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细菌载体基因工程菌活体生物药制剂评价体系初探
1
作者 梅妮 李积宗 +1 位作者 陈桂良 王建新 《上海医药》 2025年第1期83-87,共5页
细菌载体基因工程菌活体生物药制剂的评价体系建立对于推动该领域的研究和开发具有重要意义。通过确立合适的评价指标和方法,可以有效评估基因工程菌活体药物的质量和疗效。细菌载体基因工程菌活体生物药制剂是全球新的品种,至今尚未有... 细菌载体基因工程菌活体生物药制剂的评价体系建立对于推动该领域的研究和开发具有重要意义。通过确立合适的评价指标和方法,可以有效评估基因工程菌活体药物的质量和疗效。细菌载体基因工程菌活体生物药制剂是全球新的品种,至今尚未有产品上市,其具有生物多样性和组成不确定性的特点,评价体系有许多需要探讨的关注点。该文从国内外法规现状和相关技术法规要求方面,阐述了该类的评价策略,并对该类制剂的质量评价要点和技术方法展望进行了分析和总结,以期为细菌载体基因工程菌活体生物药制剂评价工作的开展提供参考。 展开更多
关键词 细菌载体 基因工程菌 活体生物药 评价体系
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基因工程菌在石油污染修复中的研究进展与前景 被引量：3
2
作者 宫兆波 郭瑛瑛 +7 位作者 张燕萍 杨永霞 赵增义 刘艳伟 史斌 毕磊 阴永光 宋茂勇 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期14-26,共13页
构建基因工程菌(genetically engineered microorganisms,GEMs)是石油污染生物修复的重要发展方向.目前,通过基因编辑、过表达和定向进化等手段改造微生物的石油污染物降解和调控途径,可以提高微生物的环境适应能力和污染物降解能力,用... 构建基因工程菌(genetically engineered microorganisms,GEMs)是石油污染生物修复的重要发展方向.目前,通过基因编辑、过表达和定向进化等手段改造微生物的石油污染物降解和调控途径,可以提高微生物的环境适应能力和污染物降解能力,用于石油污染物的生物降解和监测.本文概述了石油污染物降解基因工程菌的主要构建策略,包括选择和改造宿主菌、改造与优化石油污染物关键酶和代谢通路、开发微生物全细胞传感器和构建基因工程菌的自毁程序.此外,基因工程菌也可用于石油污染的酶修复、微生物菌群修复和细菌-植物联合修复.随着系统生物学和合成生物学在降解微生物中的应用,基因工程菌在石油污染修复中展现出良好的研究和应用前景. 展开更多
关键词 石油污染物 基因工程菌 微生物修复 合成生物学 降解
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白原胶基因工程菌株 Xanthomonas campestris ΔrpfB ΔxanK发酵工艺优化
3
作者 朱建行 何亚文 欧杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期14-22,共9页
黄原胶是一种亲水杂多糖,广泛应用于食品、药品、化妆品等领域,但因其自身带有菌黄素而呈黄色,限制了其应用范围。野油菜黄单胞菌工程菌株Xanthomonas campestrisΔrpfB ΔxanK可以生产不含有菌黄素的黄原胶,命名为“白原胶”,具有极其... 黄原胶是一种亲水杂多糖,广泛应用于食品、药品、化妆品等领域,但因其自身带有菌黄素而呈黄色,限制了其应用范围。野油菜黄单胞菌工程菌株Xanthomonas campestrisΔrpfB ΔxanK可以生产不含有菌黄素的黄原胶,命名为“白原胶”,具有极其广阔的市场应用前景,但其发酵培养条件亟待进一步优化。本研究通过单因素实验和正交实验对Xanthomonas campestrisΔrpfB ΔxanK菌株发酵培养基进行优化,以提升胶体产量,并用15 L机械搅拌发酵罐进行放大验证,对最终生产的胶体和市售黄原胶通过红外光谱进行比对验证。结果表明,最佳发酵培养基为玉米淀粉蔗糖(31,质量比)5%(质量分数,下同),蛋白胨0.2%,K_(2)HPO_(4)0.4%,CaCO_(3)0.5%,大豆0.3%,初始pH 8,接种量5%(体积分数),摇床转速220 r/min,发酵温度28℃,发酵时间72 h。摇瓶产量可以达到33.8 g/L。经15 L机械搅拌发酵罐扩大实验,前期通气量1 vvm,后期逐渐增大到2 vvm,前36 h转速250 r/min,后36 h转速400 r/min,发酵72 h最终产量为38.4 g/L。红外光谱分析显示,白原胶结构与市售黄原胶结构吻合,证明两者具有相同的结构。本研究为Xanthomonas campestrisΔrpfB ΔxanK菌株的工业化应用提供了科学合理的发酵策略,为白原胶进一步的工业应用提供参考。 展开更多
关键词 基因工程菌株 白原胶 培养基优化 发酵 放大实验
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同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌研究 被引量：16
4
作者 蒋建东 顾立锋 +3 位作者 孙纪全 代先祝 文阳 李顺鹏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期884-891,共8页
构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点。通过以受体菌的16SrDNA为同源重组指导序列、sacB基因为双交换正筛选标记构建同源重... 构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点。通过以受体菌的16SrDNA为同源重组指导序列、sacB基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体,二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因(mpd)整合到呋喃丹降解菌Sphingomonassp.CDS1染色体的16SrDNA位点,分别成功构建了含1个和2个mpd基因插入到rDNA位点且不带入外源抗性的基因工程菌株CDSmpd和CDS2mpd。同源重组单交换的效率为3.7×10-7～6.8×10-7。通过PCR和Southern杂交的方法验证了同源重组事件。基因工程菌遗传稳定,能同时降解甲基对硫磷和呋喃丹。甲基对硫磷水解酶(MPH)的比活在各生长时期均高于原始出发菌株,比活最高达6.22muμg。 展开更多
关键词 同源重组 RDNA sacB 基因工程菌 农药降解 生物修复
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对硝基苯酚降解菌P3的分离、降解特性及基因工程菌的构建 被引量：27
5
作者 崔中利 张瑞福 +1 位作者 何健 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期19-26,共8页
分离到一株假单胞菌 (Pseudomonassp .)P3 ,该菌能够以对硝基苯酚为唯一碳源和氮源进行生长。在有外加氮源的条件下 ,P3降解对硝基苯酚并在培养液中积累亚硝酸根。P3有比较广泛的底物适应性 ,对多种芳香族化合物都有降解能力。不同金属... 分离到一株假单胞菌 (Pseudomonassp .)P3 ,该菌能够以对硝基苯酚为唯一碳源和氮源进行生长。在有外加氮源的条件下 ,P3降解对硝基苯酚并在培养液中积累亚硝酸根。P3有比较广泛的底物适应性 ,对多种芳香族化合物都有降解能力。不同金属离子对P3降解对硝基苯酚有不同的作用。葡萄糖的存在对P3降解对硝基苯酚无明显促进作用 ,而微量酵母粉可以大大促进P3对硝基苯酚的降解。以P3为受体菌 ,通过接合转移的手段将甲基对硫磷水解酶基因mpd克隆至P3菌中 ,获得了表达甲基对硫磷水解酶活性的基因工程菌PM ,PM能够以甲基对硫磷为唯一碳源进行生长。 展开更多
关键词 对硝基苯酚 生物降解 mpd基因 基因工程菌 分离
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代谢木糖生产乙醇的基因工程菌研究进展 被引量：16
6
作者 洪解放 张敏华 +2 位作者 刘成 邹少兰 吴经才 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期114-118,共5页
木糖广泛存在于林业及农业废弃物中 ,木糖发酵生产乙醇是再生资源的有效利用。文中报道了近几年来在利用基因工程菌发酵木糖生产乙醇方面的研究进展。重点介绍了大肠杆菌、酿酒酵母、树干毕赤酵母及运动发酵单胞菌的基因改造情况。
关键词 研究进展 乙醇 代谢 木糖发酵 大肠杆菌 基因改造 基因工程菌 酿酒酵母 农业废弃物 毕赤酵母
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耐盐及苯乙酸、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建 被引量：12
7
作者 刘智 洪青 +2 位作者 徐剑宏 张国顺 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期554-559,共6页
H1 (Halomonassp.)是一株耐高盐浓度 (1 8%NaCl,W V)和降解苯乙酸的菌株 ,pDT3质粒为pUC1 9插入甲基对硫磷水解酶基因 (mpd基因 )构建而成。采用HindⅢ酶切 ,获得含有完整mpd基因片段 ,克隆到广宿主质粒pKT2 3 0和pBBR1 MCS2上 ,构建... H1 (Halomonassp.)是一株耐高盐浓度 (1 8%NaCl,W V)和降解苯乙酸的菌株 ,pDT3质粒为pUC1 9插入甲基对硫磷水解酶基因 (mpd基因 )构建而成。采用HindⅢ酶切 ,获得含有完整mpd基因片段 ,克隆到广宿主质粒pKT2 3 0和pBBR1 MCS2上 ,构建成质粒pKT MP和pBBR MP。通过三亲杂交 ,在辅助质粒pRK2 0 1 3的帮助下 ,将质粒pKT MP和pBBR MP转移到H1中 ,得到的工程菌H pKT MP和H pBBR MP具有耐盐、降解苯乙酸和水解甲基对硫磷的功能 ,其中H pBBR MP水解酶活性与亲本菌株甲基对硫磷降解菌 (Pseudomonasputida)DLL E4相当 ,而H pKT MP水解酶活性要提高 1倍左右。经过传代试验 。 展开更多
关键词 耐盐 苯乙酸 甲基对硫磷 降解 基因工程菌 三亲杂交 含盐废水
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基因工程菌Pichia pastoris高密度培养条件研究 被引量：20
8
作者 郭美锦 吴康华 +3 位作者 杭海峰 储炬 庄英萍 张嗣良 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期6-11,共6页
基因工程菌pichiapastoris最佳种子培养基为添加 4mL/LPTMl的BMGY培养基 ;全合成高密度摇瓶培养基是甘油 4% ,(NH4) 2 SO41 0g/L ,CaSO40 93g/L ,K2 SO41 8 2g/L ,MgSO4·7H2 O 1 4 9g/L ,0 1mol/L磷酸缓冲液 (pH =6 0 )配制 ,培养... 基因工程菌pichiapastoris最佳种子培养基为添加 4mL/LPTMl的BMGY培养基 ;全合成高密度摇瓶培养基是甘油 4% ,(NH4) 2 SO41 0g/L ,CaSO40 93g/L ,K2 SO41 8 2g/L ,MgSO4·7H2 O 1 4 9g/L ,0 1mol/L磷酸缓冲液 (pH =6 0 )配制 ,培养 2 6h后细胞密度OD60 0 可达到 65。经SDS PAGE电泳图谱分析 ,甲醇诱导培养 72h结果 :1 2h有重组人血清白蛋白表达 ,2 4h达到最大。此全合成摇瓶培养基与批补料发酵培养基相类似 ,有利于指导发酵罐上发酵培养。 展开更多
关键词 基因工程菌 毕赤酵母 高密度培养
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基因工程菌生物强化MBR工艺处理阿特拉津试验研究 被引量：17
9
作者 刘春 黄霞 +1 位作者 孙炜 王慧 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期417-421,共5页
以生活污水为共基质,考察了基因工程菌在MBR和活性污泥反应器中对阿特拉津的生物强化处理效果,以及生物强化处理对污泥性状的影响.结果表明,基因工程菌在MBR中对阿特拉津具有很好的生物强化处理效果,阿特拉津平均出水浓度为0.84 mg/L,... 以生活污水为共基质,考察了基因工程菌在MBR和活性污泥反应器中对阿特拉津的生物强化处理效果,以及生物强化处理对污泥性状的影响.结果表明,基因工程菌在MBR中对阿特拉津具有很好的生物强化处理效果,阿特拉津平均出水浓度为0.84 mg/L,平均去除率为95%,最大去除负荷可以达到70 mg/(L.d).生物强化的MBR对生活污水中COD的平均去除率为71%,COD平均出水浓度65 mg/L,COD容积负荷增加对COD去除效果有一定影响;对生活污水中的氨氮具有很好的去除效果,氨氮平均出水浓度为1.1 mg/L,平均去除率为97%,最大氨氮去除负荷为143 mg/(L.d).与普通MBR污泥相比,生物强化MBR污泥的硝化活性和亚硝化活性略高,碳氧化活性略低,因此表现出氨氮处理效果很好,COD处理效果略差.阿特拉津的存在会对污泥性状产生影响,可能是造成污泥碳氧化活性低的原因. 展开更多
关键词 生物强化 基因工程菌 膜生物反应器 阿特拉津
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生技霉素稳定型基因工程菌的构建 被引量：28
10
作者 尚广东 戴剑漉 王以光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期171-175,共5页
运用同源重组技术将异戊酰基转移酶基因整合至螺旋霉素产生菌（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐｉｒａｍｙｃｅｔｉｃｕｓＦ２１）的染色体上，构建了稳定的生技霉素基因工程菌。在不加压的情况下传代，菌种携带选择性遗传标记情况、生长... 运用同源重组技术将异戊酰基转移酶基因整合至螺旋霉素产生菌（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐｉｒａｍｙｃｅｔｉｃｕｓＦ２１）的染色体上，构建了稳定的生技霉素基因工程菌。在不加压的情况下传代，菌种携带选择性遗传标记情况、生长、发酵效价及发酵产物的ＴＬＣ分析均表明此基因工程菌有较好的遗传稳定性，且发酵效价及产物的组分均得到改善。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明外源基因在螺旋霉素产生菌染色体上的整合情况。 展开更多
关键词 生技霉素 同源重组 基因工程菌 基因转化
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基因工程菌漆酶对蒽醌染料的脱色研究 被引量：10
11
作者 郭梅 路福平 +3 位作者 刘敏尧 李拖平 梁鹏 蒲军 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期133-136,共4页
利用基因工程菌甲醇毕赤酵母(PMAD16/pMETαA-Lcc1)培养产生的重组漆酶,研究了重组漆酶对蒽醌染料Remazol Brilliant Blue R脱色的影响。结果表明:重组漆酶对蒽醌染料RBBR脱色的最佳pH值为4.5,温度为45℃,当溶液中漆酶活力为10.0U/mL时... 利用基因工程菌甲醇毕赤酵母(PMAD16/pMETαA-Lcc1)培养产生的重组漆酶,研究了重组漆酶对蒽醌染料Remazol Brilliant Blue R脱色的影响。结果表明:重组漆酶对蒽醌染料RBBR脱色的最佳pH值为4.5,温度为45℃,当溶液中漆酶活力为10.0U/mL时,在最适脱色条件下作用14h,粗漆酶和纯化漆酶对蒽醌染料RBBR(80mg/L)的脱色率分别为95.2%和87.5%,重组漆酶可有效地使蒽醌染料RBBR脱色。 展开更多
关键词 基因工程菌 重组漆酶 蒽醌染料RBBR 脱色
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遗传稳定型六六六、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建及特性研究 被引量：8
12
作者 陆鹏 洪源范 +2 位作者 洪青 蒋新 李顺鹏 《环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1973-1976,共4页
通过转座子介导同源重组的方法,将甲基对硫磷水解酶基因mpd导入到六六六降解菌BHC-A的染色体上,构建了能同时降解六六六和甲基对硫磷的基因工程菌BHC-A-mpd.对其生长特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培养基中的生长特性与原始菌株... 通过转座子介导同源重组的方法,将甲基对硫磷水解酶基因mpd导入到六六六降解菌BHC-A的染色体上,构建了能同时降解六六六和甲基对硫磷的基因工程菌BHC-A-mpd.对其生长特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培养基中的生长特性与原始菌株没有差别,生长至对数期A600 nm值都可达到2.5;对六六六的降解特性和原始菌株相同,可在10 h内将5 mg/L的六六六完全降解.mpd基因在BHC-A-mpd中稳定表达,BHC-A-mpd可以降解多种有机磷类农药.该基因工程菌的构建为六六六和甲基对硫磷复合污染环境的生物修复奠定了基础. 展开更多
关键词 六六六 甲基对硫磷 生物降解 基因工程菌
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基因工程菌生物合成茶氨酸条件研究 被引量：10
13
作者 王丽鸳 王贤波 +1 位作者 成浩 周健 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期111-116,共6页
研究了不同诱导条件对基因工程菌催化合成茶氨酸的影响，确定了较为优化的诱导表达条件；通过单因子试验研究了不同反应条件对基因工程菌催化合成茶氨酸的影响，研究结果表明反应体系中较高的菌体浓度对催化茶氨酸有一定的抑制作用；高L... 研究了不同诱导条件对基因工程菌催化合成茶氨酸的影响，确定了较为优化的诱导表达条件；通过单因子试验研究了不同反应条件对基因工程菌催化合成茶氨酸的影响，研究结果表明反应体系中较高的菌体浓度对催化茶氨酸有一定的抑制作用；高L-Gln浓度可以提高茶氨酸的生成量，但是却降低了L-Gln的转化率；基因工程菌催化合成茶氨酸的最适pH是9．5左右，较为适合的反应温度是32℃-37℃。 展开更多
关键词 茶氨酸 基因工程菌 表达 生物合成
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多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1环境释放安全评价 被引量：6
14
作者 蒋建东 李荣 +2 位作者 郭新强 陈凯 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1479-1485,共7页
【目的】为了评价多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1的环境释放中间试验水平的安全性。【方法】通过农药检测、平板计数、Most probable number-PCR(MPN-PCR)和Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)等方法在江苏大丰进行了... 【目的】为了评价多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1的环境释放中间试验水平的安全性。【方法】通过农药检测、平板计数、Most probable number-PCR(MPN-PCR)和Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)等方法在江苏大丰进行了工程菌株m-CDS-1田间降解农药效果、定殖动态和对土壤微生物群落结构影响的研究。【结果】投加1.01×107CFU/g干土的工程菌株m-CDS-1在30d时均能完全降解10.71mg/kg的甲基对硫磷和1.29mg/kg的呋喃丹。平板计数表明工程菌株m-CDS-1在土壤中快速下降;MPN-PCR检测结果显示,在4d,15d和30d时,0～10cm混合土壤中该工程菌株的数目分别为2.15±0.98×106CFU/g干土,3.70±4.66×104CFU/g干土和检测不出。工程菌株m-CDS-1的投加不会对土壤可培养三大微生物菌群数量产生显著影响;基于细菌16S rDNA V3区的DGGE分析结果表明,施加农药对细菌菌落结构有显著影响,4d,11d,30d时农药施用区与空白对照区的图谱相似性分别为17.16%,49.81%和75.01%,但到60d时的相似性为98.62%。工程菌株m-CDS-1释放在前期对细菌群落结构有一定影响,4d,11d和30d工程菌株释放区相对于空白的相似性分别为49.57%,38.30%和83.30%。在60d时,空白、施药和施菌小区的图谱相似性都在90%以上。【结论】工程菌株m-CDS-1不仅可同时高效降解甲基对硫磷和呋喃丹,仍保持了实验室内的原有特性,而且不会成为优势菌群长期在土壤环境中存在,也不会对土壤微生物群落结构造成长期影响。 展开更多
关键词 基因工程菌株m—CDS-1 环境释放 安全评价 农药降解 Most PROBABLE number-PCR(MPN-PCR) Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)
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减毒鼠伤寒沙门氏菌全长hpaA基因工程菌的构建 被引量：6
15
作者 朱森林 陈旻湖 +2 位作者 陈洁 胡品津 李国庆 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期27-32,共6页
为构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ,并探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体构建H .pylori疫苗株的意义 ,应用PCR法从H .pylori基因组DNA中扩增 783bp的hpaA基因 ,经酶切 连接反应将其克隆入原核表达质粒pTrc99A的NcoⅠ SalⅠ位... 为构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ,并探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体构建H .pylori疫苗株的意义 ,应用PCR法从H .pylori基因组DNA中扩增 783bp的hpaA基因 ,经酶切 连接反应将其克隆入原核表达质粒pTrc99A的NcoⅠ SalⅠ位点 ,并进行了核苷酸序列测定。重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3 2 6 1 ,提取重组菌质粒 ,PCR和酶切鉴定 ,筛选阳性克隆。用SDS PAGE电泳和Westernblot进行HpaA表达分析和鉴定 ,用薄层扫描分析HpaA含量。重组菌C5 7BL 6小鼠喂灌 ,分批两d和 1 0d后处死小鼠 ,取脾和末段回肠进行细菌培养 ,挑菌落提质粒鉴定。结果表明 ,经PCR和酶切证实 ,构建了含 783bphpaA基因的重组原核表达质粒 ,并将后者成功转化了减毒鼠伤寒沙门氏菌。重组菌能表达约3 0kDHpaA蛋白 ,重组HpaA量约占全菌体蛋白量的 3 8 9% ,Westernblot证实其有免疫反应性。小鼠重组菌喂灌两d或 1 0d后 ,脾和末段回肠均发现携目的基因的菌落。这些结果提示 ,构建了表达H .pyloriHpaA的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ,为制备以减毒鼠伤寒沙门氏菌为抗原释放系统的H . 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 HPAA基因 鼠伤寒沙门氏菌 减毒疫苗 重组 基因工程菌
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耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件 被引量：8
16
作者 段绪果 沈微 +5 位作者 李艳丽 饶志明 唐雪明 方慧英 刘吉泉 诸葛健 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期74-78,共5页
利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后... 利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后对该工程菌在LB培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明:在LB培养基中,诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5 h,最大产酶量达到72.9 U/mL;在半合成培养基中,于30℃培养4 h,再于42℃诱导培养6 h,产酶量最高达到131 U/mL。 展开更多
关键词 耐热过氧化氢酶 基因工程菌 温控表达载体 发酵条件
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乙酸积累对基因工程菌培养的影响及与培养基pH的关系 被引量：13
17
作者 吴军 于公义 冯尔玲 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期433-437,共5页
在rIL-2工程菌K_(802)(pLY—4)高密度培养中,发现培养液中有大量代谢副产物乙酸积累,乙酸的存在对工程菌的生长和产物的表达均有明显的抑制作用,这种抑制作用是制约工程菌高密度培养的重要因素。为了减小这种抑制作用,初步研究了培养基p... 在rIL-2工程菌K_(802)(pLY—4)高密度培养中,发现培养液中有大量代谢副产物乙酸积累,乙酸的存在对工程菌的生长和产物的表达均有明显的抑制作用,这种抑制作用是制约工程菌高密度培养的重要因素。为了减小这种抑制作用,初步研究了培养基pH与乙酸抑制作用的关系,发现适当提高培养基pH值,能减小乙酸的抑制作用;高密度培养时,提高培养基的pH后,虽然仍有大量乙酸积累,但产物的表达水平和菌密度都有提高。 展开更多
关键词 基因工程菌 乙酸 培养基 PH值 微生物培养
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非均匀电场对土壤中基因工程菌的迁移与机理 被引量：7
18
作者 罗启仕 张锡辉 +1 位作者 王慧 钱易 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期285-289,共5页
以克隆有绿色荧光蛋白基因的Rm1021-GFP细菌作为标记细菌,研究了该细菌在非均匀电场作用下在土壤中的运移特征和存活性,分析了其运移机理和影响因素.结果表明,非均匀电场能有效地促进土壤中Rm1021-GFP细菌的运移,电泳、介电泳和随电渗... 以克隆有绿色荧光蛋白基因的Rm1021-GFP细菌作为标记细菌,研究了该细菌在非均匀电场作用下在土壤中的运移特征和存活性,分析了其运移机理和影响因素.结果表明,非均匀电场能有效地促进土壤中Rm1021-GFP细菌的运移,电泳、介电泳和随电渗析流迁移是其主要机理,土壤介质、电压梯度和电极反应是其主要影响因素,电极反应对电极附近细菌的存活性有不利影响. 展开更多
关键词 非均匀电场 基因工程菌 细菌迁移 细菌存活性
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利用基因工程菌去除电解废水中的汞离子 被引量：6
19
作者 邓旭 李清彪 +2 位作者 孙道华 黄益丽 Wilson David B 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期330-333,共4页
利用构建的基因工程菌生物富集真实电解废水中的汞离子 .电解废水中除含有 2 .5 8mg/L的汞离子外 ,还含有十种以上的其它成分 ,且 pH值为 9.6 .实验表明 ,与重组菌对只含汞离子的实验室模拟废水的处理结果比较 ,电解废水中其它组份的存... 利用构建的基因工程菌生物富集真实电解废水中的汞离子 .电解废水中除含有 2 .5 8mg/L的汞离子外 ,还含有十种以上的其它成分 ,且 pH值为 9.6 .实验表明 ,与重组菌对只含汞离子的实验室模拟废水的处理结果比较 ,电解废水中其它组份的存在意外地增大了重组菌富集汞离子的作用速率 ,但同时却使细菌的最大汞富集量降低了30 % .废水 pH的变化对重组菌的汞富集行为影响很小 ,说明该基因工程菌能在很宽的pH范围内有效地富集汞 .实验还考察了EDTA及离子强度对富集行为的影响 . 展开更多
关键词 电解废水 基因工程菌 生物富集 废水处理 汞离子 废水组成 酸碱度 离子强度
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促冻杀虫基因工程菌的构建 被引量：7
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作者 张新建 孙福在 +2 位作者 赵廷昌 丁爱云 唐朝荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期227-232,共6页
利用转座酶基因位于转座单位以外的微转座子载体,将冰核基因iceA置于转座单位里,构建了携带iceA的自杀性工程质粒pTnice1, 并进一步利用该质粒的接合转移特性和Tn5转座功能,将iceA整合到阴沟肠杆菌染色体DNA上,成功地构建了在无选择压... 利用转座酶基因位于转座单位以外的微转座子载体,将冰核基因iceA置于转座单位里,构建了携带iceA的自杀性工程质粒pTnice1, 并进一步利用该质粒的接合转移特性和Tn5转座功能,将iceA整合到阴沟肠杆菌染色体DNA上,成功地构建了在无选择压力下冰核基因仍稳定存在并有效表达冰核活性的促冻杀虫基因工程菌Enc1.2022ina。经应用试验证明,用该工程菌饲喂玉米螟幼虫,在饲菌后9 d内,虫体的过冷却点比不饲菌的对照提高10℃左右;在饲菌后第6天,于-5℃和-7℃低温下处理12 h,工程菌处理过的幼虫冻死率分别为85%和100%,而对照虫体的冻死率分别为0和5%。试验还证明,该工程菌可以在昆虫体内稳定定殖增生,在植物上附生定殖能力明显比野生型冰核细菌弱。因此,解决了阻碍冰核细菌促冻杀虫应用中的难题,为防治我国北方地区重要农林果树和仓储主要越冬害虫探索出了一条生防新途径。 展开更多
关键词 促冻杀虫基因工程菌 微转座子载体 冰核基因 生物防治 农业害虫 仓储害虫 越冬害虫 转基因
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