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交趾黄檀新黄酮类成分及其抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性研究
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作者 任佳慧 郑启万 +3 位作者 孟晓伟 庞妍 陈兰英 刘荣华 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期126-132,共7页
目的研究交趾黄檀Dalbergia cochinchinensis Pierre ex Laness的新黄酮类成分及其抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性。方法交趾黄檀70%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、反相制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得... 目的研究交趾黄檀Dalbergia cochinchinensis Pierre ex Laness的新黄酮类成分及其抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性。方法交趾黄檀70%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、反相制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用CCK-8法检测其对H9c2心肌细胞的活性及对H9c2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并分析其构效关系。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为阔叶黄檀酚(1)、5-O-methyllatifolin(2)、mimosifoliol(3)、5-O-methydalbergiphenol(4)、dalbergiphenol(5)、cearoin(6)、2,4-dihydroxy-5-methoxy-benzophenone(7)、2-hydroxy-4,5-dimethoxybenzophenone(8)、melannoin(9)、2,2′,5-trihydroxy-4-methoxybenzophenone(10)、黄檀素(11)、4-甲氧基黄檀醌(12)。黄檀酚及黄檀内酯类化合物对H9c2细胞毒性较小,黄檀酚类化合物抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性较强。结论化合物8为新天然产物,化合物4、9为首次从该植物中分离得到。黄檀酚类化合物可能是抗H9c2细胞缺氧/复氧损伤的主要新黄酮类成分。 展开更多
关键词 交趾黄檀 新黄酮 分离鉴定 H9C2心肌细胞 缺氧/损伤 构效关系
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基于受体交联蛋白激酶3探讨马钱苷对心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用机制
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作者 许卫攀 钟可文 +3 位作者 徐航 金道群 刘滴 王琪 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期848-852,共5页
目的基于受体交联蛋白激酶3(RIPK3)探讨马钱苷对心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用及机制。方法分别使用马钱苷和(或)RIPK3激动剂Necrolr 1预处理H9C2心肌细胞24 h后构建H/R模型,使用CCK-8检测心肌细胞活力,使用ELISA法检测LDH释放水平... 目的基于受体交联蛋白激酶3(RIPK3)探讨马钱苷对心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用及机制。方法分别使用马钱苷和(或)RIPK3激动剂Necrolr 1预处理H9C2心肌细胞24 h后构建H/R模型,使用CCK-8检测心肌细胞活力,使用ELISA法检测LDH释放水平,使用药物-分子对接分析马钱苷与RIPK3的分子作用,使用Hoechst/PI荧光双染色观察凋亡和程序性坏死比率,使用Calcein AM探针检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放程度,使用Western blot检测p-RIPK3、t-RIPK3、p-MLKL、t-MLKL、Cyt-c、cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3的蛋白表达水平。结果一般状态下,马钱苷预处理对心肌细胞无明显毒性用,在H/R处理后发现25μmol/L马钱苷可显著升高细胞活力并降低LDH释放水平。药物-分子对接预测马钱苷与RIPK3具有可靠的结合位点,结合力为-5.68 kcal/mol。马钱苷预处理可降低Hoechst/PI阳性率,抑制mPTP开放,并同时下调p-RIPK3、p-MLKL、Cyt-c、cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3等程序性坏死和细胞凋亡相关蛋白的表达水平,而马钱苷和RIPK3激动剂Necrolr 1共处理则可显著削弱马钱苷对程序性坏死和细胞凋亡的抑制作用。结论马钱苷通过抑制RIPK3的磷酸化活化以同时抑制细胞凋亡和程序性坏死的发生,从而有效减轻心肌细胞H/R损伤。 展开更多
关键词 缺氧/损伤 心肌缺血再灌注损伤 RIPK3 程序性坏死 细胞凋亡
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右美托咪定经STAT3/FoxO3a信号转导通路对减轻H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用
3
作者 谭艳华 江龙 +3 位作者 邹素娟 侯杰 王云 旷昕 《国际医药卫生导报》 2024年第20期3346-3350,共5页
目的建立大鼠心肌细胞系H9C2细胞缺氧/复氧模型,探究STAT3/FoxO3a信号转导通路在右美托咪定(Dex)保护心肌缺氧/复氧损伤中的作用。方法实验时间:2023年7月至11月,地点:香港大学深圳研究院实验室。使用对数生长期的H9C2心肌细胞进行实验... 目的建立大鼠心肌细胞系H9C2细胞缺氧/复氧模型,探究STAT3/FoxO3a信号转导通路在右美托咪定(Dex)保护心肌缺氧/复氧损伤中的作用。方法实验时间:2023年7月至11月,地点:香港大学深圳研究院实验室。使用对数生长期的H9C2心肌细胞进行实验,将其分为不同组别:对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组,缺氧6 h/复氧12 h)、Dex预处理后缺氧/复氧组(D组),以及添加STAT3抑制剂Stattic+Dex预处理后缺氧/复氧组(S组)。通过CCK8试剂盒检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞损伤,丙二醛(MDA)试剂盒检测氧化应激水平,使用蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达。统计学方法采用单因素方差分析。结果H/R组H9C2细胞活力、Bcl-2和P62蛋白水平均低于C组,LDH、MDA、Bax、CC-3、LC3和Beclin-1蛋白水平均高于C组(均P<0.05)。Dex组细胞活力、P-STAT3/STAT3比值及Bcl-2、P62、FoxO3a蛋白水平均高于H/R组,LDH、MDA含量及Bax、CC-3、LC3、Beclin-1蛋白水平均低于H/R组(均P<0.05)。STAT3抑制剂可减弱Dex对心肌细胞损伤的保护作用。结论Dex预处理通过STAT3/FoxO3a信号转导通路,抑制心肌细胞的凋亡和自噬,降低氧化应激水平,减轻缺氧/复氧H9C2细胞损伤,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 右美托咪定 心肌缺血再灌注损伤 STAT3/FoxO3a信号转导通路 缺氧/ 细胞凋亡
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小檗碱与5'-N-乙基甲酰胺基腺苷单独及联合给药对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响
4
作者 贡美娜 高亚云 +3 位作者 张束滢 逄晓倩 田炜 徐菁蔓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2311-2318,共8页
目的 探讨小檗碱(berberine,BBR)与5'-N-乙基甲酰胺基腺苷(5'-n-ethylformamidoadenosine,NECA)单独及联合给药对缺氧/复氧(H/R)诱发的心肌H9c2和HL-1细胞损伤的影响。方法 心肌H9c2和HL-1细胞分为Control组、BBR组、NECA组、... 目的 探讨小檗碱(berberine,BBR)与5'-N-乙基甲酰胺基腺苷(5'-n-ethylformamidoadenosine,NECA)单独及联合给药对缺氧/复氧(H/R)诱发的心肌H9c2和HL-1细胞损伤的影响。方法 心肌H9c2和HL-1细胞分为Control组、BBR组、NECA组、联合给药组、H/R组、BBR+H/R组、NECA+H/R组、联合给药+H/R组,CCK-8检测细胞活力;TMRE检测MMP;DCFH-DA检测ROS的含量;Mito SOX Red探针检测线粒体超氧化物;Western blot检测COXⅣ、Tom20、Tim23蛋白表达;qRT-PCR检测COXⅣ、Tom20基因表达。结果 在H9c2细胞中,与Control组相比,H/R组细胞活力、TMRE荧光强度明显降低,COXⅣ、Tom20和Tim23蛋白表达、COXⅣ和Tom20基因表达、ROS和线粒体超氧化物的含量均明显升高。与H/R组相比,BBR和NECA单独给药后细胞活力均增强;单独给药及联合给药后,ROS和线粒体超氧化物的含量明显降低。在HL-1细胞中,与Control组相比,H/R组细胞活力明显降低;ROS和线粒体超氧化物的含量均明显升高。与H/R组相比,BBR和NECA单独给药及联合给药后,细胞活力均增强;ROS和线粒体超氧化物的含量均明显降低。结论 BBR和NECA单独给药及联合给药是通过减少线粒体超氧化物和细胞ROS的生成,进而缓解线粒体损伤,减轻氧化应激损伤,最终降低H/R诱发的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌缺氧/损伤 小檗碱 NECA 线粒体超化物 ROS 化应激
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MiR-124-5p通过靶向负调控TRAF6表达而抑制H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤
5
作者 王雪 付建平 +3 位作者 牛媛媛 牟丽娜 李勇 李敬 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CSCD 2024年第6期547-554,共8页
目的探讨miR-124-5p在心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用及其机制。方法通过将H9c2细胞置于缺氧环境(1%O^(2)、94%N2和5%CO^(2))中培养不同时间后再复氧24 h,制作心肌细胞H/R损伤模型;转染miR-124-5p mimic及mi... 目的探讨miR-124-5p在心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用及其机制。方法通过将H9c2细胞置于缺氧环境(1%O^(2)、94%N2和5%CO^(2))中培养不同时间后再复氧24 h,制作心肌细胞H/R损伤模型;转染miR-124-5p mimic及miR-124-5p靶向基因质粒改变miR-124-5p及其靶向基因表达水平;qRT-PCR检测miR-124-5p表达水平,Western blot检测相应靶基因蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞活力,TUNEL染色法和Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡,通过检测细胞中肌酸激酶(creatine kinase,CK)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性评估心机受损情况;生物信息学分析miR-124-5p的作用靶点并利用双荧光素酶报告实验进行验证。结果H9c2细胞活力及miR-124-5p表达水平随缺氧时间延长逐渐降低。与H/R+miR-NC组相比,H/R+miR-124-5p mimic组细胞活力增加,而CK及LDH活性、TUNEL阳性细胞比例和凋亡水平均降低。miR-124-5p靶向抑制TRAF6表达,过表达TRAF6抑制miR-124-5p对H/R损伤的心肌细胞的保护作用。结论miR-124-5p可通过对TRAF6的靶向负调控而抑制心肌细胞的H/R损伤。 展开更多
关键词 MiR-124-5p TRAF6 缺氧/ 心肌细胞损伤
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刺芒柄花素对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用研究
6
作者 武金盼 杨卫平 +2 位作者 赵新春 袁青 陈继军 《医学研究杂志》 2024年第10期81-86,98,共7页
目的 探究刺芒柄花素对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法 利用随机数字表法将大鼠H9C2心肌细胞随机分为3组,对照组细胞在常规孵箱培养,缺氧/复氧组细胞利用缺氧孵箱和常规孵箱交替培养,刺芒柄花素组细胞在缺氧/复氧培... 目的 探究刺芒柄花素对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法 利用随机数字表法将大鼠H9C2心肌细胞随机分为3组,对照组细胞在常规孵箱培养,缺氧/复氧组细胞利用缺氧孵箱和常规孵箱交替培养,刺芒柄花素组细胞在缺氧/复氧培养的基础上应用35μmol/L刺芒柄花素。利用细胞活性检测试剂盒检测细胞活性,利用试剂盒检测细胞氧化应激及炎性反应指标,利用流式细胞仪和多核苷酸链断裂检测技术检测细胞凋亡水平,利用蛋白印迹技术检测凋亡相关蛋白含量。结果 与对照组比较,缺氧/复氧组细胞活性降低、氧化应激和炎症损伤加重、凋亡增加(P<0.05);与缺氧/复氧组比较,刺芒柄花素组细胞活性增强、氧化应激和炎症损伤减轻、凋亡减少(P<0.05)。结论 刺芒柄花素可能通过减少大鼠H9C2心肌细胞的凋亡发挥对缺氧/复氧损伤的保护作用。 展开更多
关键词 刺芒柄花素 大鼠H9C2心肌细胞 缺氧/损伤 化应激 炎性反应
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玉郎伞两种黄酮单体对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:19
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作者 简洁 刘曦 +1 位作者 黄仁彬 蒋伟哲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期942-945,共4页
目的研究从玉郎伞(Yulangsan,YLS)中首次分离的两种黄酮单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,倒置显微镜下观察加入YLS两种单体的含药血... 目的研究从玉郎伞(Yulangsan,YLS)中首次分离的两种黄酮单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,倒置显微镜下观察加入YLS两种单体的含药血清(10%、5%、2.5%)后,各组缺氧/复氧心肌细胞形态学和搏动频率的变化;以MTT法检测各组细胞的存活率;用ELISA法测定心肌细胞Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性及细胞培养上清液中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,YLS两种单体含药血清的高、中剂量均能明显增加心肌细胞的存活率,增强Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性,降低细胞培养上清液LDH、NOS活性、MDA含量,提高T-SOD活性并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论两种YLS单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与清除自由基、抑制心肌细胞Ca2+超载有关。 展开更多
关键词 玉郎伞 黄酮单体 心肌细胞 缺氧/损伤
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双参宁心方血清药物化学和抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验研究 被引量:15
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作者 孙宇扬 刘建勋 +2 位作者 吴晓洋 李澎 李罡 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2006年第5期36-37,共2页
目的研究双参宁心方(SSNX)主要有效成分及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法利用血药指纹图谱检测来源于SSNX的血中成分,并利用体外心肌细胞缺氧/复氧损伤实验进行验证。结果给药后血清样本中,共检测到15个来源于SSNX的原型成... 目的研究双参宁心方(SSNX)主要有效成分及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法利用血药指纹图谱检测来源于SSNX的血中成分,并利用体外心肌细胞缺氧/复氧损伤实验进行验证。结果给药后血清样本中,共检测到15个来源于SSNX的原型成分,其中确定了人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱4个化学成分。在对心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验中,人参皂苷Rg1、脱氢紫堇碱能抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤导致的乳酰脱氢酶升高(P<0.05),丹酚酸B、延胡索乙素则能显著抑制乳酸脱氢酶的升高(P<0.01),对心肌细胞具有保护作用。结论提示人参皂苷Rg1、丹酚酸B、延胡索乙素、脱氢紫堇碱可能是SSNX抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的有效物质基础,可用于复方药代动力学的指标检测。 展开更多
关键词 双参宁心方 血清药物化学 心肌细胞 缺氧损伤
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PGE_1对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:13
9
作者 宋丽杰 付润芳 +2 位作者 王振基 冯国清 翁世艾 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1140-1142,共3页
目的 研究PGE1对纯化培养心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧 /复氧损伤模型 ,实验分 5组 :正常细胞培养组、缺氧 /复氧损伤模型组、缺氧 /复氧损伤 +PGE1(5、15、4 5 μg·L-1)组。... 目的 研究PGE1对纯化培养心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧 /复氧损伤模型 ,实验分 5组 :正常细胞培养组、缺氧 /复氧损伤模型组、缺氧 /复氧损伤 +PGE1(5、15、4 5 μg·L-1)组。分别用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力 ,硫代巴比妥酸显色法测定MDA含量 ,MTT染色法测定线粒体脱氢酶活性改变并测定LDH含量变化。结果 PGE1可明显提高SOD、LDH活性 ,降低MDA含量并可提高线粒体脱氢酶活性。结论 PGE1具有明显的抗缺氧复氧损伤。 展开更多
关键词 前列腺素E1 培养 心肌细胞 缺氧损伤
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ROS/PKC/p38 MAPK途径在山茱萸多糖抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用 被引量:11
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作者 来丽娜 宋丽华 +5 位作者 张晓京 张晓一 雷静文 刘芳 郭春花 宋晓亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2201-2205,共5页
目的:观察山茱萸多糖(polysaccharide from Fructus corni,PFC)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其对ROS/PKC/p38 MAPK途径的影响。方法:分离原代乳鼠心肌细胞,建立H/R模型,细胞分为7组:正常对照... 目的:观察山茱萸多糖(polysaccharide from Fructus corni,PFC)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其对ROS/PKC/p38 MAPK途径的影响。方法:分离原代乳鼠心肌细胞,建立H/R模型,细胞分为7组:正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧/复氧+PFC(终浓度20 mg/L、100mg/L和200 mg/L)预处理组、缺氧/复氧+PFC(100 mg/L)预处理+蛋白激酶C特异性阻断剂chelerythrine(1μmol/L)组及缺氧/复氧+PFC(100 mg/L)预处理+p38 MAPK特异性阻断剂SB203580(10μmol/L)组。倒置显微镜下观察细胞形态和自发搏动频率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡率,酶标仪测定ROS含量、SOD活性及LDH漏出量,免疫印迹法检测PKC、p-p38 MAPK和HSP70的蛋白水平。结果:H/R组细胞活力下降,搏动频率减慢,细胞ROS含量、LDH漏出量、细胞凋亡率及p-p38 MAPK的水平均较N组显著增加(P<0.01)。经PFC预处理后,细胞搏动频率、SOD活性及PKC、HSP70的水平较H/R组显著增加(P<0.05,),p-p38 MAPK的水平和细胞凋亡率均减少(P<0.05),而PFC的保护作用能被chelerythrine或SB203580抑制。结论:山茱萸多糖可抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤,其作用可能与增加SOD活性、抑制ROS产生、激活PKC并抑制p38MAPK的过度激活有关。 展开更多
关键词 山茱萸 多糖 缺氧/ 心肌细胞 活性
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丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响 被引量:13
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作者 张金艳 李澎 +2 位作者 李贻奎 赵乐 贾广波 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期510-514,共5页
目的观察丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法用体外细胞培养方法,培养乳鼠心肌细胞,复制心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。分别在缺氧和复氧阶段将细胞培养液换成含药培养液以进行药物干预,研究丹皮... 目的观察丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法用体外细胞培养方法,培养乳鼠心肌细胞,复制心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。分别在缺氧和复氧阶段将细胞培养液换成含药培养液以进行药物干预,研究丹皮酚和芍药苷的作用时,各设100、75、50和25mg/L4个剂量组,研究二者配伍作用时设芍药苷40mg/L和20mg/L组、丹皮酚40mg/L和20mg/L组、以及芍药苷20mg/L+丹皮酚20mg/L5个剂量组,模型组只造模不进行药物干预,而正常对照组则不造模。分别测定缺氧2.5~5h后及复氧2h后细胞培养上清液中的肌酸肌酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)漏出量,计算缺氧/复氧过程中各指标总漏出量及漏出抑制率。结果与正常对照组比较,模型组缺氧2.5h后MDA漏出量增加,缺氧3、5h后、复氧2h后CK、LDH和MDA漏出量、漏出总量均增加,各指标漏出抑制率均降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,丹皮酚高剂量组及芍药苷高、中剂量组缺氧后LDH、MDA漏出量及复氧2h后各指标漏出量、漏出总量均减少(P<0.01,P<0.05),各指标漏出抑制率均升高(P<0.01,P<0.05);而丹皮酚低、极低剂量组仅复氧2h后CK漏出量及漏出总量减少(P<0.01,P<0.05),CK漏出抑制率升高(P<0.01)。芍药苷极低剂量组仅复氧2h后LDH漏出量及漏出总量均减少(P<0.01),LDH漏出抑制率升高(P<0.01)。配伍组各指标与丹皮酚、芍药苷各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤均具有保护作用,二者配伍作用强度与同剂量单味药物作用强度相当,未见显著配伍增效作用。 展开更多
关键词 丹皮酚 芍药苷 心肌细胞 缺氧/
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西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤 被引量:33
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作者 王琛 李玉珍 +3 位作者 王晓礽 吕振嵘 史大卓 刘秀华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期22-28,共7页
目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其分子机制。方法:建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,以台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况;以RT... 目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其分子机制。方法:建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,以台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况;以RT-PCR和Western blotting方法,检测ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙网蛋白(CRT)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、caspase-12及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:和H/R组心肌细胞相比,PQS+H/R组:(1)细胞凋亡率降低4.19%(P<0.05),存活率升高21.2%(P<0.05),LDH活性降低66.58%(P<0.05);(2)Bcl-2 mRNA和蛋白表达分别升高30.9%和48.0%(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达分别降低39.7%和48.4%(P<0.05);(3)GRP78 mRNA和蛋白表达分别降低61.6%和37.7%(P<0.05),CRT mRNA和蛋白表达分别降低35.7%和52.2%(P<0.05);CHOP mRNA和蛋白表达分别降低57.0%和51.7%(P<0.05);剪切后的caspase-12蛋白表达降低34.9%(P<0.05)。结论:PQS可减轻H/R诱导的心肌细胞损伤,其机制是降低H/R诱导的GRP78、CRT mRNA和蛋白表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 西洋参茎叶总皂苷 缺氧/ 内质网应激 心肌细胞
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大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤细胞凋亡的影响 被引量:15
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作者 史春志 谷翔 +3 位作者 冯义柏 黎明 张新平 傅作林 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期54-56,共3页
目的探讨大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对心肌细胞凋亡的影响。方法利用乳鼠培养心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型,将培养心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺氧预处理组(AP组)、缺氧/复氧组(A/R组)、大蒜素预处理组(G... 目的探讨大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对心肌细胞凋亡的影响。方法利用乳鼠培养心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型,将培养心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺氧预处理组(AP组)、缺氧/复氧组(A/R组)、大蒜素预处理组(G组),测定各组缺氧后、复氧后细胞损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并应用DNA琼脂糖凝胶电泳及原位末端标记(TUNEL)法检测各组凋亡指数(AI)。结果G、AP组LDII、MDA明显较A/R组降低(P<0.01),SOD明显增高(P<0.01);A/R、AP、G组AI较C组明显增高(P<0.01),AP、G组AI较A/R组显著降低(P<0.01),G组AI较AP组稍高(P>0.05)。结论大蒜素具有抗心肌细胞凋亡作用,可减轻心肌细胞A/R损伤。 展开更多
关键词 缺氧/损伤 大蒜素 心肌 凋亡
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基于实时阻抗细胞分析技术评价H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型及三七皂苷R_1的干预作用 被引量:6
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作者 李光 吴堃 +4 位作者 李宜航 吕亚娜 孙慧峰 李学兰 孙晓波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期436-440,共5页
目的基于实时阻抗细胞分析技术,建立规范标准的H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,并用三七皂苷R_1进行评价。方法将H9c2心肌细胞接种到E-Plate板中,设3个复孔,分别测定生长曲线、不同缺氧时间、不同复氧时间及三七皂苷R_1的干预下细胞指数... 目的基于实时阻抗细胞分析技术,建立规范标准的H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,并用三七皂苷R_1进行评价。方法将H9c2心肌细胞接种到E-Plate板中,设3个复孔,分别测定生长曲线、不同缺氧时间、不同复氧时间及三七皂苷R_1的干预下细胞指数值,以细胞指数值反映H9c2心肌细胞的生长状态。结果本研究发现,缺氧前更换无血清、无糖DMEM培养基,缺氧4 h,复氧16 h,细胞存活率为(48.82±5.32)%,与MTT法测定结果差异无显著性,且三七皂苷R_1能够保护缺氧/复氧处理H9c2心肌细胞损伤,不存在时间依赖性。结论实时阻抗细胞分析技术能够建立标准规范的缺氧/复氧模型方法,对发现新药物靶点及作用机制也有一定的指导意义。 展开更多
关键词 RTCA H9C2心肌细胞 缺氧/损伤 细胞指数值 缺氧时间 三七皂苷R1
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PI3K/Akt通路在槲皮素后处理减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用 被引量:11
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作者 王赟 张宗泽 +3 位作者 张婧婧 陈莹莹 吴云 王焱林 《山东医药》 CAS 2019年第23期6-9,共4页
目的探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系。方法将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H... 目的探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系。方法将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H/R+槲皮素+抑制剂组(H/R+Que+W组)共4组。Con组细胞正常培养6 h;H/R组仅构建H/R模型;H/R+Que组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入终浓度为40μmol/L的槲皮素,随即复氧4 h;H/R+Que+W组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入PI3K抑制剂Wortamannin 100 nmol/L和槲皮素40μmol/L,复氧4 h。采用MTT法测定细胞活力;比色法测定培养液LDH活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2基因家族中的促凋亡基因(Bax)蛋白表达。结果与Con组比较,H/R组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05)。与H/R组比较,H/R+Que组细胞存活率升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,p-Akt表达上调,Bcl-2/Bax增高(P均<0.05)。与H/R+Que组比较,H/R+Que+W组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05)。结论槲皮素后处理通过激活PI3K/Akt信号途径减轻H/R引起的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 槲皮素 缺氧 心肌细胞 PI3K/AKT信号通路 细胞凋亡
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NF-κB在EPO预处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤保护效应中作用的研究 被引量:6
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作者 秦川 肖颖彬 +2 位作者 钟前进 陈林 王学锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期2223-2225,共3页
目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的保护效应及其与预处理过程中NF-κB的关系。方法采用培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,细胞分组为:对照组,EPO预处理组(EPO组)(EPO 10... 目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的保护效应及其与预处理过程中NF-κB的关系。方法采用培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,细胞分组为:对照组,EPO预处理组(EPO组)(EPO 10 U/m l),EPO+吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)预处理组(EPO+PDTC组)(EPO 10U/m l+PDTC 5μg/m l),PDTC预处理组(PDTC组)(PDTC 5μg/m l),共4组,分别于缺氧/复氧损伤前后,检测培养液LDH含量,MTT比色法观察细胞活力及流式细胞仪检测心肌细胞凋亡。采用EMSA检测缺氧复氧损伤前后各组心肌细胞NF-κB活性。结果EPO预处理显著降低心肌细胞缺氧/复氧损伤后细胞培养液LDH含量,提高细胞存活率,并降低心肌细胞凋亡率,预处理过程中同时加入NF-κB阻断剂PDTC使EPO预处理的以上心肌保护效应显著减弱或消失。EMSA显示EPO预处理使H/R前心肌细胞NF-κB活性较对照组、EPO+PDTC组、PDTC组显著升高(P<0.05),EPO+PDTC组心肌细胞NF-κB活性与PDTC组和对照组无显著差异(P>0.05)。缺氧复氧损伤后各组心肌细胞NF-κB活性较正常对照组显著升高(P<0.01),但EPO组的NF-κB活性低于其余各组(P<0.05),其余各组间无显著差异(P>0.05)。结论EPO预处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护效应,这一作用与EPO预处理过程中NF-κB的活化有关,NF-κB的活化可能通过其负反馈调节机制抑制H/R后心肌细胞NF-κB活性的升高。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 心肌细胞 缺氧损伤 NF-ΚB
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毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响 被引量:10
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作者 张双伟 李润美 +4 位作者 徐进文 汪芳 强皎 李爱群 张军 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期591-595,共5页
目的考察毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组,模型组,毛冬青皂苷E低、中、高剂量对照组(10,50,250μg·m L-1)、毛冬青皂苷E低、中、高剂量治疗组(10,50,25... 目的考察毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组,模型组,毛冬青皂苷E低、中、高剂量对照组(10,50,250μg·m L-1)、毛冬青皂苷E低、中、高剂量治疗组(10,50,250μg·m L-1)。造模前24 h给予相应浓度的药物预处理,缺氧4 h,复氧4 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,并采用蛋白印迹法(Western Blot)检测Caspase-3和Cleaved caspase-3凋亡蛋白的表达。结果缺氧/复氧后,与正常对照组比较,模型组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞内ROS含量显著升高(P<0.01),毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,细胞存活率增加,ROS含量降低。缺氧/复氧损伤可使Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达增加。毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达均下降。结论毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS生成,抑制凋亡相关蛋白Caspase-3和Cleaved caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 毛冬青皂苷E 缺氧/损伤 H9C2心肌细胞 细胞凋亡
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蒺藜皂苷单体B对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:12
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作者 张爽 李红 杨世杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期208-212,共5页
目的观察蒺藜皂苷单体B(TTSMB)对大乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法分离出生1~3d大鼠心肌细胞,培养72h后随机分为:正常对照组(Control)、缺氧/复氧模型组(H/R)、蒺藜皂苷组(GSTT)、蒺藜皂苷单体B(TTSMB)10、1、0.1nmol·... 目的观察蒺藜皂苷单体B(TTSMB)对大乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法分离出生1~3d大鼠心肌细胞,培养72h后随机分为:正常对照组(Control)、缺氧/复氧模型组(H/R)、蒺藜皂苷组(GSTT)、蒺藜皂苷单体B(TTSMB)10、1、0.1nmol·L-1组。观察细胞形态学变化,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养基中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)释放量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,并采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率及应用Western blot检测TTSMB对凋亡相关蛋白caspase-3的作用。结果与对照组比较,H/R组心肌细胞存活数明显减少,心肌细胞培养液中CK、LDH、AST释放量增加(P<0.01),SOD活力下降,MDA含量升高(P<0.01);与模型组比较,TTSMB10、1、0.1nmol·L-1组存活心肌细胞数明显增多(P<0.05,P<0.01),心肌细胞培养液中CK、LDH、AST含量降低,SOD活力增加、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),心肌细胞凋亡率明显下降,caspase-3表达亦下降。结论TTSMB可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,抑制心肌细胞凋亡,具有心肌细胞保护作用,其机制与抗自由基作用有关。 展开更多
关键词 蒺藜皂苷单体B 心肌细胞 缺氧/损伤(H/R) 凋亡 caspase-3 自由基
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薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:14
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作者 高卫真 王玮 +8 位作者 范晓静 康毅 赵云茜 于雷 张真 吴艳娜 刘艳霞 娄建石 高文远 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2008年第2期72-74,共3页
目的研究薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用体外培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,以薯蓣皂苷进行干预。心肌细胞随机分为5组:空白对照组(C组);缺氧/复氧组(A/R组);薯蓣皂苷(Dioscin... 目的研究薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用体外培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,以薯蓣皂苷进行干预。心肌细胞随机分为5组:空白对照组(C组);缺氧/复氧组(A/R组);薯蓣皂苷(Dioscin)低、中、高剂量干预组(Dioscin+A/R组)。分别观察各组心肌细胞搏动频率;MTT法测细胞存活率;用Rh123荧光探针标记线粒体,检测荧光强度以反映线粒体膜电位(△Ψm)变化;Fluo-3负载心肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子浓度变化。结果薯蓣皂苷干预组心肌细胞搏动频率、细胞存活率、△Ψm与A/R组比较明显升高;细胞内平均钙离子荧光强度显著低于A/R组。结论从细胞水平初步证实薯蓣皂苷预处理心肌细胞对A/R损伤有一定保护作用,保护机制可能涉及对线粒体膜保护和防止细胞内钙超载等。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷 缺氧/损伤 心肌细胞 线粒体膜电位 钙超载
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甘木通总黄酮对乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:6
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作者 聂阳 李博 +3 位作者 朱俊访 黄海潮 方春生 陈新颖 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第7期1876-1878,I0019,共4页
目的:研究甘木通总黄酮(TFCD)对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的保护作用。方法:采用原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞建立H/R损伤模型,实验分为正常组、模型组、TFCD组(75、150、300μg/m L)及地奥心血康阳性药物对照组。采用MTT... 目的:研究甘木通总黄酮(TFCD)对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的保护作用。方法:采用原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞建立H/R损伤模型,实验分为正常组、模型组、TFCD组(75、150、300μg/m L)及地奥心血康阳性药物对照组。采用MTT法测定TFCD对心肌细胞的存活率;Hoechest染色观察细胞核形态变化;比色法测定培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的含量;荧光法测定细胞内钙离子浓度。结果:TFCD可显著提高H/R损伤心肌细胞内SOD的活性,能显著抑制LDH、CK的活性、MDA的生成以及细胞内钙浓度。结论:TFCD对乳鼠H/R损伤的心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化和减轻细胞内钙超载有关。 展开更多
关键词 甘木通 总黄酮 心肌细胞 缺氧/损伤 心肌 细胞内钙离子
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