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ENO1蛋白及其相关活性位点缺失突变蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
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作者 代鹏钰 杨蕊 +2 位作者 章婷婷 马昕芸 刘会玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期669-674,共6页
目的:利用昆虫杆状病毒表达系统(昆虫BEVS)表达糖酵解酶α-烯醇化酶(ENO1)及其3种酶活性位点缺失突变的ENO1蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,为后续宫颈癌的代谢治疗研究奠定基础。方法:利用分子克隆技术将优化后ENO1序列插入pFastBacTM... 目的:利用昆虫杆状病毒表达系统(昆虫BEVS)表达糖酵解酶α-烯醇化酶(ENO1)及其3种酶活性位点缺失突变的ENO1蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,为后续宫颈癌的代谢治疗研究奠定基础。方法:利用分子克隆技术将优化后ENO1序列插入pFastBacTM1载体,获得含有目的基因的重组质粒pFastBac-ENO1。分别缺失ENO1发挥糖酵解酶功能的3个活性位点,进行优化后将其插入pFastBacTM1载体,获得3个活性位点缺失的重组质粒pFastBac-M1、pFastBac-M2和pFastBac-M3。通过转座、转染后获得重组杆状病毒rBV-ENO1、rBV-M1、rBV-M2和rBV-M3,利用WB法对目的蛋白的表达及特异性进行检测。结果:成功扩增重组杆粒rBacmid-ENO1、rBacmid-M1、rBacmid-M2和rBacmid-M3,获得大小约2000 bp的基因片段,与预期大小相符。昆虫BEVS可表达ENO1蛋白及其3个酶活位点缺失的重组蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,其分子量约为52000,与预期相符。WB法鉴定这些蛋白能与特异性标签His-tag发生反应。结论:通过昆虫BEVS成功表达目的蛋白ENO1及其酶活性位点缺失蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,这些蛋白具有反应原性,为后续测定这些蛋白与ENO1单抗亲和力创造了条件。 展开更多
关键词 α-烯醇化酶 昆虫杆状病毒表达系统 蛋白表达 酶活性位点缺失
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昆虫杆状病毒表达系统研究进展及其应用展望 被引量:17
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作者 朱江 吴祥甫 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第2期114-119,共6页
昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,已广泛应用于重组蛋白的合成。该系统具有如多角体启动子控制下的高效表达,比较完善的转译后加工修饰,容易从无血清培养上清中纯化,无内毒素污染等特点。杆状病毒表达载体系统研究的最新进展... 昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,已广泛应用于重组蛋白的合成。该系统具有如多角体启动子控制下的高效表达,比较完善的转译后加工修饰,容易从无血清培养上清中纯化,无内毒素污染等特点。杆状病毒表达载体系统研究的最新进展:高强度早期启动子群杆状病毒转移载体的成功合成,以扩大寄主范围和增进重组蛋白稳定性为目的的亲本病毒的改造;通用的昆虫细胞培养基配方的不断优化,特定昆虫细胞株培养基的研制和适用于大规模悬浮培养的无血清培养基的商品化;旨在进行复杂糖基化及提供相对稳定细胞环境的宿主细胞工程;以新标记物(tag)载体和相关亲和层析方法为代表的蛋白质高效纯化方法的进步。昆虫杆状病毒表达载体系统在基础研究、医药卫生和农业上具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 研究进展 应用 改进 蛋白质 昆虫细胞培养 纯化
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呼吸道合胞病毒黏附蛋白G在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:1
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作者 王善辉 王希良 +1 位作者 李培锋 余兵兵 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第5期84-86,共3页
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是在世界范围内引起婴幼儿下呼吸道感染的重要病毒之一,首次感染多发生于1岁以内的婴儿,2月龄婴儿的发病率最高。感染该病毒后不能产生持久的免疫力,可以反复感染,是造成婴幼儿... 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是在世界范围内引起婴幼儿下呼吸道感染的重要病毒之一,首次感染多发生于1岁以内的婴儿,2月龄婴儿的发病率最高。感染该病毒后不能产生持久的免疫力,可以反复感染,是造成婴幼儿住院的主要原因,也是青少年、老年人以及免疫缺陷人群呼吸道感染的重要病原,因此世界卫生组织要求对其严加监控。呼吸道合胞病毒在我国不但有散发流行,而且还曾引起数次大规模的流行。在南方,呼吸道合胞病毒流行高峰主要在炎热的夏秋季,而北方则发生在寒冷的冬春季。用单克隆抗体对我国部分地区呼吸道合胞病毒分离株亚型监测的结果表明,目前我国流行的呼吸道合胞病毒主要为A亚型。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 呼吸道合胞病毒 呼吸道感染 蛋白 黏附 世界卫生组织 VIRUS 病毒分离株
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昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白及其生物学功能的初步鉴定 被引量:1
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作者 郭阳 郑静 +2 位作者 胡愉 崔莲仙 何维 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第12期1268-1272,共5页
目的建立昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白技术平台并鉴定其表达产物的生物学功能。方法用搭桥PCR获得γ9Fc和δ2(OT3)Fc基因片段,构建成pBACp10ph-γ9/δ2(OT3)-Fc重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫sf9细胞,表达TCR... 目的建立昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白技术平台并鉴定其表达产物的生物学功能。方法用搭桥PCR获得γ9Fc和δ2(OT3)Fc基因片段,构建成pBACp10ph-γ9/δ2(OT3)-Fc重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫sf9细胞,表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白;Western blot鉴定TCRγ9/δ2-Fc蛋白表达位置;胞内流式细胞仪检测γ9Fc和δ2(OT3)Fc两基因表达效率;蛋白G亲和层析后,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度;激光共聚焦扫描显微镜技术和生物传感器技术检测了TCRγ9/δ2-Fc蛋白与SKOV3细胞和MNS蛋白的结合特性。结果成功构建pBACp10ph-γ9/δ2(OT3)-Fc表达载体,经鉴定发现TCRγ9/δ2-Fc蛋白在sf9细胞内表达,但γ9Fc和δ2(OT3)Fc两基因的表达效率有较大差异。纯化得到一定纯度的TCRγ9/δ2-Fc蛋白,并且具有与SKOV3细胞和MNS蛋白结合的特性。结论成功建立昆虫杆状病毒表达系统表达TCRγ9/δ2-Fc融合蛋白的技术平台,表达产物TCRγ9/δ2-Fc可以在体外模拟TCRγδ识别抗原的特性。 展开更多
关键词 TCRγ9/δ2-Fc 昆虫杆状病毒表达系统
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提高昆虫杆状病毒表达系统重组蛋白表达水平的技术 被引量:1
5
作者 于少芳 吴小锋 《蚕桑通报》 2010年第3期6-9,共4页
昆虫杆状病毒表达系统已广泛用于各种重组蛋白的生产。然而,由于各种因素重组蛋白的表达量远远达不到理想的水平。提高重组蛋白的表达水平成为提高昆虫杆状病毒表达系统效率的核心问题。根据目前的研究,提高外源基因表达水平的技术主要... 昆虫杆状病毒表达系统已广泛用于各种重组蛋白的生产。然而,由于各种因素重组蛋白的表达量远远达不到理想的水平。提高重组蛋白的表达水平成为提高昆虫杆状病毒表达系统效率的核心问题。根据目前的研究,提高外源基因表达水平的技术主要包括抑制目的蛋白降解、合理调控目的基因的转录、优化启动子类型以及利用活体昆虫而非培养细胞,如用家蚕幼虫或蛹进行表达等。这些技术也为家蚕成为更加高效的生物反应器奠定了基础。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 重组蛋白 表达水平
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旋毛虫副肌球蛋白在BaculoDirect昆虫杆状病毒表达系统中的表达及鉴定 被引量:3
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作者 王子霞 郝春悦 +3 位作者 赵夕 黄京京 程喻力 诸欣平 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2018年第1期1-6,共6页
利用Baculo Direct昆虫杆状病毒表达系统表达重组旋毛虫副肌球蛋白(recombinant Trichinella spiralis paramyosin,r Ts Pmy),以获得生物学活性较好的重组蛋白。通过PCR和DNA重组方法构建含Ts Pmy基因的Gateway入门载体重组质粒p DONR22... 利用Baculo Direct昆虫杆状病毒表达系统表达重组旋毛虫副肌球蛋白(recombinant Trichinella spiralis paramyosin,r Ts Pmy),以获得生物学活性较好的重组蛋白。通过PCR和DNA重组方法构建含Ts Pmy基因的Gateway入门载体重组质粒p DONR221(p DONR221/Ts Pmy),经测序鉴定后,扩增重组质粒;利用重组质粒p DONR221/Ts Pmy和Baculo Direct线性杆状病毒进行Gateway DNA重组反应,构建重组病毒,用其直接感染昆虫细胞Sf9使得重组病毒具有感染活力;连续感染Sf9以扩增病毒,利用滴度较高的病毒感染Sf9进行r Ts Pmy表达;SDS-PAGE及Western blotting分析鉴定表达的重组蛋白r Ts Pmy。结果显示,重组质粒经测序鉴定显示序列正确;SDS-PAGE及Western blotting显示r Ts Pmy分子量大小约110 k Da,未见不完全表达;可溶性分析显示r Ts Pmy部分可溶,大部分为不可溶沉淀;Western blotting结果显示r Ts Pmy可被旋毛虫感染的小鼠和猪抗血清识别,具有抗原特异性。本研究首次利用Baculo Direct昆虫杆状病毒表达系统成功表达了r Ts Pmy,获得翻译后修饰更加完善、纯化效果更好的重组蛋白,对于进一步研究Ts Pmy的功能,为制备有效的旋毛虫病疫苗候选抗原分子提供了生物学基础。 展开更多
关键词 旋毛虫 副肌球蛋白 昆虫杆状病毒表达系统 表达和鉴定 抗原性
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昆虫杆状病毒表达系统的研究与应用进展 被引量:21
7
作者 刘高强 章克昌 +1 位作者 王晓玲 魏美才 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第7期40-44,共5页
昆虫杆状病毒表达系统 (BEVS)因具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点 ,现已成功表达了近千种高价值蛋白。随着杆状病毒载体的不断改进 ,该系统获得重组病毒的几率已从最初的 0 1 %~ 1 %提高到现在的 80 %~ 9... 昆虫杆状病毒表达系统 (BEVS)因具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点 ,现已成功表达了近千种高价值蛋白。随着杆状病毒载体的不断改进 ,该系统获得重组病毒的几率已从最初的 0 1 %~ 1 %提高到现在的 80 %~ 90 %以上 ,并且出现了一些新的宿主域扩大的昆虫杆状病毒载体和高水平表达重组蛋白的昆虫细胞系。杆状病毒载体将在未来药物研发、疫苗生产、基因治疗、重组杆状病毒杀虫剂等领域得到广泛应用。但存在的一些问题如杆状病毒的基因组学研究相对薄弱 ,有关病毒晚期基因的高表达和调控机制等还不十分清楚 ,表达产物的纯化比较困难 ,多元表达等方面的技术还不够成熟等 ,均有待进一步解决。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒 杆状病毒载体 表达系统 外源基因 基因工程
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昆虫杆状病毒表达系统的研究进展 被引量:11
8
作者 朱帮福 卢兹凡 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期681-684,共4页
关键词 杆状病毒 研究进展 昆虫细胞表达系统 生物学特性 病毒载体
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昆虫杆状病毒表达系统在病毒性家禽疾病研究中的应用进展 被引量:3
9
作者 孙新宽 宋丽丽 +2 位作者 韦平 韦天超 磨美兰 《中国家禽》 北大核心 2014年第1期39-43,共5页
昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,具有安全性高、对外源基因克隆容量大、重组病毒易于筛选、具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点,已成功表达了近千种高价值蛋白,在很多领域都得到较广泛的应用。本... 昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,具有安全性高、对外源基因克隆容量大、重组病毒易于筛选、具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点,已成功表达了近千种高价值蛋白,在很多领域都得到较广泛的应用。本文对该表达系统在主要病毒性家禽疾病方面的相关应用研究进展进行综述,旨在为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒 表达 家禽病毒 应用
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昆虫杆状病毒表达系统的研究及其新进展 被引量:8
10
作者 孙阳 张淑颖 《江西农业学报》 CAS 2006年第5期96-99,共4页
就昆虫杆状病毒转移载体的优化、细胞株的优化、病毒滴度测定方法的改进及其将在未来农业、分子生物学、医学等领域得到广泛应用等方面进行了综述。
关键词 昆虫杆状病毒 表达系统 研究进展
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神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达 被引量:4
11
作者 马晓骊 黄秉仁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期141-144,共4页
目的 通过昆虫杆状病毒表达系统的优势,表达出具有生物学活性的神经营养素-4( hNT-4)蛋白。方法 通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因,将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上,在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生... 目的 通过昆虫杆状病毒表达系统的优势,表达出具有生物学活性的神经营养素-4( hNT-4)蛋白。方法 通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因,将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上,在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生物学活性测定。结果 获得 hNT-4蛋白的表达产物, SDS-PAGE电泳显示表达产物相对分子质量为 15 000。 经 Western-blot验证,表达上清及细胞全蛋白均有一条能与抗人 NT-4抗体发生特异性免疫反应的条带。经 PC12细胞测定,表达上清中的 rNT-4蛋白具有明确的生物学活性。结论 hNT-4在昆虫杆状病毒表达系统中的表达为今后进一步深入研究 hNT-4的功能及其在临床中的应用提供了条件。 展开更多
关键词 神经营养素-4 载体PacGP67B Sf 细胞 昆虫杆状病毒 表达系统 克隆表达
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水貂肠炎病毒VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:5
12
作者 倪佳 张蕾 +6 位作者 柴秀丽 高晗 张海玲 赵建军 白雪 邵西群 闫喜军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期97-100,共4页
利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEVVP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFa... 利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEVVP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFast-BacⅠ载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blotting鉴定。结果成功克隆MEVVP2基因。Western blotting结果证实,表达蛋白能够被MEV单克隆抗体识别。在Bac-To-Bac杆状病毒表达系统中成功的表达了MEV VP2蛋白,目的蛋白具有较好的反应原性。 展开更多
关键词 水貂肠炎病毒 VP2基因 病毒样粒子 杆状病毒表达系统
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昆虫杆状病毒表达系统在禽流感病毒研究中的应用 被引量:4
13
作者 韩庆功 崔艳红 刘保国 《吉林农业科学》 CSCD 2010年第1期38-41,44,共5页
禽流感的防控,主要在疫苗的免疫和平时的监测以及发病后的快速诊断等多个方面采取综合措施才能取得较好效果,这就需要建立快速、特异的诊断、检测方法以及不断开发新型疫苗用于禽流感的免疫。昆虫杆状病毒表达系统(BEVS)因具有完备的翻... 禽流感的防控,主要在疫苗的免疫和平时的监测以及发病后的快速诊断等多个方面采取综合措施才能取得较好效果,这就需要建立快速、特异的诊断、检测方法以及不断开发新型疫苗用于禽流感的免疫。昆虫杆状病毒表达系统(BEVS)因具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点,现已成功表达了近千种高价值蛋白。其在禽流感病毒中的应用,为禽流感防控所需的特异性抗原,诊断、检测方法的建立,新型基因工程疫苗的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒 表达系统 禽流感病毒
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昆虫杆状病毒表达系统中重组蛋白质的降解及其对策 被引量:7
14
作者 吴小锋 曹翠平 鲁兴萌 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期382-388,共7页
昆虫杆状病毒基因表达系统是目前比较高效的真核表达系统之一,但重组蛋白质的降解成为影响该系统生产效率的一个重要问题。就该系统中蛋白质降解的相关问题及其对应策略进行了探讨。
关键词 杆状病毒表达系统 重组蛋白质降解 蛋白酶抑制剂
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鹅细小病毒VP3基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:2
15
作者 王志强 李洪彬 +4 位作者 杨旭东 黄宇翔 邹跃 张军 刘力威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第9期52-55,共4页
为真核表达鹅细小病毒(GPV)融合蛋白VP3基因,本研究通过PCR扩增GPV FY89株VP3基因,并将其克隆至杆状病毒转移载体pFastBac/HBM-TOPO中,经双酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP3,将经... 为真核表达鹅细小病毒(GPV)融合蛋白VP3基因,本研究通过PCR扩增GPV FY89株VP3基因,并将其克隆至杆状病毒转移载体pFastBac/HBM-TOPO中,经双酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP3,将经PCR鉴定正确的rBacmid-VP3转染Sf9昆虫细胞,连续传代后,细胞病变明显。SDS-PAGE分析结果表明成功表达了分子质量约为61ku的VP3蛋白;Western blotting分析结果表明重组VP3蛋白具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 VP3基因 杆状病毒表达系统
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昆虫杆状病毒表达系统中阳性重组病毒的筛选 被引量:1
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作者 朱反修 王福山 齐义鹏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第1期35-39,共5页
近年来,随着杆状病毒表达系统的普遍应用,阳性重组病毒筛选方法也有了很大的改进,从过去的经验性的ocu ̄+/ocu ̄-空斑表型筛选发展到根据颜色差异,药物抗性,抗生素抗性等等筛选重组病毒。同源重组过程也可在大肠杆菌或酵... 近年来,随着杆状病毒表达系统的普遍应用,阳性重组病毒筛选方法也有了很大的改进,从过去的经验性的ocu ̄+/ocu ̄-空斑表型筛选发展到根据颜色差异,药物抗性,抗生素抗性等等筛选重组病毒。同源重组过程也可在大肠杆菌或酵母甚至体外进行,大大提高了重组率,由于重组率是如此之高,有些方法可以免去繁琐的空斑选择,很快得到重组病毒的纯培养。文章对各种筛选方法进行了比较,并指出各自的优缺点。 展开更多
关键词 杆状病毒 外源基因表达 表达系统 重组病毒 筛选
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昆虫杆状病毒表达系统在动物疫苗研究的应用 被引量:5
17
作者 杨旭东 朱庆贺 +3 位作者 王刚 王爽 陈曦 王观悦 《畜禽业》 2018年第6期10-10,13,共2页
昆虫杆状病毒表达系统(Insrct cell baculovirus expression vector system,IC-BEVS)是基因工程四大表达系统之一,它具有重组蛋白表达量高,能够在一个载体上表达多种蛋白,容纳较大片段的外源DNA插入,细胞培养易于大规模获得蛋白等特点... 昆虫杆状病毒表达系统(Insrct cell baculovirus expression vector system,IC-BEVS)是基因工程四大表达系统之一,它具有重组蛋白表达量高,能够在一个载体上表达多种蛋白,容纳较大片段的外源DNA插入,细胞培养易于大规模获得蛋白等特点。在很多领域都有广泛的应用,文章旨在介绍其在动物疾病方面的研究进展。 展开更多
关键词 昆虫 杆状病毒 表达系统 动物疾病
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昆虫杆状病毒表达系统生产流感疫苗的研究进展 被引量:4
18
作者 李晶梅 靖志强 +4 位作者 秦红刚 薛霜 漆世华 谢红玲 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第12期67-70,共4页
综述了昆虫杆状病毒表达系统生产流感疫苗的研究进展,同时分析了昆虫杆状病毒表达系统表达流感病毒样颗粒用于流感疫苗的优势和前景,以期为兽用流感病毒VLPs疫苗研发提供参考。
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 流感病毒样颗粒 流感疫苗
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犬瘟热病毒N基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达及应用
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作者 冯佩平 张蕾 柴秀丽 《中国畜牧兽医文摘》 2013年第3期131-131,共1页
目的:为检测犬瘟热抗体提供诊断抗原,应用Bac~to~Bac杆状病毒表达系统表达犬瘟热病毒(caninedistempervirus,CDV)N蛋白。方法:采用RT~PCR克隆CDV~N基因,
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 犬瘟热病毒 N基因 应用 PCR克隆 诊断抗原 BAC 系统
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人类细小病毒B19壳蛋白VP2在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:2
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作者 周为民 谷淑燕 《生物技术通讯》 CAS 2003年第5期378-380,共3页
利用BAC-TO-BAC系统获得了人类细小病毒B19壳蛋白VP2的重组昆虫杆状病毒,并在sf9细胞中表达出VP2。用蚀斑法纯化病毒,终末稀释法测定病毒滴度为3.6×108。Western印迹检测证实了表达蛋白的特异性,间接免疫荧光法可观察到细胞胞浆中... 利用BAC-TO-BAC系统获得了人类细小病毒B19壳蛋白VP2的重组昆虫杆状病毒,并在sf9细胞中表达出VP2。用蚀斑法纯化病毒,终末稀释法测定病毒滴度为3.6×108。Western印迹检测证实了表达蛋白的特异性,间接免疫荧光法可观察到细胞胞浆中的表达蛋白颗粒。 展开更多
关键词 细小病毒B19 壳蛋白 VP2 杆状病毒表达系统
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