目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d...目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d的SD大鼠乳离体差速贴壁法纯化培养双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,用24h后的原代成肌细胞进行试验。实验分5组:空白对照组、5-氮杂胞苷(10μmol/ml)阳性药对照组、MOO各剂量(100gg/ml、300gg/ml、500μg/m1)组。分别检测以下指标:(1)观察加药前后成肌细胞形态学改变。(2)Desmin(结蛋白)鉴定。(3)加药前后成肌细胞对异丙肾上腺素(Isoprenaline,IP)的反应。(4)采用RT-PCR法检测成肌细胞中TGF-β1、GATA-4mRNA的表达。结果:(1)与空白对照组相比,MOO诱导48h后成肌细胞生长密集,胞浆丰富,增殖明显,具有较好的折光性。并呈一定方向性的长轴平行排列,细胞融合的肌管增多,分化良好,有明显自发性搏动的收缩现象,生长状态明显好于空白对照组。(2)与空白对照组相比,IP对阳性药对照组和MOO小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显(P〉0.05);而IP对MOO中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著(P〈0.05)。展开更多
目的:细胞移植技术的探索,为急性心肌梗死患者坏死区的心肌细胞重建及衰竭心脏的功能恢复,可能是-种极具前途的临床治疗手段。我们前期的研究初步证实巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)具有明显促进成...目的:细胞移植技术的探索,为急性心肌梗死患者坏死区的心肌细胞重建及衰竭心脏的功能恢复,可能是-种极具前途的临床治疗手段。我们前期的研究初步证实巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)具有明显促进成肌细胞的增殖和分化的作用保护心脏作用的研究。方法:采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,以5-氮杂2’-脱氧胞苷(5-Aza—dc)为阳性药对照组、并设立MOO中剂量+5-Aza—dc联合用药组,应用免疫组化、蛋白免疫痕迹技术进-步观察了MOO促成肌细胞向心肌样细胞分化时对TGF-β2受体及信号传导的影响。结果:(1)与空白对照组相比,各组TGF-β2表达水平均上调,差异显著(P〈0.05);与阳性对照组相比,MOO各剂量组TGF—β2表达水平随剂量增加而增强,联合用药组TGF-β2表达水平显著高于阳性对照组(P〈0.05)。(2)与空白对照组相比,各用药组Smad4表达水平均显著上调(P〈0.05),各用药组间Smad4表达水平无明显差异。(3)与空白对照组相比,MOO小剂量组及联合用药组Smad2/3表达轻微上调、MOO中、大剂量组及阳性组均下调Smad2/3的表达。(4)与空白对照组相比,各组Smad7的表达差异显著(P〈0.05),其中MOO小剂量组、阳性组和联合组均抑制Smad7表达,MOO中、大剂量组逐渐增强Smad7的表达。结论:(1)MOO可促进TGF-β2的表达,并随着剂量的增加表达增强。展开更多
文摘目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d的SD大鼠乳离体差速贴壁法纯化培养双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,用24h后的原代成肌细胞进行试验。实验分5组:空白对照组、5-氮杂胞苷(10μmol/ml)阳性药对照组、MOO各剂量(100gg/ml、300gg/ml、500μg/m1)组。分别检测以下指标:(1)观察加药前后成肌细胞形态学改变。(2)Desmin(结蛋白)鉴定。(3)加药前后成肌细胞对异丙肾上腺素(Isoprenaline,IP)的反应。(4)采用RT-PCR法检测成肌细胞中TGF-β1、GATA-4mRNA的表达。结果:(1)与空白对照组相比,MOO诱导48h后成肌细胞生长密集,胞浆丰富,增殖明显,具有较好的折光性。并呈一定方向性的长轴平行排列,细胞融合的肌管增多,分化良好,有明显自发性搏动的收缩现象,生长状态明显好于空白对照组。(2)与空白对照组相比,IP对阳性药对照组和MOO小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显(P〉0.05);而IP对MOO中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著(P〈0.05)。
文摘目的:细胞移植技术的探索,为急性心肌梗死患者坏死区的心肌细胞重建及衰竭心脏的功能恢复,可能是-种极具前途的临床治疗手段。我们前期的研究初步证实巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)具有明显促进成肌细胞的增殖和分化的作用保护心脏作用的研究。方法:采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,以5-氮杂2’-脱氧胞苷(5-Aza—dc)为阳性药对照组、并设立MOO中剂量+5-Aza—dc联合用药组,应用免疫组化、蛋白免疫痕迹技术进-步观察了MOO促成肌细胞向心肌样细胞分化时对TGF-β2受体及信号传导的影响。结果:(1)与空白对照组相比,各组TGF-β2表达水平均上调,差异显著(P〈0.05);与阳性对照组相比,MOO各剂量组TGF—β2表达水平随剂量增加而增强,联合用药组TGF-β2表达水平显著高于阳性对照组(P〈0.05)。(2)与空白对照组相比,各用药组Smad4表达水平均显著上调(P〈0.05),各用药组间Smad4表达水平无明显差异。(3)与空白对照组相比,MOO小剂量组及联合用药组Smad2/3表达轻微上调、MOO中、大剂量组及阳性组均下调Smad2/3的表达。(4)与空白对照组相比,各组Smad7的表达差异显著(P〈0.05),其中MOO小剂量组、阳性组和联合组均抑制Smad7表达,MOO中、大剂量组逐渐增强Smad7的表达。结论:(1)MOO可促进TGF-β2的表达,并随着剂量的增加表达增强。