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大麦条纹花叶病毒新疆株RNA5′-末端帽子结构的鉴定 被引量:2
1
作者 孙薇 彭学贤 莽克强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期133-139,共7页
在弱碱条件下一些RNA病毒蛋白外壳可以特异性地从RNA5'-末端开始剥落,对大麦条纹花叶病毒新疆株(BSMV-XJ)RNA以含帽子结构的TMV-RNA和不含帽子结构的CpMV-RNA为正,负对照,在弱碱条件下剥壳,用合成的pCp特异性地标记RNA5'-末端帽子结... 在弱碱条件下一些RNA病毒蛋白外壳可以特异性地从RNA5'-末端开始剥落,对大麦条纹花叶病毒新疆株(BSMV-XJ)RNA以含帽子结构的TMV-RNA和不含帽子结构的CpMV-RNA为正,负对照,在弱碱条件下剥壳,用合成的pCp特异性地标记RNA5'-末端帽子结构上的3'-羟基,经碱水解后纸电泳分离单核苷酸,见BSMV-XJ-RNA和TMV-RNA同样含有m^7G~*p,而CpMV-RNA则无,证实BSMV-XJ-RNA在5'-末端具有m7G帽子结构,同时对BSMV的蛋白外壳在弱碱条件下剥落的时间,条件及标记方法进行了研究。 展开更多
关键词 条纹花叶病毒 帽子结构 大麦
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3D虚拟试衣技术在帽子结构设计教学中的应用研究 被引量:1
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作者 韩伦 方进 +1 位作者 于滨 马翔 《轻工科技》 2023年第2期130-132,172,共4页
帽子结构设计是服装结构课程大体系中非常有特色的一个单元,对于学生的立体造型和个性设计能力培养具有十分重要的作用。传统的服装结构设计课程大多是在平面二维层面进行教学,对于像帽子这种从平面角度很难想象出其立体构成的服装配饰... 帽子结构设计是服装结构课程大体系中非常有特色的一个单元,对于学生的立体造型和个性设计能力培养具有十分重要的作用。传统的服装结构设计课程大多是在平面二维层面进行教学,对于像帽子这种从平面角度很难想象出其立体构成的服装配饰而言,单纯教会学生画结构图往往达不到课程的目的。提出将3D虚拟试衣技术应用于帽子结构设计中,从应用目的、操作方法、学生评价等方面对该课程的教学进行研究,力求达到对学生兴趣、课程质量的提升,促进服装设计与工程专业的发展。 展开更多
关键词 3D虚拟试衣技术 服装设计与工程专业教学 帽子结构设计
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A型流感病毒PB2蛋白帽子结合结构域的原核表达与鉴定
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作者 林维鹏 崔鹏飞 +2 位作者 王思文 邓国华 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期107-112,139,共7页
A型流感病毒是一种重要的人畜共患病病原,严重威胁全球公共卫生安全。PB2蛋白的帽子结合结构域(CBD)在流感病毒的转录过程中发挥重要功能,是抗流感病毒药物的重要靶点之一。为获得高纯度原核表达的A型流感病毒的CBD蛋白,本研究利用同源... A型流感病毒是一种重要的人畜共患病病原,严重威胁全球公共卫生安全。PB2蛋白的帽子结合结构域(CBD)在流感病毒的转录过程中发挥重要功能,是抗流感病毒药物的重要靶点之一。为获得高纯度原核表达的A型流感病毒的CBD蛋白,本研究利用同源重组策略将8×His标签与一株H5N1亚型高致病性禽流感病毒的CBD区基因序列克隆至原核表达载体pET28a中,构建重组质粒pET28a-8×His-CBD,经PCR及测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经不同浓度IPTG诱导不同时间后,经SDS-PAGE检测蛋白表达后使用镍柱纯化。结果显示,菌体裂解上清中在21 ku处可见目的条带,与8×His-CBD蛋白预期大小符合,且以0.5 mmol/L IPTG于37℃诱导6 h时蛋白表达量最高,镍柱纯化后可获得纯度大于95%的8×His-CBD蛋白。为确定该蛋白是否具有生物学活性,本研究以帽子结构类似物m7GTP对其进行等温滴定量热试验,结果显示8×His-CBD蛋白和m~7GTP结合时存在明显热峰,表明8×His-CBD蛋白具有生物学活性;经计算,其Kd值为1.71×10^(-5)(±2.92×10^(-6))mol/L。本研究结果对流感病毒的基础研究和抗流感病毒药物的研发具有借鉴意义。 展开更多
关键词 A型流感病毒 PB2蛋白 帽子结合结构 原核表达 纯化
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免疫共沉淀结合基因芯片对m_3G帽子结构RNA的分离鉴定 被引量:1
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作者 贾栋 张彬 +4 位作者 马瑞燕 唐贵刚 赵捷 王文华 周琳 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期65-70,共6页
目的:通过免疫共沉淀和基因芯片技术,建立一种RNA 5'端帽子结构的鉴定方法。方法:利用m3G帽子结构的特异性抗体对线虫的总RNA进行免疫共沉淀,为线虫127个非编码RNA设计探针,制备了检测基因芯片,对其帽子结构进行鉴定,并对RNA的转录... 目的:通过免疫共沉淀和基因芯片技术,建立一种RNA 5'端帽子结构的鉴定方法。方法:利用m3G帽子结构的特异性抗体对线虫的总RNA进行免疫共沉淀,为线虫127个非编码RNA设计探针,制备了检测基因芯片,对其帽子结构进行鉴定,并对RNA的转录进行分析。结果:37个非编码RNA被分离鉴定为含有m3G帽子结构,与其它物种已发现m3G帽子的RNA比较,结果基本一致。结论:免疫共沉淀结合基因芯片技术对非编码RNA 5'端帽子结构分离鉴定的方法是可行有效的。此方法特异性强,灵敏度高,对大规模RNA帽子结构的鉴定、新RNA的发现和RNA功能的鉴定都具有一定的参考和应用价值。 展开更多
关键词 帽子结构 鉴定 免疫共沉淀 基因芯片
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全长cDNA文库的构建方法 被引量:22
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作者 董志敏 张宝石 +2 位作者 关荣霞 常汝镇 邱丽娟 《中国农学通报》 CSCD 2006年第2期51-55,共5页
全长cDNA文库的构建是进行功能基因组研究的一种经济、快速、有效的途径,克服了传统cDNA文库的缺点,节省了基因克隆和功能鉴定的时间,促进了功能基因组的研究进程。目前有6种构建全长cDNA文库的方法,包括Oligo-Capping、CAPture、SMART... 全长cDNA文库的构建是进行功能基因组研究的一种经济、快速、有效的途径,克服了传统cDNA文库的缺点,节省了基因克隆和功能鉴定的时间,促进了功能基因组的研究进程。目前有6种构建全长cDNA文库的方法,包括Oligo-Capping、CAPture、SMART、CAP-trapper、CapSelect、CAP-jumping。这几种方法在起始材料用量、文库构建技术、实验操作复杂程度和文库构建质量等方面构存在不同程度的优缺点,但综合比较而言,SMART和CAP-trapper这两种方法比较有实际应用价值。SMART法适于简单、快速地构建一般质量的cDNA文库,如果采用Little-cycleSMART和Large-sizeSMART这两种改进技术,所建文库质量也非常好;CAP-trapper法虽然对实验技术要求较高,实验过程复杂,但所建文库全长率高,冗余性低,建库效率高,是目前构建高质量文库最好的方法。 展开更多
关键词 全长CDNA 5’帽子结构 cDNA文库的构建
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获取全长cDNA若干方法的比较 被引量:2
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作者 陶爱林 林兴华 张端品 《武汉植物学研究》 CSCD 2003年第2期179-186,共8页
Full length complementary DNAs (cDNA) are crucial for the functional annotation of genes. Several novel experimental approaches for selective enrichment of full length cDNAs are outlined in parallels. Some kinds of re... Full length complementary DNAs (cDNA) are crucial for the functional annotation of genes. Several novel experimental approaches for selective enrichment of full length cDNAs are outlined in parallels. Some kinds of reverse transcriptases and high fidelity PCR enzymes are introduced for promising high efficiency of accurate full length cDNA synthesis. The temperature profiles of the reverse transcription and PCR are also discussed. 展开更多
关键词 全长CDNA 信使RNA 5′帽子结构 高保真PCR 比较
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病毒末端结合蛋白VPg的功能研究进展 被引量:4
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作者 梁越 张飞云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期16-20,共5页
病毒的末端结合蛋白VPg(Viral Protein Genome-linked)是一种多功能蛋白,存在于多种病毒中,与病毒基因组RNA5′-末端共价连接,在病毒的生命周期中以不同的剪切形式存在并行使不同的功能,参与病毒的复制、翻译等基本的生命活动。主要对... 病毒的末端结合蛋白VPg(Viral Protein Genome-linked)是一种多功能蛋白,存在于多种病毒中,与病毒基因组RNA5′-末端共价连接,在病毒的生命周期中以不同的剪切形式存在并行使不同的功能,参与病毒的复制、翻译等基本的生命活动。主要对目前关于VPg如何参与病毒的复制和翻译过程,以及在病毒蛋白质成熟和病毒移动过程中如何发挥作用的研究结果进行了综述。 展开更多
关键词 VPG 病毒的复制 eIF4Es 不依赖于帽子结构的翻译 病毒的移动
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利用eIF4E分离纯化非编码RNA的新方法
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作者 李佳 丁沐然 吴传芳 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期914-918,共5页
人翻译起始因子eIF4E是特异性识别并结合mRNA帽结构的蛋白质.该文通过克隆人源基因eIF4E,并利用原核细胞大肠杆菌BL21成功表达了具有帽结合功能的eIF4E蛋白,利用该蛋白亲和纯化分离得到了具有帽子结构的RNA.通过对比用oligo(dT)分离得... 人翻译起始因子eIF4E是特异性识别并结合mRNA帽结构的蛋白质.该文通过克隆人源基因eIF4E,并利用原核细胞大肠杆菌BL21成功表达了具有帽结合功能的eIF4E蛋白,利用该蛋白亲和纯化分离得到了具有帽子结构的RNA.通过对比用oligo(dT)分离得到的非编码RNA,eIF4E法得到了更多种类的非编码RNA.本研究为非编码RNA的分离与发现提供了一个重要的工具. 展开更多
关键词 帽子结构poly(A)尾 eIF4Eoligo(dT) 非编码RNA
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鞘藻属和毛鞘藻属营养细胞分裂方式的比较研究 被引量:2
9
作者 罗玮 刘国祥 胡征宇 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期640-647,共8页
于 1 999年 7月在湖北省仙桃市湿润土壤中采得一种鞘藻 ,经培养和电镜观察 ,发现该株鞘藻营养生长主要依赖位于丝状体最上面的细胞分裂 ,分生出的子细胞在该细胞亚顶端的胞壁破裂点掀开一个帽子 ,此帽子便附着于细胞侧壁上 ,这在鞘藻属... 于 1 999年 7月在湖北省仙桃市湿润土壤中采得一种鞘藻 ,经培养和电镜观察 ,发现该株鞘藻营养生长主要依赖位于丝状体最上面的细胞分裂 ,分生出的子细胞在该细胞亚顶端的胞壁破裂点掀开一个帽子 ,此帽子便附着于细胞侧壁上 ,这在鞘藻属中为首次报道 ,与 2 0 0 0年 1 2月在武汉纸坊青龙山水库采得的一种毛鞘藻的基细胞也附着相同的帽子结构。观察结果表明 ,该属基细胞亦具有明显的居间分裂能力。在观察这两属营养细胞居间分裂的同时 ,详细报道了这一种特殊的细胞分裂———顶端分裂 ,详细比较了这两属的营养细胞分裂方式 ,并对其分裂方式的机制进行探讨。结果表明 ,这两属细胞在细胞分裂方式上有极为亲密的亲缘关系 ,但毛鞘藻属更复杂、独特的营养细胞分裂显示它的进化地位比鞘藻属高。 展开更多
关键词 营养细胞 分裂方式 鞘藻属 毛鞘藻属 居间分裂 顶端分裂 冠状环纹结构 帽子结构
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蛋白翻译元件IRES:病毒复制和毒力研究的新宠儿
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《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期534-534,共1页
真核生物的蛋白翻译,依赖于m RNA 5’端的帽子结构。而口蹄疫病毒(FMDV)、脊髓灰质炎病毒、人丙型肝炎病毒等一些RNA病毒,其蛋白的翻译是通过病毒自身的内部核糖体进入位点(Internal ribosomal entry site,IRES)以非帽依赖性方式完成的.
关键词 脊髓灰质炎病毒 内部核糖体进入位点 RNA病毒 病毒复制 丙型肝炎病毒 毒力研究 IRES 帽子结构
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IRES增强mRNA在树突状细胞中的翻译效率有效地诱发抗肿瘤免疫 被引量:2
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作者 谭晓华 万永红 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期399-403,共5页
目的旨在寻求一种能完全替代目前常规体外转录合成肿瘤相关抗原(TAA)mRNA的方法。方法构建4个质粒包括 pmRNA 荧光素(Luc)、pmRNA IRES-Luc、pmRNA 鸡卵清蛋白(OVA)和 pmRNA IRES-OVA,用 Luc 报告系统检测不同形式的 Luc mRNA 转染小鼠... 目的旨在寻求一种能完全替代目前常规体外转录合成肿瘤相关抗原(TAA)mRNA的方法。方法构建4个质粒包括 pmRNA 荧光素(Luc)、pmRNA IRES-Luc、pmRNA 鸡卵清蛋白(OVA)和 pmRNA IRES-OVA,用 Luc 报告系统检测不同形式的 Luc mRNA 转染小鼠树突状细胞(DC)后的蛋白表达水平;以 OVA 作为靶抗原,以小鼠黑色素瘤肺转移作为动物模型,通过体内细胞毒性 T淋巴细胞(CTL)杀伤实验及荷瘤实验,比较 Capped-OVA mRNA 和 IRES-OVA mRNA 修饰 DC 所诱发的抗原特异性细胞免疫反应。结果将 IRES 序列插入 mRNA 转录模板编码基因 cDNA 序列前,不影响体外转录合成相应 mRNA 的产量。不同形式 Luc mRNA 转染 DC 后8h,IRES-Luc mRNA 较Capped-Luc mRNA 表达的酶活性高1倍,而较 Uncapped-Luc mRNA 高20倍;IRES-Luc mRNA 和Capped-Luc mRNA 转染 DC 96 h 后仍能检测到 Luc 活性。用 Capped-OVA mRNA 和 IRES-OVA mRNA修饰 DC 免疫小鼠1周后行体内 CTL 杀伤实验,结果示 Capped-OVA mRNA/DC 免疫组4 h CTL 杀伤率为(28±3)%,而 IRES-OVA mRNA/DC 免疫组4 h CTL 杀伤率为(32±4)%。荷瘤实验显示,Capped-OVA mRNA/DC 和 IRES-OVA mRNA/DC 免疫小鼠后均能保护小鼠肺部免受黑色素瘤转移结节形成。结论含 IRES 序列的 TAA mRNA 可作为一种更经济、适用的方法,完伞可以取代 Cap 化mRNA 修饰 DC,并能诱导与 Cap 化 mRNA 修饰 DC 同样有效的抗原特异性细胞免疫反应。 展开更多
关键词 癌症疫苗 树突细胞 免疫疗法 内部核酸进入位点 5'末端帽子结构
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