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均相时间分辨免疫分析铕穴状螯合剂的合成 被引量:1
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作者 陈华鑫 常宇 +5 位作者 郑鑫倩 张浩然 曹雪 崔恩超 王清爽 潘利华 《合成化学》 CAS 北大核心 2019年第5期340-345,共6页
以2,6-二(溴甲基)吡啶-3,5-二甲酸二乙酯为起始原料,经溴化、取代、加成及酸化反应合成了两种铕穴状荧光螯合剂Eu 3+ 2,6-{ N,N′,N,N′-[二(2,2′-联吡啶-6,6′-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸[Eu 3+ bpy.bpy.py(CO 2 H) 2 , 1 ]和Eu... 以2,6-二(溴甲基)吡啶-3,5-二甲酸二乙酯为起始原料,经溴化、取代、加成及酸化反应合成了两种铕穴状荧光螯合剂Eu 3+ 2,6-{ N,N′,N,N′-[二(2,2′-联吡啶-6,6′-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸[Eu 3+ bpy.bpy.py(CO 2 H) 2 , 1 ]和Eu 3+ 2,6-{ N,N′,N,N′-[二(2,2′-联吡啶-6,6′-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二[ N -(2-氨基乙基)酰胺]{Eu 3+ bpy.bpy.py[CONH(CH 2 ) 2 NH 2 ] 2 , 2 },其结构和性能经 1 H NMR, MS(ESI)和荧光光谱表征。结果表明: 1 的最佳激发波长为312 nm,发射特征峰位于598和615 nm,荧光寿命为 1 064 μs,量子产量为10%。 2 的最佳激发波长为311 nm,发射特征峰位于597和616 nm,荧光寿命为398 μs,量子产率为12.1%。 展开更多
关键词 2 6-二(溴甲基)吡啶-3 5-二甲酸二乙酯 荧光螯合剂 合成 均相时间分辨免疫分析 荧光光谱
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动物源食品中孕酮激素残留的时间分辨荧光免疫分析法的建立
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作者 刘波 华彦涛 +3 位作者 马楠楠 赵炫 陈丽楠 袁利鹏 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2024年第6期279-284,共6页
该研究以孕酮为研究对象,设计并制备了新抗原,通过动物免疫得到特异性兔抗体,基于所得抗原和抗体,进一步优化了抗原抗体浓度、反应缓冲液种类及其pH值等关键参数,最终在国内首次建立了用于动物性食品中性激素孕酮残留快速检测时间分辨... 该研究以孕酮为研究对象,设计并制备了新抗原,通过动物免疫得到特异性兔抗体,基于所得抗原和抗体,进一步优化了抗原抗体浓度、反应缓冲液种类及其pH值等关键参数,最终在国内首次建立了用于动物性食品中性激素孕酮残留快速检测时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)。该研究确定最优实验条件为:抗原0.30μg/mL、铕标抗体0.40μg/mL、pH值7.2的TBST工作缓冲液,并建立标准曲线,方法的线性范围为0.46~6.94μg/L,IC_(50)达1.79μg/L,与睾酮交叉反应率为1.25%,与雌二醇、雌三醇等激素无交叉反应。实际样品的平均添加回收率为82.0%~113.0%,批内批间变异系数<5%,与高效液相色谱法(HPLC)检测结果的相关性良好(r2=0.988)。结果表明该研究所建立的TRFIA检测方法准确可靠、特异性好、灵敏度高,完全可用于动物源食品中孕酮残留的快速检测。 展开更多
关键词 动物性食品 孕酮 抗体 时间分辨荧光免疫分析 检测
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一种新型多元均相时间分辨荧光免疫分析方法的建立 被引量:1
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作者 陈振华 陈玫君 +3 位作者 侯经远 郑洁纯 吴英松 刘天才 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第4期474-479,共6页
制备出具有光学特异性的3种不同颜色量子点纳米微球和铽螯合物,分别与CEA、AFP和HBsAg的两株抗体偶联,采用双抗体夹心法模式,充分利用两株抗体与抗原的相互作用,通过采集不同量子点发出的荧光信号,根据其信号的强弱判定标记在量子点纳... 制备出具有光学特异性的3种不同颜色量子点纳米微球和铽螯合物,分别与CEA、AFP和HBsAg的两株抗体偶联,采用双抗体夹心法模式,充分利用两株抗体与抗原的相互作用,通过采集不同量子点发出的荧光信号,根据其信号的强弱判定标记在量子点纳米微球上的抗体结合的抗原的量,从而实现多元待分析物的定性定量分析.结果表明,量子点的荧光信号与CEA、AFP和HBsAg抗原浓度呈线性关系,其函数分别为:lgY=2.791 73+0.915 84lgX(R=0.998 08)、lgY=3.695 43+0.456 44lgX(R=0.998 48)和lgY=4.128 98+0.409 45lgX(R=0.998 45),分析灵敏度分别为:0.44、0.24和0.02ng/mL. 展开更多
关键词 多元免疫分析 时间分辨荧光免疫分析 双抗体夹心法 荧光共振能量转移 量子点
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多功能灵敏固相时间分辨荧光免疫分析仪设计 被引量:9
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作者 宋克非 张佩杰 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2609-2615,共7页
针对固相时间分辨荧光光谱的测量,设计出一种全新的固相时间分辨荧光免疫分析系统。使用氮分子激光器作为激发光源,采用积分球和单色仪相结合的荧光收集结构,使杂散光对样品荧光的影响降到最低;用光电倍增管进行光电转换,在500~700 nm... 针对固相时间分辨荧光光谱的测量,设计出一种全新的固相时间分辨荧光免疫分析系统。使用氮分子激光器作为激发光源,采用积分球和单色仪相结合的荧光收集结构,使杂散光对样品荧光的影响降到最低;用光电倍增管进行光电转换,在500~700 nm范围实现了高分辨荧光光谱测量;利用数字方式实现取样积分功能,提高了系统的信噪比。系统可实现荧光寿命、时间分辨荧光光谱、物质浓度的自动测量,仪器的检测灵敏度可达10-12 mol/L,线性范围为10-12~10-9 mol/L,稳定性相对误差小于3%,荧光光谱分辨为0.5 nm。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光免疫分析系统 光栅单色仪 积分球
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基于固相抗体模式时间分辨荧光免疫分析测定雌三醇 被引量:5
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作者 高素芹 杜凌云 王术皓 《光谱实验室》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期1089-1093,共5页
采用二步标记法,借助二乙烯三胺五乙酸酐,将Eu3+标记到雌三醇完全抗原上,基于固相抗体竞争反应模式,建立了时间分辨荧光免疫分析测定雌三醇的新方法。在优化的条件下,方法的线性范围为0.005—1000ng·mL-1,检出限为4pg·mL-1。... 采用二步标记法,借助二乙烯三胺五乙酸酐,将Eu3+标记到雌三醇完全抗原上,基于固相抗体竞争反应模式,建立了时间分辨荧光免疫分析测定雌三醇的新方法。在优化的条件下,方法的线性范围为0.005—1000ng·mL-1,检出限为4pg·mL-1。该方法用于检测血清中雌三醇的含量,结果令人满意。 展开更多
关键词 抗体包被 时间分辨荧光免疫分析 雌三醇
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纳米均相时间分辨荧光免疫法检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇方法的建立 被引量:10
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作者 周彬 高雷 +3 位作者 金坚 陈蕴 黄飚 赵卫国 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期338-342,共5页
目的:利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)多克隆抗体,采用纳米均相时间分辨荧光免疫法测定技术(AlphaLISA)建立间接竞争DON定量检测方法。方法:DON-BSA包被发光微粒,生物素化羊抗兔抗体与包被有链霉素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测... 目的:利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)多克隆抗体,采用纳米均相时间分辨荧光免疫法测定技术(AlphaLISA)建立间接竞争DON定量检测方法。方法:DON-BSA包被发光微粒,生物素化羊抗兔抗体与包被有链霉素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果:该方法的灵敏度为0.007ng/mL,检测范围为0.007~100ng/mL,批内批间变异系数均<5%。不同样品添加回收实验:玉米、小麦、啤酒回收率分别为84%~110%、67%~100%、74%~100%。结论:DON-AlphaLISA是目前DON检测中最灵敏的方法之一,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀烯醇 生物毒素 纳米时间分辨荧光免疫法(AlphaLISA)
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固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中的蛋白质测定 被引量:7
7
作者 刘婷婷 宁志刚 +3 位作者 赫文龙 李俊玲 张树恒 潘利华 《标记免疫分析与临床》 CAS 2009年第2期108-111,共4页
利用新型双功能螯合剂—4,7-二氯磺酰基苯基-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸(BCPDA)进行固相时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)标记技术研究,结合标记牛血清白蛋白(BSA)实验,研究测定蛋白质方法,监测标记过程,计算回收率、标记比。确定考马斯亮蓝染... 利用新型双功能螯合剂—4,7-二氯磺酰基苯基-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸(BCPDA)进行固相时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)标记技术研究,结合标记牛血清白蛋白(BSA)实验,研究测定蛋白质方法,监测标记过程,计算回收率、标记比。确定考马斯亮蓝染色法为该体系标记研究中测定蛋白质含量方法。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 BCPDA 蛋白质测定 考马斯亮蓝染色法
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昆明地区正常人甲状腺相关激素时间分辨荧光免疫分析 被引量:4
8
作者 徐燕红 杨吉生 +1 位作者 马德林 彭晓燕 《标记免疫分析与临床》 CAS 2001年第4期226-227,共2页
为确定本地区甲状腺相关激素时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)的正常参考值范围 ,对本地区 96名正常成人血清T3 、T4 、TSH、FT3 和FT4 作TRFIA测定。测量结果批间CV <5 % ,批内CV <2 % ;本地区正常参考值范围为 :T4 :6 6 - 171nmo... 为确定本地区甲状腺相关激素时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)的正常参考值范围 ,对本地区 96名正常成人血清T3 、T4 、TSH、FT3 和FT4 作TRFIA测定。测量结果批间CV <5 % ,批内CV <2 % ;本地区正常参考值范围为 :T4 :6 6 - 171nmol/L ;T3 :1.0 - 2 .5nmol/L ;TSH :0 .3- 4.5mIU/L ;FT3 :3.1- 7.0 2 pmol/L ;FT4 :6 .4-2 2 .0 pmol/L。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 正常值 甲状腺关激素
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固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂(Ⅰ)中间体—4,4′-二溴-6,6′-二甲基2,2′-联吡啶的合成 被引量:6
9
作者 郭淑英 潘利华 +2 位作者 曲晓春 孔令艳 关铭 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第3期264-266,共3页
目的:合成固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂的中间体-4,4′-二溴-6,6′二甲基2,2′-二吡啶。方法:根据自行设计的合成路线,以2-氨基6-甲基吡啶为原料,经重氮化、乌尔曼偶联合成6,6′-二甲基-2,2′-二吡啶,再经氧化、硝化、溴化、脱氧等合... 目的:合成固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂的中间体-4,4′-二溴-6,6′二甲基2,2′-二吡啶。方法:根据自行设计的合成路线,以2-氨基6-甲基吡啶为原料,经重氮化、乌尔曼偶联合成6,6′-二甲基-2,2′-二吡啶,再经氧化、硝化、溴化、脱氧等合成4,4′-二溴-6,6′二甲基2,2′-二吡啶。结果:经元素分析、红外光谱,核磁共振波谱等方法证明:成功的合成了4,4′-二溴-6,6′二甲基2,2′-二吡啶。结论:通过自行设计路线完成了4,4′-二溴-6,6′二甲基2,2′-二吡啶的合成,为固相时间分辨荧光免疫分析的应用提供了有价值的中间体和制备方法。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 6 6’-二甲基-2 2’-二吡啶 4 4’-二溴-6 6’-二甲基-2 2’-二吡啶
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B型钠尿肽固相时间分辨免疫荧光分析法的建立及其临床应用 被引量:1
10
作者 童华诚 潘世扬 童明庆 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期358-360,共3页
目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立B型钠尿肽(BNP)固相时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA).方法使用2株匹配的单克隆抗体,其中1株可以识别BNP分子C-端区,另1株生物素化单抗能识别分子内环结构,分别作为捕获抗体和... 目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立B型钠尿肽(BNP)固相时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA).方法使用2株匹配的单克隆抗体,其中1株可以识别BNP分子C-端区,另1株生物素化单抗能识别分子内环结构,分别作为捕获抗体和检测抗体,并利用制备的SA-BHHCT-Eu3+作为示踪物,建立双抗体夹心法,检测正常对照组和心功能Ⅰ~Ⅳ级心力衰竭患者组血液BNP含量.结果本法测定BNP的灵敏度为12 pg/ml,批内和批间CV分别为3.9%和5.2%,平均回收率为97.3%,线性范围为20~4 000 pg/ml.对照组(n=110)、心功能Ⅰ级(n=31)、Ⅱ级(n=30)、Ⅲ~Ⅳ级(n=25)各组血浆BNP浓度分别为(69±37)、(84±46)、(346±134)和(932±326)pg/ml;心衰各组BNP水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.001).以BNP 100pg/ml为cut off值,诊断心力衰竭(HF)的特异性为82.4%,敏感性为91.6%.结论应用铕螯合物BHHCT建立的固相TrFIA法测定BNP,是一个很好的诊断心衰和监测其严重程度的实验诊断指标. 展开更多
关键词 B型钠尿肽 时间分辨荧光免疫分析 铕螯合物 心力衰竭
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时间分辨荧光免疫分析仪的校准方法研究
11
作者 周瑾艳 武利庆 +6 位作者 黄彦捷 王晶 黄哲峰 李志雄 孙雅玲 许俊斌 陈玲 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第S01期305-310,共6页
研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准... 研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准项目与技术指标,确定了校准用的仪器设备,设计了完备的校准方案,使时间分辨荧光免疫分析仪的量值准确、可靠、可溯源,为统一相关量值发挥重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光 免疫分析
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一种均相时间分辨荧光免疫分析中间体、螯合剂及制备方法
12
《化学分析计量》 CAS 2017年第6期59-59,共1页
摘要本发明提供了一种均相时间分辨荧光免疫分析中间体、螯合剂及制备方法,属于荧光免疫分析、有机合成技术领域.该结构利用含氮杂冠醚具有良好的水溶性,且能与联吡啶经过取代反应形成穴状化合物,所述的穴状结构的化合物既能吸收激发光... 摘要本发明提供了一种均相时间分辨荧光免疫分析中间体、螯合剂及制备方法,属于荧光免疫分析、有机合成技术领域.该结构利用含氮杂冠醚具有良好的水溶性,且能与联吡啶经过取代反应形成穴状化合物,所述的穴状结构的化合物既能吸收激发光并传递能量给Eu3+,又能对Eu3+有较强的螯合作用;既可增加螯合剂的稳定性和抗干扰性,又可提高螯合剂的水溶性;本发明还提供了一种时间分辨荧光免疫分析螯合剂及其制备方法,螯合剂的激发光谱波长范围较宽为200~380nm,最大的激发光波长为363nm,有效地扩展了其激发范围,并且获得了在不同溶剂中的荧光光谱和荧光寿命. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 制备方法 螯合剂 中间体 有机合成技术 激发光谱 氮杂冠醚
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用于蛋白酪氨酸激酶抑制剂高通量筛选的均相时间分辨荧光免疫方法的建立 被引量:4
13
作者 李旭桂 王广发 +4 位作者 张俊艳 吴少瑜 徐伟 吴曙光 张嘉杰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1612-1614,共3页
目的建立一种均相时间分辨荧光免疫分析方法用于蛋白酪氨酸激酶抑制剂的体外高通量筛选。方法根据铕联穴状化合物(EuK)和异藻蓝蛋白(XL-665)两个荧光化合物在激发后的能量共振转移所发出的特异性荧光,采用多功能酶标仪在波长为612nm和67... 目的建立一种均相时间分辨荧光免疫分析方法用于蛋白酪氨酸激酶抑制剂的体外高通量筛选。方法根据铕联穴状化合物(EuK)和异藻蓝蛋白(XL-665)两个荧光化合物在激发后的能量共振转移所发出的特异性荧光,采用多功能酶标仪在波长为612nm和670nm处测定荧光信号的变化;以血管内皮生长因子2(VEGFR-2)为蛋白酪氨酸激酶,检测蛋白酪氨酸激酶抑制剂Sunitinib的抑制活性。结果建立了一种用于蛋白酪氨酸激酶抑制剂体外高通量筛选的均相时间分辨荧光免疫分析方法。在反应体系中,蛋白酪氨酸激酶VEGFR-2、三磷酸腺苷(ATP)和多肽底物浓度分别为5ng/μl、100μmol/L和1μmol/L。在上述条件下,检测到Sunitinib对VEGFR-2酪氨酸激酶抑制活性的IC50为86.7nmol/L,与文献报道的结果近似。结论本实验所建立的均相时间分辨荧光免疫分析方法操作简便,重复性好,可用于蛋白酪氨酸激酶抑制剂的体外高通量筛选。 展开更多
关键词 蛋白酪氨酸激酶 时间分辨荧光免疫分析 血管内皮生长因子受体2
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时间分辨荧光免疫分析技术与牦牛肉兽药残留检测研究进展
14
作者 赵维章 黄文颖 +1 位作者 张正英 陈成 《现代畜牧科技》 2024年第11期141-144,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本... 时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本低,检测速度快等诸多优势,因此TRFIA技术为牦牛肉质安全检测开辟一条崭新的检测途径。该文就TRFIA技术及其在牦牛肉质安全检测应用进展做一简要综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 牦牛肉 安全检测 兽药残留
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固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂中间体的合成 被引量:1
15
作者 孔令艳 《呼伦贝尔学院学报》 2007年第6期81-84,共4页
为研制固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂,合成了中间体6,6ˊ—二甲基—4,4ˊ—二(4—硝基苯乙炔)—2,2ˊ—二联吡啶。以6,6ˊ—二甲基—2,2ˊ—二联吡啶为原料,经氧化、硝化、溴化、脱氧、Sonogashira偶联五步合成,重点研究了第三... 为研制固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂,合成了中间体6,6ˊ—二甲基—4,4ˊ—二(4—硝基苯乙炔)—2,2ˊ—二联吡啶。以6,6ˊ—二甲基—2,2ˊ—二联吡啶为原料,经氧化、硝化、溴化、脱氧、Sonogashira偶联五步合成,重点研究了第三步和第五步的合成方法和合成条件,并通过DSC、红外光谱、元素分析对其结构进行表征和确证。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 4 4′-二溴-6 6′-二甲基-2 2′-二联吡啶-N N′-二氧化物 6 6′-二甲基-4 4′-二(4-硝基苯乙炔)-2 2′-二联吡啶
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均相时间分辨荧光免疫法检测降钙素原的性能评价 被引量:1
16
作者 江长绿 刘结清 +3 位作者 陈飞宇 江文力 黄昊川 杜利军 《检验医学与临床》 CAS 2022年第12期1708-1711,1728,共5页
目的评价该科室新购置的赛默飞KRYPTOR COMPACT PLUS-PCT分析仪检测降钙素原(PCT)的性能。方法依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP系列文件及我国卫生行业检验相关文件等要求,评价赛默飞KRYPTOR COMPACT PLUS-PCT分析仪的精密度、准... 目的评价该科室新购置的赛默飞KRYPTOR COMPACT PLUS-PCT分析仪检测降钙素原(PCT)的性能。方法依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP系列文件及我国卫生行业检验相关文件等要求,评价赛默飞KRYPTOR COMPACT PLUS-PCT分析仪的精密度、准确度、正确度、稀释度、线性范围、干扰试验、携带污染率、参考区间等性能指标,并将其与雷度AQT90FLEX免疫分析仪进行比较。结果批内精密度的变异系数(CV)分别为0.51%、3.47%,批间精密度的CV分别为1.66%、5.14%,均<±7.5%[1/4系统总误差(TEa)];正确度:使用的参考物质水平均落在正确度验证区间内;准确度:2021年4月份上报的5份标本室间质评结果回报均通过国家临床检验中心室间质评标准,成绩为100%;稀释度偏倚在1∶50倍稀释时为±7.2%,1∶100倍稀释时为±7.4%,均<±10%(1/3 TEa);线性范围:0.02~50μg/L;常见潜在的内源性干扰物对PCT检测无明显影响(干扰均<±10%);携带污染率为0.03%,不会产生假阳性结果;参考区间:P_(95)为0.064μg/L;其与雷度AQT90FLEX免疫分析仪进行比较有良好的相关性(R^(2)=0.995),在医学决定水平0.5μg/L和2.0μg/L时相对偏差分别为8.83%和7.95%,均<±10%(CLIA88/2)。结论赛默飞KRYPTOR COMPACT PLUS-PCT分析仪各参数性能验证均符合要求,其良好的稀释度性能可为临床提供更高水平的检测数据,与雷度AQT90 FLEX免疫分析仪具有良好的相关性,可以投入临床实验室使用。 展开更多
关键词 赛默飞KRYPTOR COMPACT PLUS-PCT分析 时间分辨荧光免疫 降钙素原 性能验证
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时间分辨荧光免疫分析测定六盘水地区正常人甲状腺相关激素 被引量:2
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作者 王诚 王世君 杨梅 《基层医学论坛》 2005年第9期830-830,共1页
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 甲状腺关激素 分析测定 时间分辨荧光免疫分析 放射免疫分析 正常人 放射免疫技术 正常参考值 标记技术
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时间分辨荧光免疫分析法直接测定雌二醇 被引量:10
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作者 唐棣 王永成 +2 位作者 常文保 慈云祥 郭振泉 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第8期899-903,共5页
合成了雌二醇抗原,并获得了雌二醇单克隆抗体,通过酶联免疫吸附法测得效价为1.O×10~7.使用洗脱增强-时间分辨荧光免疫分析法测定了血清中的雌二醇,浓度范围为1.0×10^(-2)~1.0×10~3μg/L,最低检出限为5.6ng/L,批内RSD%小... 合成了雌二醇抗原,并获得了雌二醇单克隆抗体,通过酶联免疫吸附法测得效价为1.O×10~7.使用洗脱增强-时间分辨荧光免疫分析法测定了血清中的雌二醇,浓度范围为1.0×10^(-2)~1.0×10~3μg/L,最低检出限为5.6ng/L,批内RSD%小于3.7%,批间RSD%小于7.5%.将测定结果与放射免疫分析法作了比较. 展开更多
关键词 雌二醇 测定 时间分辨 荧光免疫分析
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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用 被引量:12
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作者 李丽华 白瑞樱 +6 位作者 孙远明 沈玉栋 徐振林 雷红涛 张挺 王弘 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期216-220,共5页
建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20~IC80)为1.14~28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%~100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%~95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。 展开更多
关键词 环丙沙星 时间分辨荧光免疫分析 抗体 添加回收
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赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量:28
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作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03 ̄1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 真菌毒素 单克隆抗体
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