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基质辅助激光解吸飞行时间质谱技术快速检测水产品中5种致病菌
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作者 肖艳霞 董志军 +3 位作者 杨林军 朱家强 潘娟 钱云开 《食品安全质量检测学报》 2025年第1期28-35,共8页
目的建立水产品中5种常见致病菌的自动化快速高分辨检测手段,提高水产品致病微生物检测的效率和准确性。方法设计引物对霍乱弧菌、副溶血性弧菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌的特异基因owpW、tlh、invA、femA、p... 目的建立水产品中5种常见致病菌的自动化快速高分辨检测手段,提高水产品致病微生物检测的效率和准确性。方法设计引物对霍乱弧菌、副溶血性弧菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌的特异基因owpW、tlh、invA、femA、prfA进行多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增;设计特异探针以PCR产物为模板进行单碱基延伸,延伸产物在基质辅助激光解吸飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)上进行检测。基因owpW、tlh、invA、femA、prfA的探针分子量分别为4848、5435、5890、6560、7096 Da,单基因延伸后探针的分子量分别为5119 Da(加A)、5697 Da(加T)、6137 Da(加C)、6822 Da(加T)、7383 Da(加G)。最终确定的体系方法通过重现性试验、特异性试验、灵敏度试验、人工污染水产样本检测试验进行验证。结果以混合5种菌DNA的样本为模板做核酸质谱检测,对应的5个探针可以同时延伸,延伸效率大于80%,在以干扰菌为模板的样本中不会检出上述5种菌,检出沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌的灵敏度分别可达到150、350、160、130、180 CFU/mL。结论此方法展现出良好的重现性、特异性和灵敏度,可以满足一次反应同时检测水产品中上述5种微生物的需求。 展开更多
关键词 致病菌 辅助激光解吸飞行时间质谱技术 单碱延伸
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱结合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用
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作者 张肖 蔡辉 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第2期168-173,共6页
目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用。方法 收集2023年1-12月苏州市第九人民医院检验科血培养仪报警时间<48 h、单一病原菌感染的无菌体液阳性标... 目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用。方法 收集2023年1-12月苏州市第九人民医院检验科血培养仪报警时间<48 h、单一病原菌感染的无菌体液阳性标本(血液、胸腹水、胆汁、脑脊液)共284份。所有标本均通过比浊仪进行菌液浓度检测,利用MALDI-TOF MS技术,根据病原菌浓度对应的分值快速评估鉴定结果的可靠性。结果 使用MALDI-TOF MS进行菌种鉴定时,各菌种可信结果的最低菌液浓度如下:大肠埃希菌3.0 mcf(1 mcf=3×10^(8) CFU/mL),肺炎克雷伯菌2.0 mcf,金黄色葡萄球菌3.0 mcf,粪肠球菌3.5 mcf,念珠菌3.5 mcf。VITEK 2 鉴定、常规MALDI-TOF MS 鉴定与MALDI-TOF MS直接鉴定进行对比:常规MALDI-TOF MS鉴定与VITEK 鉴定结果一致的有282份;MALDI-TOF MS直接鉴定>1.7的有272份,灵敏度为95.8% (272/284)。三种鉴定法得到的鉴定结果差异无统计学意义(χ^(2)=2.09,P=0.55)。结论 MALDI-TOF MS技术联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌,是病原菌鉴定的可靠创新技术,优点为快速准确,为临床尽快提供病原学的检出依据,具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 比浊法 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 快速鉴定 无菌体液 病原菌
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基质辅助解析/电离-飞行时间质谱仪(MALDITOF MS)的使用维护与故障分析
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作者 王大刚 陈林 +3 位作者 潘成军 刘丹青 刘斌 王雷 《当代化工研究》 2024年第24期131-133,共3页
布鲁克公司生产的基质辅助解析/电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)具有测试快速、准确、灵敏度高、检测范围广等优点。在实际使用中,MALDI-TOF MS的管理和维护对于测试结果的可靠性和仪器安全稳定运行至关重要。介绍了MALDI-TOF MS的... 布鲁克公司生产的基质辅助解析/电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)具有测试快速、准确、灵敏度高、检测范围广等优点。在实际使用中,MALDI-TOF MS的管理和维护对于测试结果的可靠性和仪器安全稳定运行至关重要。介绍了MALDI-TOF MS的工作原理和基质、制样和实验室环境要求,总结了使用过程中遇到的问题并提出了解决方案。 展开更多
关键词 辅助解析/电离-飞行时间质谱 维护 故障分析
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法快速测定米饭和乳制品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide
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作者 曾羲 王宇 +3 位作者 徐巨才 黄穗东 王涓 徐振林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期232-238,共7页
建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考... 建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考察基质种类、点靶方式、基质溶剂和用量、激光强度等对Cereulide的质谱信号强度的影响,并进行方法学验证和实际样品检测。结果表明,选择以α-氰基-4-羟基肉桂酸为基质,均匀分散在50%乙腈-水(含0.1%三氟乙酸)中,采用先点基质再点样品的点样方式,反射线性正离子模式下选择激光强度70%进行食品中MALDI-TOF MS筛查时,可检测到Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰,此质谱信号稳定、强度高、响应重复性好。方法学验证结果表明,Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰在5~100 ng/mL范围内线性好,相关系数(r)>0.99;方法的检出限分别为3.0 ng/g和5.0 ng/g;对米饭和牛乳样品的加标回收率为73.3%~118.2%,相对标准偏差为0.3%~10.9%(n=6)。本方法分析速度快、准确性高、灵敏度好、抗干扰能力强、无需内标即可实现对米饭和乳制品中Cereulide的批量筛查和检测。 展开更多
关键词 辅助激光解吸-电离飞行时间质谱 蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 α--4-肉桂酸
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱快速检测生菜中嗜麦芽窄食单胞菌
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作者 魏超 代晓航 +3 位作者 张涛 杨强 李辉 刘文娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第23期303-309,共7页
目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)在即食果蔬中微生物风险监测的应用价值,确定生菜中的危害微生物及蛋白指纹图谱特征。方法对... 目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)在即食果蔬中微生物风险监测的应用价值,确定生菜中的危害微生物及蛋白指纹图谱特征。方法对成都地区50份生菜样品进行微生物的检测,对分离的嗜麦芽窄食单胞菌进行生化鉴定和MALDI-TOF MS鉴定,采用维恩分析(包括小于0.85‰偏差)对生菜中分离的嗜麦芽窄食单胞菌指纹图谱进行拟合,采用系统聚类法对分离的嗜麦芽窄食单胞菌指纹图谱进行聚类分析。结果50份生菜样品中检出11株嗜麦芽窄食单胞菌,MALDI-TOF MS获得其蛋白图谱拟合出特征性标识峰指纹图16组,与数据库中超级谱图比对有9组不同标识峰,为生菜分离菌特征峰;蛋白指纹图谱聚类结果表明嗜麦芽窄食单胞指纹图谱有一定来源指向性,但仍需更多数据修正。结论嗜麦芽窄食单胞菌在生菜中检出率较高,可作为危害风险特征微生物继续研究,MALDI-TOF MS可获得更多农产品中致病微生物特征信息,作为农产品危害识别微生物快速鉴定及差异性分析应更深入的研究和扩大数据量,并建立农产品微生物数据库系统。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 生菜 嗜麦芽窄食单胞菌 特征指纹图谱
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法测定α/β-二羰基类化合物与标准瓜氨酸化肽段之间的衍生化反应活性
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作者 李雁凤 周丹丹 +7 位作者 陈旭飞 赵娟娟 高春丽 邱兴泰 唐紫超 邓楠 赵伟宁 边阳阳 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期711-720,共10页
蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,... 蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,因此对蛋白质的瓜氨酸化修饰进行质谱分析面临着巨大挑战。通过对瓜氨酸侧链脲基进行化学衍生反应,可以提高瓜氨酸化肽段的m/z差值,引入亲和富集标签,可有效提高瓜氨酸化分析的灵敏度和精准度。本研究以标准瓜氨酸化肽段为研究对象,以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)为检测手段,对一系列二羰基类化合物与瓜氨酸化肽段之间的化学反应活性进行测定。在对α-二羰基类化合物的考察中发现,苯乙二醛、丙酮醛、1,2-环己二酮和1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮对瓜氨酸化肽段的衍生化效率很高,并且能够生成单一的衍生化产物;2,3-丁二酮、乙二醛与瓜氨酸化肽段之间的反应效率也很高,但会生成一系列副反应产物。在对β-二羰基类化合物的考察中发现,1,3-环己二酮、2,4-戊二酮在与瓜氨酸化肽段进行反应后,均可以产生单一的衍生化产物,但反应效率很低,不适用于瓜氨酸化肽段的化学衍生反应。实验结果表明,α-二羰基结构是实现高效、特异性瓜氨酸化肽段化学衍生反应的基础,α-二羰基类化合物中不同的侧链结构又决定了衍生化产物的结构、衍生化效率及副产物的生成。通过进一步合成含有亲和标签的α-二羰基类化合物,可以实现瓜氨酸化肽段的特异性富集和精准鉴定,有助于瓜氨酸化蛋白质及其位点鉴定的新方法开发。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 二羰结构 瓜氨酸化肽段 化学衍生
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基质辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱与电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱分析蛋白质 被引量:3
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作者 倪国新 朱镭 +4 位作者 马小土 徐学敏 胡晓芳 刘建华 李伟 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1291-1296,共6页
为比较基质辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)和电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)在蛋白质定性和定量分析方面的性能,分别利用两种仪器对用于相对和绝对定量的等量异位标签(iTRAQ)标记的雌激素刺激前后MCF... 为比较基质辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)和电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)在蛋白质定性和定量分析方面的性能,分别利用两种仪器对用于相对和绝对定量的等量异位标签(iTRAQ)标记的雌激素刺激前后MCF7细胞内的蛋白质水解产生的多肽进行了定性和定量分析。结果表明,用MALDI-TOF-TOF和ESI-Q-TOF方法分别鉴定出1086种和848种蛋白质,其中相同的蛋白质为633种;MALDI-TOF-TOF和ESI-Q-TOF方法分别找到38种和33种表达差异在0.5倍以上的蛋白质,其中3种为相同的蛋白质。实验数据说明,两种仪器在蛋白质定性和定量分析方面有很大的互补性,将两种仪器结合使用,不仅能够显著提高蛋白质定性和定量分析的覆盖率,而且可提高分析的置信度。 展开更多
关键词 等量异位标签 辅助激光解析电离-串联飞行时间质谱 电喷雾离子化-四极杆-飞行时间质谱 定性分析 定量分析
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱快速检测ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌 被引量:7
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作者 余佳佳 刘婧娴 +2 位作者 李媛睿 俞静 刘瑛 《检验医学》 CAS 2018年第6期536-542,共7页
目的采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选并验证ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌的特异峰,建立快速检测此型别肺炎克雷伯菌的方法。方法收集前期已进行碳青霉烯酶基因检测和多位点序列分型(MLST)的118株肺炎克雷伯菌作... 目的采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选并验证ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌的特异峰,建立快速检测此型别肺炎克雷伯菌的方法。方法收集前期已进行碳青霉烯酶基因检测和多位点序列分型(MLST)的118株肺炎克雷伯菌作为特异峰筛选组,其中ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌67株,非ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌51株,采用Clinpro Tools 3.0软件和Flex analysis 3.0图谱分析软件筛选出ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌的特异峰;再收集前期已进行碳青霉烯酶基因检测和MLST的另外89株肺炎克雷伯菌作为特异峰验证组,严格按照试验条件获得质量图谱,对特异峰的特异性进行验证并进行重复性试验;最后随机收集95株肺炎克雷伯菌临床分离株及其临床鉴定图谱,利用特异峰直接判断菌株是否为ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌,同时对菌株进行碳青霉烯酶基因检测和MLST,以评估特异峰的临床应用价值。结果利用分析软件筛选获得ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌的最佳特异峰为m/z 4 521;在试验条件下,以该峰作为检测此型别细菌的特异峰,其特异性和敏感性分别为98.1%和97.3%,且该特异峰的重复性达97.4%;采用临床鉴定图谱对特异峰的临床应用价值进行评估,其特异性和敏感性分别为95.2%和96.9%。结论 MALDITOF MS可检出ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌的特异峰m/z 4 521。可依据细菌鉴定图谱是否存在此特异峰来直接检测ST11型产KPC-2肺炎克雷伯菌,该特异峰具有较高的特异性和敏感性,可快速、准确地为临床合理、有效的治疗和医院感染的控制提供依据。 展开更多
关键词 辅助激光解析电离飞行时间质谱 特异峰 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 多位点序列分型
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应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱和N端测序鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构 被引量:6
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作者 王红霞 杨松成 +3 位作者 张学敏 蔡耘 桑志红 王杰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期312-316,共5页
目的 :应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI -TOF -MS)和N端测序方法鉴定重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构。方法 :1 用Edman降解法进行N端测序。 2 应用MALDI-TOF -MS测定分子量并鉴定纯度。 3 通过还原、... 目的 :应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI -TOF -MS)和N端测序方法鉴定重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构。方法 :1 用Edman降解法进行N端测序。 2 应用MALDI-TOF -MS测定分子量并鉴定纯度。 3 通过还原、烷基化确定rhGM -CSF分子中二硫键数目。 4 通过蛋白内切酶Glu -C酶切的肽质量指纹谱确证氨基酸序列并确证其中两对二硫键的配对。结果 :1 测定的rhGM -CSFN端 15个氨基酸序列与从cDNA推导的序列一致。 2 测定的rhGM -CSF分子量与理论计算值一致。 3 证明rhGM -CSF没有自由巯基 ,含有两对二硫键 ,与理论值一致。 4 证明rhGM -CSF的氨基酸序列是正确的 ,并确证其中的两对二硫键配对正确。结论 :确证重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构是正确的 ,没有修饰、变异和氨基酸的丢失。应用的方法灵敏、准确。 展开更多
关键词 重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子 辅助激光解析电离飞行时间质谱 N端测序 量指纹谱 RHGM-CSF
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测β-内酰胺酶的研究进展 被引量:8
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作者 余佳佳 俞静 刘瑛 《上海交通大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2017年第4期566-570,共5页
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种检测微生物的新型工具,不仅可用于微生物的快速鉴定,而且还可以检测细菌的耐药机制。产β-内酰胺酶是革兰阴性杆菌耐β-内酰胺类抗菌药物的主要耐药机制,目前利用MALDI-TOF MS快... 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种检测微生物的新型工具,不仅可用于微生物的快速鉴定,而且还可以检测细菌的耐药机制。产β-内酰胺酶是革兰阴性杆菌耐β-内酰胺类抗菌药物的主要耐药机制,目前利用MALDI-TOF MS快速检测细菌β-内酰胺酶的技术已被广泛报道,方法主要有检测β-内酰胺酶水解β-内酰胺类抗菌药物的活性,直接检测β-内酰胺酶分子、肽段或其相关蛋白以及检测β-内酰胺酶基因的单核苷酸多态性等。该文结合最新的研究成果对MALDI-TOF MS在β-内酰胺酶检测中的应用现状进行综述。 展开更多
关键词 辅助激光解析电离飞行时间质谱 Β-内酰胺酶 水解试验 单核苷酸多态性
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基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱在高分子聚合物研究应用中的样品制备方法 被引量:4
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作者 向弘 朱斌 +1 位作者 徐昕荣 胡朝辉 《广东化工》 CAS 2009年第8期85-86,117,118,共4页
在基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrum,MALDI-TOF-MS)研究高分子聚合物的过程中,样品的制备方法对获得准确的质谱图非常关键,样品制备必须选择合适的溶剂、... 在基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrum,MALDI-TOF-MS)研究高分子聚合物的过程中,样品的制备方法对获得准确的质谱图非常关键,样品制备必须选择合适的溶剂、基质和阳离子化试剂。文章就近年来MALDI-TOF-MS在高分子聚合物研究中的有关样品制备方法的发展进行综述。 展开更多
关键词 辅助激光解析电离 飞行时间质谱 高分子聚合物 样品制备
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)在食品药品中微生物检测的应用进展
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作者 刘音 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2024年第7期0135-0137,共3页
MALDI-TOFMS是一种微生物鉴定和分型的技术,它相较于传统方法展现出了显著的优势。通过分析国内外的研究现状,指出MALDI-TOFMS在临床病原微生物、食源性微生物及环境微生物的鉴定中具有较大优势。该技术不仅加快了微生物鉴定的进程,还... MALDI-TOFMS是一种微生物鉴定和分型的技术,它相较于传统方法展现出了显著的优势。通过分析国内外的研究现状,指出MALDI-TOFMS在临床病原微生物、食源性微生物及环境微生物的鉴定中具有较大优势。该技术不仅加快了微生物鉴定的进程,还提高了鉴定的效率和准确性,有助于更迅速地确定微生物感染的病因。此外,还探讨了MALDI-TOFMS在新领域的应用进展和所面临的挑战,展望了其在微生物学领域的广泛应用前景,为我国相关技术的发展提供了重要参考。 展开更多
关键词 微生物 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 鉴定
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半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析 被引量:1
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作者 黄益曼 李春晖 +5 位作者 柏家辉 陆颖洁 李添 董志颖 苏越 郭寅龙 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-236,共11页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。 展开更多
关键词 半夏 炮制方法 半夏凝集素(PTL) 纤维素纳米晶体(CNC) 辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在食源性致病菌鉴定中的应用 被引量:2
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作者 任婷 史敏 +2 位作者 刘聪慧 黄一刚 裴金金 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第5期62-68,共7页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为近年来发展的新型食源性致病菌鉴定技术,具有灵敏、准确、检测速度快等优点,该技术为食品病原微... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为近年来发展的新型食源性致病菌鉴定技术,具有灵敏、准确、检测速度快等优点,该技术为食品病原微生物靶标性监测和食品安全事件应急检验提供了一种高效的鉴别技术参考,在保障民众生命健康和经济社会发展上发挥了重要作用。本文检索了近年来国内外MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测中的相关研究案例,简要综述了MALDI-TOF MS检测原理、工作流程,影响鉴定结果的主要因素,介绍了MALDI-TOF MS技术应用于食源性致病菌检测中的实际案例,在此基础上分别从参考菌株数据库建设、标准化程序规范等方面对MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测领域的未来研究方向进行展望,以期为后续食品安全检测及快速监管食源性致病菌污染提供技术支持。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 食源性致病菌 鉴定
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基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)临床应用 被引量:2
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作者 汪正范 刘娜 张婷 《现代仪器》 2009年第6期78-78,共1页
医学诊断技术发展所追求的目标是能够有一种仪器,使临床医生通过一滴血液或唾液能够快速准确诊断出一个人可能患有的所有疾病.尽管近年来基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(maldi-Tof)在主要性能方面有所改进,但在临床应用方面仍然有... 医学诊断技术发展所追求的目标是能够有一种仪器,使临床医生通过一滴血液或唾液能够快速准确诊断出一个人可能患有的所有疾病.尽管近年来基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(maldi-Tof)在主要性能方面有所改进,但在临床应用方面仍然有很多问题亟待改进. 展开更多
关键词 辅助激光解析电离 飞行时间质谱 MALDI-TOF 准确诊断 医学诊断 临床应用 临床医生 技术发展 改进 仪器 血液 性能 问题 唾液 目标 疾病
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪微生物鉴定准确度快速评价参考品的研制 被引量:1
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作者 许庭莹 赵高岭 +3 位作者 刘美丽 刘东来 张园园 许四宏 《中国医药生物技术》 2024年第4期362-366,共5页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,可在短时间内完成对微生物种属水平的鉴定[1]。基本原理是使用已知菌种的蛋白... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,可在短时间内完成对微生物种属水平的鉴定[1]。基本原理是使用已知菌种的蛋白质图谱建立数据库,利用不同菌种核糖体蛋白(2~20 kD)大小的差异,将未知样本的检测图谱与数据库中的微生物参考图谱进行比对,鉴定结果[2-3]。与传统的微生物表型和生理生化检测方法相比,质谱鉴定的分子量范围大、扫描速度快、操作通量高,且对样品纯度要求不高[4]。除了可鉴定常见细菌和真菌,对临床厌氧菌、苛养菌、丝状真菌以及分枝杆菌等疑难微生物和相对复杂样品的鉴定能力也更强,同时对耐药微生物的鉴定准确性相对较好[5]。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 微生物鉴定 参考品 苛养菌 分枝杆菌 蛋白图谱 分子量范围 快速评价
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌δ-毒素的应用 被引量:4
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作者 郭庆昕 杨滨 强华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第4期455-460,共6页
目的本研究采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)检测δ-毒素,评估其在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分型和毒力表达中的作用。方法使用Bruker microflex MALDI-TOF仪器,采集2000~20000Da质量范围内,以正线性模式采... 目的本研究采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)检测δ-毒素,评估其在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分型和毒力表达中的作用。方法使用Bruker microflex MALDI-TOF仪器,采集2000~20000Da质量范围内,以正线性模式采集图谱,使用仪器配套的MALDI Biotyper 2.0软件分析MRSA菌株的原始图谱,产生的峰列表直接使用flexAnalysis、clinProTools 3.0软件分析。结果本研究中共检测83株MRSA,共有39(47.0%)株MRSA检出(3005±5)m/z信号峰,其中HA-MRSA19(22.9%)株,CA-MRSA20(26.5%)株,P=0.766,两者之间无显著性差异;33(39.8%)株MRSA检出(3035±5)m/z信号峰,其中HA-MRSA9(10.8%)株,CA-MRSA24(28.9%)株,P=0.003,两者之间有显著性差异;11(13.%)株MRSA既未检出(3005±5)m/z信号峰也未检出(3035±5)m/z信号峰,全部为HA-MRSA菌株。spa分型中检出(3005±5)m/z信号峰,15(18.1%)株为t062型,8株为t015(9.6%)型,4株为t030(4.8%)株,P=0,有显著性差异;检出(3035±5)m/z信号峰,31(37.3%)株为t437型,2(2.4%)株t8660型,P=0,有显著性差异;(3035±5)m/z作为spat437型特征信号ROC曲线下面积0.89,P=0。11株未检出δ-毒素,6株分离自骨关节标本,3株分离自呼吸道标本,1株分离自慢性溃疡的分泌物标本,1株分离自血液;在血平板的菌落特征,6株MRSA菌落形态发生改变,5株菌落形态正常。结论MALDI-TOF MS使用常规方法即可快速检测MRSA的δ-毒素,其质谱峰为(3005±5)m/z和(3035±5)m/z两种;(3035±5)m/z是δ-毒素的同基因变异体(HldG10S)的质谱峰,该峰可快速鉴别spat437型;不产生δ-毒素的菌株是agr调控系统失调的表现,与慢性感染、小菌落形成、无明显β-溶血有关。 展开更多
关键词 辅助激光解析电离飞行时间质谱 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 δ-毒素
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金黄色葡萄球菌基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱的鉴定与聚类分型 被引量:9
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作者 陈志敏 张亦琴 +6 位作者 胡连霞 陈敏娜 姜彦芬 孙晓霞 杨倩 张伟 王建昌 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第18期6055-6061,共7页
目的建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption lonization-time offlight mass spectrometer,MALDI-TOF MS)快速鉴定金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)并自建数据库,进行聚类分型。方... 目的建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption lonization-time offlight mass spectrometer,MALDI-TOF MS)快速鉴定金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)并自建数据库,进行聚类分型。方法基于MALDI-TOF MS技术,对经全自动微生物分析仪(VITEK2 COMPACT)鉴定为S.aureus的25株分离株和1株标准菌株(ATCC 25923)进行鉴定。并进一步采集26株S.aureus特征性蛋白质指纹图谱,使用flex Analysis软件进行分析,汇总成标准图谱并构建本地分离株S.aureus的鉴定数据库,命名为Staphylococcus aureus。结果经标准菌株ATCC 25923验证,自建数据库对S.aureus鉴定结果的可信度较设备自带数据库明显提高,鉴定分值由2.251提高到了2.845。自建数据库进一步对26株S.aureus进行聚类分型,在差异水平100时,24株不同来源S.aureus被聚类成24个分支,将食品中不同来源分离的S.aureus分为24个型。结论MALDI-TOF MS作为一种快速、准确、高通量的全新微生物鉴定技术,实现了对S.aureus的特异性快速鉴定与分型,能够满足公共安全卫生、突发食品安全事件和口岸快速通关方面的需求。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 鉴定 聚类分型
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基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法对铜绿假单胞菌的鉴定与聚类分析 被引量:8
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作者 孙晓霞 张亦琴 +6 位作者 王旭旭 陈敏娜 姜彦芬 杨倩 张伟 胡连霞 王建昌 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第18期6047-6054,共8页
目的建立基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption lonization-time offlight mass spectrometery,MALDI-TOF MS)快速鉴定和聚类分析铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)。方法将全自动... 目的建立基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption lonization-time offlight mass spectrometery,MALDI-TOF MS)快速鉴定和聚类分析铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)。方法将全自动微生物分析仪鉴定为P.aeruginosa的20株分离株和1株标准菌株(CICC 21636)进行MALDI-TOF MS检测。经离线微生物鉴定软件分析,所有菌株均报告为P.aeruginosa。获取21株P.aeruginosa的特征蛋白质指纹图谱,建立命名为Pseudomonas aeruginosa的自建数据库,并采用P.aeruginosa标准菌株CICC 21636进行验证。结果Pseudomonas aeruginosa自建数据库对P.aeruginosa的鉴定结果较设备自带数据库明显提高。而且自建数据库信息基础上,进一步对21株P.aeruginosa进行聚类分型,实现了对不同来源P.aeruginosa可能污染源的追溯。结论作为一种快速、准确、高通量的全新技术手段,MALDI-TOF MS能够实现对P.aeruginosa的特异性快速鉴定,能满足在公共安全卫生、突发食品安全事件和口岸快速通关方面对P.aeruginosa的快速鉴定需求。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 辅助激光解析电离-飞行时间质谱 鉴定 聚类分析
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ZnO、CuO和NiO纳米颗粒在基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子化合物中的应用 被引量:7
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作者 杨梦瑞 王敏 +2 位作者 汤晓艳 周剑 毛雪飞 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1058-1062,共5页
考察了过渡金属氧化物ZnO纳米颗粒直接作为无机基质,应用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法分析糖类、硬脂酸小分子物质的效果;同时以L-精氨酸为目标分析物,初步探讨了Cu O和Ni O两种纳米颗粒直接作为无机基质,对L-... 考察了过渡金属氧化物ZnO纳米颗粒直接作为无机基质,应用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法分析糖类、硬脂酸小分子物质的效果;同时以L-精氨酸为目标分析物,初步探讨了Cu O和Ni O两种纳米颗粒直接作为无机基质,对L-精氨酸选择性离子化的可行性。实验中,将待分析物与纳米颗粒悬浮液直接混合于样品板上,自然蒸干溶剂形成结晶状,采用337 nm波长的紫外激光辐照激发,在反射模式的TOF-MS条件下检测分析。结果表明,ZnO纳米颗粒作为一种半导体材料,具有较强的紫外吸收,可直接作为无机基质,能够避免使用传统基质带来的干扰,简化质谱图,尤其在负离子模式下能够提高硬脂酸离子化的峰强度。此外,通过比较Cu O和Ni O纳米颗粒对于L-精氨酸分析检测结果的差异性,初步实现了Cu+对L-精氨酸的选择性检出。 展开更多
关键词 纳米颗粒 辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 有机小分子
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