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BNIP3L介导的线粒体自噬在镉致大鼠大脑皮质神经元凋亡中的作用 被引量:1
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作者 闻双全 王亮 +1 位作者 方兰 袁燕 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2025年第1期50-56,共7页
为探究线粒体自噬受体Bcl-2/腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3样(BNIP3L)介导的线粒体自噬对镉致大鼠大脑皮质神经元凋亡的调控作用,利用RNA干扰技术建立大鼠大脑皮质神经元BNIP3L基因沉默模型,并经10μmol/L镉处理12 h,Western blot检测B... 为探究线粒体自噬受体Bcl-2/腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3样(BNIP3L)介导的线粒体自噬对镉致大鼠大脑皮质神经元凋亡的调控作用,利用RNA干扰技术建立大鼠大脑皮质神经元BNIP3L基因沉默模型,并经10μmol/L镉处理12 h,Western blot检测BNIP3L、帕金森氏蛋白2(Parkin)和线粒体凋亡通路相关蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3的表达水平,免疫荧光染色检测BNIP3L与线粒体标志蛋白TOMM20共定位,透射电镜检测细胞内线粒体自噬体数目,FITC Annexin V染色检测细胞凋亡水平。结果:大鼠大脑皮质神经元经镉处理12 h后,BNIP3L蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),BNIP3L与TOMM20共定位增加,沉默BNIP3L极显著抑制镉致Parkin线粒体转位(P<0.01),抑制镉致细胞内线粒体自噬体形成,极显著促进镉致caspase-9、caspase-3激活和神经元凋亡(P<0.01)。结果表明,BNIP3L介导的线粒体自噬可抑制镉致大鼠大脑皮质神经元凋亡。 展开更多
关键词 大鼠大脑皮质神经元 BNIP3L 线粒体自噬 凋亡
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新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法的建立及其活性鉴定 被引量:25
2
作者 梅莉 路浩 +1 位作者 刘宗平 何玉琴 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期264-268,共5页
采用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜对新生24h内SD大鼠大脑皮质原代培养的神经元进行了形态学观察,建立了大脑皮质神经元原代培养方法。应用2.5μg/mL阿糖胞苷(Ara-C)对培养3d的神经元进行24h干预,去除神经胶质细胞、成纤维... 采用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜对新生24h内SD大鼠大脑皮质原代培养的神经元进行了形态学观察,建立了大脑皮质神经元原代培养方法。应用2.5μg/mL阿糖胞苷(Ara-C)对培养3d的神经元进行24h干预,去除神经胶质细胞、成纤维细胞、神经干细胞等杂质细胞,以提高神经元产率;用Nissl’s染色法进行神经元鉴定;利用微量滴定(MTT)法测定了一个培养周期(约10d)的神经元活性分布。光学显微镜观察结果表明,培养至第4h绝大多数神经元已贴壁生长,胞体上可见1~2个细小突起;培养至第3d、第6d时,Nissl’s染色结果显示,加Aralc能显著提高神经元纯度(≥929/6);MTT结合形态学观察结果表明,神经元培养至第6d时活性最强,细胞呈卵圆形、蜘蛛状、锥体状等多种形态,细胞胞体饱满,光晕明显,神经网络形成完整。 展开更多
关键词 大脑皮质神经元 原代培养 MTT Nissl’s染色 活性鉴定
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胎鼠大脑皮质神经元的体外培养及鉴定 被引量:12
3
作者 罗湘颖 杨志敏 +2 位作者 王廷华 刘苏 赵匡彦 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期505-508,共4页
为了建立SD大鼠大脑皮质神经元的分离、培养及免疫细胞化学鉴定技术,本研究通过分离孕15 d SD胎鼠大脑皮质组织,经机械吹打后,加入含有5%马血清、5%小牛血清的MEM培养基接种在24孔培养板中进行原代培养,并于第3 d在培养基中加入阿糖... 为了建立SD大鼠大脑皮质神经元的分离、培养及免疫细胞化学鉴定技术,本研究通过分离孕15 d SD胎鼠大脑皮质组织,经机械吹打后,加入含有5%马血清、5%小牛血清的MEM培养基接种在24孔培养板中进行原代培养,并于第3 d在培养基中加入阿糖胞苷抑制胶质细胞的生长,于第9 d将细胞固定后采用免疫细胞化学技术检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果表明从孕15 d SD胎鼠大脑皮质分离的神经元纯度高,生长旺盛,形态典型,90%以上表达NSE免疫阳性。该结果提示我们建立的培养大鼠大脑皮质神经元的方法易于标准化操作,结果稳定,值得推广应用。 展开更多
关键词 大脑皮质神经元 胎鼠 NSE SD 表达 体外培养 免疫阳性 胶质细胞 原代培养 免疫细胞化学
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阿魏酸及其酯化产物与体外培养大鼠大脑皮质神经元的存活 被引量:6
4
作者 盛艳梅 张静 +1 位作者 罗维早 张艺 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第41期7730-7733,共4页
背景:大量体外筛选中得到的中药脑神经保护活性成分,多因脂溶性低难以透过血脑屏障而限制了其临床应用。目的:比较阿魏酸及其酯化产物阿魏酸甲酯、乙酯对原代培养的大鼠大脑皮质神经元体外存活的保护作用。方法:出生1d内的乳鼠采用酶消... 背景:大量体外筛选中得到的中药脑神经保护活性成分,多因脂溶性低难以透过血脑屏障而限制了其临床应用。目的:比较阿魏酸及其酯化产物阿魏酸甲酯、乙酯对原代培养的大鼠大脑皮质神经元体外存活的保护作用。方法:出生1d内的乳鼠采用酶消化法分离培养大脑皮质神经元。培养6d后,分别进行阿魏酸、阿魏酸甲酯及乙酯干预,继续培养1d。结果与结论:形态学观察结果显示细胞生长良好,NSE染色检查表明培养6d的存活细胞大部分均为神经元。MTT比色法测量结果显示,与空白对照组比较,阿魏酸仅在质量浓度为200mg/L时有明显促进大脑皮质神经元存活的作用,而阿魏酸甲酯、乙酯在质量浓度为0.16~20mg/L时均能明显促进神经元体外存活,且作用趋势、作用强度相近。表明阿魏酸的酯化产物阿魏酸甲酯和阿魏酸乙酯均能促进原代培养的大脑皮质神经元体外存活,显示出较好的脑神经元保护作用,且活性比阿魏酸更强。 展开更多
关键词 川芎 阿魏酸 酯化产物 大脑皮质神经元 细胞培养 脑缺血
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工频磁场对胎鼠大脑皮质神经元影响 被引量:6
5
作者 张莹 李伯勤 +4 位作者 董娟 辛华 朱传菊 逯素梅 刘鲁华 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期503-504,共2页
关键词 工频磁场 大脑皮质神经元 胎鼠 脂质过氧化物 超氧化物歧化酶 脊髓神经细胞 氧化应激 生物机体
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银杏内酯B对谷氨酸诱导大鼠大脑皮质神经元氧化损伤的影响 被引量:8
6
作者 蔡卫斌 臧颖 余明华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期256-260,共5页
【目的】探讨银杏内酯B(ginkgolide B)对谷氨酸(glutamate)引起原代培养的脑皮质神经元氧化损伤的保护作用。【方法】采用改良的方法原代培养胎鼠脑皮质神经元,用噻唑蓝(MTT)及乳酸脱氢酶法分别检测神经元的存活率和损伤情况;用硫代巴... 【目的】探讨银杏内酯B(ginkgolide B)对谷氨酸(glutamate)引起原代培养的脑皮质神经元氧化损伤的保护作用。【方法】采用改良的方法原代培养胎鼠脑皮质神经元,用噻唑蓝(MTT)及乳酸脱氢酶法分别检测神经元的存活率和损伤情况;用硫代巴比妥酸法测定细胞脂质过氧化的程度;并同时检测了细胞内抗氧化酶的活性。【结果】银杏内酯B(10~100μmol/L)能剂量依赖性地抑制谷氨酸(0.8 mmol/L)引起的细胞存活率下降和细胞损伤,同时提高细胞内抗氧化酶活性和减轻细胞脂质过氧化。【结论】银杏内酯B可拮抗谷氨酸所致的神经细胞毒性作用,这可能与其能提高神经细胞内抗氧化酶活性和清除氧自由基有关。 展开更多
关键词 银杏内酯B 谷氨酸 大鼠 大脑皮质神经元 氧化损伤 氧自由基
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hTERT基因转染对人胚胎大脑皮质神经元生长的影响 被引量:7
7
作者 张洁 廖亚平 +3 位作者 吴灵芝 孔令平 郑敏 汪华侨 《解剖学研究》 CAS 2008年第4期251-254,260,共5页
目的观察hTERT基因转染后对人胚胎大脑皮质神经元生长活力的影响。方法制备pSU-CMV-hTERT腺病毒,以MOI感染人胚胎大脑皮质神经元。免疫细胞化学荧光染色观察神经元内hTERT表达。MTT法测量接种病毒后24h、72h、1周、2周、3周的神经元活... 目的观察hTERT基因转染后对人胚胎大脑皮质神经元生长活力的影响。方法制备pSU-CMV-hTERT腺病毒,以MOI感染人胚胎大脑皮质神经元。免疫细胞化学荧光染色观察神经元内hTERT表达。MTT法测量接种病毒后24h、72h、1周、2周、3周的神经元活力。结果经鉴定正确的重组质粒pSU-CMV-hTERT与骨架质粒正确重组,经包装扩增后得到含hTERT基因的腺病毒。病毒转染24h时荧光染色可见神经元内有hTERT表达,第3周末表达减弱。hTERT基因转染后的神经元平均活力较对照组高,转染病毒后24h、72h、1周、2周、3周,hTERT基因转染对神经元的保护率分别为27.4%、42.4%、17.3%、7.4%和15.9%。结论hTERT基因转染对人胚胎大脑皮质神经元有一定的保护作用。 展开更多
关键词 人端粒酶催化亚基(hTEET) 端粒酶 大脑皮质神经元 阿尔茨海默病
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丁基苯酞抗大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧损伤及其机制 被引量:7
8
作者 吴丽蓉 罗勇 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期366-370,共5页
本研究探讨丁基苯酞抗大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧损伤及其机制。原代培养大鼠大脑皮质神经元,建立氧糖剥夺/复氧模型(OGD/R),采用MTT法、酶学检查、免疫组化、RT-PCR等观察丁基苯酞(各浓度组)的保护作用及其机制。在氧糖剥夺4 h/... 本研究探讨丁基苯酞抗大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧损伤及其机制。原代培养大鼠大脑皮质神经元,建立氧糖剥夺/复氧模型(OGD/R),采用MTT法、酶学检查、免疫组化、RT-PCR等观察丁基苯酞(各浓度组)的保护作用及其机制。在氧糖剥夺4 h/复氧8 h时丁基苯酞各浓度组可增加神经元的细胞活力和减少神经元LDH(乳酸脱氢酶)的释放,可显著降低神经元表达iNOS mRNA(诱生型一氧化氮合酶)和NF-κB(核因子κB)p65蛋白(增加)。不同剂量丁基苯酞(100、10、1和0.1μmol.L-1)在增加细胞活力、减少LDH释放及降低神经元表达iNOSmRNA等方面,高浓度的作用强于低浓度,且丁基苯酞100μmol.L-1组与吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)100μmol.L-1组差异显著。在OGD 4 h/R 8 h时丁基苯酞可能抑制iNOSmRNA的表达及NF-κB的活化,从而有效保护氧糖剥夺/复氧中损伤的大脑皮质神经元。 展开更多
关键词 丁基苯酞 核因子κB 氧糖剥夺/复氧 大脑皮质神经元 诱生型一氧化氮合酶
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Sertoli细胞对体外培养的大脑皮质神经元的营养作用 被引量:6
9
作者 上官芳芳 史小林 《首都医科大学学报》 CAS 2003年第3期247-250,共4页
为研究睾丸支持细胞 (Sertolicells,SCs)对体外培养的大脑皮质神经元的营养作用 ,采用 2种实验方法 :1 )将Sertoli细胞与大脑皮质神经元共培养 ;2 )在神经元培养基内添加Sertoli细胞条件培养基 (Sertolipreconditionedmedium ,SCM)。结... 为研究睾丸支持细胞 (Sertolicells,SCs)对体外培养的大脑皮质神经元的营养作用 ,采用 2种实验方法 :1 )将Sertoli细胞与大脑皮质神经元共培养 ;2 )在神经元培养基内添加Sertoli细胞条件培养基 (Sertolipreconditionedmedium ,SCM)。结果 :在培养早期SCs能显著促进大脑皮质神经元的贴壁 ,对神经元胞体及突起的生长也有显著的效果 ,培养晚期SCs组的神经元生长状况也显著优于DMEM培养组和SCM组 ,说明SCs对神经元有显著的促生长作用 ; 展开更多
关键词 SERTOLI细胞 体外培养 大脑皮质神经元 营养作用 睾丸支持细胞 SCS 细胞培养
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NF-κB靶向性哑铃形“圈套”ODNs抑制大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后TNF-α的表达 被引量:3
10
作者 何兰英 罗勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期318-321,共4页
目的设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4h/R6h组、NF-κB d... 目的设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4h/R6h组、NF-κB decoy ODNs组、无关decoy ODNs组、脂质体组为实验组,采用Western blot检测NF-κB p65蛋白表达,分别采用免疫细胞化学和逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测TNF-α蛋白和mRNA表达。结果Westernblot检测显示NF-κB decoy ODNs组NF-κB P65蛋白表达明显低于OGD4h/R6h组、脂质体组、无关decoy ODNs组(P<0.05),与OGD4h/R6h组、脂质体组、无关decoy组相比NF-κB decoy ODNs组TNF-α蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);而脂质体组、无关decoy ODNs组对NF-κB P65蛋白、TNF-α蛋白和mRNA表达未见抑制(P>0.05)。结论靶向性NF-κB的哑铃形圈套ODNs可有效抑制大脑皮质神经元OGD/R后炎症因子TNF-αmRNA及蛋白的表达。 展开更多
关键词 NF-ΚB DECOY ODNs 大脑皮质神经元 氧糖剥夺/复氧 肿瘤坏死因子-Α
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SYK调控缺氧/缺糖损伤诱导的大脑皮质神经元凋亡及其机制 被引量:1
11
作者 张志鑫 崔应麟 +2 位作者 李彦杰 任锟 邢若星 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期1381-1386,共6页
目的探讨抑制脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,SYK)对缺氧/缺糖损伤诱导的大脑皮质神经元的凋亡的影响及相关机制。方法分离培养10只SD怀孕大鼠(190~230 g,胎龄16 d)胎鼠的大脑皮质神经元细胞并用MAP2免疫荧光法进行鉴定。建立缺氧... 目的探讨抑制脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,SYK)对缺氧/缺糖损伤诱导的大脑皮质神经元的凋亡的影响及相关机制。方法分离培养10只SD怀孕大鼠(190~230 g,胎龄16 d)胎鼠的大脑皮质神经元细胞并用MAP2免疫荧光法进行鉴定。建立缺氧/缺糖损伤的体外模型,caspase-3荧光检测试剂盒检测caspase-3活性,Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡,q RT-PCR检测SYK和凋亡相关的原癌基因Fra-1 m RNA的表达,Western Blot检测SYK、Bcl-2和Fra-1蛋白的表达。Control组:无转染处理的缺氧/缺糖损伤的神经元;SYK siRNA组:转染SYK siRNA的缺氧/缺糖损伤的神经元;SYK-Fra-1 siRNA组:同时转染SYK siRNA和Fra-1 siRNA的缺氧/缺糖损伤的神经元;non-specific siRNA组:转染non-specific siRNA的氧/缺糖损伤的神经元。结果 MAP2免疫荧光鉴定为神经元细胞。缺氧/缺糖损伤诱导神经元SYK表达(P<0.01),RNA干扰抑制SYK表达后caspase-3活性(P<0.05)和细胞凋亡(P<0.01)均显著降低,但是Fra-1 m RNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达量明显上升。用RNA干扰技术同时抑制SYK和Fra-1后,caspase-3活性(P<0.01)显著上升但Bcl-2蛋白表达(P<0.01)显著降低。结论 Fra-1介导了SYK对缺氧/缺糖损伤诱导的神经元凋亡的调节,为脑卒中所致的神经元缺血性损伤的治疗提供了新的靶点。 展开更多
关键词 SYK Fra-1 缺氧/缺糖损伤 大脑皮质神经元 凋亡
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氧化应激诱发大脑皮质神经元凋亡的体外实验研究 被引量:1
12
作者 于如同 高立达 +3 位作者 官鹏 毛伯镛 姜曙 孙兵 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期108-108,120,128,共3页
关键词 氧化应激 大脑皮质神经元 细胞凋亡 体外实验
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提高大脑皮质神经元细胞产率以及活性的研究 被引量:2
13
作者 武俏丽 刘恩重 +1 位作者 张相彤 隋立森 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2001年第1期62-63,F004,共3页
目的 提高培养大脑皮质神经元的产率以及活性 ,使实验的细胞模型有良好的一致性和可比性。方法 实验分析了大脑皮质神经元培养过程中 ,从选材、取材到分散细胞等一系列步骤中维持细胞活性的内在因素 ,应用细胞形态学指标 ,Trypanblue... 目的 提高培养大脑皮质神经元的产率以及活性 ,使实验的细胞模型有良好的一致性和可比性。方法 实验分析了大脑皮质神经元培养过程中 ,从选材、取材到分散细胞等一系列步骤中维持细胞活性的内在因素 ,应用细胞形态学指标 ,Trypanblue染色计数分析以及染色观察。结果 每侧大脑皮质得到细胞约 2 .5× 10 6~ 3.0× 10 6个 ,而且种植不同时间 6 ,12 ,48h细胞存活率均在 95 %以上。结论 该法是较好的大脑皮质神经元培养方法。 展开更多
关键词 细胞培养 大脑皮质神经元 细胞产率 活性
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一种改良后的大脑皮质神经元细胞的原代培养模型建立及鉴定 被引量:2
14
作者 张磊 韩延峰 +4 位作者 戴朝 李阳 胡玉奇 陈富雷 赵冬 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第1期100-105,共6页
目的在传统的大脑皮质神经元的提取和培养方法基础上进行优化改良以获得高收率、高纯度、高质量、低死亡率、背景干净的皮质神经元细胞。方法分别采用传统的含EDTA的0.25%Trypsin分离培养的皮质神经元,与改良后用混有Tryple Express和Dn... 目的在传统的大脑皮质神经元的提取和培养方法基础上进行优化改良以获得高收率、高纯度、高质量、低死亡率、背景干净的皮质神经元细胞。方法分别采用传统的含EDTA的0.25%Trypsin分离培养的皮质神经元,与改良后用混有Tryple Express和DnaseI的消化液,经弹拨分散、手法震荡,提前一次离心后种植培养的皮质神经元。接种后的第1、3、5、6、7 d,显微镜观察细胞形态,第7 d用免疫荧光法对神经元细胞进行鉴定以及检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量。结果与传统的胰酶提取方法相比,改良后获得的皮质神经元生长状态更优,突触发育良好,双极神经元形态典型,杂质细胞及碎片含量少,背景干净,且具有高纯度和高存活率的特性。结论本研究在组织细胞分离消化,弹拨分散、手法震荡,提前一次离心,多重细节方面进行了探索与改良后成功建立了一种结果稳定,简单可行的皮质神经元原代培养方法,是研究神经科学领域较为理想的模型。 展开更多
关键词 大脑皮质神经元 Tryple Express 神经元特异性烯醇化酶 乳酸脱氢酶 免疫荧光染色
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bFGF对成年大鼠损伤的大脑皮质神经元的作用 被引量:11
15
作者 汪春风 黄连碧 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期327-330,共4页
实验用SD大鼠40只,其中30只分为实验组和对照组各15只,切片用甲基绿-派洛宁染色;另10只也分为实验组和对照组,各5只,切片用神经丝免疫组化染色.手术毁损大鼠大脑顶叶皮质,立即放入分别浸有碱性成纤维细胞生长因子(... 实验用SD大鼠40只,其中30只分为实验组和对照组各15只,切片用甲基绿-派洛宁染色;另10只也分为实验组和对照组,各5只,切片用神经丝免疫组化染色.手术毁损大鼠大脑顶叶皮质,立即放入分别浸有碱性成纤维细胞生长因子(实验组)或PBS(pH7.2,0.2moL/M)(对照组)的海绵胶粒(1mm3),于术后14d,24d,34d在损伤的皮质腔内重复注射相应的实验用液25μl.术后40d取材,在大脑皮质损伤腔颞侧边缘Ⅱ~Ⅲ层距边缘500μm范围内,对每只大鼠计数了1mm2面积中的存活神经元数目,并观察神经元的形态学变化.结果发现,实验组大脑皮质存活神经元数目较多,对照组存活神经元较少.经体视学定量方法分析,结果其均数±标准差为:实验组919.45±165.40,对照组628.39±57.50/mm2,经两样本均数t检验,P<0.05.提示碱性成纤维细胞生长因子对大鼠大脑皮质损伤神经元有一定的维持存活作用. 展开更多
关键词 大鼠 成纤维细胞 生长因子 大脑皮质神经元 损伤
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大鼠严重烧伤后大脑皮质神经元和腓肠肌细胞bcl-2、HSP70蛋白的表达及意义 被引量:1
16
作者 王水明 刘友生 陈锐 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期256-258,354,共4页
目的 探讨大鼠严重烧伤后大脑皮质神经元和腓肠肌细胞bcl 2、HSP70蛋白的表达及其意义。方法 应用免疫组化SP法检测大鼠体表总面积 (TBSA)为 30 %Ⅲ度烧伤后大脑皮质及腓肠肌组织bcl 2、HSP70蛋白的表达及动态变化。结果 严重烧伤后 ... 目的 探讨大鼠严重烧伤后大脑皮质神经元和腓肠肌细胞bcl 2、HSP70蛋白的表达及其意义。方法 应用免疫组化SP法检测大鼠体表总面积 (TBSA)为 30 %Ⅲ度烧伤后大脑皮质及腓肠肌组织bcl 2、HSP70蛋白的表达及动态变化。结果 严重烧伤后 1- 3hbcl- 2、HSP70在大脑皮质神经元胞浆呈中度阳性表达 ,此后呈阴性 ;而在腓肠肌呈强阳性表达且持续至伤后 12h ,两种蛋白的表达强度及持续时间与细胞的损伤程度密切相关。结论 严重烧伤后bcl 2。 展开更多
关键词 大鼠 严重烧伤 大脑皮质神经元 腓肠肌细胞 BCL-2 HSP70蛋白 表达
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大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后NF-κB P50及c-Rel蛋白的表达 被引量:1
17
作者 何兰英 罗勇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1333-1336,共4页
目的:探讨Wistar大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后不同时间点NF-κB亚基P50及c-Rel蛋白表达情况。方法:体外培养原代大脑皮质神经元,采用免疫细胞化学鉴定神经元,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD 4h组、OGD 4h/R2h组、OGD... 目的:探讨Wistar大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后不同时间点NF-κB亚基P50及c-Rel蛋白表达情况。方法:体外培养原代大脑皮质神经元,采用免疫细胞化学鉴定神经元,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD 4h组、OGD 4h/R2h组、OGD 4h/R6h组、OGD 4h/R12h组、OGD 4h/R24h组为实验组,采用免疫细胞化学、Western印迹检测NF-κB亚基P50及c-Rel蛋白表达。结果:(1)免疫细胞化学(神经元烯醇化酶相关抗原及β-tubulin 3)鉴定所培养的细胞为神经元;(2)免疫细胞化学、Western印迹结果显示OGD 4h组NF-κB P50蛋白表达开始增加明显高于正常组(P<0.05),OGD 4h/R2h组、OGD 4h/R6h组NF-κB P50蛋白表达持续性升高,并在复氧后6h达高峰(P<0.01),此后逐渐下降,至OGD 4h/R 12h时与正常组有显著差异(P<0.05),OGD 4h/R 24h NF-κB P50蛋白表达降低与正常组比较无统计学差异(P<0.05);(3)NF-κB c-Rel蛋白表达OGD 4h组与正常组无差异(P>0.05),OGD 4h/R 2h至OGD 4h/R 12h表达持续增加,并在复氧后12h达高峰(P<0.01),OGD4h/R24h仍未恢复到正常水平(P<0.05)。结论:大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后激活了NF-κB P50及c-Rel蛋白的表达,并具有时间相关性。 展开更多
关键词 NF-ΚB P50 C-REL 大脑皮质神经元 脑缺氧缺血 再灌注损伤
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大脑皮质神经元培养中胰蛋白酶消化分离技术的探讨 被引量:2
18
作者 白瑜 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第6期105-107,共3页
为探讨大脑皮质神经元培养中胰蛋白酶消化分离法的最佳条件,取新生大鼠大脑皮质组织,在不同的胰蛋白酶消化条件下分离培养神经元,通过细胞形态观察以及染色计数比较不同消化条件对神经元活性的影响。结果表明,0.25%胰蛋白酶,37℃,5 min... 为探讨大脑皮质神经元培养中胰蛋白酶消化分离法的最佳条件,取新生大鼠大脑皮质组织,在不同的胰蛋白酶消化条件下分离培养神经元,通过细胞形态观察以及染色计数比较不同消化条件对神经元活性的影响。结果表明,0.25%胰蛋白酶,37℃,5 min消化分离的神经元活性较好,细胞产率也较高。在新生大鼠大脑皮质神经元培养时,采用0.25%胰蛋白酶,37℃,5 min可消化分离到单层、生长活性较好的神经元。 展开更多
关键词 细胞培养 大脑皮质神经元 胰蛋白酶消化分离
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不均匀恒磁场对小鼠急性低压缺氧大脑皮质神经元超微结构的影响 被引量:3
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作者 黄晶波 郭宝军 沙建慧 《第四军医大学吉林军医学院学报(86813X)》 2002年第4期190-191,196,共3页
目的探讨不均匀恒磁场对急性低压缺氧大脑皮质神经元超微结构的影响。方法将20只小鼠随机分为对照组、模型组、磁场N极组和磁场S极组,除对照组外均在急性低压缺氧30min后,立即断头处死,取脑额叶部位皮质,制成电镜标本,观察各组小... 目的探讨不均匀恒磁场对急性低压缺氧大脑皮质神经元超微结构的影响。方法将20只小鼠随机分为对照组、模型组、磁场N极组和磁场S极组,除对照组外均在急性低压缺氧30min后,立即断头处死,取脑额叶部位皮质,制成电镜标本,观察各组小鼠大脑皮质神经元超微结构的改变。结果不均匀恒磁场可缓解因缺氧而导致的小鼠大脑皮质神经元胞核变形、核膜不光滑及细胞器数量减少等现象。结论不均匀恒磁场可改善低压缺氧造成的大脑皮质神经元损伤,并具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 大脑皮质神经元 低压缺氧 恒磁场 小鼠 急性 超微结构 对照组 细胞器 叶部 核膜
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人端粒酶反转录酶基因转染人胚胎大脑皮质神经元的凋亡
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作者 吴灵芝 李水彬 +2 位作者 成钢卫 汪华侨 孔令平 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第29期4653-4657,共5页
背景:人端粒酶反转录酶重组腺病毒转染原代培养的人胚胎大脑皮质神经元,可以促进细胞生存,抑制凋亡。目的:观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)诱导人胚胎大脑皮质神经元凋亡的影响。方法:人胚胎大脑皮质神经元... 背景:人端粒酶反转录酶重组腺病毒转染原代培养的人胚胎大脑皮质神经元,可以促进细胞生存,抑制凋亡。目的:观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)诱导人胚胎大脑皮质神经元凋亡的影响。方法:人胚胎大脑皮质神经元原代培养后,分为3组:对照组、Aβ25-35组和人端粒酶反转录酶组。Aβ25-35组和人端粒酶反转录酶组细胞在培养144 h后,用Aβ25-35 5μmol/L干预24 h。人端粒酶反转录酶组在Aβ25-35 5μmol/L干预72 h进行人端粒酶反转录酶基因转染。结果与结论:原代培养的人胚胎大脑皮质神经元培养7 d后,出现凋亡细胞,而Aβ25-35干预后使凋亡细胞数量增加,而人端粒酶反转录酶可防止Aβ25-35诱导的人胚胎大脑皮质神经元的凋亡。 展开更多
关键词 大脑皮质 细胞凋亡 端粒 端粒结合蛋白质类 转染 组织构建 组织工程 干细胞 胚胎干细胞 人端粒酶催化亚基 诱导 人胚胎大脑皮质神经元 阿尔茨海默病 凋亡 端粒酶 反转录酶
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