：对常用噬菌体抗体库呈现载体ｐＣＯＭＢ３序列进行点矩阵作图分析（Ｄｏｔ－Ｐｌｏｔ分析），切除其中重复区，纠正其多代培养后自删除特性。原克隆位点６３ｂｐ的填充序列增加到１４３５ｂｐ以便于酶切鉴定和电泳回收。结果：构建了命名为ｐＴＭＢ２的噬菌粒载体。结论：ｐＴＭＢ２的噬菌粒载体更为稳定且易于操作。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 pCOMB3 Dot-Plot分析 载体
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用噬菌体随机肽库筛选SARS冠状病毒S蛋白单克隆抗体2C5的模拟表位 被引量：3
3
作者 华荣虹 吴东来 +3 位作者 童光志 王云峰 田志军 周艳君 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期701-706,共6页
SARS-CoVS蛋白特异的单克隆抗体2C5具有病毒中和作用。以单克隆抗体2C5为筛选靶分子,筛选噬菌体展示随机7肽库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10个ELISAOD值大于0.2的阳性噬菌体克隆中,有8个噬菌体克... SARS-CoVS蛋白特异的单克隆抗体2C5具有病毒中和作用。以单克隆抗体2C5为筛选靶分子,筛选噬菌体展示随机7肽库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10个ELISAOD值大于0.2的阳性噬菌体克隆中,有8个噬菌体克隆展示有共同的7肽序列TPEQQFT。展示有该序列的噬菌体克隆能竞争抑制SARS-CoVS蛋白抗原与单抗2C5的结合。结果表明TPEQQFT为单克隆抗体2C5的模拟表位。该结果可对进一步研究S蛋白结构与功能和设计SARS疫苗有一定的参考意义。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒(SARS-CoV) S蛋白 单克隆抗体 噬菌体随机肽库 模拟表位
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利用噬菌体随机肽库筛选Rh(D)血型抗原的模拟表位 被引量：4
4
作者 刘淑均 沈继龙 +2 位作者 卞茂红 张循善 闻慧琴 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第7期817-820,共4页
目的从纯化的人抗Rh(D)抗体阳性血清中筛选Rh(D)血型抗原模拟表位。方法用纯化的多克隆抗Rh(D)抗体血清对噬菌体随机十二肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"过程筛选,随机挑取噬菌体克隆;用ELISA法检测其特异性及其与抗体的结合能... 目的从纯化的人抗Rh(D)抗体阳性血清中筛选Rh(D)血型抗原模拟表位。方法用纯化的多克隆抗Rh(D)抗体血清对噬菌体随机十二肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"过程筛选,随机挑取噬菌体克隆;用ELISA法检测其特异性及其与抗体的结合能力。提取阳性克隆DNA并进行测序,推导外源多肽的氨基酸序列。凝集抑制试验检测噬菌体展示的多肽对Rh(D)血型抗原结合的模拟作用。结果经过3轮筛选和相应鉴定后得到6个抗Rh(D)抗体的特异性噬菌体克隆,其中4个克隆展示相同的氨基酸序列为PSQGYVILLDEK,命名为C2,另外2个克隆展示相同的氨基酸序列为TMLNRAHDFSEC,命名为C21。凝集抑制试验结果表明这两个多肽的噬菌体可以抑制Rh(D)抗原阳性红细胞的凝集作用。结论多肽PSQGYVILLDEK和TMLNRAH-DFSEC可以模拟Rh(D)血型抗原表位。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 模拟表位 Rh(D)血型抗原
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应用噬菌体随机肽库筛选结肠癌患者血清中的肿瘤标记物的研究 被引量：8
5
作者 苏荣 李秀萍 +3 位作者 靳更林 彭丽容 王丽 寿成超 《宁夏医学杂志》 CAS 2006年第2期86-88,共3页
目的用噬菌体随机肽库技术对结肠癌病人血清进行差异性筛选,以获得特异性的肿瘤标志物。方法用噬菌体随机十二肽库与结肠癌病人血清和正常人血清进行淘选,经过几轮吸附和洗脱得到重组噬菌体库。采用ELISA方法进行单克隆鉴定,挑选20个阳... 目的用噬菌体随机肽库技术对结肠癌病人血清进行差异性筛选,以获得特异性的肿瘤标志物。方法用噬菌体随机十二肽库与结肠癌病人血清和正常人血清进行淘选,经过几轮吸附和洗脱得到重组噬菌体库。采用ELISA方法进行单克隆鉴定,挑选20个阳性克隆测序获得相同的序列:19B(GSMSRYVRWYTP),人工合成小肽19B的寡核苷酸序列,并将其与原核表达载体PGEX-4T-I连接,转化大肠杆菌BL-21(DE3),诱导融合蛋白的表达,以Glutathione Sepharose 4B进行纯化。结果用纯化的蛋白包被抗原板检测24例正常人血清和24例结肠癌病人的血清,证实小肽在正常人血清和结肠癌病人血清间存在差异。结论小肽19B有可能作为检测结肠癌的生物标志物。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 差异性筛选 肿瘤标志物 结肠癌血清
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利用噬菌体随机肽库筛选抗原模拟表位的研究进展 被引量：1
6
作者 裴亚峰 胡骁飞 +3 位作者 王耀 侯玉泽 张改平 邓瑞广 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第10期14-18,共5页
噬菌体随机肽库技术是将编码外源多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白结构基因的表达而表达,被展示的外源多肽可保持相对独立的空间结构和生物活性,是一种基因型与表达型的统一。近年来,噬菌体... 噬菌体随机肽库技术是将编码外源多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白结构基因的表达而表达,被展示的外源多肽可保持相对独立的空间结构和生物活性,是一种基因型与表达型的统一。近年来,噬菌体随机肽库技术被广泛应用于各种抗原的模拟表位筛选中,并取得了显著成果。综述了利用噬菌体随机肽库技术在抗原模拟表位筛选中的研究进展。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 噬菌体展示技术 模拟表位 抗原
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用强直性脊柱炎患者血清筛选噬菌体随机肽库 被引量：1
7
作者 王敏 李先平 +4 位作者 周勇 曹虹 何斌 郑荣 姚冬梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期844-847,共4页
目的:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中免疫筛选出能与强直性脊柱炎患者血清特异性结合的抗原模拟肽。方法:首先用正常人纯化血清免疫球蛋白IgG作为固相配基吸附非特异性噬菌体,然后以纯化强直性脊柱炎患者血清免... 目的:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中免疫筛选出能与强直性脊柱炎患者血清特异性结合的抗原模拟肽。方法:首先用正常人纯化血清免疫球蛋白IgG作为固相配基吸附非特异性噬菌体,然后以纯化强直性脊柱炎患者血清免疫球蛋白IgG包被,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程对上述处理过的噬菌体液进行3轮筛选,随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,并对部分克隆进行测序。用ELISA方法初步观察阳性克隆的诊断价值。结果:3轮筛选的投入产出比逐轮升高,提示具有良好的富集效果。对从第3轮洗脱物中挑选出的20个克隆进行结合试验,发现17个克隆与强直性脊柱炎患者纯化血清IgG特异性结合。其中7个克隆测序表明,7个克隆源于同一克隆,其外源插入肽为LALPPLAPN-HHH。该阳性克隆对50例强直性脊柱炎患者血清的检出率为92.0%,但该克隆对正常人血清亦有14.0%的阳性率。结论:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中筛选到具有一定生物学功能的抗原模拟肽。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 强直性脊柱炎 血清标志物
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噬菌体随机肽库筛选抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶单抗2A5的识别表位 被引量：1
8
作者 郝文波 董文其 +1 位作者 吴英松 李明 《热带医学杂志》 CAS 2006年第1期8-9,共2页
目的利用噬菌体随机肽库技术筛选恶性疟原虫乳酸脱氢酶(pfLOH)抗体2A5的识别表位。方法以抗pfLDH的单抗2A5筛选噬菌体随机12肽库,挑取阳性克隆测定DNA序列,推导其氨基酸序列并进行同源性分析。通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体... 目的利用噬菌体随机肽库技术筛选恶性疟原虫乳酸脱氢酶(pfLOH)抗体2A5的识别表位。方法以抗pfLDH的单抗2A5筛选噬菌体随机12肽库,挑取阳性克隆测定DNA序列,推导其氨基酸序列并进行同源性分析。通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与单抗2A5之间的结合特性。结果从噬菌体随机12肽库中筛选出21株可与2A5单抗特异结合的噬菌体克隆,其中多数克隆呈现核心序列SQK(R)L,该序列与pfLDH的一级序列具有一定同源性。竞争抑制实验显示,带有核心序列的噬菌体克隆可与pfLDH竞争结合单抗2A5。结论 SQK(R)L是pfLDH单抗2A5特异识别的表位。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 乳酸脱氢酶 单克隆抗体 噬菌体随机肽库
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应用噬菌体随机肽库筛选2型登革病毒E蛋白的抗原表位 被引量：1
9
作者 魏惠永 江丽芳 郭辉玉 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第B09期10-13,共4页
【目的】通过型特异性单抗与噬菌体随机 12肽库的生物淘洗 ,确定 2型登革病毒E蛋白分子的抗原表位。【方法】以DEN2型特异的E单克隆抗体作为筛选分子 ,生物淘洗噬菌体随机 12肽库 ,将筛选的噬菌体阳性克隆进行ELISA检测、DNA序列测定及... 【目的】通过型特异性单抗与噬菌体随机 12肽库的生物淘洗 ,确定 2型登革病毒E蛋白分子的抗原表位。【方法】以DEN2型特异的E单克隆抗体作为筛选分子 ,生物淘洗噬菌体随机 12肽库 ,将筛选的噬菌体阳性克隆进行ELISA检测、DNA序列测定及展示肽的氨基酸序列推导 ,通过展示肽序列与DEN2E蛋白的氨基酸一级结构的对比 ,确定E蛋白的抗原优势表位并用相应的合成肽验证。【结果】常规生物淘洗获得富含芳香族氨基酸并有aHWbW核心结构的克隆 ,确定为非特异的塑料结合噬菌体。改进淘洗方法后 ,肽库筛选的噬菌体阳性克隆有共同的结构模体WFKKGS ,与DEN2E蛋白分子的 390～ 397有 3～ 5个氨基酸相同。其对应的合成 10肽能与淘洗单抗特异反应 ,并可抑制噬菌体阳性克隆与该单抗结合。【结论】本实验通过噬菌体随机肽库的生物淘洗确定DEN2E蛋白 390～ 397氨基酸残基 (WFKKGSSI)存在一线性的B细胞抗原表位。 展开更多
关键词 登革病毒 E蛋白 噬菌体随机肽库 抗原表位
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应用噬菌体随机肽库筛选肿瘤MUC1/Y黏蛋白结合肽
10
作者 张立新 李春海 +1 位作者 孙丽亚 岳文 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第3期196-200,共5页
目的 :探索用噬菌体随机肽库筛选可用于肿瘤导向治疗的新型小分子载体。方法 :以MUC1/Y黏蛋白的胞外段蛋白(MUC1/Yex)为靶分子 ,用凝胶亲和法和酶联板法分别筛选十二肽噬菌体随机肽库 ,ELISA鉴定阳性克隆 ,DNA序列测定后确定MUC1/Yex结... 目的 :探索用噬菌体随机肽库筛选可用于肿瘤导向治疗的新型小分子载体。方法 :以MUC1/Y黏蛋白的胞外段蛋白(MUC1/Yex)为靶分子 ,用凝胶亲和法和酶联板法分别筛选十二肽噬菌体随机肽库 ,ELISA鉴定阳性克隆 ,DNA序列测定后确定MUC1/Yex结合肽的氨基酸序列 ;免疫组化鉴定阳性噬菌体克隆与正常及肿瘤细胞的结合能力及特异性。结果 :通过 4轮筛选 ,共获得 3种MUC1/Yex的结合肽 ,分别为HHWHSRSQLSWF ,HLKHKNYLPPTP和GNWYRHPHYLQP ,其中HXXHS表位可能在与MUC1/Yex的结合中起重要作用。阳性噬菌体克隆可与肿瘤细胞系MCF7,OVCA3,而不与正常外周血淋巴细胞结合。结论 :筛选获得的MUC1/Yex结合肽具有一定的亲合力和肿瘤特异性 ,可进一步用于肿瘤导向治疗的研究。 展开更多
关键词 MUC1/Y黏蛋白 结合肽 噬菌体随机肽库 肿瘤 导向治疗
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应用噬菌体随机肽库研究抗溶藻弧菌及其外膜蛋白单抗识别的特异性表位
11
作者 黄志坚 何建国 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期67-70,共4页
用噬菌体随机七肽库筛选制备的抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的纯化单抗,经3轮淘洗,获得较高程度富集的噬菌体,效价较高,第3轮淘洗比第1轮淘洗的产量高出近百倍。同时获得的阳性噬菌体经ELISA检测能与Va抗原发生强的阳性反应,确证了淘洗筛选... 用噬菌体随机七肽库筛选制备的抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的纯化单抗,经3轮淘洗,获得较高程度富集的噬菌体,效价较高,第3轮淘洗比第1轮淘洗的产量高出近百倍。同时获得的阳性噬菌体经ELISA检测能与Va抗原发生强的阳性反应,确证了淘洗筛选的结果。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 溶藻弧菌 外膜蛋白 单克隆抗体 表位
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从噬菌体随机肽库中初步筛选RCAS1的模拟表位
12
作者 沈沉浮 袁贤瑞 +2 位作者 罗端午 姜维喜 赵杰 《国际神经病学神经外科学杂志》 2005年第5期401-403,共3页
目的从噬菌体随机肽库中初步筛选表达于SiSo细胞系的受体结合癌抗原(receptorbindingcancerantigenexpressedonSiSocells,RCAS1)的模拟表位。方法用抗RCAS1单克隆抗体2211对噬菌体随机肽库进行多级亲和筛选,建立与2211具有亲和力的肽库... 目的从噬菌体随机肽库中初步筛选表达于SiSo细胞系的受体结合癌抗原(receptorbindingcancerantigenexpressedonSiSocells,RCAS1)的模拟表位。方法用抗RCAS1单克隆抗体2211对噬菌体随机肽库进行多级亲和筛选,建立与2211具有亲和力的肽库,随机挑选阳性克隆,用双抗体夹心ELISA和斑点ELISA检测其特异性。结果经过3轮免疫筛选,阳性噬菌体克隆富集了100倍,在随机挑取的10个阳性克隆斑中,有7个克隆可与2211单克隆抗体特异性结合。结论这7个阳性克隆中可能包含了肿瘤相关抗原RCAS1的模拟表位。 展开更多
关键词 噬菌体表面呈现技术 RCAS1 表位 噬菌体随机肽库 模拟表位 亲和筛选 初步 双抗体夹心ELISA 单克隆抗体 ELISA检测
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应用噬菌体随机肽库筛选腺病毒模拟肽的研究
13
作者 路秀英 程启高 鲍永利 《华北国防医药》 CAS 2002年第3期157-159,共3页
目的　探讨模拟腺病毒表位肽的噬菌体对该病毒感染Hela细胞的保护作用 ,以便为研制防治腺病毒感染的新型疫苗奠定基础。　方法　用 3型腺病毒中和抗体筛选噬菌体随机六肽库 ,经 3轮筛选后 ,随机挑取了 2 1个噬菌体克隆 ,扩增后分别加入 ... 目的　探讨模拟腺病毒表位肽的噬菌体对该病毒感染Hela细胞的保护作用 ,以便为研制防治腺病毒感染的新型疫苗奠定基础。　方法　用 3型腺病毒中和抗体筛选噬菌体随机六肽库 ,经 3轮筛选后 ,随机挑取了 2 1个噬菌体克隆 ,扩增后分别加入 3型腺病毒感染的Hela细胞。用结晶紫染色法观察Hela细胞的病变程度。　结果　 10 /2 1个克隆噬菌体短肽对 3型腺病毒感染Hela细胞具有保护作用。　结论　噬菌体表面的短肽可以模拟中和抗体相关的腺病毒表位 ,对 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 腺病毒模拟肽 腺病毒感染 结晶紫染色法
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从噬菌体随机肽库筛选庚型肝炎病毒E2抗原表位 被引量：3
14
作者 柯屾 戚中田 +4 位作者 施明 赵平 王建安 姚志建 沈倍奋 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期838-841,共4页
目的 :筛选能识别庚型肝炎病毒 (HGV) E2区的单克隆抗体和有竞争抑制活性的多肽。方法 :利用抗 HGV E2区的3株单克隆抗体 M6 ,M13,M30作为筛选配基 ,对构象限制性的随机环 9肽库进行亲和筛选 ,并对阳性噬菌体克隆进行功能鉴定。结果 :... 目的 :筛选能识别庚型肝炎病毒 (HGV) E2区的单克隆抗体和有竞争抑制活性的多肽。方法 :利用抗 HGV E2区的3株单克隆抗体 M6 ,M13,M30作为筛选配基 ,对构象限制性的随机环 9肽库进行亲和筛选 ,并对阳性噬菌体克隆进行功能鉴定。结果 :证实亲和筛选具有良好的富集效果后 ,随机挑出 16个噬菌体克隆进行交叉结合实验 ,有 14个克隆与 M6抗体有较强的特异结合 ;其中 10个克隆在竞争抑制实验中抑制率大于 5 0 %。 DNA测序表明 9个克隆具有氨基酸核心序列 GYAPL S,该序列与 HGV E2区第 30 6～ 311位氨基酸有较好的同源性。用合成肽与核心序列相似的噬菌体克隆 P9GC5和 P9GC11进行HGV E2抗原抗体实验 ,显示它们的 IC5 0 分别为 4.5和 7.2 nmol/ L。结论 :从噬菌体随机肽库中筛选到能与 HGV E2抗体特异性结合的 HGV抗原表位 ,并确定与合成了具有活性的核心多肽序列。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 E2蛋白 抗原表位 庚型肝炎 HGV
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噬菌体随机肽库技术及其应用 被引量：1
15
作者 杨海燕 李妍 董文其 《热带医学杂志》 CAS 2006年第4期463-466,共4页
噬菌体随机肽库是噬菌体呈现技术的重要分支,是应用噬菌体表面呈现技术将外源编码多肽基因随机克隆入噬菌体载体中而构建的噬菌体肽库。近年来,噬菌体随机肽库已成功地应用于基因治疗、表位研究、细胞信号传导与药物开发、寄生虫病研究... 噬菌体随机肽库是噬菌体呈现技术的重要分支,是应用噬菌体表面呈现技术将外源编码多肽基因随机克隆入噬菌体载体中而构建的噬菌体肽库。近年来,噬菌体随机肽库已成功地应用于基因治疗、表位研究、细胞信号传导与药物开发、寄生虫病研究、肿瘤导向治疗等领域,显示了广阔的应用前景。本文就针对以上几个方面做一综述。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 构建 表位
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利用噬菌体随机肽库技术分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的表位 被引量：1
16
作者 柯屾 戚中田 +3 位作者 温新宇 施明 胡美茹 沈倍奋 《军医进修学院学报》 CAS 2002年第4期283-285,共3页
目的 :分析患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法 :用ProteinA亲和层析柱从患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体 ;以此对噬菌体表面展示的随机 6肽库进行亲和筛选。结果 :经具有良好富集效果的三轮筛选后 ,从第三轮挑选出的 12个克隆... 目的 :分析患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法 :用ProteinA亲和层析柱从患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体 ;以此对噬菌体表面展示的随机 6肽库进行亲和筛选。结果 :经具有良好富集效果的三轮筛选后 ,从第三轮挑选出的 12个克隆进行结合试验 ,发现 8个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清反应 ;测序表明阳性克隆的外源肽具有一定的相似性。用阳性噬菌体克隆检测 2 0例患者血清 ,有程度不等的阳性反应。结论 :用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中筛选得到了有一定功能的模拟表位。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 丙肝 血清 抗HCV抗体 表位
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噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位 被引量：2
17
作者 杨清浩 王祥卫 +1 位作者 金燕 张立新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期1332-1334,共3页
目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得... 目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。 展开更多
关键词 MCU1抗原 模拟表位 噬菌体随机7肽库 抗体
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噬菌体随机肽库技术的应用现状
18
作者 姜立东 李林均 +2 位作者 余建云 张军 李敏 《实用临床医药杂志》 CAS 2011年第5期126-128,共3页
噬菌体随机肽库技术是将编码外源肽的DNA序列插入噬菌体编码外壳蛋白的基因中，使大量的随机肽段以融合形式表达在噬菌体的表面。该技术已广泛应用于抗原表位筛选、疫苗研制、药物开发、肿瘤靶向治疗、疾病诊断、基因治疗、重金属污染... 噬菌体随机肽库技术是将编码外源肽的DNA序列插入噬菌体编码外壳蛋白的基因中，使大量的随机肽段以融合形式表达在噬菌体的表面。该技术已广泛应用于抗原表位筛选、疫苗研制、药物开发、肿瘤靶向治疗、疾病诊断、基因治疗、重金属污染修复等方面，本文针对其应用现状做一综述。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 表位 疫苗 基因
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应用噬菌体随机肽库筛选肺癌血清标志物的研究
19
作者 李文辉 苏丽菊 +5 位作者 杨桐树 杨威 钟志 马玉杰 孟晓燕 徐宁 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2012年第6期511-514,共4页
目的利用噬菌体随机12肽库筛选肺癌患者血清中标志物，对探索肺癌的早期诊断、鉴别诊断、临床治疗特别是实施针对肺癌的早期干预有重要的理论意义和应用价值。方法分别选取正常人、良性肿瘤患者及肺癌患者血清各35例，先用肺癌患者、良... 目的利用噬菌体随机12肽库筛选肺癌患者血清中标志物，对探索肺癌的早期诊断、鉴别诊断、临床治疗特别是实施针对肺癌的早期干预有重要的理论意义和应用价值。方法分别选取正常人、良性肿瘤患者及肺癌患者血清各35例，先用肺癌患者、良性肿瘤患者、正常人混合血清作为筛选配基，对噬菌体随机12肽库进行减性淘筛，获得肺癌血清特异性结合的噬菌体克隆，并用患者混合血清进行Dot—ELISA实验鉴定获得的噬菌体克隆，进而分别用肺癌患者及正常人血清各12例进一步鉴定阳性噬菌体的混合克隆，确定阳性噬菌体克隆与个体血清之间的结合情况。结果经减性筛选后，特异结合的噬菌体得到富集。随机挑取的12个噬菌体克隆，经鉴定均能与肺癌患者血清特异性结合，阳性率100％。用肺癌病人血清和正常人血清各12例分别与阳性混合克隆反应，结果显示12例肺癌病人血清均呈阳性，而12例正常人血清均为阴性，敏感性和特异性均为100％。结论通过筛选肺癌患者血清学标志物，获得与肺癌患者血清特异结合的噬菌体多肽，其可能用于制备肺癌诊断试剂，对于开展肺癌的早期诊断及早期干预有重要的理论意义和应用价值。 展开更多
关键词 肺癌 噬菌体随机肽库 血清标志物
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噬菌体随机肽库的应用 被引量：5
20
作者 李华 朱锡华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期387-390,共4页
生物大分子间的相互作用是一切生命现象的基础。近年来 ,噬菌体随机肽库已成为探索受体与配体之间相互作用结合位点、寻求高亲和力生物活性的配体分子、探测未知蛋白空间结构表位的有利工具 ,在蛋白分子相互识别的研究、新型疫苗的研制... 生物大分子间的相互作用是一切生命现象的基础。近年来 ,噬菌体随机肽库已成为探索受体与配体之间相互作用结合位点、寻求高亲和力生物活性的配体分子、探测未知蛋白空间结构表位的有利工具 ,在蛋白分子相互识别的研究、新型疫苗的研制、以及药物的开发等领域具有广泛应用前景。 展开更多
关键词 肽库 噬菌体随机肽库 蛋白分子 MHC
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