2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病。对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子。对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验。在...2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病。对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子。对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验。在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理（DNase-sequence independent single primer amplification,DNase-SISPA）对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增。剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死。含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示：病毒粒子直径为50~60 nm。动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒。应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属（Flavi-virus）坦布苏病毒（Tembusu virus）基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%。据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%。将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010（简称JS804）。研究结果表明：此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒。展开更多
目的建立检测腹泻粪便标本中病毒病原的方法。方法选取本实验室检测的杯状病毒、肠道腺病毒、轮状病毒、博卡病毒、星状病毒以及肠道病毒阳性标本各一份，通过非序列依赖性单一PCR扩增（Sequence—independent single primer amplificat...目的建立检测腹泻粪便标本中病毒病原的方法。方法选取本实验室检测的杯状病毒、肠道腺病毒、轮状病毒、博卡病毒、星状病毒以及肠道病毒阳性标本各一份，通过非序列依赖性单一PCR扩增（Sequence—independent single primer amplification，SISPA）构建基因文库，从中筛查病毒基因片段。结果六份标本中都可以得到相对应的病毒核酸序列。结论本研究采用的方法可以检测到粪便标本中引起腹泻的相关病毒，为进一步研究检测目前尚未发现的病毒病原奠定基础。展开更多
文摘2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病。对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子。对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验。在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理（DNase-sequence independent single primer amplification,DNase-SISPA）对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增。剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死。含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示：病毒粒子直径为50~60 nm。动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒。应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属（Flavi-virus）坦布苏病毒（Tembusu virus）基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%。据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%。将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010（简称JS804）。研究结果表明：此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒。
文摘目的建立检测腹泻粪便标本中病毒病原的方法。方法选取本实验室检测的杯状病毒、肠道腺病毒、轮状病毒、博卡病毒、星状病毒以及肠道病毒阳性标本各一份，通过非序列依赖性单一PCR扩增（Sequence—independent single primer amplification，SISPA）构建基因文库，从中筛查病毒基因片段。结果六份标本中都可以得到相对应的病毒核酸序列。结论本研究采用的方法可以检测到粪便标本中引起腹泻的相关病毒，为进一步研究检测目前尚未发现的病毒病原奠定基础。
