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CircACTR2调节miR-101-3p/NFAT5轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 王晶 黄斌芳 周光全 《蚌埠医科大学学报》 2025年第3期281-287,共7页
目的:探讨环状非编码RNA(circRNA)ACTR2调节微小RNA-101-3p(miR-101-3p)/活化T细胞核因子5(NFAT5)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,分为对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄... 目的:探讨环状非编码RNA(circRNA)ACTR2调节微小RNA-101-3p(miR-101-3p)/活化T细胞核因子5(NFAT5)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,分为对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖),同时在高糖组的基础上对HK-2细胞进行转染,设置为小干扰RNA阴性对照(si NC)组、circACTR2特异性小干扰RNA(si circACTR2)组、si circACTR2+抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、si circACTR2+miR-101-3p抑制物(miR-101-3p inhibitor)组。流式细胞术、CCK-8分别检测细胞凋亡和增殖;qRT-PCR检测细胞中circACTR2、miR-101-3p及NFAT5 mRNA表达;Western blotting检测各组细胞中增殖蛋白Ki-67、抗凋亡蛋白Bcl-2、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、NFAT5表达水平;ELISA检测细胞中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;双荧光素酶实验验证circACTR2、NFAT5分别与miR-101-3p的靶向关系。结果:miR-101-3p分别与circACTR2、NFAT5存在靶向关系。与对照组相比,高糖组细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、circACTR2、NFAT5、α-SMA水平增加(P<0.05),细胞光密度(OD_(450))值(24、48 h)、miR-101-3p、Bcl-2、Ki-67、E-cadherin水平降低(P<0.05);与si NC组相比,si circACTR2组细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、circACTR2、NFAT5、α-SMA水平下降(P<0.05),细胞OD_(450)值(24、48 h)、miR-101-3p、Bcl-2、Ki-67、E-cadherin水平增加(P<0.05);与si circACTR2+inhibitor NC组相比,si circACTR2+miR-101-3p inhibitor组细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、circACTR2、NFAT5、α-SMA水平增加(P<0.05),细胞OD_(450)值(24、48 h)、miR-101-3p、Bcl-2、Ki-67、E-cadherin水平降低(P<0.05)。结论:干扰circACTR2表达可以促进高糖诱导HK-2细胞增殖、抑制其凋亡及上皮间质转化,可能与调控miR-101-3p/NFAT5轴有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 环状非编码RNA ACtR2 微小rna-101-3p/活化t细胞核因子5轴 肾小管上皮细胞
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CircNFATC3通过miR-183-5p/THBS1轴调节胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭
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作者 亓立廷 黄冬梅 +1 位作者 王健 王勇 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第14期3519-3525,共7页
目的 探讨环状RNA活化T细胞核因子(circNFATC)3通过微小RNA(miR)-183-5p/血小板凝血酶蛋白(THBS)1轴对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调节作用。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胃癌组织circNFATC3、miR-183-5p、THBS... 目的 探讨环状RNA活化T细胞核因子(circNFATC)3通过微小RNA(miR)-183-5p/血小板凝血酶蛋白(THBS)1轴对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调节作用。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胃癌组织circNFATC3、miR-183-5p、THBS1 mRNA表达水平,分析circNFATC3表达与胃癌临床病理特征的关系,筛选出表达差异最大的胃癌细胞系,选择AGS细胞进行干预,将AGS细胞分为:si-NC组(转染si-NC)、si-circNFATC3组(转染si-circNFATC3)、si-circNFATC3+miR-NC inhibitor组(转染si-circNFATC3和miR-NC inhibitor)、si-circNFATC3+miR-183-5p inhibitor组(转染si-circNFATC3和miR-183-5p inhibitor)和ctrl组(未转染);RT-qPCR检测细胞中circNFATC3、miR-183-5p的表达;CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;Western印迹检测细胞中THBS1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证circNFATC3和miR-183-5p、miR-183-5p和THBS1的关系。结果 circNFATC3、THBS1在胃癌组织和细胞中显著高于癌旁组织和GES-1细胞,miR-183-5p表达显著低于癌旁组织和GES-1细胞(P<0.05);circNFATC3表达与分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径、幽门螺杆菌(HP)感染、向远处转移不相关(P>0.05);与ctrl组、si-NC组相比较,si-circNFATC3组AGS细胞的circNFATC3表达、OD450值、克隆细胞数、侵袭数目、划痕愈合率及THBS1、MMP-2、MMP-9和PCNA蛋白表达显著下降,细胞凋亡率、miR-183-5p、Bax和caspase-3表达明显升高(P<0.05);与si-circNFATC3组、si-circNFATC3+miR-NC inhibitor组比较,si-circNFATC3+miR-183-5p inhibitor组AGS细胞的OD450值、克隆细胞数、划痕愈合率、侵袭数目、THBS1、PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax和caspase-3表达显著降低(P<0.05);circNFATC3靶向调控miR-183-5p表达,miR-183-5p靶向下调THBS1。结论 circNFATC3敲低可抑制胃癌细胞的迁移、侵袭和增殖,促进其凋亡,其机制可能与特异性结合miR-183-5p下调THBS1有关。 展开更多
关键词 环状RNA活化t细胞核因子(circNFAtC)3 微小RNA(miR)-183-5p 血小板凝血酶蛋白(tHBS)1 胃癌 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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